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不同干燥方式制备巴西人参提取物粉体性质比较

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中国新药杂志 2024年第4期33卷 383-389页

作者：高健黄璐琦李哲董欢欢陈丽华江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 中国中医科学院北京100700

目的:比较真空干燥、热风干燥、喷雾干燥不同工艺粉末性质间差异,研究巴西人参提取物的最佳干燥方式。方法:以巴西人参为实验材料,通过对3种干燥工艺所制粉末样品的粒径、干燥失重、松装密度、振实密度、休止角等多指标测定,表征其流动... 详细信息

目的:比较真空干燥、热风干燥、喷雾干燥不同工艺粉末性质间差异,研究巴西人参提取物的最佳干燥方式。方法:以巴西人参为实验材料,通过对3种干燥工艺所制粉末样品的粒径、干燥失重、松装密度、振实密度、休止角等多指标测定,表征其流动性、稳定性、可压性等粉体学性质;并对优选干燥方式放大验证。结果:各干燥方式与对照图谱的相关性系数分别为0.798,0.827,0.698;聚类分析将热风干燥与真空干燥归为Ⅰ类,表明二者性质较为相似;中试规模喷雾干燥粉与实验室喷雾干燥粉二级指标的Pearson相关系数达0.978。结论:喷雾干燥粉相比于其他2种干燥方式粉体性质有明显差异,具有良好的流动性且不易团聚,而热风干燥与真空干燥的可压性较好;中试喷雾干燥粉末性质稳定,可实现巴西人参提取物粉末的大规模生产。

关键词：巴西人参干燥工艺物理性质粉末流动性固体制剂

巴西人参皂苷的纯化富集及其体外促雄激素活性研究

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中国野生植物资源 2024年第4期43卷 31-38页

作者：黄倩倩吴海英张锴佳鲁珍秦小明林海生曹文红刘素青广东海洋大学食品科技学院广东省水产品加工与安全重点实验室广东湛江524088 国家贝类加工技术研发分中心(湛江) 广东湛江524088 广东海洋大学滨海农业学院广东湛江524088

目的:探讨巴西人参提取物中齐墩果酸型皂苷类化合物对小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)雄激素合成与分泌的促进作用,并根据细胞试验筛选出活性较强的组分。方法:以AB-8与XAD1600两种大孔吸附树脂分离富集得到的不同组分为试材,分别采用四甲基... 详细信息

目的:探讨巴西人参提取物中齐墩果酸型皂苷类化合物对小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)雄激素合成与分泌的促进作用,并根据细胞试验筛选出活性较强的组分。方法:以AB-8与XAD1600两种大孔吸附树脂分离富集得到的不同组分为试材,分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、酶联免疫吸附法、硝酸还原法、羟胺法、硫代巴比妥酸法检测不同组分在不同浓度下对TM3细胞增殖活率、睾酮(T)含量、二氢睾酮(DHT)含量、环磷酸鸟苷(cGMP)含量、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响。结果:经AB-8大孔吸附树脂分离得到的70%乙醇组分较其他组分具有更强的促进TM3细胞雄激素分泌的活性,再以XAD1600大孔吸附树脂对70%乙醇组分进一步纯化富集,获得的GP-1与GP-2组分均可显著促进TM3细胞T、DHT、cGMP的分泌量(P巴西人参各分离纯化组分可以显著促进TM3细胞雄激素的合成与分泌,并提高TM3细胞的抗氧化能力,其中GP-2组分活性最强,其主要活性成分为齐墩果酸型皂苷。

关键词：巴西人参皂苷纯化富集小鼠睾丸间质细胞雄激素

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含巴西人参中药复方颗粒剂制备工艺优化

中成药 2024年第3期46卷 962-966页

作者：刘志青李斌颜冬梅唐琍萍王飞黄璐琦徐玲霞江西中医药大学院士工作站江西南昌330004

目的优化含巴西人参中药复方颗粒剂制备工艺。方法在单因素试验基础上,以赋形剂[可溶性淀粉+环糊精(1∶3)]用量、乙醇体积分数、乙醇用量为影响因素,成型率、粒度、溶化率、休止角、吸湿率、感官评价的综合评分为评价指标,Box-Behnke... 详细信息

