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细角滨对虾酚氧化酶原cDNA克隆及序列结构分析

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钦州学院学报 2015年第5期30卷 1-6页

作者：许尤厚胡超群广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室钦州学院广西钦州535000 广东省/中国科学院应用海洋生物学重点实验室广东广州510301 广西北部湾海洋生物资源保护与开发高校重点实验室钦州学院广西钦州535000

采用RT-PCR原理和长片段扩增技术克隆细角滨对虾酚氧化酶原基因。结果表明,细角滨对虾血淋巴细胞内存在2个pro PO基因。pro PO gene 1的c DNA序列包含有372氨基酸,前190个氨基酸为一个M家族血蓝蛋白,是一个铜结合位点区域,191-372为一个... 详细信息

采用RT-PCR原理和长片段扩增技术克隆细角滨对虾酚氧化酶原基因。结果表明,细角滨对虾血淋巴细胞内存在2个pro PO基因。pro PO gene 1的c DNA序列包含有372氨基酸,前190个氨基酸为一个M家族血蓝蛋白,是一个铜结合位点区域,191-372为一个C家族的血蓝蛋白,是一个免疫球蛋白样的区域。pro PO gene 2的2个功能位点之间的序列有重叠,pro PO gene 2 c DNA序列的6-935bp包含了第一个功能位点,928-1464bp则包含了第二个功能位点。系统进化树比对分析发现2个基因之间的序列差异非常大。细角滨对虾和凡纳滨对虾的pro PO gene 2同处于一个密切相关的群,pro PO gene 1则和其他几种对虾的pro PO gene处于一个群。pro PO gene 2与pro PO gene 1在对虾免疫活动中是否存在不同的功能还有待于进一步的研究。

关键词：细角滨对虾酚氧化酶原基因克隆序列结构分析

抗人Cl-INH McAb可变区基因的克隆及序列结构分析

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生物技术通讯 1997年第Z1期8卷 131-132页

作者：高宁朱锡华第三军医大学免疫学教研室重庆630038

近年来迅猛发展的基因工程抗体研究,已成为抗体应用研究的核心。构建重组抗体的前提是从杂交瘤细胞、免疫脾细胞或外周血淋巴细胞中分离免疫球蛋白(Ig)的重链和轻链可变区(VL和VH)基因。

关键词：序列结构分析 Cl-INH 可变区基因基因的克隆基因工程抗体杂交瘤细胞免疫球蛋白 DNA序列测定氨基酸序列 DNA片段

不同软段长度PBT-co-PBS-b-PEG嵌段共聚物的合成与表征

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高分子学报 2003年第6期13卷 776-783页

作者：张勇冯增国吴彤张爱英北京理工大学材料科学与工程学院北京100081

用熔融缩聚法合成了一系列具有不同软段长度的聚对苯二甲酸丁二酯 (PBT) co 聚丁二酸丁二酯(PBS) b 聚乙二醇 (PEG)嵌段共聚物 (PTSG) ,考察了PEG分子量 (Mn(PEG) )及PBS摩尔分数 (MPBS)对材料性能的影响实验表明 ,随Mn(PEG)增加 ,... 详细信息

用熔融缩聚法合成了一系列具有不同软段长度的聚对苯二甲酸丁二酯 (PBT) co 聚丁二酸丁二酯(PBS) b 聚乙二醇 (PEG)嵌段共聚物 (PTSG) ,考察了PEG分子量 (Mn(PEG) )及PBS摩尔分数 (MPBS)对材料性能的影响实验表明 ,随Mn(PEG)增加 ,缩聚反应时间延长 ,所得产物分子量均呈较为对称的单峰分布 ,多分散性指数小于 2 0 硬段序列结构分析显示 ,随MPBS 增加 ,PBT平均序列长度减小 ,而PBS平均序列长度增加 ,二者呈无规分布 .受组成及硬段平均序列长度变化影响 ,材料内部呈微观相分离状态 ,DSC曲线上可分别观察到软、硬段熔点及玻璃化转变温度 ;硬段熔点及结晶度随MPBS升高而降低 ,主要是受其平均序列长度变化及共晶作用所致 .材料断裂延伸率及降解速率均随Mn(PEG)及MPBS增加而增加 ,可见提高软段长度及降低硬段结晶度等均能有效改善共聚物高分子链的柔韧性及亲水性 ,赋予共聚物更好的降解性能 .

