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人β-防御素-3调控呼吸道合胞病毒致哮喘幼鼠的气道重塑及白细胞激活

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东南大学学报（医学版） 2022年第2期41卷 183-192页

作者：蔡昌君黄惠敏桂冬梅尹杨艳海南医学院第一附属医院儿科海南海口570100

目的:探究人β-防御素-3(hBD3)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染诱发哮喘幼鼠气道重塑与白细胞激活的影响及其机制。方法:采用卵清白蛋白(OVA)合并RSV诱发建立幼鼠哮喘模型,期间予100μg·kg^(-1)·d^(-1) hBD3溶液灌胃;制备肺泡灌洗液(BALF)... 详细信息

目的:探究人β-防御素-3(hBD3)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染诱发哮喘幼鼠气道重塑与白细胞激活的影响及其机制。方法:采用卵清白蛋白(OVA)合并RSV诱发建立幼鼠哮喘模型,期间予100μg·kg^(-1)·d^(-1) hBD3溶液灌胃;制备肺泡灌洗液(BALF),瑞氏染色测定BALF细胞总数与各细胞计数,ELISA法检测BALF和血清中免疫球蛋白IgE、白细胞介素(IL)-4、IL-5、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色、PAS染色和Masson染色观察肺组织病理学变化情况,观察切片测定各项气道重塑指标,免疫组化染色检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,蛋白质印迹法检测肺组织生长因子与自噬相关蛋白的表达。结果:相较于模型组,经hBD3作用的幼鼠BALF中细胞总数以及嗜酸粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞的比例均降低,BALF和血清中IgE、IL-4、IL-5、TNF-α水平均下降,肺组织损伤明显缓解,炎症细胞浸润减轻,杯状细胞减少,肺组织胶原纤维面积较小,管壁面积/气管内周长(WAt/Pi)、支气管平滑肌面积/气管内周长(WAm/Pi)及支气管平滑肌细胞核数目/气管内周长(N/Pi)均下降,α-SMA阳性表达率下降,同时肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)以及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ与Beclin-1的蛋白表达水平均下调,P62蛋白表达水平则上调,差异具有统计学意义(P幼鼠模型的气道炎症和气道重塑过程,介导白细胞失活,该作用可能与调控自噬水平相关。

关键词：呼吸道合胞病毒哮喘幼鼠人β-防御素-3 气道重塑自噬

颞叶癫痫幼鼠海马神经发生与Miat及Wnt7b/β-catenin信号通路的变化

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儿科药学杂志 2022年第10期28卷 1-6页

作者：都玉敏高莹安闻杨扬徐向平哈尔滨医科大学附属第一医院哈尔滨150001

目的:探讨颞叶癫痫幼鼠海马神经发生与Miat及Wnt7b/β-catenin信号通路的变化。方法:将日龄21~23 d的幼鼠分为生理盐水(NS)组与红藻氨酸(KA)组,每组18只。取KA组幼鼠侧脑室注射KA构建颞叶癫痫模型,埋入脑电波接收电极,观察幼鼠的癫痫发... 详细信息