目的优化含巴西人参中药复方颗粒剂制备工艺。方法在单因素试验基础上,以赋形剂[可溶性淀粉+环糊精(1∶3)]用量、乙醇体积分数、乙醇用量为影响因素,成型率、粒度、溶化率、休止角、吸湿率、感官评价的综合评分为评价指标,Box-Behnken响应面法优化制备工艺。结果最优条件为赋形剂用量50 g, 89%乙醇用量16 mL,巴西人参中药复方浸膏冻干粉、可溶性淀粉、环糊精用量比例50∶12.5∶37.5,制软材,制粒,在60℃下干燥1 h,综合评分为98.83分。结论该方法稳定可行,所得含巴西人参中药复方颗粒剂体验感较好,可为其后续规模化生产奠定基础。

关键词：巴西人参中药复方颗粒剂制备工艺 Box-Behnken响应面法

巴西人参的抗疲劳和调节免疫力作用及其制剂研究

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巴西人参的抗疲劳和调节免疫力作用及其制剂研究

作者：刘志青江西中医药大学

学位级别：硕士

本课题采用单因素考察、正交设计及响应面试验设计法等,优化巴西人参及巴西人参复方(该复方为自主组方,包括9 g巴西人参、9 g枸杞、9 g桑椹、5 g白扁豆花和5 g玳玳花)的提取工艺,考察巴西人参及其复方的抗疲劳及其调节免疫力作用,在此... 详细信息

本课题采用单因素考察、正交设计及响应面试验设计法等,优化巴西人参及巴西人参复方(该复方为自主组方,包括9 g巴西人参、9 g枸杞、9 g桑椹、5 g白扁豆花和5 g玳玳花)的提取工艺,考察巴西人参及其复方的抗疲劳及其调节免疫力作用,在此基础上,开发巴西人参及其复方制剂,拓展巴西人参的应用范围。具体研究方法与结果如下:1.巴西人参提取工艺研究以齐墩果酸、蜕皮甾酮提取量和浸膏量为考察指标,采用单因素、正交设计法优化巴西人参提取工艺:80%乙醇1:10(g·m L)100℃回流提取1 h,提取2次;其中齐墩果酸含量为22.06μg·g,蜕皮激素含量为5.18 mg·g,浸膏得率为54.49%。2.巴西人参复方提取工艺研究以总多糖、总皂苷、蜕皮激素、芦丁及白藜芦醇提取量和浸膏量为考察指标,采用单因素、层次分析及响应面设计法优化巴西人参复方的提取工艺:水1:12(g·m L)煎煮,提取140 min,提取2次;其中浸膏得率为51.22%、总多糖含量为170.577 mg·g、总皂苷含量为52.091 mg·g、蜕皮激素含量为1.236 mg·g、芦丁含量为1.262 mg·g、白藜芦醇含量为0.0769 mg·g。3.