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人高迁移率族蛋白B1对大鼠气道平滑肌细胞表型改变的影响

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广西医科大学学报 2020年第5期37卷 817-821页

作者：李梦泽黄青华黄兰芳侯长春陈一强广西医科大学第一附属医院呼吸疾病研究所南宁530021 广西医科大学第二附属医院南宁530007

目的:探讨人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)表型转化的影响。方法:以浓度为0 ng/mL、500 ng/mL、5000 ng/mL、10000 ng/mL的人HMGB1分别刺激原代大鼠ASMC 24 h,为空白对照组、HMGB1500 ng/mL组、HMGB15000 ng/mL组... 详细信息

目的:探讨人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)表型转化的影响。方法:以浓度为0 ng/mL、500 ng/mL、5000 ng/mL、10000 ng/mL的人HMGB1分别刺激原代大鼠ASMC 24 h,为空白对照组、HMGB1500 ng/mL组、HMGB15000 ng/mL组和HMGB110000 ng/mL组;以浓度为50 ng/L、100 ng/L的血小板源性生长因子(PDGF)分别刺激原代大鼠ASMC 24 h,为阳性对照组。免疫荧光法观察大鼠ASMC形态,蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠ASMC中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌(SM)22α蛋白表达水平。结果:大鼠ASMC经人HMGB1刺激后出现了长度缩短、外形收缩变钝的形态改变,且其细胞收缩程度随HMGB1刺激浓度增加而增大。大鼠ASMC中α-SMA、SM22α表达水平随HMGB1刺激浓度增加而降低;HMGB110000 ng/mL组大鼠ASMC的α-SMA、SM22α表达水平显著均低于空白对照组(0.203±0.040 vs0.865±0.096,P蛋白标志物表达降低,从而参与气道平滑肌的表型转换。

关键词：高迁移率族蛋白B1 大鼠气道平滑肌细胞 α平滑肌肌动蛋白平滑肌22α蛋白

27nt-miRNA对血管平滑肌细胞SM22α表达的调节及其对细胞活力、迁移和表型改变的影响

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中国病理生理杂志 2019年第2期35卷 200-205页

作者：沈凤杨鹏陶晓静李丹颜渊鸳罗雪兰秦祖杰覃裕旺欧和生广西医科大学药学院广西南宁530021 广西中医药大学附属广西国际壮医医院广西南宁530001

目的:探讨27nt-微小RNA(27nt-miRNA)对血管平滑肌细胞(VSMCs)中平滑肌22α蛋白(SM22α表达的调节及其对细胞活力、迁移和表型改变的影响。方法:构建27nt-miRNA高表达、反义序列(anti-27nt-miRNA)以及阴性对照的表达质粒,经慢病毒包装后... 详细信息

目的:探讨27nt-微小RNA(27nt-miRNA)对血管平滑肌细胞(VSMCs)中平滑肌22α蛋白(SM22α表达的调节及其对细胞活力、迁移和表型改变的影响。方法:构建27nt-miRNA高表达、反义序列(anti-27nt-miRNA)以及阴性对照的表达质粒,经慢病毒包装后分别转染大鼠原代VSMCs,加入血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs表型转换。MTT实验检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学染色法检测细胞中SM22α的mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常组相比,PDGF-BB组的细胞活力上升(P 22α的mRNA及蛋白表达量下降(P 22α的mRNA及蛋白表达量明显升高(P 22α的mRNA及蛋白表达量下降(P 22α表达,同时抑制VSMCs的活力及迁移,并有可能抑制VSMCs从收缩型转变为合成型。

关键词： 27nt-miRNA 血管平滑肌细胞表型平滑肌22α蛋白血小板源性生长因子

SM22α对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响

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中国病理生理杂志 2019年第4期35卷 636-640页

作者：赵斌刘亚彬王光林河北医科大学附属哈励逊国际和平医院普外二科河北衡水053000

目的:探究平滑肌22α蛋白(SM22α)对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:通过慢病毒转染人结直肠癌细胞HCTL16构建SM22α过表达细胞,应用细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化;Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能... 详细信息

目的:探究平滑肌22α蛋白(SM22α)对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:通过慢病毒转染人结直肠癌细胞HCTL16构建SM22α过表达细胞,应用细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化;Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力的变化;使用RT-qPCR检测细胞SM22αmRNA表达的改变;通过Western blot法检测细胞外信号调节激酶(ERK)、p-ERK、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和SM22α蛋白水平。结果:成功构建HCT116过表达SM22α细胞;SM22α过表达细胞的侵袭和迁移能力减弱(P22α过表达抑制p-ERK和MMP-9的蛋白水平(P22α通过抑制ERK/MMP-9信号通路调节结直肠癌细胞侵袭和迁移能力。

关键词：平滑肌22α蛋白结直肠癌细胞外信号调节激酶基质金属蛋白酶9

金属硫蛋白和瑞舒伐他汀对小鼠动脉粥样硬化和SM22α表达的影响

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实验动物与比较医学 2014年第6期34卷 449-453页

作者：朱中生鲁亚丽徐州市第一人民医院心内科徐州221002 南京医科大学附属南京第一医院心内科南京210006

目的探讨金属硫蛋白（MT）和HMG-CoA还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化以及血管平滑肌22α蛋白（SM22α）表达的影响.方法 30只6周龄雄性ApoE基因缺陷小鼠随机分为高脂模型组、瑞舒伐他汀组、金属硫蛋白组,高脂饮... 详细信息

目的探讨金属硫蛋白（MT）和HMG-CoA还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化以及血管平滑肌22α蛋白（SM22α）表达的影响.方法 30只6周龄雄性ApoE基因缺陷小鼠随机分为高脂模型组、瑞舒伐他汀组、金属硫蛋白组,高脂饮食喂养13周;10只背景品系雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照组,正常饮食喂养13周.13周后,摘眼球取血测定血浆总胆固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）的水平,处死小鼠后取主动脉,剪取主动脉弓部位5 mm长主动脉用10％甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE染色及SM22α免疫组织化学染色;其余标本-80℃保存,取100 mg主动脉组织两份,分别提取总蛋白和RNA,并做WesternBlot和RT-PCR检测,观察主动脉血管壁形态学变化,定性和定量分析主动脉组织SM22α表达强度变化.结果与高脂模型组比较,瑞舒伐他汀组血清中TCH、TG、LDL-C水平显著降低（P＜0.05）;金属硫蛋白组与高脂高脂模型组比较,TCH、TG、LDL-C水平无统计学差异（P＞0.05）;和正常对照组相比,高脂模型组主动脉粥样硬化病变程度明显加重,免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法分析主动脉SM22α蛋白和mRNA的表达均明显减少;金属硫蛋白和瑞舒伐他汀组主动脉粥样硬化病变程度减轻,SM22α蛋白和mRNA的表达均增加.结论金属硫蛋白对血脂无明显影响,瑞舒伐他汀降低血脂作用明显;ApoE基因缺陷小鼠主动脉组织动脉粥样硬化明显且SM22α表达减少,金属硫蛋白和瑞舒伐他汀可减轻主动脉粥样硬化病变程度并可增加主动脉SM22α的表达.

关键词：金属硫蛋白(MT) 瑞舒伐他汀 ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化(AS) 平滑肌22α蛋白