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濒危植物巴东木莲花粉母细胞减数分裂观察

植物分类学报 2005年第6期43卷 526-532页

作者：何子灿李晓东李建强中国科学院武汉植物园武汉430074

对巴东木莲Manglietiapatungensis及其近缘种乳源木莲***的花粉母细胞减数分裂过程的基本特征进行了比较研究。乳源木莲与巴东木莲的染色体数目和核型相同,但不经任何人为因素诱导,它们之间在减数分裂过程中的染色体行为上有明显差异。... 详细信息

对巴东木莲Manglietiapatungensis及其近缘种乳源木莲***的花粉母细胞减数分裂过程的基本特征进行了比较研究。乳源木莲与巴东木莲的染色体数目和核型相同,但不经任何人为因素诱导,它们之间在减数分裂过程中的染色体行为上有明显差异。(1)巴东木莲减数分裂中期I构型为0.30IV+18.33II+0.15I,与乳源木莲构型19II不同,巴东木莲可能存在同臂内倒位杂合子,染色体结构存在一定的杂合性。(2)后期I和后期II染色体行为异常现象发生频率明显不同。以后期II为例,乳源木莲减数分裂相中有迟滞染色体的细胞占8.8%,迟滞染色体不超过2个;巴东木莲有迟滞染色体等异常现象的细胞占29.2%,迟滞染色体最高达11个,还出现染色体碎裂成断片现象。巴东木莲减数分裂过程中染色体组表现出染色体结构杂合变异和迟滞染色体与染色体的断裂频率很高的异常现象在一定程度上可能影响了雄配子体的发育。

关键词：巴东木莲乳源木莲濒危物种减数分裂

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巴东木莲种子贮藏和萌发过程中同工酶分析

西北植物学报 2011年第7期31卷 1453-1457页

作者：张德春张博刘曦王希群陈发菊三峡大学生物技术研究中心湖北宜昌443002 国家林业局林产工业规划设计院北京100010

以贮藏和萌发过程中的巴东木莲种子为材料,采用非变性聚丙烯凝胶电泳技术分析其种子中淀粉酶(AMY)、酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)同工酶酶谱,并测定其酸性磷酸酶(ACP)和POD的活性,以探讨巴东木莲种子休眠和萌发过... 详细信息

以贮藏和萌发过程中的巴东木莲种子为材料,采用非变性聚丙烯凝胶电泳技术分析其种子中淀粉酶(AMY)、酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)同工酶酶谱,并测定其酸性磷酸酶(ACP)和POD的活性,以探讨巴东木莲种子休眠和萌发过程中的生理生化变化特征.结果表明:巴东木莲种子在贮藏和萌发过程中,EST和SOD同工酶在萌发过程中表达增强,并不断有新酶的合成;AMY同工酶在萌发初期表达强度高且酶带数较多,到后期表达水平较低,其可能启动并控制种子萌发快慢;POD同工酶在萌发后期酶的活性增强,且酶的种类也增加,与EST和AMY同工酶的变化相适应.巴东木莲种子ACP和POD活性在储藏条件下以干藏种子最低,在萌发过程中总体上随发育进程呈升高的趋势,与同工酶电泳的结果吻合.因此,EST、AMY、SOD和POD同工酶酶谱变化及表达强弱可作为巴东木莲种子萌发各阶段转变的重要标志.

关键词：巴东木莲种子同工酶非变性聚丙烯凝胶电泳

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巴东木莲核基因组微卫星位点分离的初步研究

武汉植物学研究 2010年第1期28卷 76-80页

作者：邢冲姚小洪黄宏文中国科学院武汉植物园武汉430074 中国科学院研究生院北京100049 中国科学院植物种质创新与特色农业重点实验室武汉430074

FIASCO是一种高效构建微卫星富集文库的方法。本研究采用FIASCO(fast isolation by AFLP sequences containing repeats)方法成功构建了巴东木莲(Manglietia patungensis)微卫星AC富集文库。我们对AC富集文库中的119个阳性克隆进行测序... 详细信息