巴西人参及其复方的抗疲劳、调节免疫力研究本文以小鼠的负重游泳时间、肝/肌糖原含量、血清LA及BNN含量考察巴西人参及其复方抗疲劳作用;以免疫力低下模型小鼠的脏器/体重比值、Ig G、Ig M、Ig A免疫球蛋白含量、Con A诱导淋巴细胞转化率、NK细胞活性,免疫力正常小鼠的DTH值、血清HC含量、溶血空斑数来考察巴西人参及其复方调节免疫力作用。巴西人参的抗疲劳、调节免疫力作用研究:与空白组比较,巴西人参高剂量组显著延长小鼠的负重游泳时间,显著增高其肝/肌糖原含量(P巴西人参降低小鼠的BUN及血清LA含量(P>0.05),结果表明,巴西人参具抗疲劳作用。采用小鼠免疫力低下模型考察其促进免疫力作用,与模型组比较,巴西人参及阳性对照组增加小鼠的Ig G、Ig M、Ig A免疫球蛋白含量(P>0.05);巴西人参高剂量组及阳性对照组显著升高小鼠的Con A诱导淋巴细胞转化率、NK细胞活性(P巴西人参高剂量组及阳性对照组显著升高小鼠的DTH、HC(P巴西人参增加小鼠溶血空斑数(P>0.05);以上结果表明,巴西人参对小鼠在细胞免疫及非特异性免疫方面具有免疫调节作用。巴西人参复方的抗疲劳、调节免疫力作用研究:与空白组比较,巴西人参复方中高剂量组显著延长小鼠的负重游泳时间,显著增高其肝/肌糖原含量(P巴西人参复方降低小鼠的BNN及LA含量(P>0.05),结果表明,巴西人参复方有抗疲劳作用。采用小鼠免疫力低下模型考察其促进免疫力作用,与模型组比较,巴西人参复方及阳性对照组增加小鼠的Ig G、Ig M、Ig A免疫球蛋白含量(P>0.05);巴西人参复方中、高剂量组及阳性对照组显著升高小鼠的Con A诱导淋巴细胞转化率及NK细胞活性(P巴西人参复方的中高剂量组和阳性对照组显著升高小鼠的DTH、HC(P巴西人参复方增加小鼠溶血空斑数(P>0.05);结果表明,巴西人参复方对小鼠在体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫方面具免疫调节作用。4.巴西人参口香糖的处方优选和工艺研究以硬度、弹性、黏性、咀嚼性和感官为考察指标,采用单因素、正交设计法考察巴西人参口香糖制备处方:胶基35%、木糖醇40%、巴西人参提取液冻干粉7%、绿茶粉1%、抹茶粉0.5%、甘油25%、柠檬酸0.4%、薄荷油0.8%、巴西甘菊花0.5%。5.巴西人参复方颗粒剂的制备工艺研究以成型率、粒度、水分溶化性、溶化率、休止角及吸湿率和感官评价为指标,采用单因素、响应面试验设计法考察巴西人参复方颗粒剂制备处方:巴西人参复方浸膏冻干粉50%,可溶性淀粉12.5%,环糊精37.5%,89%乙醇16%,混匀,制软材,制粒,60℃干燥1 h,整粒分级。按2020《中国药典》颗粒剂要求进行巴西人参复方颗粒剂的检查,符合2020《中国药典》颗粒剂要求。

