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‘凤丹’牡丹幼胚愈伤组织诱导的优化和再生体系的建立

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园艺学报 2022年第1期49卷 166-174页

作者：刘蓉慈惠婷任秀霞高洁王顺利张秀新中国农业科学研究院蔬菜花卉研究所国家花卉改良中心中国农业科学院牡丹研究中心农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京100081

以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容... 详细信息

以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容易获得高质量的愈伤组织,且褐化率较低;MS基本培养基添加0.162μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)可提高幼胚愈伤组织诱导率,但会增加褐化率,而在WPM基本培养基中添加不同浓度的H_(2)O_(2),对愈伤诱导率和褐化率的影响不大;WPM基本培养基比MS更适于‘凤丹’牡丹幼胚再生;WPM+2.5 mg·L^(-1)2,4-D+0.1 mg·L^(-1)6-BA是诱导愈伤的最佳植物生长调节剂组合,诱导率可达93.33%;不定芽和不定根诱导的最佳组合分别为WPM+30 g·L^(-1)蔗糖+3 g·L^(-1)植物凝胶+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1) GA_(3)和1/2 WPM+30 g·L^(-1)蔗糖+2.5 g·L^(-1)植物凝胶+2 mg·L^(-1) IBA+1 mg·L^(-1) IAA。

关键词：牡丹幼胚愈伤诱导褐化离体再生

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马蔺幼胚高效再生体系的建立

植物研究 2023年第3期43卷 333-339页

作者：安文杰王银杰刘清泉杨永恒张婷范少茹张永侠原海燕山西林业职业技术学院太原030009 江苏省中国科学院植物研究所南京210014

以马蔺(Iris lacteal var.chinensis)幼胚为外植体,探究不同时期幼胚及不同植物生长调节剂对愈伤组织、体胚和不定芽诱导的影响。结果表明:在本试验条件下最佳取材时间为授粉后35~45 d,此时,幼胚发育完全但胚乳尚未完全硬化,幼胚剥取容... 详细信息

以马蔺(Iris lacteal var.chinensis)幼胚为外植体,探究不同时期幼胚及不同植物生长调节剂对愈伤组织、体胚和不定芽诱导的影响。结果表明:在本试验条件下最佳取材时间为授粉后35~45 d,此时,幼胚发育完全但胚乳尚未完全硬化,幼胚剥取容易;愈伤组织最适诱导培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.2 mg·L^(-1)6-苄氨基嘌呤(6-BA),诱导率为83.33%;最适体胚诱导培养基为MS+0.25 mg·L^(-1)2,4-D+0.05 mg·L^(-1)6-BA,诱导率71.67%;最佳不定芽诱导和增殖培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)噻苯隆(TDZ)+0.2 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA),诱导率为78.33%,增殖系数为3.65;在添加0.1 mg·L^(-1)NAA的MS培养基上诱导生根,4周后的生根率达95%以上;生根培养4周的植株清洗掉根部培养基后,移栽至经高温消毒的蛭石中培养,成活率达95%以上。该研究建立了高效的马蔺再生体系,可为马蔺的遗传改良和基因功能研究奠定基础。

关键词：马蔺幼胚离体培养愈伤诱导高效再生

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农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系

浙江农林大学学报 2022年第1期39卷 13-21页

作者：周佳君胡恒康龚丽干安格喻卫武吴家胜黄坚钦张启香浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300 浙江农林大学省部共建亚热带森林培育国家重点实验室浙江杭州311300

【目的】以香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系。【方法】以香榧种子突破种鳞后第8周至... 详细信息

【目的】以香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系。【方法】以香榧种子突破种鳞后第8周至第11周的幼胚作为转基因受体材料,比较受体胚龄、农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗生素质量浓度对遗传转化效率的影响,并采用潮霉素、绿色荧光蛋白GFP表达及GFP基因聚合酶链式反应对遗传转化香榧幼胚培养物进行阳性筛选。【结果】随着胚龄的增加,香榧幼胚抗逆性增强,污染率降低,成活率提高,第10周和第11周幼胚成活率分别为52.1%和52.3%。农杆菌菌液浓度和侵染时间均对香榧幼胚的污染率、成活率、愈伤组织诱导率以及体胚发生率具有显著影响(P幼胚愈伤组织诱导率和体胚发生率最高,分别为17.9%和17.3%;侵染时间为10 min时,愈伤组织诱导率和体胚发生率为最高,分别达17.5%和17.1%。羧苄青霉素对于受体材料的农杆菌脱除具有显著影响(P胚发生率均最高,分别为60.5%、15.8%和17.5%。潮霉素对于香榧幼胚培养物的阳性筛选具有良好的效果,当潮霉素质量浓度为100 mg·L^(-1)时,成活率为30.5%。【结论】不同胚龄香榧幼胚遗传转化效果不同,突破种鳞后第10周香榧幼胚遗传转化效果良好;当农杆菌菌液D(600)为0.5,侵染时间为10 min时,转化效果最佳;300 mg·L^(-1)为羧苄青霉素脱除农杆菌的最佳质量浓度;100 mg·L^(-1)是潮霉素阳性香榧幼胚筛选的最佳质量浓度。图3表5参37。

