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基于平衡透析法的中药多种活性成分与血清白蛋白的相互作用及其应用研究

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基于平衡透析法的中药多种活性成分与血清白蛋白的相互作用及其应...

作者：田晏重庆大学

学位级别：硕士

中药的治疗功能是建立在多种有效成分联合作用的基础上,研究中药多种活性成分与血浆蛋白的结合特征,对阐明中药的协同作用机制和中药现代化具有重要意义。然而,目前的研究主要集中在中药单一活性成分与蛋白质的相互作用方面,难以解释中... 详细信息

中药的治疗功能是建立在多种有效成分联合作用的基础上,研究中药多种活性成分与血浆蛋白的结合特征,对阐明中药的协同作用机制和中药现代化具有重要意义。然而,目前的研究主要集中在中药单一活性成分与蛋白质的相互作用方面,难以解释中药整体治疗机制。因此,本文发展了平衡透析法可同时研究多个成分与蛋白质分子的相互作用,并将其成功应用到中药黄芩提取物中多成分与蛋白质的结合研究,为科学解释中药整体作用机制提供了理论基础,并显示了在基于多成分-靶蛋白相互作用研究的活性药物筛选上的应用潜力。具体研究包括以下三部分:(1)首先基于平衡透析法测定了七种单一黄酮类化合物与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)的结合常数。对平衡透析时间以及透析袋对化合物的吸附性进行考察,并进行了方法学验证,探讨了温度和p H对结合亲和力的影响。结果表明该方法可以准确测定黄酮类化合物与BSA的结合常数,结合亲和力与它们的化学结构密切相关,且温度和p H对结合常数都有显著影响。(2)在单一成分与蛋白质相互作用研究的基础上,进一步研究多种活性成分与BSA的同时结合并对结合机制进行探讨。结果表明,黄酮类化合物之间与BSA的结合存在竞争性置换作用,而黄酮类化合物芦丁与皂苷类化合物甘草酸之间与BSA的结合互不影响;荧光光谱结果表明黄酮类化合物和甘草酸分别结合在BSA的site I和site II上;混合状态下同时测定的各黄酮类成分与BSA的结合常数发生了显著改变,这种改变除多成分之间的竞争置换外,还可能与结合引起的蛋白质微环境或构象的改变等因素有关。上述结果表明,该方法可以分析多成分与蛋白质的相互作用并可同时获得它们的结合常数。(3)最后将该方法应用到黄芩提取物中多种活性成分与BSA的相互作用研究。对相互作用的成分进行了结构鉴定,比较了各活性成分与BSA的结合强弱。结果表明,在共存环境下,黄芩提取物中五种主要活性成分与BSA具有不同程度的结合,其中千层纸素A与BSA的结合最强,黄芩苷与BSA结合最弱。综上,本文采用平衡透析法来研究中药多种活性成分与蛋白质的相互作用,为科学解释中药多成分在体内的协同作用机制提供理论基础,且该方法在活性化合物的筛选与上具有潜在应用。

关键词：平衡透析类黄酮牛血清白蛋白中药活性成分结合常数

平衡透析法用于有机小分子和蛋白质相互作用研究进展

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河南师范大学学报（自然科学版） 2008年第4期36卷 93-97页

作者：杨海艳王公轲陈得军卢秀敏卢雁河南师范大学化学与环境科学学院河南新乡453007

生物大分子是近年来生命科学研究的热点和难点之一,有关蛋白质的各类研究也是人们比较感兴趣的课题.平衡透析法是定量研究蛋白质与有机小分子相互作用的经典方法.通过平衡透析法的研究我们可以讨论蛋白质与有机小分子的结合数目、结合... 详细信息

生物大分子是近年来生命科学研究的热点和难点之一,有关蛋白质的各类研究也是人们比较感兴趣的课题.平衡透析法是定量研究蛋白质与有机小分子相互作用的经典方法.通过平衡透析法的研究我们可以讨论蛋白质与有机小分子的结合数目、结合平衡常数及作用力情况等.近年来,国内外学者在此方面做了大量的工作,提出了各种各样的结合模型.本文就此方面的研究进行综述.

