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差别表达基因片段的克隆策略

河南职业技术师范学院学报 2004年第4期32卷 50-52页

作者：晏猛河南省体育运动学校河南郑州450043

克隆差异表达的基因可为分化细胞与祖细胞、激活细胞与静止细胞、突变细胞(如肿瘤细胞)与正常细胞提供某些有意义的信息,本文综述了差异表达基因克隆的一些策略。

关键词：克隆差别表达基因祖细胞差异表达基因正常细胞突变细胞肿瘤细胞分化细胞活细胞片段

cDNA微阵列技术:一种有效的差别表达基因克隆新方法

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生命的化学 2003年第1期23卷 73-75页

作者：郑琳赵明光毕玉蓉兰州大学生命科学院兰州730000

cDNA微阵列技术是以Northern印记杂交为基础 ,采用大规模集成电路点样技术的一种DNA杂交微阵列技术 ,是基因分离鉴定的最有效的方法之一。本文通过对其原理和工艺流程的简单介绍。

关键词： cDNA微阵列技术差别表达基因分离鉴定基因克隆

几种差别表达基因显示技术及其在植物方面的应用

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生命科学 1999年第3期11卷 140-143,144页

作者：宁顺斌王玲宋运淳武汉大学发育生物学研究中心武汉430072

９０年代以来，先后出现了ＤＤ、ＲＤＡ、ｃＤＮＡ－ＲＤＡ、ＳＡＧＥ、ＧＥＦ、ＲＦＤ、ＳＳＨ以及ＡＴＡＣ－ＰＣＲ等数种未知产物的差别表达基因显示技术。本文对这些技术的异同、各自的优缺点以及它们在植物方面的应用现状和前景作... 详细信息

９０年代以来，先后出现了ＤＤ、ＲＤＡ、ｃＤＮＡ－ＲＤＡ、ＳＡＧＥ、ＧＥＦ、ＲＦＤ、ＳＳＨ以及ＡＴＡＣ－ＰＣＲ等数种未知产物的差别表达基因显示技术。本文对这些技术的异同、各自的优缺点以及它们在植物方面的应用现状和前景作了简单综述。

关键词： RT-PCR 差别表达基因基因克隆

植入前期与分娩前期子宫差别基因筛选及IL-1β对胚泡植入前后子宫MMP2表达的影响

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植入前期与分娩前期子宫差别基因筛选及IL-1β对胚泡植入前后子宫...

作者：孙敬西北农林科技大学

学位级别：硕士

妊娠主要包括胚泡着床,妊娠的维持以及分娩等一系列重要的阶段。从免疫学角度来讲,母体子宫作为特殊的生殖免疫器官在胚泡着床和分娩时分别表现为免疫耐受和免疫排斥,这两个生理反转过程必然涉及基因的时空差别表达;胚泡植入又涉及大量... 详细信息

妊娠主要包括胚泡着床,妊娠的维持以及分娩等一系列重要的阶段。从免疫学角度来讲,母体子宫作为特殊的生殖免疫器官在胚泡着床和分娩时分别表现为免疫耐受和免疫排斥,这两个生理反转过程必然涉及基因的时空差别表达;胚泡植入又涉及大量细胞因子及基质金属蛋白酶的协同参与。研究这些关键过程将使我们对胚泡植入和分娩的分子机理获得进一步的认识,同时也可为器官移植、同种或异种克隆等研究热点提供基础理论依据,在临床上也为治疗一些妊娠疾病如不孕、流产、胎儿畸形等提供药物可能作用的靶位点。本文采用抑制消减杂交技术,以Sprague-Dawley大鼠（SD大鼠）为实验动物,选取妊娠过程中植入前期（第5d）和分娩前期（第19d）子宫分别作为驱动方和实验方,进行抑制消减杂交,获得的消减文库经差异筛选得到70 个阳性克隆。序列测定和同源对比分析表明这些克隆所代表的基因在大鼠基因库中分别与8个已知基因有90%～100%不等的同源性。这些基因均差别表达于分娩前期子宫组织中,其中首次发现尿鸟苷蛋白和干扰素诱导蛋白16在SD 大鼠妊娠子宫中有表达。RT-PCR 及半定量分析显示尿鸟苷蛋白基因在妊娠第19d子宫中的表达显著高于妊娠第5d （P＜0.001）,而干扰素诱导蛋白16差异表达不明显。在妊娠第6d、第9d 和第12d 的子宫中尿鸟苷蛋白基因自胚泡植入后其表达逐渐上升,妊娠第15d 下降,在妊娠第19d 表达量最高。结果提示特异表达的尿鸟苷蛋白基因可能与分娩有关。采用半定量RT-PCR、免疫组化等方法,对胚泡植入前后时期SD 妊娠大鼠体内注射超生理剂量的白细胞介素1β（IL-1β）,检测处理前后妊娠子宫中基质金属蛋白酶2（MMP2）的表达变化,探讨IL-1β对MMP2表达的影响。统计分析表明妊娠第4d 及妊娠第9d处理组与对照组无明显差异,妊娠第6d 处理组MMP2表达明显低于对照组（P＜0.01）;免疫组化检测显示,妊娠第4d,MMP2主要表达于子宫腔上皮,基质及腺体表达较少;妊娠D6,