关键词：巴西人参巴西人参复方提取工艺抗疲劳调节免疫力口香糖颗粒剂

巴西人参极性部位化学成分及其体外抗肿瘤活性研究

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巴西人参极性部位化学成分及其体外抗肿瘤活性研究

作者：黄锦程江西中医药大学

学位级别：硕士

巴西人参Pfaffia glomerata(Spreng)Pedersen,苋科草本植物,化学成分包括甾体、三萜、黄酮和生物碱等,具有抗肿瘤、壮阳以及器官保护等药理作用。本研究采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、ODS、聚酰胺和HPLC制备液相等柱色谱方... 详细信息

巴西人参Pfaffia glomerata(Spreng)Pedersen,苋科草本植物,化学成分包括甾体、三萜、黄酮和生物碱等,具有抗肿瘤、壮阳以及器官保护等药理作用。本研究采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、ODS、聚酰胺和HPLC制备液相等柱色谱方法对巴西人参的极性部位化学成分进行了系统地分离,同时结合紫外、质谱和核磁共振等波谱技术以及理化性质对所得化合物进行了结构鉴定。从巴西人参95%乙醇浸膏的乙酸乙酯部位、甲醇部位以及巴西人参50%乙醇浸膏的正丁醇部位共分离得到33个化合物,鉴定了其中30个化合物,分别为20S,22S-O-(R-亚乙基)-20-羟基蜕皮甾酮(1)、20-羟基蜕皮甾酮(2)、水龙骨甾酮B(3)、坡斯特甾酮(4)、stachysterone B(5)、蕨甾酮(6)、钙固酮(7)、紫杉甾酮(8)、马克甾酮C(9)、20,22-O-(R-亚乙基)-20-羟基蜕皮甾酮(10)、20,22-O-(R-3-甲氧羰基)亚丙基-20-羟基蜕皮甾酮(11)、荆节花甾酮D(12)、齐墩果酸(13)、β-D-吡喃葡萄糖基齐墩果酸酯(14)、5α-20-羟基蜕皮甾酮(15)、阿卜它甾酮(16)、25-羟基达克海南甾酮(17)、竹节参皂苷IVa甲酯(18)、1,2,4-苯三酚(19)、(-)-丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(20)、丁香树脂酚(21)、7,4＇-二羟基-5-甲氧基二氢黄酮(22)、3-甲氧基槲皮素(23)、木樨草素(24)、槲皮素(25)、N-反式阿魏酰酪胺(26)、α-D-甲基呋喃果糖苷(27)、β-D-甲基呋喃果糖苷(28)、蔗糖(29)、尿嘧啶核苷(30)。其中,化合物1为新化合物。化合物1、3～5、7、9～12、15～17、19～20、27～28和30为首次从巴西人参中分离得到。化合物1、4～5、7、9～12、15～17、19～20、27～28和30为首次从珐菲亚属植物中分离得到。对分离得到的化合物1～3、6～12、15～17进行体外抑制癌细胞增殖的活性筛选,结果发现所有化合物对A549细胞、MKN-45细胞、HEPG2.2.15细胞、HELA细胞和MCF10A细胞的体外增殖均有抑制效果。与此同时,发现20S,22S-O-(R-亚乙基)-20-羟基蜕皮甾酮(1)在体外抑制MKN-45细胞和MCF10A细胞增殖的活性强于20,22-O-(R-亚乙基)-20-羟基蜕皮甾酮(10);20,22-O-(R-亚乙基)-20-羟基蜕皮甾酮(10)在体外抑制HEPG2.2.15细胞增殖的活性强于20S,22S-O-(R-亚乙基)-20-羟基蜕皮甾酮(1);20-羟基蜕皮甾酮(2)在体外抑制MKN-45细胞增殖的活性强于5α-20-羟基蜕皮甾酮(15);5α-20-羟基蜕皮甾酮(15)在体外抑制A549细胞、HEPG2.2.15细胞和MCF10A细胞增殖的活性强于20-羟基蜕皮甾酮(2)。还发现体外抑制HELA细胞增殖的作用与甾酮类化合物呈现一定的剂量依赖性。

关键词：巴西人参甾酮化学成分癌细胞

日粮添加巴西人参茎叶青贮对广西麻鸡的生长性能、屠宰性能及肌肉营养成分的影响

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饲料研究 2022年第11期45卷 26-30页

作者：郑喜邦崔博惟何仁春周志扬王启芝黄丽霞周俊华韦友传广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 广西畜牧研究所广西南宁530001

试验旨在探究日粮中添加不同水平的巴西人参茎叶青贮料对广西麻鸡的生长性能、屠宰性能及肌肉营养成分的影响,将200只80日龄广西麻鸡随机分为4组(对照组、试验1组、试验2组、试验3组),每组5个重复,每个重复10只鸡。对照组麻鸡饲喂基础日... 详细信息

试验旨在探究日粮中添加不同水平的巴西人参茎叶青贮料对广西麻鸡的生长性能、屠宰性能及肌肉营养成分的影响,将200只80日龄广西麻鸡随机分为4组(对照组、试验1组、试验2组、试验3组),每组5个重复,每个重复10只鸡。对照组麻鸡饲喂基础日粮,试验1组、试验2组、试验3组麻鸡分别饲喂含巴西人参茎叶青贮料30%、40%、50%的试验日粮。试验期90 d。结果显示:与对照组相比,试验2组麻鸡的平均日增重显著提高(P巴西人参茎叶青贮饲料对广西麻鸡生长性能、屠宰性能及肌肉品质均具有一定程度的改善作用。

