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肿瘤相关巨噬细胞过表达巯基氧化酶1对人SMMC-7721肝癌细胞功能影...

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作者：孔令希广西医科大学

学位级别：硕士

目的:肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,病死率高,研究肝癌相关的发病机制可以帮助提高临床诊疗效果,并能提升患者的生活质量。肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)这个概念的提出为研究肿瘤的发病... 详细信息

目的:肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,病死率高,研究肝癌相关的发病机制可以帮助提高临床诊疗效果,并能提升患者的生活质量。肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)这个概念的提出为研究肿瘤的发病机制提供了新思路,近几年已成为了癌症研究的热点。本课题拟通过检测SMMC-7721肝癌细胞的细胞功能上的改变,明确巯基氧化酶1(Sulfhydryl oxidase 1,QSOX1)过表达对肝癌细胞功能的影响,探索肝癌微环境通过外分泌蛋白影响肝癌转移、复发的具体机制。方法:通过载有QSOX1过表达基因的慢病毒感染人急性单核白血病细胞THP-1,筛选出稳定过表达QSOX1的THP-1细胞,将其作为过表达组(OE组);同时,将空病毒转染的THP-1细胞作为阴性对照组(NC组)和未做任何处理的THP-1细胞作为空白对照组(BC组)。使用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)将THP-1细胞诱导成未分化巨噬细胞(undifferentiated macrophage,UM0),用无血清培养基培养UM0后,收集UM0的培养液,去除细胞后即为条件培养液。实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测QSOX1的RNA相对表达量和蛋白表达量。用三组巨噬细胞的条件培养液分别培养SMMC-7721肝癌细胞后,CCK-8增殖实验检测肝癌细胞增殖能力的改变,克隆形成实验检测肝癌细胞的克隆形成能力,Transwell小室实验检测肝癌细胞的侵袭和转移能力,划痕实验检测条件培养基中的QSOX1对SMMC-7721肝癌细胞迁移功能的影响。用SPSS21.0进行统计数据的分析。结果:RT-PCR结果显示QSOX1过表达基因成功在THP-1细胞中表达;WB检测发现QSOX1有QSOX1-S和QSOX1-L两种蛋白亚型,且OE组蛋白表达量明显高于阴性对照组和空白对照组。通过PMA成功将THP-1细胞诱导成巨噬细胞UM0。克隆形成实验发现,OE组肝癌细胞形成的克隆数平均为82.67±9.07个,高于BC组的48.33±7.50个和NC组的44.67±9.29个,差异有统计学意义(P1过表达组肝癌细胞增殖能力在72h时间点开始高于其他两组(P12h和24h肝癌细胞的迁移面积均值分别为0.613±0.076mm和1.477±0.160 mm,均明显高于其他两组在此时间点的迁移面积,差异有统计学意义(P157±16.66个,BC组为105±14.68个,NC组为116±11.98个,过表达组细胞转移数明显高于其它两组,差异有统计学意义(P1);Transwell侵袭实验,三组肝癌细胞的细胞侵袭数并未出现明显差别(P>0.05)。结论:肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞UM0可通过PMA诱导THP-1细胞获得。QSOX1蛋白有两种亚型,分别为QSOX1-S(67Kd)和QSOX1-L(83Kd)。QSOX1蛋白过表达可增加SMMC-7721肝癌细胞的增殖和迁移能力,QSOX1对肝癌的发生发展有调控作用,同时,本实验也为研究分泌蛋白质组在肝癌中所起的作用提供了实验依据。

关键词：巯基氧化酶1 肿瘤相关巨噬细胞 SMMC-7721细胞肝细胞癌肿瘤微环境

QSOX1、CXCL10、β2GPI 在乙型肝炎病毒相关性肝病患者中的表达及相关性研究

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中国感染与化疗杂志 2021年第5期21卷 588-592页

作者：李曾谢青李金强长沙市第一医院感染科长沙410000

目的研究巯基氧化酶1(QSOX1)、趋化因子配体10(CXCL10)、β2糖蛋白I(β2GPI)在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病患者中的表达及相关性。方法选取2019年3月—2020年3月在长沙市第一医院接受治疗的120例HBV相关性肝病患者,其中40例慢性乙型肝... 详细信息