FIASCO是一种高效构建微卫星富集文库的方法。本研究采用FIASCO(fast isolation by AFLP sequences containing repeats)方法成功构建了巴东木莲(Manglietia patungensis)微卫星AC富集文库。我们对AC富集文库中的119个阳性克隆进行测序,其中57个含有微卫星序列。设计并合成了其中40对微卫星引物进行PCR扩增检测,有6对引物扩增出目的片段,然而没有位点都呈现多态性。最后对巴东木莲微卫星位点的分离效率低下的原因进行了初步探讨。

关键词：巴东木莲微卫星标记富集文库 FIASCO

巴东木莲DNA的提取及SRAP-PCR反应体系的正交优化

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湖北农业科学 2008年第9期47卷 980-984页

作者：万玉华余璐璐李晓玲陈发菊梁宏伟何正权三峡大学化学与生命科学学院生物技术研究中心/天然产物研究与利用湖北省重点实验室湖北宜昌443002

研究确定了提取巴东木莲基因组DNA的方法,采用正交试验设计法对影响SRAP-PCR反应的引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量、Mg2+和dNTPs浓度及PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了比较、优化,同时对DNA模板浓度进行了筛选。结果表明,Mg2+... 详细信息

研究确定了提取巴东木莲基因组DNA的方法,采用正交试验设计法对影响SRAP-PCR反应的引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量、Mg2+和dNTPs浓度及PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了比较、优化,同时对DNA模板浓度进行了筛选。结果表明,Mg2+、dNTPs、Taq酶及引物的不同水平均对PCR反应结果有显著的影响。建立了巴东木莲20μL SRAP-PCR的反应体系为1×buffer、Mg2+浓度为2.0 mmol·L-1、dNTPs浓度为0.25 mmol·L-1、引物浓度为0.45μmol·L-1、Taq酶为0.5 U和模板DNA 40ng。适宜的扩增程序为94℃预变性1 min,94℃变性1 min,33℃复性1 min,72℃延伸1 min,10个循环;94℃变性1 min,55℃复性1 min,72℃延伸1 min,30个循环;最后72℃延伸5min。试验表明,该体系重复性好、稳定性强。

关键词：巴东木莲 DNA提取 SRAP-PCR反应体系正交设计优化

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巴东木莲雌蕊柱头蛋白的提取与双向电泳分离

江西农业大学学报 2009年第3期31卷 393-396页

作者：刘国勇梁宏伟陈发菊三峡大学化学与生命科学学院湖北宜昌443002 三峡大学生物技术研究中心湖北宜昌443002

优化巴东木莲雌蕊柱头蛋白的提取方法,并用双向电泳方法分离提取蛋白,得到分辨率高和重复性较好的双向电泳图谱。在考马斯亮蓝R-250染色胶上,开花前柱头蛋白有858个蛋白点,开花后的聚合雌蕊柱头有865个蛋白点。有1个蛋白点只在开花前柱... 详细信息

优化巴东木莲雌蕊柱头蛋白的提取方法,并用双向电泳方法分离提取蛋白,得到分辨率高和重复性较好的双向电泳图谱。在考马斯亮蓝R-250染色胶上,开花前柱头蛋白有858个蛋白点,开花后的聚合雌蕊柱头有865个蛋白点。有1个蛋白点只在开花前柱头蛋白中表达,3个蛋白点只在开花后的聚合雌蕊柱头中表达。为分析花粉和柱头间的识别奠定基础。

关键词：巴东木莲蛋白提取双向电泳

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巴东木莲实生苗培育及光合生理特征

福建林业科技 2013年第2期40卷 56-59,69页

作者：宗卫费永俊喻慧长江大学园艺园林学院湖北荆州434025

开展珍稀树种巴东木莲播种育苗试验,探讨不同移栽季节对幼苗各项形态指标的影响,及不同光照条件对其叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)、气孔导度(Gs)的影响。结果表明,巴东木莲的种子在自然条件下发芽率低,出苗整... 详细信息