目的:探讨颞叶癫痫幼鼠海马神经发生与Miat及Wnt7b/β-catenin信号通路的变化。方法:将日龄21~23 d的幼鼠分为生理盐水(NS)组与红藻氨酸(KA)组,每组18只。取KA组幼鼠侧脑室注射KA构建颞叶癫痫模型,埋入脑电波接收电极,观察幼鼠的癫痫发作情况与脑电波变化情况。在第1周、第4周、第8周通过Y型迷宫检测幼鼠学习、记忆能力。取幼鼠脑组织,包埋切片后检测BrdU阳性细胞数与DCX蛋白表达。镊取幼鼠海马组织,提取RNA检测Miat含量,提取蛋白检测Wnt7b/β-catenin信号蛋白表达。结果:KA组幼鼠在不同时期出现癫痫发作,脑电波连续出现高频/高幅棘波;随着时间进展,与KA-1周组发作频率[(7.50±1.87)次/天]、发作等级(3.31±0.48)相比,KA-8周组癫痫发作频率[(2.33±1.21)次/天]与等级(1.19±0.40)降低(P幼鼠正确反应次数减少,正确反应时间延长;与KA-1周组正确反应次数[(8.17±1.72)次]、正确反应时间[(11.83±1.72)s]相比,KA-8周组幼鼠正确反应次数[(10.50±2.74)次]增加,正确反应时间[(9.50±2.74)s]缩短。与NS组相比,KA组幼鼠BrdU阳性细胞数、DCX蛋白表达、Miat含量、Wnt7b/β-catenin信号通路与BDNF/TrkB信号通路蛋白表达减少(P幼鼠BrdU阳性细胞数、DCX蛋白表达、Miat含量、Wnt7b/β-catenin信号通路与BDNF/TrkB信号通路蛋白表达增加(P幼鼠海马体中存在神经发生减少,这可能与抑制Miat及Wnt7b/β-catenin信号通路相关。

关键词：颞叶癫痫幼鼠海马体神经发生红藻氨酸 Miat Wnt7b/β-catenin

干细胞动员对急性肺损伤幼鼠肺泡表面活性蛋白的影响

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右江医学 2023年第1期51卷 15-23页

作者：黄国日潘革莫锦丽杨兰黄忠向广西医科大学第二附属医院儿科广西南宁530007 广西医科大学第三附属医院儿科广西南宁530031 广西医科大学第三附属医院检验科广西南宁530031 广西医科大学第三附属医院病理科广西南宁530031

目的分析干细胞动员对急性肺损伤(ALI)幼鼠肺泡表面活性蛋白表达的影响。方法选择SPF级BALB/c品系健康幼鼠120只,随机分为动员组、对照组各60只,均经尾静脉注射精制大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)5 mg/kg复制内毒素性肺损伤幼鼠模型,动员组... 详细信息

目的分析干细胞动员对急性肺损伤(ALI)幼鼠肺泡表面活性蛋白表达的影响。方法选择SPF级BALB/c品系健康幼鼠120只,随机分为动员组、对照组各60只,均经尾静脉注射精制大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)5 mg/kg复制内毒素性肺损伤幼鼠模型,动员组采用皮下注射重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)30μg/(kg·d)进行干细胞动员干预,对照组注射同等剂量生理盐水,连续5 d,在干预后5 d、10 d、14 d对两组肺组织进行半定量肺损伤评分法及辐射状肺泡计数(RAC)评估,对两组肺表面活性物质蛋白SP-A、SP-D、水通道蛋白5(AQP5),肺组织匀浆SP-A、SP-D、AQP5 mRNA含量的表达水平进行检测。结果对照组5 d、10 d、14 d半定量肺损伤评分逐渐增加(P幼鼠急性肺损伤,促进其肺泡表面活性物质再生,促进肺恢复。

关键词：干细胞动员急性肺损伤幼鼠肺泡表面活性蛋白

丙戊酸通过调控S100B蛋白表达对癫痫幼鼠模型的认知功能及NMDAR1水平的影响

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卒中与神经疾病 2023年第5期30卷 454-460页

作者：冯骄黄丽侯宁谢南昌陈敏山西省临汾市妇幼保健院儿童医院 041000

目的探讨丙戊酸通过调控S100B蛋白表达对癫痫幼鼠模型的认知功能及N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)1水平的影响。方法50只幼鼠按随机数字表分为对照组、模型组、丙戊酸组、喷他脒(Pentamidine)组及丙戊酸+P... 详细信息

