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布氏杆菌表面特异性多表位抗原的串联表达与免疫磁珠的初步建立(英文)

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中国人兽共患病学报 2013年第10期29卷 965-971页

作者：唐泰山赵林立廉慧峰张常印陈国强姜焱祝长青王凯民江苏出入境检验检疫局南京210001 内蒙古出入境检验检疫局呼和浩特010020 山西出入境检验检疫局太原030024

目的为获得布氏杆菌表面多表位抗原的特异性抗体,用于布氏杆菌免疫磁珠的构建。方法从布氏杆菌3个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段并插入原核表达载体,转化至*** BL21(DE3),获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,IPT... 详细信息

目的为获得布氏杆菌表面多表位抗原的特异性抗体,用于布氏杆菌免疫磁珠的构建。方法从布氏杆菌3个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段并插入原核表达载体,转化至*** BL21(DE3),获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,IPTG诱导后表达出30kDa的重组蛋白,亲和层析纯化后将其进行Western blot分析、间接ELISA鉴定和兔免疫试验,制备的抗血清经亲和层析纯化后,包被成免疫磁珠并用于布氏杆菌富集。结果表达的重组蛋白能与牛抗布氏杆菌血清反应,其抗血清与布氏杆菌发生良好反应,纯化抗体包被的免疫磁珠能特异性吸附布氏杆菌。结论获得的布氏杆菌特异性抗体和免疫磁珠具有良好的应用前景。

关键词：布氏杆菌多表位抗原串联表达免疫磁珠

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布氏杆菌引起布加综合征1例报告

临床肝胆病杂志 2020年第4期36卷 874-875页

作者：伍广鑫范天利陈鹏青岛市第六人民医院肝病科山东青岛266000

布氏杆菌是一种革兰阴性、细胞内寄生菌,可引起人和动物急性或慢性感染,临床表现主要为病情轻重不一的发热,多汗、关节疼痛,可引起多系统损害。由于布氏杆菌试管凝集试验在部分患者存在假阴性,血培养周期长,易造成漏诊、误诊。本文通过... 详细信息

布氏杆菌是一种革兰阴性、细胞内寄生菌,可引起人和动物急性或慢性感染,临床表现主要为病情轻重不一的发热,多汗、关节疼痛,可引起多系统损害。由于布氏杆菌试管凝集试验在部分患者存在假阴性,血培养周期长,易造成漏诊、误诊。本文通过对1例布氏杆菌感染致布加综合征误诊为肝硬化失代偿期病例分析并文献复习,以加强对该细菌的认识。

关键词：布氏杆菌布加综合征肝硬化

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布氏杆菌性脊柱炎MRI征象与病理对照分析

中国医学计算机成像杂志 2021年第5期27卷 431-435页

作者：徐传辉孙爱君沈连芳蒋常琴蒋瑞生吴翠萍马智军王夕富潍坊市益都中心医院医学影像科潍坊市益都中心医院财务科潍坊市益都中心医院感染性疾病科上海交通大学附属第一人民医院放射科上海市嘉定区江桥医院放射科

目的:分析布氏杆菌性脊柱炎MRI表现特征并与病理学特点对照,以提高对该病的诊断水平。方法:回顾性收集经临床及实验室检查确诊并治疗的布氏杆菌性脊柱炎患者69例,分析其临床表现及MRI征象,包括椎体好发部位、数目、形态、信号以及椎旁... 详细信息

目的:分析布氏杆菌性脊柱炎MRI表现特征并与病理学特点对照,以提高对该病的诊断水平。方法:回顾性收集经临床及实验室检查确诊并治疗的布氏杆菌性脊柱炎患者69例,分析其临床表现及MRI征象,包括椎体好发部位、数目、形态、信号以及椎旁软组织情况,进一步结合文献分析其病理特点并与MRI表现进行对照和分析。结果:69例布氏杆菌性脊柱炎患者以腰椎受累最常见,多位于L4椎体(36例),且多为多个连续椎体受累(55例);受累椎体异常信号多局限于椎体边缘(39例);29例椎间隙不同程度狭窄,27例椎间盘受累;6例患者合并单侧或双侧腰大肌脓肿形成。结论:布氏杆菌性脊柱炎MRI表现具一定特征,能够反映其病理特点,结合MRI特征、实验室检查及临床表现能够对该病作出正确诊断。

关键词：布氏杆菌脊柱炎临床表现磁共振成像

布氏杆菌S2疫苗株GL_0002181基因的原核表达

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畜牧与兽医 2017年第8期49卷 62-67页

作者：王文龙红梅呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010059

为了鉴别羊种布氏杆菌自然感染和S2疫苗(猪种)免疫羊,选用布氏杆菌S2疫苗株进行了全基因组测序,预测出的编码基因与已公布的布氏杆菌基因组数据库比对分析,找出S2特有基因GL_0002181,对GL_0002181基因进行原核表达及免疫原性验证,同时用... 详细信息