关键词： SD 雌鼠抑制消减杂交子宫差别表达基因尿鸟苷蛋白白细胞介素1β 基质金属蛋白酶2

抑制性底物杂交(SSH)技术研究BXSB小鼠的差异表达基因

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中国免疫学杂志 1999年第11期15卷 481-483页

作者：李莹韩文玲杨高云宋朱声张颖妹狄春辉邓鸿业马大龙北京医科大学免疫学系北京100083

目的：利用抑制性底物杂交技术（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），以ＢＸＳＢ狼疮小鼠为模型，研究系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）发病相关基因。方法：分离ＢＸＳＢ和Ｃ５７ＢＬ... 详细信息

目的：利用抑制性底物杂交技术（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），以ＢＸＳＢ狼疮小鼠为模型，研究系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）发病相关基因。方法：分离ＢＸＳＢ和Ｃ５７ＢＬ６小鼠骨髓细胞，提取ｍＲＮＡ，反转录构建ｃＤＮＡ文库，利用ＳＳＨ技术研究ＢＸＳＢ小鼠差异表达基因。结果：获得了１２个阳性克隆，其中有３个克隆编码ＴＣＲ、ＭＨＣ Ⅱ类分子及逆转录病毒基因表达产物，均在ＢＸＳＢ狼疮小鼠高表达，表明其与系统性红斑狼疮发病有关；１个在ＢＸＳＢ狼疮小鼠高表达的基因可能为新的ｃＤＮＡ片段，已被ＧｅｎＢａｎｋ收录，登记号码为ＡＦ０９３４５３。结论：ＴＣＲ、ＭＨＣ Ⅱ类分子及逆转录病毒基因表达产物与系统性红斑狼疮发病有关。

关键词： SLE 抑制性底物杂交 BXSB小鼠差别表达基因

长链非编码RNA CRNDE在恶性肿瘤中的研究进展

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广东医学 2017年第11期38卷 1767-1769,1773页

作者：刘芳腾曲强冠朱正明黄传喜胡白娥南昌大学第二附属医院普外科江西南昌330006 南昌大学第四临床医学院江西南昌330038 永丰县人民医院普外一科江西吉安343000 南昌曙光手足外科医院手外科江西南昌330002

近年来，一类长度大于200个核苷酸但不具备编码蛋白质功能的RNA分子——长链非编码RNA （ longnoncoding RNA, LncRNA）日益受到人们的关注。越来越多的证据表明，长链非编码RNA在细胞发育、分化以及许多其他生物过程中扮演重要角色，... 详细信息

近年来，一类长度大于200个核苷酸但不具备编码蛋白质功能的RNA分子——长链非编码RNA （ longnoncoding RNA, LncRNA）日益受到人们的关注。越来越多的证据表明，长链非编码RNA在细胞发育、分化以及许多其他生物过程中扮演重要角色，与肿瘤等多种人类疾病密切相关。而结直肠肿瘤差别表达基因（ colorectal neoplasia differentially expressed, CRNDE ）作为长链非编码RNA中新近发现的一员，已被证实在多种肿瘤中存在异常表达，可影响癌细胞的增殖、凋亡和侵袭转移，参与肿瘤的发生进展。因此，本文就CRNDE在多种人类肿瘤中的研究进展作简要综述。

关键词：非编码RNA 恶性肿瘤长链差别表达基因 RNA分子蛋白质功能结直肠肿瘤细胞发育

长链非编码RNA CRNDE在结直肠癌中的研究进展

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西北国防医学杂志 2017年第12期38卷 834-837页

作者：郝东明天津市人民医院肛肠外科天津300121

根据DNA元件百科全书计划（encyclopedia of DNA elements,ENCODE）报道显示,人类基因组中能够有效编码蛋白的基因〈2%,其余大部分为非编码基因[1]。非编码基因根据核苷酸长度分为长链非编码RNA（long noncoding RNA,LncRNA）和短链非编... 详细信息

根据DNA元件百科全书计划（encyclopedia of DNA elements,ENCODE）报道显示,人类基因组中能够有效编码蛋白的基因〈2%,其余大部分为非编码基因[1]。非编码基因根据核苷酸长度分为长链非编码RNA（long noncoding RNA,LncRNA）和短链非编码RNA（ncRNA、siRNA、microRNA）。

关键词：结直肠癌长链非编码RNA 差别表达基因信号通路