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布氏杆菌19号菌苗和福尔马林—明礬菌苗对绵羊的联合免疫试验研究

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甘肃农业大学学报 1964年第1期 8-13页

作者：王积禄周尚志张素玉王宾来家畜傅染病学教研组青海省畜牧兽医科学研究所

目前,许多国家在预防牛的布氏杆菌病时,应用19号菌苗并配合其它措施,取得了一定的成绩,但是迄今尚无一种最理想的菌苗来预防羊的布氏杆菌病。国内,孔繁锟、魏仁山等氏曾进行过19号菌苗对绵羊的免疫试验,证明洼射菌苗后4—6个月内具有免... 详细信息

目前,许多国家在预防牛的布氏杆菌病时,应用19号菌苗并配合其它措施,取得了一定的成绩,但是迄今尚无一种最理想的菌苗来预防羊的布氏杆菌病。国内,孔繁锟、魏仁山等氏曾进行过19号菌苗对绵羊的免疫试验,证明洼射菌苗后4—6个月内具有免疫力;殷善述、谢昕等氏也证实绵羊在注射19号菌苗后3个月内,具有良好的免疫力。苏联С.Б.А-бакин等氏的试验证实,用19号菌苗免疫绵羊后经过11个月,仅有50%的保护率;而П.С.уласевич氏的试验确定,19号菌苗对绵羊的免疫作用是极其短暂而微弱的。许多学者曾

关键词：活菌苗保护力变态反应福尔绵羊布氏杆菌联合免疫试验研究

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羊布氏杆菌的分离与鉴定

中国畜牧兽医 2011年第8期38卷 231-233页

作者：欧燎原谈志祥何世成黄建龙张朝阳鲁杏华唐小明汪洪冰湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410007

从一患睾丸炎公山羊中分离到一株革兰氏阴性短小杆菌,该菌经柯兹洛夫斯基鉴别染色红色,在普通绵羊血琼脂、巧克力平板上生长缓慢,对该菌的16SrDNA进行PCR扩增,测序,BLAST比较,结果显示该菌与羊布氏杆菌的16SrDNA有100%的同源性,菌体与... 详细信息

从一患睾丸炎公山羊中分离到一株革兰氏阴性短小杆菌,该菌经柯兹洛夫斯基鉴别染色红色,在普通绵羊血琼脂、巧克力平板上生长缓慢,对该菌的16SrDNA进行PCR扩增,测序,BLAST比较,结果显示该菌与羊布氏杆菌的16SrDNA有100%的同源性,菌体与布氏杆菌标准阳性血清起强凝集反应。结果显示,该分离菌为布氏杆菌。

关键词：布氏杆菌 16SrDNA PCR 鉴定

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抗牛布氏杆菌单克隆抗体的制备及cELISA检测试剂盒研制

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抗牛布氏杆菌单克隆抗体的制备及cELISA检测试剂盒研制

作者：王志明扬州大学

学位级别：硕士

布氏杆菌病(Brucellaellosis)也称布鲁菌病(布病),是由布氏杆菌感染引起的一种最为常见的人兽共患传染病之一,其中又以牛种和羊种布氏杆菌最为严重。布氏杆菌被列为必须报告病原体,除了少数已经根除布病的国家,布病广泛地分布于世界各地... 详细信息