开展珍稀树种巴东木莲播种育苗试验,探讨不同移栽季节对幼苗各项形态指标的影响,及不同光照条件对其叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)、气孔导度(Gs)的影响。结果表明,巴东木莲的种子在自然条件下发芽率低,出苗整齐度良好,幼苗易得立枯病和根腐病;冬季移栽苗的各项形态指标(株高、地茎、冠幅)及成活率均优于夏季移栽苗;光照强度对1年生巴东木莲叶片的各项光合生理指标均有明显的影响。

关键词：巴东木莲播种育苗幼苗移栽形态指标光合生理特征

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巴东木莲简易扦插繁殖技术研究

林业科技 1998年第2期23卷 10-14页

作者：黄运平张安民谭鉴锡湖北民族学院湖北利川星斗山自然保护区

用嫩枝扦插繁殖巴东木莲是高生根率可达８３．３％，不同的生根促进剂对其作用有差异，枝条生根的能力随采枝母树的年龄增大而下降，生根形式也由皮部生根转向愈伤组织生根类型。

关键词：林业巴东木莲扦插无性繁殖

巴东木莲AGL6同源基因参与调控花发育的分子机制

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巴东木莲AGL6同源基因参与调控花发育的分子机制

作者：李来运长江大学

学位级别：硕士

巴东木莲(Manglietia patungensis Hu)是木兰科(Magnoliaceae)木莲属(Manglietia)常绿乔木,我国Ⅱ级保护频危植物,其树姿优美,花大芬芳,观赏价值高,园林用途广,也是分布最北缘的木莲属植物,对研究木兰科植物的分类演化有重要的意义。被... 详细信息