关键词：巴西人参青贮广西麻鸡生长性能屠宰性能肌肉营养成分

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基于等效替换法的巴西人参四气研究

基于等效替换法的巴西人参四气研究

作者：宋振光江西中医药大学

学位级别：硕士

目的:基于复方配伍替换法将党参方中党参替换为巴西人参,采用生化效应指标对巴西人参方和党参方进行寒热属性判别,代谢组学方法对两组方进行温凉属性判别,进一步探究巴西人参的四性归属;分析巴西人参方药性的分子机制,探讨其药性归属的... 详细信息

目的:基于复方配伍替换法将党参方中党参替换为巴西人参,采用生化效应指标对巴西人参方和党参方进行寒热属性判别,代谢组学方法对两组方进行温凉属性判别,进一步探究巴西人参的四性归属;分析巴西人参方药性的分子机制,探讨其药性归属的科学性;以期赋予外来药材四气的归属,助力外来药材的中药化。方法:1采用生化效应指标研究巴西人参方和党参方的寒热归属,再判断巴西人参的寒热属性。大鼠随机分为巴西人参方组、党参方组,共给药29天,检测大鼠自主活动次数,能量相关指标包括多种酶活性(Na-K-ATP,SDH)、以及肾上腺、睾丸和体脂的系数、血常规和ALT、AST、血清中T3、T4等含量。导入中药寒热属性判别决策树模型,预测出两个方子的寒热属性,进而推测巴西人参的四气属性。2为提升判别的精确性,采用代谢组学方法研究巴西人参方和党参方的温凉归属,再判断巴西人参的温凉属性。大鼠随机分为空白对照组,温性药类6组(黄芪、桂枝、小茴香、乌药、当归、苍术),凉性药类6组(小蓟、钩藤、女贞子、葛根、大蓟、薄荷),巴西人参方组,党参方组。于给药第29天分别收集各组动物的尿液,基于UPLC-QTOF-MS采集数据后,联合SIMCA软件对各组数据进行主成分分析(PCA),基于偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法建立温凉药性的判别模型,将两组方数据导入所建温凉判别模型中,判断两个方子的温凉属性,进而推测巴西人参的四气属性。3基于UPLC-QTOF-MS分析各组大鼠代谢组分信息,探究巴西人参方的药性归属机制。采用SIMCA软件计算温凉药VIP>1的潜在生物标记物,采用人体代谢组数据库(HMDB)、Progenesis QI软件对潜在生物标志物(Marker)鉴定,Metabo Analyst数据库对24个Marker进行通路分析,探讨巴西人参方的药性归属机制。结果:1寒热属性判别模型结果显示C5.0算法预测有95.70%的准确率,表示巴西人参方(n=9)是热属性的概率为66.7%,党参方(n=9)是热属性的概率为88.9%,C&R算法显示结果一致,同时预测巴西人参是平性的概率为59.3%。2在正离子模式下采集的代谢组学数据,以黄芪、桂枝、小茴香、乌药、当归等五组温药,及小蓟、钩藤、女贞子、葛根、大蓟五组凉药作训练集,薄荷、苍术组为测试集建立模型,模型的训练能力和测试能力最好[R2X(Cum)=0.388,R2Y(Cum)=0.488,Q2(Cum)=0.373],综合准确率为94.4%,巴西人参方的预测结果属于温性的概率为100%,党参方结果属于温性的概率为77.8%,同时预测巴西人参属于平性的概率为77.8%,对比党参的药性偏温。3在正离子模式条件下,温凉药对大鼠体内缬氨酸、色氨酸-谷氨酰胺等24个Marker的调节趋势基本一致,巴西人参方调节趋势更偏温性。将24个Marker的HMDB ID号导入Metabo Analyst数据库进行通路分析,表明巴西人参方主要参与调节细胞色素P450对异生素的代谢通路。结论:在生化效应指标判别结果中显示巴西人参方属热性的概率为66.7%,党参方属热性的概率为88.9%,预测巴西人参属平性的概率为59.3%;后基于代谢组学建立的温凉判别模型,表明巴西人参方和党参方均属温性,因党参为平性药,结合巴西人参方的温性概率大于党参方的温性,推测巴西人参为平性偏温;温凉药对酪氨酸、缬氨酸、色氨酸-谷氨酰胺等24个生物标记物的调节趋势基本一致,巴西人参方偏向温药的调控方向,且主要参与调节细胞色素P450对异生素的代谢通路。