布氏杆菌病(Brucellaellosis)也称布鲁菌病(布病),是由布氏杆菌感染引起的一种最为常见的人兽共患传染病之一,其中又以牛种和羊种布氏杆菌最为严重。布氏杆菌被列为必须报告病原体,除了少数已经根除布病的国家,布病广泛地分布于世界各地,我国也是布病流行极为严重的国家之一。最近几年,布病在世界范围内呈反弹趋势,给公共卫生安全及畜牧业发展而带来了巨大的经济损失,布病防控形势十分严峻。由于目前尚未有理想的治疗药物,因此对布病的准确诊断是预防该病的关键。目前对布病的检测方法主要是血清学方法,包括试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RBPT)、补体结合试验(CFT)、聚合酶链式反应(PCR)和荧光偏振免疫分析法(FPIA)等。但是由于布氏杆菌的脂多糖(LPS)与另外一些革兰阴性菌,特别是耶尔森菌09和大肠杆菌0157表面的LPS的结构存在相似成分,因此在检测中往往会发生交叉反应而出现假阳性的检测结果。鉴于此,本研究制备了具有特异性的抗牛种布氏杆菌的单克隆抗体,并且利用该单克隆抗体建立了检测布氏杆菌抗体的竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)方法,通过与商品化布病检测试剂盒的比较,证明本研究的cELISA方法能够有效地排除以耶尔森菌09和大肠杆菌0157为代表的典型革兰氏阴性菌引起的假阳性的结果,在布病根除计划中将具有重要应用价值。1.抗布氏杆菌单克隆抗体的研制及特性鉴定本研究用灭活的牛种布氏杆菌S2308免疫BALB/c小鼠,按常规方法免疫三次后进行加强免疫,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合。将牛种布氏杆菌A99、耶尔森菌09和大肠杆菌0157分别包被酶标板,用间接酶联免疫吸附试验(iELISA)对杂交瘤细胞进行筛选,结果获得2株稳定分泌抗布氏杆菌抗体的杂交瘤细胞株Brucella-5C10和Brucella-4D2。对该2株杂交瘤进行特性分析,结果表明,Brucella-5C10腹水效价为1：64000,亚类鉴定为IgG3/X;Brucella-4D2腹水效价为1：32000,亚类鉴定为IgG3/λ。试管凝集试验结果表明,2株单克隆抗体与牛种布氏杆菌S2308、牛种布氏杆菌A99、羊种布鲁氏菌16M能发生较强凝集作用;而与耶尔森菌09、大肠杆菌0157无明显凝集现象。免疫印迹法(Western-blot)结果显示,该2株单克隆抗体与布氏杆菌菌体蛋白具有明显反应性,而与耶尔森菌09、大肠杆菌0157无明显反应。本研究所获得的2株单克隆抗体为组建检测动物血清中布氏杆菌抗体的cELISA试剂盒提供了优良的生物材料。2.布氏杆菌抗体竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)检测试剂盒的研制为检测待检血清中布氏杆菌抗体,利用牛种布氏杆菌A99作为抗原包被酶标板,利用Brucella-5C10作为竞争抗体,HRP标记的羊抗鼠IgG作为第二抗体组建了cELISA试剂盒。优化试验结果表明,当牛种布氏杆菌A99按4μg/孔包被;单克隆抗体按1：4000稀释;待检血清按1：20稀释;酶标二抗按1：10000作为工作浓度时本研究建立的cELISA方法检测结果最适。通过ROC分析,本研究建立的cELISA方法确定抑制率30%作为临界值,其敏感性(DSn)和特异性(DSp)在95%置信度(CI)下分别为93.3%和96.2%。用本研究建立的cELISA方法检测临床样品320份牛血清和147份羊血清,并与商品化布病cELISA检测方法作比较。结果表明,两种cELISA方法共同检测出牛血清样品中167份阳性和139份阴性,出现了14份差异样品,符合率为95.6%;共同检测羊血清样品112份阳性和24份阴性,出现了11份差异样品,符合率为92.5%。进一步用CFT验证其中的25份差异样品,结果本研究建立的cELISA与CFT符合率为85%(21/25)。另外,利用该方法检测牛羊种耶尔森菌09的高免血清,结果证明当高免血清的抗体浓度小于200 IU/ml时,本研究组建的cELISA试剂盒不会出现假阳性结果。综上所述,本研究建立的cELISA检测试剂盒具有良好的特异性和灵敏度,能够更好的排除由典型的交叉菌耶尔森菌09和大肠杆菌0157造成的假阳性现象,为布病的准确诊断提供了一种有效的血清学检测工具。