关键词：软段长度嵌段共聚物合成聚对苯二甲酸丁二酯聚丁二酸丁二酯聚乙二醇柔韧性亲水性降解性能序列结构分析酯交换法熔融缩聚法

聚对苯二甲酸丁二醇酯-co-聚丁二酸丁二醇酯-b-聚乙二醇嵌段共聚物的合成及表征

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化学学报 2002年第12期60卷 2225-2231页

作者：张勇冯增国刘凤香张爱英北京理工大学化工与材料学院北京100081 北京燕山石油化工公司研究院北京102500

用熔融缩聚法合成了一系列基于聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚丁二酸丁二醇酯(PBS)及聚乙二醇(PEG)的嵌段共聚物(PBT co PBS/PEG).1HNMR结构分析显示,软段摩尔百分含量恒为 2 0 %.随组成中PBS含量增加,软段质量百分含量略微升高,硬段PB... 详细信息

用熔融缩聚法合成了一系列基于聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚丁二酸丁二醇酯(PBS)及聚乙二醇(PEG)的嵌段共聚物(PBT co PBS/PEG).1HNMR结构分析显示,软段摩尔百分含量恒为 2 0 %.随组成中PBS含量增加,软段质量百分含量略微升高,硬段PBT平均序列长度由 2 80逐步减至 1 2 3,PBS平均序列长度由 1 2 7逐步增加到4 76,无规度在 1 1附近,两者呈无规分布.受组成及硬段平均序列长度变化影响,材料内部呈微观相分离状态,DSC热分析曲线上可分别观察到软、硬段熔点(Tm,s,Tm,h)及玻璃化转变温度 (Tg,s,Tg,h).硬段熔点及结晶度随PBS含量升高而降低,在 5 0～ 60mol%处达到最小值,则是PBS与PBT二者间形成共晶所致.力学性能测试及水解降解实验表明,将脂肪族聚酯PBS引入PEGT/PBT共聚体系,可赋予高分子链更好的柔韧性及亲水性。

关键词：聚对苯二甲酸丁二醇酯聚丁二酸丁二醇酯聚乙二醇合成表征聚醚酯弹性体序列结构分析力学性能缩聚嵌段共聚物

不同软段长度PBT-co-PCT-b-PEG嵌段共聚物的结构与性能

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高分子材料科学与工程 2005年第1期21卷 180-183,187页

作者：张勇冯庆玲崔福斋冯增国清华大学材料科学与工程系北京100084 北京理工大学材料科学与工程学院北京100081

用熔融缩聚法合成了一系列具有相同软段摩尔含量,不同软段长度的聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)-co-聚对苯二甲酸环己烷二甲醇酯(PCT)-b-聚乙二醇(PEG)嵌段共聚物(PBCG)。NMR分析表明,共聚物软段质量百分含量随PEG分子量(Mn(PEG))增加而增... 详细信息

用熔融缩聚法合成了一系列具有相同软段摩尔含量,不同软段长度的聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)-co-聚对苯二甲酸环己烷二甲醇酯(PCT)-b-聚乙二醇(PEG)嵌段共聚物(PBCG)。NMR分析表明,共聚物软段质量百分含量随PEG分子量(Mn(PEG))增加而增加,随PCT摩尔百分数(MPCT)增加而减小;结构中两种硬段呈无规分布,Mn(PEG)一定,随MPCT增加,PBT平均序列长度减小,而PCT平均序列长度增加。硬段熔点及结晶度在MPCT为20%～30%处达到最小值。TGA分析显示,向体系中引入PCT可提高共聚物热稳定性。

关键词：聚醚酯弹性体序列结构分析缩聚热分析力学性能

聚(对苯二甲酸丁二醇酯-co-对苯二甲酸环己烷二甲醇酯)-b-聚乙二醇嵌段共聚物的合成与表征

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高等学校化学学报 2004年第2期25卷 376-381页

作者：张勇吴春红冯增国刘凤香张爱英王连才北京理工大学材料科学与工程学院北京100081 北京燕山石油化工公司研究院北京100250

用熔融缩聚法合成了一系列聚 (对苯二甲酸丁二醇酯 -co-对苯二甲酸环己烷二甲醇酯 ) -b-聚乙二醇嵌段共聚物 ( PBCG) ,用 NMR,GPC,DSC,TGA及力学性能测试等方法表征了材料的结构与性能 .GPC分析显示 ,共聚物分子量均具有较为对称的单峰... 详细信息

用熔融缩聚法合成了一系列聚 (对苯二甲酸丁二醇酯 -co-对苯二甲酸环己烷二甲醇酯 ) -b-聚乙二醇嵌段共聚物 ( PBCG) ,用 NMR,GPC,DSC,TGA及力学性能测试等方法表征了材料的结构与性能 .GPC分析显示 ,共聚物分子量均具有较为对称的单峰分布 ,多分散性指数低于 1 .70 .1 3C NMR谱结果表明 ,随 PCT摩尔分数 ( x PCT)从 1 0 %增至 60 % ,PBT平均序列长度由 4.0 2降到 1 .41 ;而 PCT平均序列长度则由 1 .1 7升至 2 .5 0 ,二者呈无规分布 .受硬段平均序列长度及结晶能力影响 ,硬段熔点及结晶度在 x PCT为 2 0 %～ 3 0 %处均达到最小值 ,可能是硬段间形成共晶所致 .TGA分析显示 ,引入芳香族聚酯组分 PCT确可提高材料的热稳定性 .力学性能测试说明 ,降低结晶度有利于提高材料的断裂延伸率 ,相反 ,则有助于增强弹性模量。