关键词：蛋白质有机小分子相互作用平衡透析

平衡透析和差示吸收光谱法研究铅(Ⅱ)与BSA的相互作用

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河北工业大学学报 2011年第1期40卷 55-59页

作者：苗风智王改珍贺进田河北科技大学环境科学与工程学院河北石家庄050018 河北师范大学生命科学学院河北石家庄050016

使用平衡透析和差示紫外吸收光谱法研究了铅(Ⅱ)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.平衡透析的实验结果表明铅(Ⅱ)与BSA的相互作用受缓冲溶液pH的影响,在pH为6.3和pH为5.4条件下,铅(Ⅱ)在BSA上的强结合位点数分别是1.5个和0.8个,弱结合位... 详细信息

使用平衡透析和差示紫外吸收光谱法研究了铅(Ⅱ)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.平衡透析的实验结果表明铅(Ⅱ)与BSA的相互作用受缓冲溶液pH的影响,在pH为6.3和pH为5.4条件下,铅(Ⅱ)在BSA上的强结合位点数分别是1.5个和0.8个,弱结合位点数分别为6个和4个,用非线性最小二乘法拟合Bjerrum方程,报道了铅(Ⅱ)-BSA体系的逐级稳定常数,Hill系数表明铅(Ⅱ)与BSA的结合部位之间有负协同效应.使用差示紫外吸收光谱法研究铅(Ⅱ)-BSA体系的电荷转移谱带,发现组氨酸咪唑基是铅(Ⅱ)在BSA中的优先配位基团.进一步根据Zn2+与Pb2+竞争结合BSA上的强结合位点,推断Pb2+在BSA中优先结合位点是位点A.

关键词：铅牛血清白蛋白平衡透析电荷转移谱带逐级稳定常数

Cu(Ⅱ)与HSA或BSA相互作用的平衡透析研究

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科学通报 1997年第22期42卷 2395-2399页

作者：梁宏邢本刚王修建袁余洲周永洽申泮文广西师范大学化学系桂林541004 南开大学化学系天津300071

我们曾用平衡透析方法研究了生理pH（7.43）下Zn（Ⅱ）与HSA（Human serum albumin,人血清白蛋白）或BSA（Bovine serum albumin,牛血清白蛋白）及Ni（Ⅱ）与HSA或BSA的相互作用。本文用平衡透析法结合原子吸收分光光度法研究了生理pH... 详细信息

我们曾用平衡透析方法研究了生理pH（7.43）下Zn（Ⅱ）与HSA（Human serum albumin,人血清白蛋白）或BSA（Bovine serum albumin,牛血清白蛋白）及Ni（Ⅱ）与HSA或BSA的相互作用。本文用平衡透析法结合原子吸收分光光度法研究了生理pH下Cu（Ⅱ）与HSA或BSA的结合情况。由于迄今报道的Cu（Ⅱ）与血清白蛋白的结合常数往往是用Scatchard公式或类似公式计算的,这实际上只反映了某种平均值,尚不足以全面反映结合状况。我们用非线性最小二乘法拟合Jjerrum方程,首次报道了Cu（Ⅱ）与血清白蛋白相互作用的逐级稳定常数值。结果表明:在相似条件下Cu（Ⅱ）与HSA或BSA结合平衡常数小于Zn（Ⅱ）,而与Ni（Ⅱ）的数量级相似;平衡常数数量级为104mol-1·dm3左右;结合位置数HSA和BSA中均约有20个（计量值）,分别分为二类和三类结合部位;其优先结合部位是His3咪唑基N。用平衡透析方法证实在Cu（Ⅱ）-HSA及Cu（Ⅱ）-BSA体系中存在一个强的金属结合部位的推断。

关键词：铜离子血清白蛋白平衡透析 HSA BSA 相互作用

应用平衡透析法分析药物小分子与蛋白质相互作用

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生物技术通报 2010年第6期26卷 80-84页

作者：李瑞光陈历俊姜铁民徐晨大连工业大学大连116034 北京三元食品有限公司北京100085

蛋白质的相关信息一直是生命科学研究的重点,其中药物小分子与蛋白质的相互作用成为近年来的研究热点。平衡透析法是研究药物小分子与蛋白质相互作用的经典方法,通过该方法可以定量的讨论药物小分子与蛋白质结合的结合数量、结合常数。... 详细信息