目的研究巯基氧化酶1(QSOX1)、趋化因子配体10(CXCL10)、β2糖蛋白I(β2GPI)在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病患者中的表达及相关性。方法选取2019年3月—2020年3月在长沙市第一医院接受治疗的120例HBV相关性肝病患者,其中40例慢性乙型肝炎(乙肝)为慢性乙肝组,40例HBV相关肝硬化患者为肝硬化组,40例HBV相关性肝癌患者为肝癌组,40例非HBV感染肝病患者为非HBV肝病组,选择40例同期无HBV感染的健康体检志愿者为正常组。检测所有入选者丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、QSOX1、CXCL10、β2GPI。结果失代偿期肝硬化患者QSOX1、CXCL10、β2GPI、ALT、TBIL水平分别高于代偿期肝硬化患者、正常组和非HBV肝病组(P<0.05)。随着慢性乙肝患者严重程度增加,QSOX1、CXCL10、β2GPI、TBIL水平逐渐升高(P<0.05)。肝癌、肝硬化、慢性乙肝组QSOX1、CXCL10、β2GPI、ALT水平均高于正常组和非HBV肝病组;其中肝癌患者QSOX1、CXCL10、β2GPI表达最高,ALT水平降低(P<0.05)。QSOX1、CXCL10、β2GPI与肝功能指标(ALT、TBIL)呈正相关。结论QSOX1、CXCL10、β2GPI可作为反映HBV相关性肝病患者肝脏炎性损伤程度的重要指标,与患者肝功能损伤有一定的相关性,可能参与HBV相关性肝病的发生和发展。

关键词：巯基氧化酶1 趋化因子配体10 β2糖蛋白I 乙型肝炎病毒

血清QSOX1、GSN、DKK1蛋白联合检测对原发性肝癌的诊断及预后价值

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血清QSOX1、GSN、DKK1蛋白联合检测对原发性肝癌的诊断及预后价值

作者：谭顺顺广西医科大学

学位级别：硕士

研究目的:通过对原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)组、其它肝病组、正常对照组的血清巯基氧化酶1(quiescin sulfhydl oxidase-1,QSOX1)、凝溶胶蛋白(gelsolin,GSN)、DKK1(Dickkopf1)、甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)表达水平的联合检测,探索QSOX1、GSN、DKK1对PLC的诊断及预后价值。研究方法:以本院60例新发PLC患者、60例其它肝病患者及匹配60例健康体检者分别组成PLC组、其它肝病组、正常对照组。应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)定量检测法测定各组血清中QSOX1、GSN、DKK1的表达水平;应用电化学发光法(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)定量检测各组血清中AFP的表达水平。研究结果:1、血清QSOX1的表达水平在正常对照组、其它肝病组、PLC组分别为4.73(3.82.54)pg/ml、29.63(6.472.08)pg/ml、90.30(33.3030.66)pg/ml;血清GSN的表达水平在正常对照组、其它肝病组、PLC组分别为7.65(5.94.56)ng/ml、60.34(27.5020.66)ng/ml、113.31(55.2051.97)ng/ml;血清DKK1的表达水平在正常对照组、其它肝病组、PLC组分别为195.81(39.2139.19)pg/ml、369.81(248.7670.99)pg/ml、941.63(293.31521.65)pg/ml。PLC组血清QSOX1、GSN、DKK1的表达水平均明显高于其它肝病组及正常对照组,差异均有统计学意义(P均0.05)。3、建立QSOX1、GSN、DKK1的Logistic回归方程来联合诊断PLC的ROC曲线下面积为0.935,灵敏度、特异度及Youden指数分别为83.3%、92.5%、75.8%。其Youden指数高于QSOX1、GSN、DKK1、AFP单独检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。4、本研究通过随访60例PLC患者或家属,发现1年内死亡的PLC患者与存活患者的QSOX1、GSN、DKK1的表达水平,差异均无统计学意义。Cox多因素回归分析PLC预后的独立危险因素显示BCLC分期、CA125、治疗方式的HR(95%CI)分别为3.748(1.417-9.913)、2.571(1.129-5.856),3(1.068-8.428)。结论:1、血清QSOX1、GSN、DKK1均在PLC组中高表达,提示可能与PLC的发生密切相关。2、QSOX1、GSN、DKK1对PLC的诊断都有一定的参考价值。3、应用Binary Logistic回归模型建立QSOX1、GSN、DKK1拟合最佳回归方程可能提高PLC的诊断效率,对PLC的诊断有重要参考价值。4、尚不能认为QSOX1、GSN、DKK1的表达水平与PLC患者的预后相关。而PLC患者的BCLC分期、CA125表达水平、治疗方式可能为PLC预后的独立危险因素。