关键词：聚(对苯二甲酸丁二醇酯-co-对苯二甲酸环己烷二甲醇酯)-b-聚乙二醇嵌段共聚物合成结构表征熔融缩聚法力学性能热分析序列结构分析

基于受体激活对两种甜味剂与甜味受体的相互作用及分子进化机制的研究

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基于受体激活对两种甜味剂与甜味受体的相互作用及分子进化机制的...

作者：王聪睿齐鲁工业大学

学位级别：硕士

甜味觉是灵长类动物的五种基本味觉感知之一,影响着灵长类动物的饮食偏好与选择,对灵长类动物的健康及生存具有极其重要的意义。甜味是由位于口腔的味蕾细胞细胞膜上的G蛋白偶联受体(GPCR)Tas1r2/Tas1r3(T1R2/T1R3)异源二聚体所介导的,... 详细信息

甜味觉是灵长类动物的五种基本味觉感知之一,影响着灵长类动物的饮食偏好与选择,对灵长类动物的健康及生存具有极其重要的意义。甜味是由位于口腔的味蕾细胞细胞膜上的G蛋白偶联受体(GPCR)Tas1r2/Tas1r3(T1R2/T1R3)异源二聚体所介导的,甜味剂与甜味受体相互作用,诱发后者构象发生改变,从而使甜味受体被激活。迄今为止,对于人类甜味受体的研究已经取得了很大的进展。然而,除了人类以外的其他灵长类动物甜味受体的信息仍然很少,灵长类动物甜味受体的结构与功能之间的关系,尤其是决定甜味感知物种依赖性的分子机制尚不清晰。首先,根据之前的报道可知,灵长类动物甜味感知具有物种依赖性,由此通过对40种灵长类动物的甜味受体进行全面系统的序列、结构、功能分析,以期阐明灵长类动物甜味受体功能的多样性、进化以及介导其物种依赖性的分子决定因素。结果发现,T1R2和T1R3这两个亚基中都存在显著的分类学聚类分布和特征(相互作用、共同进化和上位显性),这一结果也被序列相似网络和系统发育分析的氨基酸保守/突变结果所证实。这些特征在一定程度上解释了先前报道的灵长类动物对于甜味感知的行为学实验结果。其次,为阐明人类甜味受体对于天然来源的甜味剂甜菊糖苷(stevioside,STV)的作用机制,基于报道过的人类甜味受体与阿斯巴甜、色氨酸等小分子甜味化合物的结合方式,在人类甜味受体T1R2和T1R3中设计了一些单突变位点(T1R2:S40、K65、I67、Y103、D142、S144、S165、P277、D278、E302、S303、D307、R378、R383;T1R3:R52、E105),并在细胞水平上测定其对甜菊糖苷的活性,对这些甜味受体的突变体进行功能表征。根据上述实验结果,进行甜菊糖苷与人甜味受体的分子对接模拟,将对甜菊糖苷的活性下降的突变位点作为分子对接时的锚定点(T1R2:S40、K65、Y103、D142、S165)。结合体外实验和分子对接模拟,在甜味受体结合口袋附近确定了与甜菊糖苷的功能相关的一些关键残基(活性下降的氨基酸位点:T1R2中的S40、N44、Y103、D142、S144、S165、P277、D278,活性完全丧失的氨基酸位点T1R2中的K65、I67、R383及T1R3中的E105)。这些残基通过氢键或者疏水作用等相互作用对甜味受体的配体识别以及影响甜菊糖苷的活性程度方面发挥了重要作用。接着,基于第二章的序列分析发现一个有趣的地方,即之前报导的生理行为测试结果表示对阿斯巴甜的刺激不敏感的原猴类狐猴可能能够感知到阿斯巴甜。通过对科氏倭狐猴(coquerel’s sifaka)的甜味受体T1R2/T1R3及其T1R2上的两个定向突变体(T1R2:S40T和D142E)进行体外细胞学功能分析,进一步验证了这一推测。以上研究结果促进了对于灵长类动物甜味受体的多样性、功能和进化的理解。本研究通过对灵长类动物甜味受体进行全面的序列与结构分析以及细胞水平功能研究,阐明了灵长类动物甜味受体多样性、功能和进化的分子机制,再以此为基础探究二种不同来源的甜味剂与甜味受体之间的相互作用机理。本研究不但为今后设计新型优良甜味剂打下基础,也为灵长类动物甜味受体的功能与进化研究提供了新的视角。

关键词：甜味受体甜味剂相互作用灵长类动物分子进化序列结构分析