关键词：香榧幼胚农杆菌介导的遗传转化羧苄青霉素潮霉素

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水稻幼胚电激转化及转基因植株再生(英文)

Acta Botanica Sinica 2002年第7期44卷 827-831页

作者：王胜华赵洁杨弘远武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室武汉430072

幼胚的遗传转化对研究植物胚胎发育相关基因的表达与调控具有重要意义 ,也为植物遗传改良提供新的技术。本研究借助一种自制的特殊装置 ,采用电激法将GFP基因转入 2 - 3天水稻幼胚 ,得到瞬时表达 ,4- 6天水稻幼胚经电激后再生了植株 ,... 详细信息

幼胚的遗传转化对研究植物胚胎发育相关基因的表达与调控具有重要意义 ,也为植物遗传改良提供新的技术。本研究借助一种自制的特殊装置 ,采用电激法将GFP基因转入 2 - 3天水稻幼胚 ,得到瞬时表达 ,4- 6天水稻幼胚经电激后再生了植株 ,并在愈伤组织阶段及R0植株中检测到GFP荧光的转基因植株 ,从而建立了水稻幼胚的遗传转化实验系统。在电容为 5 0 0 μF、电压为 30 0V/cm ,浓度为 10 0 μg/mL的条件下 ,幼胚GFP的电激转化频率可达 35 %。在pH 5 .8的电激缓冲液中 ,最高转化频率可达 40 %。在三种不同的启动子实验中 ,以Ubi启动子的转化频率最高。

关键词：水稻幼胚电激转化转基因植株再生

玉米幼胚胚性愈伤组织再生能力相关性状遗传研究

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遗传 2017年第2期39卷 143-155页

作者：张晓玲龙芸葛飞管中荣张晓祥王艳丽沈亚欧潘光堂四川农业大学玉米研究所成都611130

本文对来源于美国、墨西哥和中国的144份不同玉米自交系幼胚胚性愈伤组织的再生能力相关性状进行了研究,发现其再生能力受到环境、基因型及环境与基因型互作三方面的影响。其中各性状之间的相关性表现为:绿点率(green embryonic callus ... 详细信息

本文对来源于美国、墨西哥和中国的144份不同玉米自交系幼胚胚性愈伤组织的再生能力相关性状进行了研究,发现其再生能力受到环境、基因型及环境与基因型互作三方面的影响。其中各性状之间的相关性表现为:绿点率(green embryonic callus rate,GCR)、分化率(embryonic callus differentiating rate,CDR)及再生绿苗数(the plantlet number of embryonic callus regeneration,CPN)之间呈极显著正相关,且这三者与褐化率(embryonic callus browning rate,CBR)呈极显著负相关;两次继代的克隆指数(embryonic callus cloning index for the first subculture,CCI1;embryonic callus cloning index for the second subculture,CCI2)呈显著正相关,且CCI2与GCR有一定的正相关关系,与CBR呈负相关关系;生根率(embryonic callus rooting rate,CRR)则与GCR、CDR及CPN呈一定正相关。经过广义遗传力计算发现:胚性愈伤组织的两次继代克隆指数CCI1、CCI2和CRR的遗传力较低,其他性状的遗传力较高。此外,经Ward法双向聚类分析,共发现了11个具有高再生能力的自交系材料,且通过生根培养发现其再生绿苗的生根情况良好,因而可将它们作为玉米转基因受体的骨干自交系。

关键词：幼胚胚性愈伤组织再生能力环境基因型

丁香(Syringa L.)种间杂交幼胚离体培养研究

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应用生态学报 2003年第3期14卷 382-386页

作者：周莉罗凤霞代力民中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳110016 北京市农林科学研究院植保环保研究所北京110089

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗 ,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究 .结果表明 ,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为 5 0 g·L-1;幼胚在 5 0～ 6 0d胚龄时培养最容易成功 ;加... 详细信息