目的探讨丙戊酸通过调控S100B蛋白表达对癫痫幼鼠模型的认知功能及N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)1水平的影响。方法50只幼鼠按随机数字表分为对照组、模型组、丙戊酸组、喷他脒(Pentamidine)组及丙戊酸+Pentamidine组,每组各10只;除对照组外,其余各组幼鼠均建立癫痫模型,建模后丙戊酸组灌胃1 mg/kg丙戊酸,Pentamidine组注射5 mg/kg的Pentamidine及丙戊酸+Pentamidine组灌胃1 mg/kg丙戊酸和尾部注射5 mg/kg的Pentamidine;水迷宫实验检测认知功能;尼氏染色观察海马组织形态;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP尾端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测海马组织神经细胞凋亡率;免疫组化染色检测海马组织NMDAR1阳性细胞率;免疫印记检测海马组织中S100钙结合蛋白B(S100 calcium-binding protein B,S100B)、环氧化酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)及白细胞介素(Interleukin,IL)-1β蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组幼鼠第1、2、3及4 d搜索平台时间、神经细胞凋亡率、NMDAR1阳性细胞率及S100B,COX-2及IL-1β蛋白水平升高,穿越平台次数及原平台搜索时间占比均减少(P幼鼠第1、2、3及4 d的搜索平台时间、神经细胞凋亡率、NMDAR1阳性细胞率及S100B,COX-2及IL-1β蛋白水平降低,穿越平台次数及原平台搜索时间占比增加(P0.05);与Pentamidine组比较,丙戊酸+Pentamidine组幼鼠第1、2、3及4 d的搜索平台时间、神经细胞凋亡率、NMDAR1阳性细胞率及S100B,COX-2及IL-1β蛋白水平降低,穿越平台次数及原平台搜索时间占比均增加(P幼鼠模型的认知功能,降低NMDAR1表达水平,减少神经细胞凋亡,其机制可能与调控S100B表达有关。

关键词：幼鼠癫痫丙戊酸认知功能神经细胞 S100钙结合蛋白B N-甲基-D-天冬氨酸受体1

ALA对神经母细胞瘤幼鼠自噬的影响及其机制

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实验与检验医学 2023年第5期41卷 617-620页

作者：孙明昌张敬芳卓艳霞濮阳市人民医院儿三科河南濮阳457000

目的探讨α-硫辛酸(ALA)对神经母细胞瘤幼鼠自噬和氧化应激水平的影响及机制。方法SD幼鼠30只随机分为3组,每组10只,分别命名为模型组、ALA组和空白对照组。模型组,通过向幼鼠左侧肾上腺区肾筋膜内接种人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞悬液方... 详细信息

目的探讨α-硫辛酸(ALA)对神经母细胞瘤幼鼠自噬和氧化应激水平的影响及机制。方法SD幼鼠30只随机分为3组,每组10只,分别命名为模型组、ALA组和空白对照组。模型组,通过向幼鼠左侧肾上腺区肾筋膜内接种人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞悬液方法制备神经母细胞瘤幼鼠模型;ALA组,幼鼠于接种人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞悬液后2 h开始给予尾静脉注射ALA,1次/d,连续注射14 d;空白对照组,单纯给予幼鼠左侧肾上腺区肾筋膜内注射等量无菌生理盐水。造模14 d后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组幼鼠外周血中MDA、SOD、GSH-px水平,采用Western Blot法检测各组幼鼠瘤组织中Beclin-1、微管相关蛋白轻链3(LC-3)、P62、磷酸化的腺嘌呤核糖核苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶体蛋白(p-mTOR)蛋白表达量。结果ALA组和模型组瘤组织中Beclin-1、LC-3、p-AMPK蛋白表达量及外周血中MDA水平显著高于空白对照组(P幼鼠自噬及氧化应激水平,其机制可能与ALA抑制AMPK/mTOR通路有关。

关键词： α-硫辛酸神经母细胞瘤幼鼠自噬氧化应激 AMPK/mTOR通路

水飞蓟宾对哮喘幼鼠肺内炎症反应的影响及可能机制

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解剖科学进展 2022年第3期28卷 278-280,286页

