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干细胞生长因子协同血小板生成素体外扩增脐血巨核前体细胞的研究

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上海医学 2006年第7期29卷 473-475页

作者：李博文飞球陈霆丁路冯战桂杨默暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院儿科深圳518020 香港中文大学儿科学系

目的探讨在干细胞生长因子(SCF)和血小板生成素(TPO)组合作用下,人脐血CD34^+细胞体外扩增为巨核前体细胞的效果。方法采用经免疫磁珠纯化系统收集的人脐血CD34^+细胞与SCF+TPO组合体外培养,研究该组合对巨核前体细胞的扩增效果。结果在... 详细信息

目的探讨在干细胞生长因子(SCF)和血小板生成素(TPO)组合作用下,人脐血CD34^+细胞体外扩增为巨核前体细胞的效果。方法采用经免疫磁珠纯化系统收集的人脐血CD34^+细胞与SCF+TPO组合体外培养,研究该组合对巨核前体细胞的扩增效果。结果在SCF和TPO组合的作用下,脐血CD34^+细胞(6例)显著地向巨核前体细胞(CD61+CD41^+细胞)扩增。CD61^+CD41^+细胞构成比在培养第7天达到峰值(15．57±4．95)％,第14天为(9．06±2．72)％；存第14天,CD61^-CD41^+细胞总数和巨核系细胞集落形成单位(CFU- MK)达到高峰,为较理想的培养时间。经过体外扩增,总细胞数、CD34^+细胞数、CD61^+CD41^+细胞和CFU-MK均显著增加。结论在SCF和TPO组合的作用下,脐血CD34^+细胞可有效地扩增为巨核前体细胞。

关键词：巨核细胞巨核前体细胞体外扩增血小板生成素干细胞生长因子

人干细胞生长因子-α基因的克隆、表达及其协同rhGM-CSF对人脐带间充质干细胞的增殖作用

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生物工程学报 2011年第11期27卷 1667-1676页

作者：彭鑫磊马岩岩荣靖赵振岭韩波陈伟向阳飞刘秋英王一飞任哲周向荣陈海佳暨南大学生物医药研究开发基地广东省生物工程药物重点实验室广州510632 基因工程药物国家工程研究中心广州510632 亚太干细胞科研中心有限公司暨南.赛莱拉基因生物美容联合实验室广州510632

为了研究hSCGF-α对人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)的作用,采用基因工程技术获得重组人干细胞生长因子-α(Recombinant human Stem Cell Growth Factor-α,rhSCGF-α)。针对SCGF基因的高GC含量,采用PCR两步法获得hSCGF-α基因,插入pET-28a(+)载体质粒,构建重组质粒pET-28a-SCGF-α,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株。低温20℃诱导24 h,目标重组蛋白人干细胞生长因子-α以可溶性表达为主。通过Ni2+-NTA柱纯化,获得目标重组蛋白,电泳谱带扫描分析蛋白纯度可达90%以上。以巨噬细胞/粒细胞(Granulocyte/macrophage,GM)集落形成实验鉴定重组蛋白的生物学活性,并协同重组人巨噬细胞/粒细胞集落刺激因子(Recombinant human GM-colony stimulating factor,rhGM-CSF)研究其对人脐带间充质干细胞的影响。结果显示,纯化的重组蛋白rhSCGF-α具有生物学活性;hSCGF-α及rhGM-CSF对hUCMSCs均有刺激增殖活性,但协同作用效果最强。

关键词：干细胞生长因子人脐带间充质干细胞克隆协同作用集落

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人干细胞生长因子的克隆与表达

复旦学报（自然科学版） 1998年第2期37卷 221-224页

作者：崔剑平徐人尔陆诗华陈春妹应蓓蓓赵寿元李昌本复旦大学遗传工程国家重点实验室上海

干细胞生长因子（ＳｔｅｍＣｅｌｌＦａｃｔｏｒ，ＳＣＦ）能够刺激造血干细胞生长，并与多种细胞因子有协同作用．研究中，运用ＰＣＲ手段，从中国人胎肝ｍＲＮＡ中扩增得到编码人ＳＣＦ全部胞外部分的ｃＤＮＡ．经测序鉴定后，... 详细信息