关键词：中药四气复方配伍巴西人参生化判别代谢组学判别

日粮中添加巴西人参茎叶青贮对广西麻鸡生产性能及脾脏转录组的影响

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日粮中添加巴西人参茎叶青贮对广西麻鸡生产性能及脾脏转录组的影...

作者：崔博惟广西大学

学位级别：硕士

巴西人参（Pfaffia paniculata）是一种药用植物,富含皂苷、甾体、三萜类等化合物,具有降低胆固醇、抗炎症、抗肿瘤等功效。其茎叶可用于开发青贮饲料,在畜牧养殖中具有一定的药用价值与饲料替代作用。广西麻鸡肉质鲜美、营养价值高,是... 详细信息

巴西人参（Pfaffia paniculata）是一种药用植物,富含皂苷、甾体、三萜类等化合物,具有降低胆固醇、抗炎症、抗肿瘤等功效。其茎叶可用于开发青贮饲料,在畜牧养殖中具有一定的药用价值与饲料替代作用。广西麻鸡肉质鲜美、营养价值高,是广西农村地区重要的地方肉鸡养殖品种。饲喂高品质、功能性的巴西人参青贮饲料可减少饲料添加剂的使用,将有助于提升广西麻鸡品质,不断满足消费者对绿色、高品质肉鸡的要求。本研究以开发饲料替代物、提高肉鸡生产性能及抗病力为出发点,探究巴西人参茎叶青贮的最佳发酵时间及其对广西麻鸡生产性能和脾脏转录组的影响。获得如下结果:1、巴西人参茎叶青贮的成功制备将新鲜巴西人参茎叶、玉米、豆粕充分混匀进行密封发酵,于发酵的0d、10d、30d、45d、60d、90d进行采样,测定巴西人参茎叶青贮营养成分及发酵指标,探究不同发酵时间对其青贮品质的影响。与青贮0d相比,结果显示,密封发酵30～90d,所制备青贮符合优良青贮的感官标准:颜色较深,味道清香并伴有酒酸味,水分充足且茎叶组织仍保持原状,无腐败现象。密封发酵10～90d,青贮中粗蛋白、粗脂肪含量显著升高,分别以45d、90d含量最高（P＜0.05）;中性、酸性洗涤纤维和粗灰分含量显著降低（P＜0.05）;干物质、钙、磷含量无显著变化（P＞0.05）。青贮p H值显著降低（P＜0.05）,在30d后逐渐稳定;乳酸、乙酸的含量显著上升（P＜0.05）,并在45d后趋于稳定;而丁酸、异丁酸、异戊酸含量在10～90d内无显著变化（P＞0.05）。2、巴西人参茎叶青贮可显著提升广西麻鸡的生产性能、肌肉营养及免疫器官指数将200只80日龄广西麻鸡随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,试验1、2、3组分别饲喂含巴西人参茎叶青贮30%、40%、50%的试验日粮,预试期7d,试验期90d;测定广西麻鸡生产性能、肌肉营养、血清生化、免疫器官指数等相关指标。与对照组相比,结果显示:（1）生产性能:试验2组生长性能显著提升（P＜0.05）;试验1组屠宰率、腹脂率显著升高（P＜0.05）。（2）肌肉营养:试验3组胸肌水分显著升高（P＜0.05）;粗灰分含量显著降低（P＜0.05）;腿肌营养成分无显著差异（P＞0.05）。各试验组肌肉中必需氨基酸和味觉氨基酸含量显著升高（P＜0.05）。（3）血清生化和免疫器官指数:日粮中添加巴西人参茎叶青贮可显著提高血清中AST、ALT、ALB、ALP、HDL-C水平（P＜0.05）,显著降低血清中TC含量（P＜0.05）。试验1组胸腺、脾脏指数显著升高（P＜0.05）,试验3组法氏囊指数显著升高（P＜0.05）。3、日粮添加巴西人参茎叶青贮可引起脾脏免疫基因的差异表达为探究巴西人参茎叶青贮提升广西麻鸡生产性能的分子调控机制,从对照组和试验1组中各随机选取三只鸡的脾脏,应用RNA-Seq技术、GO和KEGG富集分析研究脾脏转录组变化情况。结果表明,对照组与试验1组比较,共145个基因出现差异表达（51个基因显著上调,94个基因显著下调）。这些差异基因主要涉及细胞发育与凋亡过程、toll样受体信号通路的正调控、免疫系统过程的调节、T细胞迁移等生物学过程,参与到黑素原生成、细胞粘附分子、细胞因子受体相互作用、吞噬体等信号通路。推测巴西人参茎叶青贮对广西麻鸡免疫功能及脂代谢的调控可能与LDHA、HPSE、CCR8、MR1、TGFBR2、Wnt7a、FZD4、GEM、ANO6、TMTC1等差异基因密切相关。综上,巴西人参茎叶青贮在发酵30～90d可达到优良青贮标准,以45d品质最佳。在日粮中添加巴西人参茎叶青贮可显著提升广西麻鸡的生产性能、肌肉品质和免疫器官指数。通过转录组测序技术推测巴西人参茎叶青贮对机体的调控作用可能与LDHA、HPSE、CCR8、MR1、TGFBR2、Wnt7a、FZD4、GEM、ANO6、TMTC1等基因密切相关,为进一步研究巴西人参茎叶青贮饲喂广西麻鸡效果的具体分子机制奠定基础。

