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干扰素α上调肝癌细胞胸苷磷酸化酶的表达及其机制

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中华肿瘤杂志 2008年第6期30卷 444-447页

作者：肖永胜周俭樊嘉孙绮蛮赵燕孙瑞霞刘银坤汤钊猷复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

目的探讨干扰素α（IFN—α）调控肝癌细胞SMMC-7721胸苷磷酸化酶（TP）表达的机制。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SMMC-7721细胞中TP mRNA的表达水平；应用JAK-STAT信号通路阻断剂AG-490研究该通路的作用；应用基因转录抑... 详细信息

目的探讨干扰素α（IFN—α）调控肝癌细胞SMMC-7721胸苷磷酸化酶（TP）表达的机制。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SMMC-7721细胞中TP mRNA的表达水平；应用JAK-STAT信号通路阻断剂AG-490研究该通路的作用；应用基因转录抑制剂放线菌素D研究TP mRNA的半衰期。结果IFN-α上调TP mRNA表达具有时间-剂量依赖性。10000U／ml的IFN—α处理SMMC-7721细胞8h后，TP mRNA表达水平开始升高，至12h时峰值达0．7272±0．0582，此后维持在0．6573±0．1873水平至72h。5000U／ml和10000U／ml的IFN-α处理肝癌细胞24h，TP mRNA表达水平分别为0．5991±0．2179和0．6298±0．1786，与未用IFN—α处理的肝癌细胞（0．2231±0．0595）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。应用AG-490阻断JAK—STAT通路，IFN—α上调TP mRNA表达的能力明显受到抑制（0．2545±0．1053），与未处理的肝癌细胞（0．2329±0．1032）相比，差异不明显，仅应用IFN-α而未应用AG-490处理的肝癌细胞，其TP mRNA表达水平则显著升高（0．7209±0．1168）。应用IFN-α处理SMMC-7721细胞24h后，利用放线菌素D阻断RNA聚合酶，TP mRNA半衰期为35．8h，而未用IFN-Ot处理的肝癌细胞为8．5h。结论一定剂量的IFN-α上调TP mRNA的表达水平，与细胞内JAK-STAT信号通路有关；IFN—α具有转录后稳定TPmRNA的作用。

关键词：胸苷磷酸化酶干扰素α JAK—STAT信号通路癌,肝细胞

干扰素α对乙型肝炎病毒X蛋白诱导小鼠足细胞系凋亡的影响及分子机制研究

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中国当代儿科杂志 2019年第9期21卷 930-935页

作者：孙永红雷晓燕陈星星崔维静刘璟甘肃省人民医院儿科

目的观察干扰素α(INF-α)对乙型肝炎病毒X (HBx)蛋白诱导的小鼠足细胞系(MPC5)凋亡的影响及其分子机制。方法以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平。将MPC5细胞分为对照组:正常条件下培养... 详细信息

目的观察干扰素α(INF-α)对乙型肝炎病毒X (HBx)蛋白诱导的小鼠足细胞系(MPC5)凋亡的影响及其分子机制。方法以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平。将MPC5细胞分为对照组:正常条件下培养的MPC5细胞;INF-α组:正常MPC5细胞与INF-α共培养;HBx组:HBx诱导的MPC5细胞;HBx+INF-α组:HBx诱导的MPC5细胞与INF-α共培养。不同实验条件下干预48 h后,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测足细胞裂孔隔膜相关蛋白(nephrin、CD2AP、synaptopodin)和细胞骨架相关蛋白(TRPC6)的mRNA及其蛋白的表达。结果 pEX-HBx转染MPC5细胞后48 h HBx mRNA表达最高(P < 0.05)。HBx组MPC5细胞凋亡率显著高于对照组、INF-α组和HBx+INF-α组(P < 0.05)。与对照组和INF-α组相比,HBx组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显降低,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显增高(P < 0.05)。与HBx组相比,HBx+INF-α组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显增高,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显降低(P < 0.05)。结论 INF-α可抑制HBx诱导的MPC5细胞凋亡,其机制可能与INF-α可调节HBx诱导的足细胞裂孔隔膜相关蛋白(CD2AP、nephrin、synaptopodin)和细胞骨架相关蛋白(TRPC6)的异常表达恢复正常有关。

关键词：干扰素α 乙肝病毒X 蛋白细胞凋亡足细胞系小鼠

蒿本内酯通过lncRNA NKILA对干扰素α诱导的人脑血管外膜成纤维细胞增殖及凋亡的影响

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中国细胞生物学学报 2022年第11期44卷 2081-2087页