为了鉴别羊种布氏杆菌自然感染和S2疫苗(猪种)免疫羊,选用布氏杆菌S2疫苗株进行了全基因组测序,预测出的编码基因与已公布的布氏杆菌基因组数据库比对分析,找出S2特有基因GL_0002181,对GL_0002181基因进行原核表达及免疫原性验证,同时用BP26蛋白作为对照组。Western blot结果显示:以S2疫苗免疫绵羊血清作为检测抗体,重组菌BL21(pETGL_0002181)、BL21(pETBP26)与BL21(DE3)空菌比较,分别在31 ku、32 ku处出现了特异性条带,说明重组蛋白能够与S2免疫血清中的抗体发生特异性反应,具有较好的免疫原性;而重组表达菌BL21(pETGL_0002181)菌体蛋白与自然感染血清不反应,重组蛋白BP26与自然感染血清反应,说明GL_0002181基因在S2疫苗株中存在,在羊种自然流行株中不存在。结果表明:GL_0002181抗原可用于布氏杆菌S2疫苗免疫与羊种布氏杆菌自然感染鉴别诊断,为布氏杆菌病有效诊断提供理论依据。

关键词：布氏杆菌 S2疫苗株 GL_0002181基因原核表达鉴别诊断

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布氏杆菌致儿童髋关节感染一例

中华小儿外科杂志 2014年第7期35卷 559-560页

作者：严维李祁伟刘振江中国医科大学附属盛京医院小儿骨科 110004

患儿男，2岁6个月。2012年12月25Et因间断发热2个月，右侧髋关节不能主动伸直14d入院。患儿体温波动于36．5℃～37．3℃，曾于外院诊断为右侧髋关节暂时性滑膜炎，给予一代头孢抗生素静脉滴注7d，同时右下肢水平皮牵引8d治疗。但发热及... 详细信息

患儿男，2岁6个月。2012年12月25Et因间断发热2个月，右侧髋关节不能主动伸直14d入院。患儿体温波动于36．5℃～37．3℃，曾于外院诊断为右侧髋关节暂时性滑膜炎，给予一代头孢抗生素静脉滴注7d，同时右下肢水平皮牵引8d治疗。但发热及髋关节伸直受限均未见明显好转。

关键词：髋关节感染布氏杆菌髋关节暂时性滑膜炎儿童间断发热头孢抗生素水平皮牵引体温波动

布氏杆菌pCDNA3.1-L7L12核酸疫苗的构建及其免疫学评价

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免疫学杂志 2004年第3期20卷 208-212页

作者：曾政王英赵光宇周华于三科韩岳罗德炎马丽娟王希良军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100

目的　获得布氏杆菌保护性抗原L7 L12重组蛋白及pCDNA3.1 L7 L12重组质粒 ,并比较其诱导特异性免疫应答的能力。方法　PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7 L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中 ;pET32a L7 L12重... 详细信息

目的　获得布氏杆菌保护性抗原L7 L12重组蛋白及pCDNA3.1 L7 L12重组质粒 ,并比较其诱导特异性免疫应答的能力。方法　PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7 L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中 ;pET32a L7 L12重组质粒转化BL2 1(DE3) ,所表达蛋白经SDS PAGE、免疫印迹分析、纯化后免疫小鼠 ;pCDNA3.1 L7 L12重组质粒配以GM CSF同时肌肉注射免疫小鼠 ,3次免疫后测定免疫功能进行免疫效果的评价。结果　ELISA、Westernblot检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生 ,蛋白苗所诱导的抗体效价远远高于DNA疫苗 ;通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明DNA疫苗以诱发TH1 型免疫为主。结论　所构建的布氏杆菌DNA疫苗和蛋白苗均具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力 ,DNA疫苗诱导产生的细胞免疫反应强于蛋白苗 ,可作为潜在的布氏菌新型疫苗。

关键词：布氏杆菌 L7/L12蛋白 DNA疫苗

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布氏杆菌微滴数字PCR方法的建立

畜牧与兽医 2022年第2期54卷 97-101页

作者：董浩原霖刘洋吴同垒陈亚娜徐阳王传彬梁春南中国食品药品检定研究院北乐102600 中国动物疫病预防控制中心北京102618 河北科技师范学院河北秦皇岛066000

为建立一种布氏杆菌微滴数字PCR qPCR方法,对布氏杆菌病的定量诊断提供技术支持,在实时荧光PCR(qPCR)检测方法(T/CVMA 20—2020)的基础上,建立了布氏杆菌微滴数字PCR方法,并对方法的反应条件进行了优化,同时对其敏感性、特异性、重复性... 详细信息