关键词：巴西人参青贮广西麻鸡生产性能肌肉营养成分免疫功能转录组

基于粉体学性质与QbD理念对巴西人参覆盆子健康产品的开发研究

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基于粉体学性质与QbD理念对巴西人参覆盆子健康产品的开发研究

作者：高健江西中医药大学

学位级别：硕士

目的结合网络药理学与分子对接技术,对巴西人参-覆盆子的潜在活性成分与核心靶点进行探究,为后期课题研究提供基础与研究方向;通过腺嘌呤对大鼠造模,初步探究巴西人参-覆盆子在少弱精子症上的治疗效果,以验证网络药理学结果;通过对热风... 详细信息

目的结合网络药理学与分子对接技术,对巴西人参-覆盆子的潜在活性成分与核心靶点进行探究,为后期课题研究提供基础与研究方向;通过腺嘌呤对大鼠造模,初步探究巴西人参-覆盆子在少弱精子症上的治疗效果,以验证网络药理学结果;通过对热风干燥、真空干燥、喷雾干燥与冷冻干燥的粉体进行多指标测定及物理指纹图谱评价以讨论不同干燥方法的差异,为后期固体制剂的研究提供有价值的参考;基于QbD概念研制巴西人参-覆盆子泡腾片,在对产品质量目标、关键质量属性与关键物料属性确定的理论基础上对泡腾片的处方进行优化设计,在达到崩解时限、发泡量等药典质量要求的同时获得最佳味觉感受,以达到泡腾片产品设计的质量目标。方法1.巴西人参-覆盆子用于治疗少弱精子症的网络药理学研究。运用TCMSP、TCMID及文献检索等方法获取巴西人参及覆盆子的活性成分,在Pub Chem数据库及中国天然产物化学成分库中确认化合物结构并建立成分数据库。在Swiss ADME数据库中以同时符合Lipinski五规则及Veber规则为条件进行筛选。通过Swiss Target Prediction对活性成分进行靶点预测及筛选。在Gene Cards、Pharm Gkb、OMIM、Uni Prot数据库中收集与少弱精子症相关的疾病靶点。通过构建药材-成分-靶点网络的构建预测药物对发挥治疗少弱精子症作用的关键靶点与活性成分。针对核心靶点进行GO BP、GO CC、GO MF分析,并利用富集结果推测巴西人参-覆盆子防治少弱精子症的作用机制。2.巴西人参-覆盆子治疗少弱精子症模型大鼠的药效研究。将56只雄性大鼠随机分为7组。分别为正常组、模型组、阳性对照组、巴西人参低剂量组、巴西人参高剂量组、巴西人参-覆盆子低剂量组、巴西人参-覆盆子高剂量组,每组8只。除正常组外,其余各组每日均给予250mg·kg腺嘌呤,连续灌胃4周。自第5周起,正常组、模型组均给予等量纯水,阳性对照组给予左卡尼汀100mg·kg,巴西人参低剂量组给予1000mg·kg,巴西人参高剂量组给予1500mg·kg,巴西人参-覆盆子低剂量组给予巴西人参1000mg·kg、覆盆子450mg·kg,巴西人参-覆盆子高剂量组给予巴西人参1000mg·kg、覆盆子860mg·kg。