作者：卢金华程熙戴清月福建中医药大学附属康复医院脑病康复科福州350003 福建省康复技术重点实验室福州350003

该文旨在探讨蒿本内酯对干扰素α(IFN-α)诱导的人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAF)增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。HBVAF细胞经IFN-α诱导后建立细胞损伤模型,将不同剂量的蒿本内酯作用于IFN-α诱导的HBVAF细胞后,采用MTT法、平板克隆... 详细信息

该文旨在探讨蒿本内酯对干扰素α(IFN-α)诱导的人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAF)增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。HBVAF细胞经IFN-α诱导后建立细胞损伤模型,将不同剂量的蒿本内酯作用于IFN-α诱导的HBVAF细胞后,采用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡情况,qRT-PCR法检测lncRNA NKILA的表达量;为探究蒿本内酯与lncRNA NKILA对IFN-α诱导的HBVAF细胞增殖及凋亡的影响,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NKILA分别转染至HBVAF细胞后加入IFN-α处理24 h,si-NC、si-lncRNA NKILA分别转染至HBVAF细胞后加入蒿本内酯与IFN-α共处理24 h,Western blot测定凋亡相关蛋白表达量。结果显示,蒿本内酯处理后细胞存活率和lncRNA NKILA的表达量升高(P<0.05),细胞克隆形成数增多(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9蛋白水平降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染pcDNA-lncRNA NKILA后,细胞存活率升高(P<0.05),细胞克隆形成数增多(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9蛋白水平降低(P<0.05);转染si-lncRNANKILA可减弱蒿本内酯对IFN-α诱导的HBVAF细胞增殖、克隆形成及凋亡的作用。总之,蒿本内酯可通过上调lncRNA NKILA表达而促进IFN-α诱导的脑血管外膜成纤维细胞增殖、克隆形成及抑制细胞凋亡。

关键词：人脑血管外膜成纤维细胞干扰素α 蒿本内酯 lncRNA NKILA 细胞增殖凋亡

干扰素α对Ⅰ型胶原及转化生长因子β1基因表达的影响

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中华肝脏病杂志 2009年第9期17卷 657-660页

作者：胡静李智伟杨秀锦杨悦杰马力中国医科大学附属盛京医院感染科沈阳110003

目的观察干扰素α（IFNα）对血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）分泌Ⅰ型胶原及转化生长因子β1（TGFβ1）基因表达的影响，探讨IFNα抗肝纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠HSC系rHSC-99，分别用0，0．012... 详细信息

目的观察干扰素α（IFNα）对血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）分泌Ⅰ型胶原及转化生长因子β1（TGFβ1）基因表达的影响，探讨IFNα抗肝纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠HSC系rHSC-99，分别用0，0．0125、0．0250、0．0500，0．1000、0．2000、0．4000ng／ml IFNα、PDGF—BB干预和两者共同干预，用四甲基偶氮唑盐实验观察各组对HSC细胞活力的影响，采用逆转录聚合酶链反应方法测定各组对HSC细胞Ⅰ型胶原mRNA和TGFβ1 mRNA表达的影响。结果（1）HSC细胞活力（A值）PDGF—BB干预组为1．35±0．22，空白对照组为0．89±0．12，两组比较，F=16．311，P〈0．05，差异有统计学意义，说明PDGF-BB可提高HSC细胞活力。0．025、0．050、0．100、0．2000、0．400ng／ml IFNα加PDGF-BB共干预组，4值分别为0．84±0．18、0．45±0．15、0．26±0．01、0．33±0．07、0．30±0．06，较空白对照组明显降低，F=7．430，P〈0．05，差异有统计学意义，说明IFNα与PDGF-BB共同作用可抑制HSC细胞活力，且在0．025～0．100ng／ml范围内随着IFNα浓度的增加其抑制作用越明显。（2）0．050、0．100、0．200ng／ml IFNα加PDGF—BB共干预各组Ⅰ型胶原mRNA相对表达值分别为0．94±0．19、0．61±0．12、0．52±0．02，空白对照组为1．41±0．01，共干预各组比空白对照组均明显降低，F=127．921，P〈0．05，差异有统计学意义。0．050、0．100、0．200ng／ml IFNα加PDGF—BB共干预组各组TGFβ1 mRNA相对表达值分别为1．18±0．06、1．15±0．10、1．39±0．04，空白对照组为1．62±0．12，共干预各组比空白对照组均明显降低，F=82．115，P〈0．05，差异有统计学意义，说明IFN仅与PDGF-BB共同作用对HSC细胞Ⅰ型胶原、TGFβ1基因的表达有抑制作用，且随着浓度的增加其抑制作用越明显。结论IFNα对PDGF—BB诱导的HSC细胞活力及Ⅰ型胶原、TGFβ1基因的表达有抑制作用，且随着浓度的增加其抑制作用越明显。这可能是IFNα发挥抗肝纤维化作用的途径之一。