干细胞生长因子（ＳｔｅｍＣｅｌｌＦａｃｔｏｒ，ＳＣＦ）能够刺激造血干细胞生长，并与多种细胞因子有协同作用．研究中，运用ＰＣＲ手段，从中国人胎肝ｍＲＮＡ中扩增得到编码人ＳＣＦ全部胞外部分的ｃＤＮＡ．经测序鉴定后，将其克隆入表达载体ｐＲＳＥＴ－Ｃ，并在大肠杆菌ＤＥ３菌株进行表达．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实表达产物确为人ＳＣＦ，并对其包涵体作了变性、复性的初步研究．该成果为ＳＣＦ的产品化打下了基础，并将有助于其结构与功能的研究．

关键词：干细胞生长因子 PCR 无性系细胞因子

基于干细胞生长因子/酪氨酸激酶受体信号通路探讨红芪多糖治疗糖尿病胃轻瘫大鼠的作用

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中国临床药理学杂志 2023年第12期39卷 1758-1762页

作者：张倩万生芳张磊李荣科仲倩利张亚男荀敏奇甘肃中医药大学基础医学院

目的探究红芪多糖（HPS）改善糖尿病胃轻瘫（DGP）大鼠胃动力的作用和可能机制。方法将60只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为空白组（常规饲养）、模型组（构建DGP模型）、对照组(DGP模型+3.5 mg·kg-1枸橼酸莫沙必利溶液灌胃)、低、... 详细信息

目的探究红芪多糖（HPS）改善糖尿病胃轻瘫（DGP）大鼠胃动力的作用和可能机制。方法将60只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为空白组（常规饲养）、模型组（构建DGP模型）、对照组(DGP模型+3.5 mg·kg-1枸橼酸莫沙必利溶液灌胃)、低、中、高剂量实验组(DGP模型+按50、100和200 mg·kg-1给予HPS灌胃),每组10只大鼠，每日1次，连续8周。用免疫组化法测定大鼠胃窦组织中Cajal间质细胞（ICC）的含量，用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠胃窦组织中干细胞生长因子（SCF）和酪氨酸激酶受体（c-kit）mRNA的表达水平。结果空白组、模型组、对照组和中、高剂量实验组大鼠胃窦组织中ICC含量的阳性面积分别为（2 537.00±372.89）、（254.99±139.80）、（2 270.00±132.84）、（1 339.00±218.05）和（1 530.00±242.56）μm2,SCF mRNA表达水平分别为1.02±0.28、0.24±0.03、3.51±0.70、2.23±0.22和3.37±0.13,c-kit mRNA表达水平分别为1.00±0.07、0.18±0.02、2.29±0.42、1.88±0.36和2.14±0.33。与模型组比较，中、高剂量实验组及对照组的上述指标差异均有统计学意义（均P<0.01）。结论 HPS可改善胃动力，促进胃排空，其机制可能与上调DGP大鼠胃窦组织中SCF/c-kit信号通路的表达、提高ICC的含量，从而达到对DGP的治疗效果。

关键词：红芪多糖糖尿病胃轻瘫 Cajal间质细胞干细胞生长因子酪氨酸激酶受体

树鼩干细胞生长因子的原核表达、纯化及免疫原性

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中国生物制品学杂志 2019年第1期32卷 20-24,28页

作者：龙琼郝嘉茂徐盟毕研伟肖红剑李智华闫玲梅丁晨李育中姚月婷寸韡中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学海源学院云南昆明650106 吉林省万通药业四川分公司四川宜宾644000

目的原核表达、纯化树鼩干细胞生长因子(stem cell factor,SCF),并检测其免疫原性。方法根据GenBank预测的树鼩SCF基因序列设计引物,PCR扩增SCF基因,克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a(+)-SCF,转化大肠埃希菌BL2... 详细信息

目的原核表达、纯化树鼩干细胞生长因子(stem cell factor,SCF),并检测其免疫原性。方法根据GenBank预测的树鼩SCF基因序列设计引物,PCR扩增SCF基因,克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a(+)-SCF,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Ni柱纯化后,免疫家兔,Western blot和ELISA法检测其免疫原性,并检测SCF在树鼩不同组织中的分布情况。结果重组表达质粒pET-30a(+)-SCF经酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为34 500,表达量约占菌体总蛋白的35. 6%,以包涵体形式存在;纯化后的重组蛋白纯度达90%以上,可与兔抗人SCF多克隆抗体特异性结合,且免疫原性良好,抗血清效价为1∶256 000。在鼻、气管、肺、脾、肾、食管中能检测到SCF的分布。结论在大肠埃希菌中高效表达了重组SCF蛋白,纯化复性后具有良好的免疫原性。