每日灌胃1次,连续给药4周后取材,对受试大鼠的精子数量、精子活力、SOD活力及MDA含量进行检测,对大鼠睾丸的组织形态及附睾内精子的形态进行染色观察。3.不同干燥方式巴西人参-覆盆子提取物粉体学性质比较。采用真空干燥、喷雾干燥、热风干燥、冷冻干燥方法制备巴西人参-覆盆子粉末样品,通过中值粒径、粒径分布宽度、粒径分布范围表征均一性;通过松装密度、振实密度表征堆积性;通过颗粒间孔隙率、卡尔指数表征可压性;通过休止角、豪纳斯比表征流动性;通过含水量、吸湿率表征稳定性。根据上述二级指标构建巴西人参-覆盆子提取物粉末的物理指纹图谱,并通过相似度分析、聚类分析及主成分分析比较各干燥方式间的差异及产生差异的主要因素。4.基于QbD概念巴西人参-覆盆子泡腾片的制备。依次确定产品质量目标、关键质量属性及关键物料属性;以崩解时限、发泡量为重点考察因素,分别对巴西人参-覆盆子泡腾片的酸碱比、填充剂、甜味剂、润滑剂及主药添加量分别进行单因素考察;根据单因素考察结果进行Box-Behnken响应面试验优化,通过二阶回归模型方差分析得到最佳处方,并对该处方进行感官评价验证以及泡腾片质量检查。结果1.共获得类药性成分32个,核心靶点主要包括CDK1、CCNA2、CCNB1、CCNB2、CDC20、CDK2、CCNA1、CDC25C、BUB1、CCNE1。主要富集于Cell cycle、p53 signaling pathway、Cellular senescence、AMPK signaling pathway、Fox O signaling pathway等通路,涉及睾丸组织细胞周期调控及类固醇类激素代谢等生物过程。2.少弱精子症模型大鼠给药4周后,阳性对照组、巴西人参低剂量组、巴西人参高剂量组、巴西人参-覆盆子低剂量组、巴西人参-覆盆子高剂量组均对大鼠的睾丸组织产生一定程度的修复作用,睾丸生精小管相对饱满,上皮结构尚完整,但各级生精细胞略为紊乱,相较于模型组管腔内可见较多的精子细胞。巴西人参及其与覆盆子配伍后可提高大鼠的精子浓度及活力,适当提升SOD活力,降低睾丸中MDA含量,并减少腺嘌呤对于睾丸部位的损害,以药效实验验证了网络药理学的研究结果。3.热风干燥粉、真空干燥粉、喷雾干燥粉、冷冻干燥粉与对照图谱的相关性系数分别为0.516、0.965、0.697、0.717。真空干燥粉与冷冻干燥粉的粉体学性质最为相似,但冷冻干燥粉由于含水量更高,干燥用时更长。热风干燥粉的含水量最少,较易出现糊化现象。喷雾干燥粉流动性最好,但堆积性与可压性较差。4.单因素试验结果为酸碱比在1.3:1至1.5:1范围

关键词：巴西人参少弱精子症网络药理学分子对接片剂 QbD