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗 ,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究 .结果表明 ,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为 5 0 g·L-1;幼胚在 5 0～ 6 0d胚龄时培养最容易成功 ;加入适量的椰乳、谷氨酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长 .低浓度 (0 .0 1mg·L-1)BA的加入可以提高幼胚的萌发率 ;NAA浓度以 0 .0

关键词：丁香幼胚离体培养

刺葡萄幼胚愈伤组织诱导及其高产原花青素细胞系筛选

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植物生理学报 2014年第11期50卷 1683-1691页

作者：赖呈纯范丽华黄贤贵谢鸿根福建省农业科学院农业工程技术研究所福州350003

以刺葡萄幼胚为材料,研究不同培养方式、培养基配方和培养条件对其愈伤组织诱导的影响,采用正交试验设计法筛选刺葡萄愈伤组织继代增殖的培养基配方,并对继代保持的培养条件和方式进行优化,同时进行了高产原花青素刺葡萄愈伤组织细胞系... 详细信息

以刺葡萄幼胚为材料,研究不同培养方式、培养基配方和培养条件对其愈伤组织诱导的影响,采用正交试验设计法筛选刺葡萄愈伤组织继代增殖的培养基配方,并对继代保持的培养条件和方式进行优化,同时进行了高产原花青素刺葡萄愈伤组织细胞系的筛选研究。结果表明,刺葡萄幼胚以平放的方式接种到MS+1.0 mg·L-1 2,4-D或MS+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.5mg·L-1 KT的固体培养基上,在黑暗的条件下,能有效的诱导出愈伤组织,诱导效率为80%;刺葡萄愈伤组织继代增殖以MS+1.5 mg·L-1 2,4-D或MS+1.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 KT的固体培养基为佳,并且采用此两种培养基交替继代培养,在光照条件下能长期保持旺盛且生长一致的刺葡萄愈伤组织;筛选出了紫红色松脆状的高产原花青素的刺葡萄愈伤组织细胞系,培养35 d后每克鲜样的原花青素含量可达1 671.16μg。

关键词：刺葡萄幼胚愈伤组织花青素原花青素

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幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

江西农业大学学报 2006年第1期28卷 44-49页

作者：陈桂信谢文龙潘东明郭志雄赖钟雄福建农林大学园艺学院福建福州350002 福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所福建福州350002 福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002

试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用... 详细信息

试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用山梨醇（浓度为3％）为碳源、含氮量低的WPM培养基，胚性愈伤组织的诱导效果优于蔗糖为碳源、含氮量高的MS培养基；幼胚胚性愈伤组织诱导的最适2，4-D浓度为2．0mg／L，培养基中附加5．0mg／LAgNO3有助于提高胚性愈伤组织的诱导率。

关键词： (木奈) 幼胚胚性愈伤组织诱导

广东不同玉米基因型幼胚愈伤组织诱导差异研究

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安徽农业科学 2022年第5期50卷 85-89页

作者：何慧怡陈勇生崔方庆齐永文劳方业广东省科学院南繁种业研究所广东广州510316

[目的]针对广东玉米品种建立高效遗传再生技术体系。[方法]以穗甜1号、广糯1号和广黑甜3个玉米品种的幼胚为外植体,研究N_(6)培养基中不同浓度的L-Pro、AgNO_(3)、2,4-D对愈伤组织诱导率和胚性愈伤率的影响。[结果]较高浓度的Pro(1000~1... 详细信息

[目的]针对广东玉米品种建立高效遗传再生技术体系。[方法]以穗甜1号、广糯1号和广黑甜3个玉米品种的幼胚为外植体,研究N_(6)培养基中不同浓度的L-Pro、AgNO_(3)、2,4-D对愈伤组织诱导率和胚性愈伤率的影响。[结果]较高浓度的Pro(1000~1300 mg/L)有利于玉米愈伤组织诱导,而继代时在N_(6)培养基中添加29.43μmol/L AgNO_(3)则可获得较多高质量的胚性愈伤组织;对3个玉米品种而言,培养基中2,4-D的适宜浓度为1~2 mg/L。3种基因型的外植体均可诱导出愈伤组织,但基因型和激素种类与浓度均影响愈伤组织诱导效率。[结论]在实际应用中,应根据不同基因型选择最佳的L-Pro、AgNO_(3)和2,4-D浓度配比,以获得较多高质量的胚性愈伤组织。

关键词：玉米幼胚愈伤组织诱