作者：王建刚肖韵王莹巍王娟营口市中心医院儿科辽宁营口115003 中国医科大学附属盛京医院小儿呼吸内科辽宁沈阳110004

目的探讨水飞蓟宾对哮喘幼鼠肺内炎症反应的影响及可能机制。方法 45只SPF级BALB/c幼鼠随机分为对照组(Control)、哮喘组(Model)和水飞蓟宾组(Silybin),每组15只,采用卵清蛋白致敏(OVA)制备幼鼠支气管哮喘模型。收集各组小鼠支气管肺... 详细信息

目的探讨水飞蓟宾对哮喘幼鼠肺内炎症反应的影响及可能机制。方法 45只SPF级BALB/c幼鼠随机分为对照组(Control)、哮喘组(Model)和水飞蓟宾组(Silybin),每组15只,采用卵清蛋白致敏(OVA)制备幼鼠支气管哮喘模型。收集各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),进行总细胞计数和白细胞分类计数,ELISA方法检测各组小鼠BALF中白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平;HE染色观察各组小鼠肺组织病理学变化;免疫组织化学方法与Western blot方法检测各组小鼠肺组织TLR4与NF-κB p65蛋白的表达。结果与哮喘组相比,水飞蓟宾组幼鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数明显降低(P幼鼠肺组织的炎症反应。免疫组织化学方法与Western blot结果显示,水飞蓟宾能够减轻哮喘幼鼠肺组织TLR4与NF-κB p65蛋白的表达(P幼鼠的肺内炎性反应。

关键词：支气管哮喘水飞蓟宾 TLR4 NF-κB p65 幼鼠

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幼鼠和老龄鼠尾胶原体外纤维化的形态学比较

吉林大学学报（医学版） 2012年第4期38卷 705-708页

作者：刘国民孙红辉张艳秋张永利孔宁吉林大学第二医院骨科吉林长春130041 吉林大学第二医院手术室吉林长春130041 吉林大学第二医院妇产科吉林长春130041 吉林大学药学院医用生物材料教研室吉林长春130021

目的:通过观察幼鼠和老龄鼠尾胶原体外的纤维化过程以及幼鼠、老龄鼠腰椎松质骨胶原纤维形态学的变化,探讨年龄对胶原纤维化的影响。方法:取2周、20月的鼠尾肌腱各5g,分别利用稀醋酸进行胶原的提取,提取出的胶原低温冻干。取2周龄和20... 详细信息

目的:通过观察幼鼠和老龄鼠尾胶原体外的纤维化过程以及幼鼠、老龄鼠腰椎松质骨胶原纤维形态学的变化,探讨年龄对胶原纤维化的影响。方法:取2周、20月的鼠尾肌腱各5g,分别利用稀醋酸进行胶原的提取,提取出的胶原低温冻干。取2周龄和20月龄的鼠尾胶原各15mg,分成3组,每组5mg,在4℃下分别熔解于10mmol.L-1醋酸溶液中;将钛金属螺钉浸润到醋酸溶液中,加入缓冲液,37℃下进行胶原的纤维化,分别在2、4和8h3个时间点取出螺钉,扫描电镜下观测螺钉表面的胶原形态。取2周、20月鼠各10只,处死后取出L3椎体,制成规则试件,反复生理盐水冲洗后,脱水,进行喷金后,行扫描电镜观察。结果:纤维化2h,2周龄及20月龄组鼠尾胶原纤维均未在螺钉表面微纤维化。纤维化4h,20月龄鼠尾胶原原纤维在螺钉的表面聚集成形态不规则的团块状胶原聚合物,未见胶原纤维形成;2周龄鼠尾胶原在螺钉的表面微纤维化成宽为0.07～0.20μm,纵横交错的胶原纤维。纤维化8h,20月龄鼠尾胶原在螺钉的表面聚集成原形或其他形态大小不等的胶原聚合物,未见胶原纤维形成;2周龄鼠尾胶原原纤维进一步纤维化,形成宽0.65～1.35μm的胶原纤维。骨小梁扫描电镜下显示:2周龄鼠骨胶原交联成粗细均匀的胶原纤维,纤维排列紧密靠拢,取向一致;20月龄鼠骨小梁胶原纤丝粗细不等,排列松散、稀疏、紊乱,其间联接相临的较粗纤丝的更细的胶原纤丝的取向杂乱无章。结论:随着年龄的增长,Ⅰ型胶原纤维化能力逐渐降低,导致骨胶原纤维形态的改变,矿物质沉积的异常,这可能是老年骨质疏松、骨折危险性增加的非常重要原因之一。