关键词：原发性肝癌肿瘤标志物巯基氧化酶1 凝溶胶蛋白 Dickkopf1

血清QSOX1水平及其基因多态性与乙肝病毒性肝癌的遗传易感性研究

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临床和实验医学杂志 2021年第1期20卷 12-15页

作者：欧世梅陈学兵张利沙德阳市人民医院耳鼻喉头颈外科四川德阳618000 德阳市人民医院感染科四川德阳618000 德阳市第二人民医院检验科四川德阳618000

目的探讨血清巯基氧化酶1(QSOX1)水平及其基因多态性与乙肝病毒性肝癌的遗传易感性的相关性。方法本研究采用病例-对照研究方法,回顾性收集德阳市人民医院收治的200例乙肝病毒性肝癌患者(HCC)及200例种族、年龄、性别匹配的对照组为研... 详细信息

目的探讨血清巯基氧化酶1(QSOX1)水平及其基因多态性与乙肝病毒性肝癌的遗传易感性的相关性。方法本研究采用病例-对照研究方法,回顾性收集德阳市人民医院收治的200例乙肝病毒性肝癌患者(HCC)及200例种族、年龄、性别匹配的对照组为研究对象。首先利用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测两组人群血清中QSOX1的含量;利用构象差异凝胶电泳的方法将QSOX1基因启动子区的rs11589519和rs7597位点的单核苷酸多态性进行分型;利用卡方检验判断QSOX1基因型分布频率是否符合遗传平衡定律;同时分析QSOX1基因启动子区不同位点的基因多态性和等位基因型与HCC遗传易感性的相关性。分析QSOX1基因启动子区的rs11589519和rs7597位点基因多态性与HCC患者肿瘤分期的相关性。结果 HCC组血清中QSOX1的表达含量(3.48±1.82)明显高于对照组(1.91±0.78),差异有统计学意义(P 0.05)。HCC组QSOXl位点rs11589519基因型TT频率高于对照组(38.0%vs.25.0%),rs7597基因型CT、TT频率高于对照组(48.0%vs.16.0、32.0%vs.10.0%),差异有统计学意义(P <0.05)。HCC组QSOXl基因rs11589519和rs75972位点等位基因型T分布频率均高于对照组(65.0%vs.51.0%、56.0%vs.18.0%),差异有统计学意义(P <0.05)。QSOX1基因启动子区的rs11589519位点AA型HCC患者IIIa+IIIb比率明显高于TT型患者(P <0.05)。QSOX1基因启动子区的rs7597位点TT型HCC患者Ⅲa+Ⅲb比率明显高于CC型患者,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 QSOX1基因启动子区的rs11589519和rs7597位点多态性与HCC遗传易感性存在相关性。

关键词：乙肝病毒性肝癌巯基氧化酶1 多态性遗传易感性

血清QSOX-1、GSN、AFP联合检测对原发性肝癌的诊断价值

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山东医药 2018年第8期58卷 54-56页

作者：宋晓婷国娇谭顺顺黄天壬何雨张春燕广西医科大学附属肿瘤医院南宁530021 柳州市人民医院广西医科大学第一附属医院

目的探讨血清巯基氧化酶1(QSOX-1)、凝溶胶蛋白(GSN)、甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选择原发性肝癌患者60例(肝癌组),乙肝、肝硬化、肝脓肿等其他肝病患者60例(肝病组),健康志愿者60例(对照组),采用ELISA法检测... 详细信息