关键词：树鼩干细胞生长因子原核表达纯化免疫原性

腺病毒介导的血管内皮生长因子联合干细胞生长因子治疗严重肢体缺血的实验研究

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实用医学杂志 2024年第5期40卷 639-645页

作者：钟睿王家宁张蕾郭凌郧杨建业郑飞晏誉文余丹丽谭利国湖北医药学院附属人民医院心内科湖北十堰442000 湖北医药学院附属人民医院临床研究所湖北十堰442000 湖北医药学院附属人民医院消化内镜中心湖北十堰442000

目的探究血管内皮生长因子(VEGF)和干细胞生长因子(HGF)双基因腺病毒载体在缺血组织中促血管生成的作用及疗效。方法将84只昆明小鼠随机分为假手术组、空白对照组、VEGF组、HGF组、VEGF+HGF组,构建左侧下肢缺血模型,血流仪观察缺血组... 详细信息

目的探究血管内皮生长因子(VEGF)和干细胞生长因子(HGF)双基因腺病毒载体在缺血组织中促血管生成的作用及疗效。方法将84只昆明小鼠随机分为假手术组、空白对照组、VEGF组、HGF组、VEGF+HGF组,构建左侧下肢缺血模型,血流仪观察缺血组织血运情况,Western blot及ELISA检测各组小鼠不同时间点VEGF、HGF表达,免疫组织化学染色检测缺血组织的血管生成情况(CD31、SMA),以小鼠治疗期间副作用评估安全性。结果建模成功后,各组小鼠左侧下肢血流流速均显著下降;术后第7天,各组小鼠左侧下肢血流流量均明显优于术后即刻(P <0.05),且Ad-VEGF-HGF组小鼠左下肢血流量明显优于其他各组(P <0.05);术后28 d Ad-VEGF-HGF组小鼠左下肢血流量逐步稳定,且术后Ad-VEGF-HGF组小鼠血流明显优于其余各组,且VEGF组、HGF组均显著优于对照组(P <0.05);Western Blot及ELISA检测发现术后7、14、28 d时Ad-HGF组、Ad-VEGF组、Ad-VEGF-HGF组HGF蛋白、VEGF蛋白均明显高于对照组(P <0.05),且14 d Ad-VEGF-HGF组的表达水平处于相对峰值(P <0.001),术后第28天时表达水平逐步降低至术前水平。结论 Ad-VEGF-HGF基因注射可显著提高小鼠体内VEGF和HGF蛋白的表达水平并快速达到相对峰值水平,继而进一步促进下肢缺血后的血管生成,增加血流量,改善下肢循环。

关键词：血管内皮生长因子干细胞生长因子下肢缺血腺病毒载体

子宫内膜异位症患者腹腔液及血清中干细胞生长因子的测定及意义

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实用医学杂志 2012年第21期28卷 3534-3536页

作者：韩燕华王晶晶郑春勤广东省中山市人民医院妇科 528403

目的:通过测定子宫内膜异位症(EMs)患者腹腔液及血清中干细胞生长因子(SCF)水平,初步探讨SCF在EMs发病机制中的作用。方法:选择经手术治疗并经病理诊断证实的EMs患者35例(异位症组),同期因不孕或卵巢囊肿行腹腔镜手术的患者30例作为对照... 详细信息

目的:通过测定子宫内膜异位症(EMs)患者腹腔液及血清中干细胞生长因子(SCF)水平,初步探讨SCF在EMs发病机制中的作用。方法:选择经手术治疗并经病理诊断证实的EMs患者35例(异位症组),同期因不孕或卵巢囊肿行腹腔镜手术的患者30例作为对照组,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)测定两组患者腹腔液及血清中SCF水平。结果:异位症组腹腔液SCF水平明显高于对照组(P0.05)。异位症组腹腔液SCF水平明显高于血清值(P0.05)。异位症组Ⅰ期和Ⅱ期患者腹腔液SCF水平明显高于Ⅲ期和Ⅳ期患者(P0.05)。结论:EMs患者腹腔液SCF水平升高,提示SCF可能在EMs发病过程中发挥一定作用。

关键词：子宫内膜异位症干细胞生长因子腹腔液

白癜风患者血清及疱液中IL-22、肝及干细胞生长因子水平测定

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白癜风患者血清及疱液中IL-22、肝及干细胞生长因子水平测定

作者：李洋青岛大学

学位级别：硕士

目的：检测白癜风患者血清及疱液中白细胞介素-22(Interleukin-22, IL-22)、肝细胞生长因子(Hepatocyte Growth Factor,HGF)及干细胞生长因子(Stem Cell Factor,SCF)水平,并分析处于不同发病阶段及经过治疗后不同疗效的白癜风患者上述... 详细信息