关键词：肝硬化干扰素α 血小板衍生生长因子-β 胶原 Ⅰ型转化生长因子β 肝星状细胞

干扰素α对重症急性胰腺炎治疗作用的实验研究

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中华外科杂志 2002年第2期40卷 146-149页

作者：汤耀卿戚大川武钧毛恩强季俊韩天权张圣道上海第二医科大学附属瑞金医院外科 200025

目的　探讨干扰素α(interferon α,IFN α)对重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis ,SAP)的治疗作用及机理。　方法　雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、IFN α治疗组和生理盐水对照组 ,每组 10只。胰管内逆行注射 5 %牛磺胆酸... 详细信息

目的　探讨干扰素α(interferon α,IFN α)对重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis ,SAP)的治疗作用及机理。　方法　雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、IFN α治疗组和生理盐水对照组 ,每组 10只。胰管内逆行注射 5 %牛磺胆酸钠建立SAP模型。治疗组大鼠 ,自制模后 0 5h开始每小时皮下注射IFN α 5× 10 5U/kg。按随机原则在制模后 4h和 12h分批处死动物 ,观察胰腺、肺和肾病变 ,测腹水量、血和腹水淀粉酶活性 (碘比色法 )、血肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素 10 (IL 10 )浓度 (ELISA法 )。　结果　IFN α组胰腺、肺和肾病变程度减轻。血和腹水淀粉酶活性显著降低。血TNF α显著降低 ,IL 10升高。　结论　IFN α可有效减轻重症急性胰腺炎局部病变和器官损害程度。

关键词：干扰素α 急性坏死性胰腺炎 SAP 肿瘤坏死因子白细胞介素10 实验研究

干扰素α治疗慢性乙型肝炎患者获得HBsAg血清学转换后HBeAg阳性4例临床分析

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中华肝脏病杂志 2021年第6期29卷 580-582页

作者：吴凤萍王怡恺李亚萍李梅贾晓黎张欣党双锁西安交通大学第二附属医院感染科 710004

报道4例使用α干扰素治疗后发生HBsAg血清学转换而HBeAg仍阳性的乙型肝炎血清学标志物少见模式,并复习相关文献,探讨出现这种现象的可能原因。

关键词：肝炎,乙型,慢性干扰素α HBsAg血清学转换 HBeAg阳性

干扰素α调控维甲酸诱导基因G表达分子机制的新发现

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中华肿瘤杂志 2010年第2期32卷 88-92页

作者：楼叶江潘晓蓉贾培敏李冬张长林许桂平童建华上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所 200025 同济大学附属同济医院检验科

目的探讨干扰素α（IFN-α）调控维甲酸诱导基因G（RIG-G）表达调控的分子机制。方法采用Westernblot方法检测急性早幼粒白血病细胞系NB4经IFN-α处理后信号传导和转录活化因子1（STAT1）、p-STATI和RIG—G蛋白的表达变化。采用细胞转... 详细信息

目的探讨干扰素α（IFN-α）调控维甲酸诱导基因G（RIG-G）表达调控的分子机制。方法采用Westernblot方法检测急性早幼粒白血病细胞系NB4经IFN-α处理后信号传导和转录活化因子1（STAT1）、p-STATI和RIG—G蛋白的表达变化。采用细胞转染、报告基因实验、免疫共沉淀实验和染色质免疫沉淀实验等技术，研究STAT1缺失的U3A细胞中，STAT1、STAT2和IFN调节因子9（IRF-9）在IFN-α调控RIG—G基因表达中的作用及其机制。结果在U3A细胞中，只有当STAT2和IRF-9共同转染时，RIG—G启动子荧光素酶报告基因的表达活性才明显升高，约为空载对照组的8倍。在无IFN-α作用时，野生型或突变型STAT2与IRF-9共同转染U3A细胞可产生相似的效应；但IFN-α能进一步增强野生型STAT2与IRF-9的转录激活作用，约为未加IFN-α时的6倍，而对突变型STAT2无效。STAT2能与IRF-9相互作用，并能与RIG-G基因的启动子结合。结论STAT2和IRF-9能以不依赖于STATl的形式发生相互作用，所形成的复合物是介导IFN-α调控RIG—G基因表达的关键性转录因子，这是一种有别于经典JAK—STAT途径的新的干扰素信号转导方式。

关键词：干扰素α 信号转导维甲酸诱导基因G

干扰素α治疗慢性乙型肝炎疗效预测的评分量表

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中华肝脏病杂志 2011年第10期19卷 738-742页