为建立一种布氏杆菌微滴数字PCR qPCR方法,对布氏杆菌病的定量诊断提供技术支持,在实时荧光PCR(qPCR)检测方法(T/CVMA 20—2020)的基础上,建立了布氏杆菌微滴数字PCR方法,并对方法的反应条件进行了优化,同时对其敏感性、特异性、重复性进行了评估。结果显示:本方法的最低检测下限为2.6 copies/μL,未发现与常见的5种细菌存在交叉反应,重复性检测的变异系数小于5%;采用该微滴数字PCR和实时荧光PCR检测方法分别对76份流产牛的阴道拭子进行检测,显示该微滴数字PCR比qPCR可以多检出3份阳性样品。本研究建立的微滴数字PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,适用于临床样品的布氏杆菌核酸检测。

关键词：布氏杆菌微滴数字PCR 实时荧光PCR

布氏杆菌Ⅳ型分泌系统相关蛋白基因RicA的克隆、原核表达及免疫原性分析

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西北农业学报 2015年第5期24卷 18-23页

作者：韩玉霞孙志华刘娟关团张辉陈创夫石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

为克隆并原核表达布氏杆菌(Brucella melitensis)疫苗菌株M5Ⅳ型分泌系统相关蛋白基因RicA,并进行表达蛋白的免疫原性分析,应用PCR技术从布氏杆菌疫苗菌株M5全基因组扩增RicA基因片段,亚克隆至pMD18-T载体后测序分析,构建重组表达载体pE... 详细信息

为克隆并原核表达布氏杆菌(Brucella melitensis)疫苗菌株M5Ⅳ型分泌系统相关蛋白基因RicA,并进行表达蛋白的免疫原性分析,应用PCR技术从布氏杆菌疫苗菌株M5全基因组扩增RicA基因片段,亚克隆至pMD18-T载体后测序分析,构建重组表达载体pET-28a(+)-RicA,转化*** BL21(DE3)表达菌,以不同浓度IPTG诱导表达不同时间,SDS-PAGE鉴定表达效果,表达蛋白经AKTA蛋白纯化系统纯化,用Antheprot 5.0软件分析其理化特性及抗原性,Western Blot检测其免疫原性。结果表明:RicA基因全长528bp,编码175个氨基酸,与基因库中已知菌株的核苷酸同源性和氨基酸同源性均达到99%以上。SDS-PAGE表明,RicA融合蛋白在大约23ku处出现条带,纯化后条带单一。软件分析发现RicA蛋白融合抗原性较强,Western Blot检测证明其有较好的免疫原性。说明,成功克隆并表达布氏杆菌疫苗菌株M5 RicA基因,为进一步研究其与布氏杆菌Ⅳ型分泌系统及布氏杆菌致病机制之间的关系奠定了基础。

关键词：布氏杆菌 Ⅳ型分泌系统 RicA基因

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布氏杆菌性脊柱炎临床与治疗观察

中国矫形外科杂志 2018年第2期26卷 174-177页

作者：王超相宏飞马学晓岳斌张国庆陈伯华青岛大学附属医院脊柱外科青岛市海尔路59号266000

[目的]回顾本院收治的31例布氏杆菌性脊柱炎患者资料,分析布氏杆菌性脊柱炎的诊断、治疗要点和预后情况,为本病的规范化诊治提供临床经验。[方法]收集2013年11月~2016年8月本院收治的布氏杆菌性脊柱炎患者31例临床及随访资料,分析患者... 详细信息

[目的]回顾本院收治的31例布氏杆菌性脊柱炎患者资料,分析布氏杆菌性脊柱炎的诊断、治疗要点和预后情况,为本病的规范化诊治提供临床经验。[方法]收集2013年11月~2016年8月本院收治的布氏杆菌性脊柱炎患者31例临床及随访资料,分析患者的一般情况、临床表现、实验室检查、影像学表现、细菌及病理学检查及治疗方法,评价治疗效果与预后。[结果]患者31例,男16例,女15例,平均年龄52.7岁,24例有牛羊接触史,局部疼痛(100%)和发热(58.1%)较常见,10例伴有神经损害。实验室检查发现26例(83.87%)血沉升高、27例(87.10%)血CRP升高、23例(74.19%)血单核细胞或单核细胞百分比升高。8例行血培养均为阴性,活检细菌培养阳性率80%,血清凝集试验均为阳性。病变主要累及腰椎及腰骶段(24例,77.42%),X线平片及CT可见椎间隙变窄、椎体骨质破坏、反应性骨硬化、前方骨赘鸟嘴征;MRI可见病变在T1像表现为低信号,T2像为等信号或高信号,T2压脂像显示高信号。手术联合药物治疗19例,单纯药物治疗12例,平均随访17.1个月(4~37个月),所有患者均治愈。[结论]布氏杆菌性脊柱炎有特征性的流行病学特点、临床表现、实验室指标和影像学表现,确诊需细菌培养或血清凝集试验。药物治疗首选口服多西环素+利福平,手术治疗应把握指征,规范的保守治疗或联合手术治疗均可达到良好的预后效果。

关键词：布氏杆菌脊柱感染