目的探讨血清巯基氧化酶1(QSOX-1)、凝溶胶蛋白(GSN)、甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选择原发性肝癌患者60例(肝癌组),乙肝、肝硬化、肝脓肿等其他肝病患者60例(肝病组),健康志愿者60例(对照组),采用ELISA法检测各组血清QSOX-1、GSN,电化学发光法检测各组血清AFP。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清QSOX-1、GSN、AFP单独或联合检测对原发性肝癌的诊断效能。结果肝癌组、肝病组、对照组血清QSOX-1、GSN、AFP水平依次降低,组间两两比较P均1、GSN、AFP单独诊断原发性肝癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.891、0.801、0.802,Youden指数分别为58.3%、53.3%、55.0%,敏感性分别为88.3%、70.0%、73.3%,特异性分别为70.0%、83.3%、81.7%;AFP+QSOX-1、AFP+GSN、QSOX-1+GSN、AFP+QSOX1+GSN联合检测诊断原发性肝癌的AUC分别为0.911、0.848、0.895、0.918,Youden指数分别为64.2%、59.2%、63.3%、65.8%,敏感性分别为88.3%、80.0%、85.0%、90.0%,特异性分别为75.8%、79.2%、78.3%、75.8%。结论血清QSOX-1、GSN、AFP联合检测可提高对原发性肝癌的诊断敏感性,优化诊断效能,对原发性肝癌的早期筛查具有一定参考价值。

关键词：原发性肝癌巯基氧化酶1 凝溶胶蛋白甲胎蛋白受试者工作特征曲线

妊娠合并HBV感染者血清IP-10、QSOX1水平及与母婴不良结局关系

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中国计划生育学杂志 2024年第6期32卷 1420-1423+1428页

作者：卓亚朱斌吴虹杰新乡医学院第一附属医院

目的：探讨妊娠合并乙肝病毒(HBV)感染孕妇血清干扰素γ诱导蛋白-10(IP-10)、巯基氧化酶1(QSOX1)水平与母婴不良结局关系。方法：回顾性选择2021年3月-2023年3月本院治疗的妊娠合并HBV感染孕妇86例为感染组，产前检查正常孕妇76例为对... 详细信息

目的：探讨妊娠合并乙肝病毒(HBV)感染孕妇血清干扰素γ诱导蛋白-10(IP-10)、巯基氧化酶1(QSOX1)水平与母婴不良结局关系。方法：回顾性选择2021年3月-2023年3月本院治疗的妊娠合并HBV感染孕妇86例为感染组，产前检查正常孕妇76例为对照组，检测所有孕妇血清IP-10、QSOX1水平并记录母婴结局，进行组间比较。采用多因素logistic回归模型对妊娠合并HBV感染者母婴结局的影响因素进行分析，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IP-10、QSOX1对妊娠合并HBV感染者母婴结局评估价值。结果：感染组血清IP-10(68.52±10.46 pg/ml)、QSOX1(75.62±11.50 ng/ml)水平均高于对照组(30.22±6.66 pg/ml、45.25±7.62 ng/ml),不良母婴结局发生率(50.0%)高于对照组(17.1%)(均P10(OR=1.740,95%CI 1.403～2.159)、QSOX1(OR=4.225,95%CI 2.050～8.708)均为影响妊娠合并HBV感染者不良母婴结局的因素(P10、QSOX1评估妊娠合并HBV感染者不良母婴结局的曲线下面积(AUC)为0.854、0.867,二者联合评估效能提高(AUC=0.925)。结论：妊娠合并HBV感染者血清IP-10、QSOX1水平均升高，且二者水平变化均是影响孕妇不良母婴结局因素，且可作为评估不良母婴结局指标。

关键词：妊娠合并乙肝病毒感染干扰素γ诱导蛋白-10 巯基氧化酶1 母婴不良结局影响因素评估价值