关键词：布氏杆菌单克隆抗体 cELISA 试剂盒

动态增强磁共振定量成像对布氏杆菌性脊椎炎的鉴别诊断价值

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磁共振成像 2015年第8期6卷 581-584页

作者：乔鹏飞牛衡白玉贞高阳牛广明内蒙古医科大学附属医院磁共振室呼和浩特010050

目的探讨动态对比增强磁共振定量成像(dynamic contrast-enhanced MRI,DCE-MRI)技术对布氏杆菌性脊椎炎的鉴别诊断价值。材料与方法 16例脊椎病变患者(经临床或手术病理证实:11例布氏杆菌性脊椎炎、2例脊椎椎体转移瘤、3例结核性脊椎炎)... 详细信息

目的探讨动态对比增强磁共振定量成像(dynamic contrast-enhanced MRI,DCE-MRI)技术对布氏杆菌性脊椎炎的鉴别诊断价值。材料与方法 16例脊椎病变患者(经临床或手术病理证实:11例布氏杆菌性脊椎炎、2例脊椎椎体转移瘤、3例结核性脊椎炎)行T1WI、T2WI、STIR及动态对比增强定量检查,分析其形态、信号特点及容积转运参数(Ktrans)与血管外细胞外间隙容积比(Ve)。结果病变累及腰椎最多。布氏杆菌性脊椎炎在MRI上椎体形态多无明显变化,椎体边缘可见小的骨质破坏及骨质增生。病变椎体T1WI呈低信号,T2WI呈低等或等高信号或低等高混杂信号。STIR呈高信号。增强扫描病变椎体明显强化,与周围正常增强的椎体信号类似或更高。各类脊椎病变的Ktrans值与Ve值的差异均有统计学意义(P布氏杆菌性脊椎炎有特征性的磁共振表现,动态对比增强磁共振定量成像对鉴别诊断有重要价值。

关键词：布氏杆菌脊柱炎磁共振成像动态增强

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用分子生物学方法鉴定布氏杆菌

中国畜禽传染病 1992年第6期14卷 28-29,36页

作者：郭秀兰吴从雅许锐刚张秀梅马志东内蒙古自治区地方病防治研究所

应用细菌DNAG+CM01％和DNA—DNA分子杂交分类鉴定技术,对两株难以判定的可疑布氏杆菌进行了DNA同源性测定.结合这两株菌形态特征.确定为布氏杆菌.解决了病畜的诊断问题。

关键词：分子生物学布氏杆菌鉴定

布氏杆菌感染者血清Tim-3/HMGB1与相关细胞因子的变化

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疑难病杂志 2020年第10期19卷 1016-1019页

作者：杨丽玮卢佩佩西丽娜依·买买提郭淑丽新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心乌鲁木齐830001

目的分析T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)/高迁移率族蛋白1(HMGB1)在布氏杆菌感染者中的表达及其与相关细胞因子水平的关系。方法选取2017年10月—2018年10月于新疆维吾尔自治区人民医院感染科住院的布氏杆菌感染者32例为布病组... 详细信息

目的分析T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)/高迁移率族蛋白1(HMGB1)在布氏杆菌感染者中的表达及其与相关细胞因子水平的关系。方法选取2017年10月—2018年10月于新疆维吾尔自治区人民医院感染科住院的布氏杆菌感染者32例为布病组,于同期医院体检正常者30例为健康对照组,分别测定2组血清Tim-3、HMGB1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、干细胞因子(SCF)水平,同时计数外周血单个核细胞(PBMC)中转化生长因子-β(TGF-β)的斑点形成细胞数(SFC)。结果布病组Tim-3、HMGB1、TNF-α、IL-1β及SCF水平均高于健康对照组[(13.54±2.02)ng/ml vs.(7.43±1.76)ng/ml,(25.84±6.82)ng/ml vs.(13.23±4.75)ng/ml,(74.54±22.66)pg/ml vs.(37.43±10.38)pg/ml,(205.84±84.82)pg/ml vs.(83.23±25.63)pg/ml,(225.25±76.72)pg/ml vs.(103.43±66.67)pg/ml,t=12.662、8.394、8.196、7.595、6.667,P均布病组中采用布氏杆菌重组蛋白抗原(BCSP31)为实验刺激孔TGF-β的SFC明显多于对照组(t/P=28.590/0.05)。结论布氏杆菌病患者血清Tim-3/HMGB1水平均增加,且在布氏杆菌抗原刺激后形成TGF-β的SFC明显增加。