巴东木莲(Manglietia patungensis Hu)是木兰科(Magnoliaceae)木莲属(Manglietia)常绿乔木,我国Ⅱ级保护频危植物,其树姿优美,花大芬芳,观赏价值高,园林用途广,也是分布最北缘的木莲属植物,对研究木兰科植物的分类演化有重要的意义。被子植物花发育过程中,AGL6(AGAMOUS-like6,AGL6)同源基因主要参与成花转变、控制花被片发育和调控腋芽发生等功能。系统研究AGL6同源基因参与调控巴东木莲花发育的作用与功能,不仅有助于解析巴东木莲花被片发育与形态分化调控的分子基础,同时为理解木兰科植物种属间花型演变与发育演化积累资料,并为观赏花木花型改良与种质创新提供新的基因资源。主要的结果如下:(1)巴东木莲AGL6同源基因的克隆与结构分析同源克隆的方法从巴东木莲花芽中分离出3个与花发育调控相关的MADS-box基因,序列同源比对与分子发生分析显示:3者属于AGL6同源基因,命名为MapaAGL6A、MapaAGL6A和MapaAGL6B,GenBank登录号分别为KX926430、KX626431和KX626432。进一步分析发现,AGL6型基因在巴东木莲中发生了1次小尺度的基因重复,产生了MapaAGL6A和MapaAGL6B两种类型,2者均编码1个长度为242个氨基酸的MIKCc型MADS-box转录因子,但相似性仅为81.40%,其K区和C末端转录激活区序列差异较大。同时,MapaAGL6A基因的pre-mRNA在加工过程中发生可变剪接(alternative splicing,AS)产生2个剪接异构体,MapaAGL6A和MapaAGL6A。MapaAGL6A基因是相对MapaAGL6A基因在加工过程中通过1段57 bp的外显子遗漏和1段51 bp的内含子滞留产生,编码1个240个氨基酸的MADS-box转录因子;其中,57 bp的外显子遗漏导致MADS-box结构域和I区分别缺失18个和1个氨基酸残基;而51 bp的内含子滞留导致C转录激活区增加17个氨基酸残基,致使C端结构域的AGL motif I尾端酪氨酸(Y)位点变成半胱氨酸(C)。(2)巴东木莲MapaAGL6A、MapaAGL6A和MapaAGL6B基因表达模式分析比较MapaAGL6A、MapaAGL6A和MapaAGL6B基因在巴东木莲不同花器官和花芽不同发育时期的表达模式发现:MapaAGL6A、MapaAGL6A和MapaAGL6B主要在巴东木莲花被片中表达,在幼叶中不表达,其在各轮被片间的表达量存在明显差异。3个基因在不同瓣数巴东木莲花器官中的表达模式也呈现一定的差别:在9瓣型植株花芽分化早期,3个基因主要集中在外轮萼片状的被片中表达,但在花芽发育后期至开花前,其表达主要集中在内2轮花瓣状的被片中,且3者在各轮花器官中表达的变化趋势一致;在12瓣型植株花发育早期,MapaAGL6A基因在内轮花瓣状被片中的表达量显著高于其在外2轮花被片中的表达量,而在花芽分化晚期的,其在3轮花被片中的表达量无明显差异;在花芽分化晚期,MapaAGL6B基因在花萼状被片中的表达量显著高于其在内两轮花被片中的表达量,而在花芽分化早期,其在3轮花被片中的表达量无明显差异。在2种瓣型巴东木莲花芽发育过程中,MapaAGL6A与MapaAGL6A基因的表达区域一致,但MapaAGL6A的表达量极显著高于MapaAGL6A。(3)巴东木莲MapaAGL6A-1、MapaAGL6A-2和MapaAGL6B基因功能分析分别观察MapaAGL6A、MapaAGL6A和MapaAGL6B基因在拟南芥花被(花萼和花瓣)缺失突变体ap1-10(CS6230;Landsberg型)中异源表达后对花器官恢复表型发现:在35S::MapaAGL6A的T0代和T1代转基因拟南芥ap1-10突变体中,萼片和花瓣呈现不同程度的恢复,同时未见苞片及苞片顶端柱头状结构的产生,表明MapaAGL6A参与调控花被片(花萼和花瓣)发育的同时,能抑制拟南芥中C类基因在外两轮花器官中的表达,具备A功能活性;而35S::MapaAGL6A转基因T0代拟南芥仅部分植株花丝顶端着生萼片状结构,该性状也能遗传到T1代植株,且极少数的后代中出现花瓣状的结构,但苞片顶端柱头状结构未消失,说明MapaAGL6A具备参与调控萼片化被片发育的功能,但不具备抑制C类基因在外两轮花器官中的表达;而35S::MapaAGL6B转基因拟南芥T0代和T1代植株中均出现花丝顶端着生花瓣状结构,呈现一定程度的器官同源转化现象,说明其相对MapaAGL6A的两个异构体,功能出现明显分化。

关键词：巴东木莲花发育 AGL6同源基因花被片形态建成

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巴东木莲等位酶的遗传多样性

武汉植物学研究 2003年第6期21卷 544-546页

作者：何敬胜黄宏文中国科学院武汉植物研究所武汉植物园武汉430074

采用超薄平板聚丙烯酰胺等电聚焦技术对中国特有濒危植物巴东木莲(ManglietiapatungensisHu)的遗传多样性进行了初步的分析。通过对8个酶系统18个酶位点的检测,结果表明,巴东木莲具有较高的遗传多样性。种水平多态位点的百分数(Ps)为66... 详细信息

采用超薄平板聚丙烯酰胺等电聚焦技术对中国特有濒危植物巴东木莲(ManglietiapatungensisHu)的遗传多样性进行了初步的分析。通过对8个酶系统18个酶位点的检测,结果表明,巴东木莲具有较高的遗传多样性。种水平多态位点的百分数(Ps)为66.7,平均预期杂合度(He)为0.178。高于多年生木本植物的平均水平。居群间分化系数为0.107,说明巴东木莲的遗传变异的89.3%来自于居群内。

关键词：巴东木莲等位酶遗传多样性电泳木兰科