作者：洪美珠方匡南毛乾国黄文琪夏挺宋闽宁张如棉潘金水解放军第一七四医院感染性疾病科厦门361003 解放军第一七四医院医务部厦门大学经济学院计划统计系厦门市中医院肝病中心及感染性疾病科厦门大学附属中山医院消化内科

目的建立可用于预测干扰素α治疗慢性乙型肝炎持久完全应昝情况的评分量表。方法本研究纳入474例采用干扰素α治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者。收集患者的基线信息，如年龄、性别、HBV标志物、肝脏炎症活动度、肝纤维化程度、HBVDNA... 详细信息

目的建立可用于预测干扰素α治疗慢性乙型肝炎持久完全应昝情况的评分量表。方法本研究纳入474例采用干扰素α治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者。收集患者的基线信息，如年龄、性别、HBV标志物、肝脏炎症活动度、肝纤维化程度、HBVDNA定量及基因型，同时收集不同疗程及停药后随访24周时患者的应答情况。采用遗传算法构建评分量表。随机抽出10%病例作为测试集。疗效分为完全应答（CR）、部分应答及无应答。统计学处理在R平台上进行。以基于随机森林的GiN指数法确定各影响因素的相关性大小顺序。以Kendall’Stau-b检验分析自变量与应变量间的统计学相关性；对于分类变量则采用Spearman秩相关分析。结果评分量表的敏感度与特异度分别为78．8％及80．60／0，优势比为15．25。CR：男性患者为31．9％（110／345），女性患者为39．5％（51／129），／9〈0．01，女性患者比男性患者更易获得CR；基因B型HBV感染者CR为43．9％，C型感染者CR为26．1％，P〈0．01，基因B型感染者比C型感染者更易获得CR。ALT1～2×正常值上限（ULN）者CR为22．6％（12／53）、2～3×ULN者CR为10．4％（8／77）、3～5×ULN者CR为22．5％（29／129）、5～10×ULN者CR为53．0％（70／132）、≥10×ULN者CR为55．4%（46／83）。AST0～1×ULN者CR为9．1％（2／22）、1～2×ULN者CR为19．6％（29／148）、2～3×ULN者CR为31．4％（32／102）、3～5×ULN者CR为46．5％（47／101）、5～10XULN者CR为53．4％（39／73）、≥10×ULN者CR为57．1％（16／28），P〈0．01，高ALT、AST水平者更易获得CR。结论本评分量表的预测性能好，便于临床使用。借助这个评分量表，专科医师可以制订出既有循证医学证据又兼顾个体特征的个体化治疗决策。

关键词：肝炎,乙型,慢性干扰素α 治疗预测

干扰素α抗病毒治疗效果与人白细胞抗原-DRB1＊11基因单核苷酸多态性的相关性

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中华肝脏病杂志 2008年第9期16卷 646-648页

作者：常家宝周镇先薛蓉朱冠山田玉岭赵伟东南大学医学院附属南京市第二医院南京210003 上海基康生物工程公司

目的探讨人白细胞抗原-DRB1＊11基因片段内5个干扰素α调节区间单核苷酸多态性的分布与慢性乙型肝炎患者对干扰素α治疗效果的关系。方法采用回顾性分析研究方法，随机抽取107例慢性乙型肝炎患者在我院经过干扰素α治疗12个月，已停药6... 详细信息

目的探讨人白细胞抗原-DRB1＊11基因片段内5个干扰素α调节区间单核苷酸多态性的分布与慢性乙型肝炎患者对干扰素α治疗效果的关系。方法采用回顾性分析研究方法，随机抽取107例慢性乙型肝炎患者在我院经过干扰素α治疗12个月，已停药6个月的患者，分持续应答组（A组）和非持续应答组（B组）。在美国国立生物技术信息中心上查询人乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白基因位点，使用DNA池技术测序作单核苷酸多态性位点的验证，针对各个单核苷酸位点分别设计引物和TaqMan-MGB探针，检测5个干扰素α调节区的单核苷酸多惫眭，分析两组间的差异。结果107例慢性乙型肝炎患者对干扰素α持续应答的30例，非持续应答的77例，持续应答组5个干扰素α调节区中基因型CT的占有率为18．0％，AG为10．8％，非持续应答组基因型CT的占有率为23．8％，AG为15．8％，持续应答组CT、AG这两对基因型的占有率比非持续应答组低，两组比较，x^2值分别为7．728和7．956，P〈0．05，差异有统计学意义，其余基因型之间比较，差异无统计学意义。结论检测干扰素调节基因，可粗略评估患者对干扰素应答的状况，有助于临床医师预测患者对干扰素α的疗效。

关键词：肝炎,乙型,慢性干扰素α HLA抗原多态性,单核苷酸