目的：检测白癜风患者血清及疱液中白细胞介素-22(Interleukin-22, IL-22)、肝细胞生长因子(Hepatocyte Growth Factor,HGF)及干细胞生长因子(Stem Cell Factor,SCF)水平,并分析处于不同发病阶段及经过治疗后不同疗效的白癜风患者上述因子水平变化情况,探讨上述因子在白癜风发病过程中的可能作用。方法：收集2008年6月至2009年9月间于青岛大学医学院附属医院皮肤科就诊的白癜风患者为实验组,并以我院健康体检中心的健康人群为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA法)对56例患者及20例健康志愿者血清及其中15例接受表皮移植的患者皮损疱液中IL-22、HGF、SCF因子水平进行测定。同时采用综合疗法对全程接受治疗的18例患者血清中三种因子水平进行监测,观察三种因子的水平变化情况,数据采用SPSS3.0软件进行统计分析。结果：进展期患者组、稳定期患者组、对照组血清中IL-22水平依次降低,且两两组间差异均有统计学意义(P均0.05)。进展期患者组血清中HGF水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。患者组、进展期患者组、稳定期患者组血清中SCF水平差异均未见统计学意义(P均>0.05)。接受表皮移植患者皮损疱液中IL-22含量显著高于供皮区水平,差异有统计学意义(P0.05),不同疗效患者血清中HGF、SCF水平差异均未见统计学意义(P均>0.05)。结论：IL-22可能在白癜风发病及加重过程中起重要作用,IL-22水平变化有可能成为预测白癜风患者病情进展及评价治疗疗效的指标之一。白癜风患者血清及皮损疱液中IL-22、HGF及SCF因子水平异常可能参与了白癜风的发病过程,白癜风患者体内HGF及SCF通路可能与白癜风的发病有关,同时两条通路可能与IL-22有一定联系。

关键词：白癜风白细胞介素-22 肝细胞生长因子干细胞生长因子

干细胞生长因子对胰腺癌细胞生长、迁移及神经浸润的影响

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河南医学研究 2022年第13期31卷 2327-2331页

作者：尚万兵吴文斌新乡医学院法学院河南新乡453003 新乡医学院基础医学院河南新乡453003 新乡医学院司法鉴定中心河南新乡453003

目的探讨干细胞生长因子(SCF)对胰腺癌细胞生长、迁移及神经浸润的影响。方法慢病毒建立SCF过表达的胰腺癌PANC-1稳定细胞系(过表达组1)、对照细胞系(对照组1)和SCF过表达的胰腺癌AsPC-1稳定细胞系(过表达组2)、对照细胞系(对照组2),荧... 详细信息

目的探讨干细胞生长因子(SCF)对胰腺癌细胞生长、迁移及神经浸润的影响。方法慢病毒建立SCF过表达的胰腺癌PANC-1稳定细胞系(过表达组1)、对照细胞系(对照组1)和SCF过表达的胰腺癌AsPC-1稳定细胞系(过表达组2)、对照细胞系(对照组2),荧光定量PCR、Western blot验证各细胞系和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7中SCF mRNA、蛋白质表达。MTT法、Transwell实验分别检测转染细胞系的增殖能力、侵袭能力。体外移植瘤法构建坐骨神经浸润模型,免疫组化分析胰腺癌神经浸润情况。结果对照组1胰腺癌细胞系SCF mRNA表达(0.98±0.16)、蛋白表达(0.41±0.09)均低于过表达组1(4.32±0.78、2.18±0.37)(P细胞系SCF mRNA表达(1.01±0.12)、蛋白表达(0.48±0.10)均低于过表达组2(4.85±0.51、2.58±0.31)(P细胞中SCF mRNA表达(0.36±0.08)、蛋白表达(0.15±0.05)均低于对照组1、对照组2(P细胞系分别比较,过表达组1、过表达组2细胞系细胞增殖能力增加(P细胞侵袭数目(85.41±12.19)高于对照组1(28.90±4.99)(P=0.001),过表达组2细胞侵袭数目(93.28±10.95)高于对照组2(34.11±6.51)(P=0.001)。对照组裸鼠坐骨神经损伤发生率[33.33%(4/12)]低于过表达组[83.33%(10/12)](χ^(2)=6.171,P=0.013)。结论SCF表达升高能促进胰腺癌PANC-1、AsPC-1细胞的生长、侵袭和神经浸润。

关键词：胰腺癌干细胞生长因子细胞生长细胞侵袭神经浸润

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