蛋白质的相关信息一直是生命科学研究的重点,其中药物小分子与蛋白质的相互作用成为近年来的研究热点。平衡透析法是研究药物小分子与蛋白质相互作用的经典方法,通过该方法可以定量的讨论药物小分子与蛋白质结合的结合数量、结合常数。就平衡透析法用于分析药物小分子与蛋白质的作用方式、作用模型及国内外研究进展进行综述。

关键词：平衡透析药物小分子蛋白质相互作用

金属-血清白蛋白的平衡透析——Ⅱ.Ni(Ⅱ)-血清白蛋白体系的别构效应

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中国科学（B辑） 1997年第1期27卷 75-79页

作者：胡绪英宋仲容苏宪东欧阳砥黄杰生周永洽南开大学化学系天津300071

详细研究了Ni～(2+)离子结合于人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的平衡透析.Ni(II)-HSA和 Ni(II)-BSA体系都得到可以划分成两组的8个结合位置,这2个体系都存在2个优先的结合位置,结合于... 详细信息

详细研究了Ni～(2+)离子结合于人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的平衡透析.Ni(II)-HSA和 Ni(II)-BSA体系都得到可以划分成两组的8个结合位置,这2个体系都存在2个优先的结合位置,结合于这 2个位置的 Ni～(2+)离子可以看作是别构效应的效应子,诱导的别构效应符合Monod等人建议的模型.别构参数表明,R-态结合Ni～(2+)离子的能力约为T-态的100倍,HSA的构象显著紧于BSA的.

关键词：血清白蛋白平衡透析别构效应金属镍离子

[Cu(dien)Cl]^+与DNA及多核苷酸作用的平衡透析研究

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无机化学学报 1992年第4期8卷 392-395页

作者：赵刚汤宝祥管荫桐唐雯霞南京大学配位化学国家重点实验室南京210008

用平衡透析法研究了37℃、pH=6.00,离子强度为0.005条件下的[Cu(dien)Cl]^+与DNA、多聚腺苷酸、多聚鸟苷酸以及多聚胞苷酸之间的相互作用。用McGhee和von Hippel法对实验数据进行了分析,求得其结合常数、反映键合过程中(Cu(dien)Cl]^+... 详细信息

用平衡透析法研究了37℃、pH=6.00,离子强度为0.005条件下的[Cu(dien)Cl]^+与DNA、多聚腺苷酸、多聚鸟苷酸以及多聚胞苷酸之间的相互作用。用McGhee和von Hippel法对实验数据进行了分析,求得其结合常数、反映键合过程中(Cu(dien)Cl]^+间相互作用的协同参数以及每个[Cu(dien)Cl]^+所键合的核苷酸残基数。

关键词：铜 DNA 多核苷酸平衡透析

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Hg（Ⅱ）－BSA的平衡透析研究

四川师范大学学报（自然科学版） 1994年第1期17卷 90-93页

作者：宋仲容王林周永洽重庆师范专科学校南开大学

本文通过Ｈｇ（Ⅱ）－ＢＳＡ（ｂｏｒｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，牛血清白蛋白）的平衡透析研究，得到了逐级结合常数ｋ＿ｉ及有意义的最大结合数α．

关键词：血清蛋白平衡透析汞离子 BSA

平衡透析法研究小檗碱与人血清白蛋白的相互作用

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广东化工 2009年第1期36卷 73-76页

作者：叶志钧刘英菊朱丽华南农业大学理学院应用化学系广东广州510642

蛋白质和小分子相互作用的研究,对促进生命科学的发展有着重要意义。在本实验中,平衡透析法结合紫外可见吸收光谱研究了中药有效成分小檗碱跟人血清白蛋白的相互作用。实验表明,在37℃的水浴恒温培养4 h后,两物质发生相互作用,紫外光谱... 详细信息

蛋白质和小分子相互作用的研究,对促进生命科学的发展有着重要意义。在本实验中,平衡透析法结合紫外可见吸收光谱研究了中药有效成分小檗碱跟人血清白蛋白的相互作用。实验表明,在37℃的水浴恒温培养4 h后,两物质发生相互作用,紫外光谱有所改变,同时,通过方程拟合,测得其结合常数为1.32×103(mol·L-1)-1,最大结合量为406μmol·L-1。

关键词：小檗碱人血清白蛋白平衡透析紫外可见吸收