关键词：幼鼠老龄鼠胶原体外纤维化

益母草碱基由CaMKⅡ/Cx36信号对七氟醚诱导幼鼠突触可塑性的改善作用

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河北医药 2022年第24期44卷 3701-3705页

作者：肖志博金辉谢海符少川葛树胜海南医学院第一附属医院麻醉科海口市570102

目的探讨益母草碱对七氟醚麻醉幼鼠海马神经元突触可塑性和认知功能损伤的影响及其可能的机制。方法60只7 d龄幼鼠,随机分为对照组,七氟醚组,益母草碱-低、中、高剂量组,每组12只。非对照组幼鼠以3%七氟醚麻醉6 h后,取益母草碱组幼鼠分... 详细信息

目的探讨益母草碱对七氟醚麻醉幼鼠海马神经元突触可塑性和认知功能损伤的影响及其可能的机制。方法60只7 d龄幼鼠,随机分为对照组,七氟醚组,益母草碱-低、中、高剂量组,每组12只。非对照组幼鼠以3%七氟醚麻醉6 h后,取益母草碱组幼鼠分别给予2.5、5、10 mg/kg益母草碱溶液。连续治疗28 d,采用Morris水迷宫评价各组幼鼠学习记忆能力;采用高尔基染色测定海马神经元树突棘状态;采用电生理测试评估海马区长时程电位增强;采用Western blotting测定各组幼鼠海马中CaMKⅡ、Cx36蛋白表达。结果与对照组相比,七氟醚组幼鼠逃避潜伏期明显增加,穿越平台次数与第Ⅰ象限停留时间明显减少(P幼鼠突触可塑性降低,提高幼鼠学习记忆能力。

关键词：益母草碱七氟醚幼鼠突触可塑性认知功能

基于JAK2/STAT3信号通路探讨头针结合艾灸对缺血缺氧脑瘫幼鼠模型的影响及作用机制

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现代生物医学进展 2022年第3期22卷 427-431页

作者：李景磊辛茜马龙卜国森周钰新疆医科大学第一附属医院针灸推拿科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学研究生院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院重症医学科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院神经内科新疆乌鲁木齐830011

目的:基于JAK2/STAT3信号通路探讨头针结合艾灸对缺血缺氧脑瘫幼鼠模型的影响及作用机制。方法:选取40只7 d龄的清洁级SD幼鼠,按随机数字表法分为A组、B组、C组、D组、E组,每组8只。E组不予以任何处理,其余各组幼鼠均以改良的缺氧缺血... 详细信息

目的:基于JAK2/STAT3信号通路探讨头针结合艾灸对缺血缺氧脑瘫幼鼠模型的影响及作用机制。方法:选取40只7 d龄的清洁级SD幼鼠,按随机数字表法分为A组、B组、C组、D组、E组,每组8只。E组不予以任何处理,其余各组幼鼠均以改良的缺氧缺血性脑病造模方法构建缺血缺氧脑瘫模型。造模成功后A组、B组、C组分别给予头针结合艾灸治疗、头针治疗、艾灸治疗,D组、E组均给予50μL生理盐水。对比各组幼鼠脑组织Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)及转录活化因子3(STAT3)蛋白表达量、血清炎症因子[白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子--α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)]水平、神经递质[去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)]水平、记忆功能。结果:A组脑组织JAK2、STAT3蛋白表达量低于B、C、D组,但高于E组(P幼鼠脑组织损伤,促进其记忆功能恢复。

关键词：缺血缺氧脑瘫幼鼠头针艾灸 JAK2/STAT3