关键词：布氏杆菌 T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3 高迁移率族蛋白1 细胞炎性因子

布氏杆菌脓毒血症合并急性化脓性甲状腺炎1例并文献复习

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国际内分泌代谢杂志 2016年第6期36卷 424-426,F0003页

作者：黄珂刘婕王洁王霖蕾范梦琳辛亚凯郭宇姜宏卫河南科技大学第一附属医院内分泌科洛阳471003

甲状腺具有良好的血供，完整的包膜结构以及高浓度碘，这些因素抑制了细菌的增殖，因此急性化脓性甲状腺炎（AST）在临床上是一种罕见的疾病。AST属于进展性疾病，如果不能快速诊断并给予及时、正确的治疗，常常具有潜在致命性。

关键词：急性化脓性甲状腺炎文献复习脓毒血症布氏杆菌快速诊断膜结构进展性 AST

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布氏杆菌猪型Ⅱ号弱毒菌种通气培养试验

中国兽药杂志 1974年第1期 21-24页

用固体培养基生产布氏杆菌猪型Ⅱ号弱毒苗要用大量的猪肝、琼脂等原材料和大扁瓶等设备,工艺复杂用人多,劳动强度大,不便生产。为了简化工艺流程,提高产量,降低成本,我们于1970年进行了猪2号布氏杆菌弱毒苗液体通气培养试验。共试验了六... 详细信息

用固体培养基生产布氏杆菌猪型Ⅱ号弱毒苗要用大量的猪肝、琼脂等原材料和大扁瓶等设备,工艺复杂用人多,劳动强度大,不便生产。为了简化工艺流程,提高产量,降低成本,我们于1970年进行了猪2号布氏杆菌弱毒苗液体通气培养试验。共试验了六批,每毫升的菌数可达到500—600亿。1972年7月又进行了九批试验,并进行了冻干。经本厂和农林部兽医药品监察所检验,认为生长和生化特性,对海猪的毒力和免疫效力,均合乎试行规程的要求,现将试验方法和结果汇报如下:

关键词：布氏杆菌通气培养免疫原性马丁好氧培养胰酶消化荷兰猪豚鼠菌数纤维素醚甲基纤维素菌种生物制品冻干苗

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牛布氏杆菌抗独特型抗体F9小鼠免疫实验

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 8-11页

作者：金红李媛于康震宋晓华何倩妮谷登峰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐830000

本研究以牛布氏杆菌抗独特型抗体Ｆ９为免疫原免疫小鼠，对小鼠体液免疫与细胞免疫的变化以及攻毒后Ｆ９对小鼠的保护情况进行了研究。阻断ＥＬＩＳＡ试验证明所制备的Ｆ９具有与布氏杆菌Ｓ_(85)Ａ抗原某一决定簇相似结构的“内影像”... 详细信息

本研究以牛布氏杆菌抗独特型抗体Ｆ９为免疫原免疫小鼠，对小鼠体液免疫与细胞免疫的变化以及攻毒后Ｆ９对小鼠的保护情况进行了研究。阻断ＥＬＩＳＡ试验证明所制备的Ｆ９具有与布氏杆菌Ｓ_(85)Ａ抗原某一决定簇相似结构的“内影像”。以Ｆ９为疫苗免疫小鼠的血清凝集试验及ＴＡＮＡＥ^+细胞检测结果均证明：Ｆ９能够诱导小鼠产生布氏杆菌凝集抗体并能使小鼠外周血淋巴细胞产生对布氏杆菌Ｓ_(85)Ａ抗原的敏感性应答，但Ｆ９组不如布氏杆菌Ｓ１９号疫苗组明显。说明Ｆ９能够刺激机体产生体液反应并能非特异性地增强细胞免疫。但攻毒试验结果又证明，Ｆ９组虽然出菌检出率在绝对数值上略小于健康对照组，但差异不显著，几乎不能对小鼠提供有效保护。

关键词：布氏杆菌抗独特型抗体疫苗