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中药材 2019年第6期42卷 1387-1392页

作者：宋园园司艳红张敬军张颖泰山医学院山东泰安271000

目的:验证南蛇藤通过调控内质网应激(ERS)途径减轻氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导巨噬细胞损伤的作用机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予50、100、150 mg/L南蛇藤提取物预处理30 min后加入100 mg/mL Ox-LDL损伤24 h,分别采用油红... 详细信息

目的:验证南蛇藤通过调控内质网应激(ERS)途径减轻氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导巨噬细胞损伤的作用机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予50、100、150 mg/L南蛇藤提取物预处理30 min后加入100 mg/mL Ox-LDL损伤24 h,分别采用油红O染色和ELISA法检测细胞内脂质沉积情况和胆固醇含量,ELISA法和TBA法检测细胞内乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量,流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的释放,MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况,Western blot检测内质网应激相关蛋白CD36、GRP78、GRP94的表达。结果:南蛇藤浓度依赖性地减轻了Ox-LDL诱导的巨噬细胞内脂质蓄积和巨噬细胞的泡沫化,显著降低了Ox-LDL诱导的细胞LDH及ROS释放,下调了MDA水平,并抑制了Ox-LDL诱导的清道夫受体CD36与葡萄糖调节蛋白78/94(GRP78/94)的高表达。结论:南蛇藤可保护Ox-LDL导致的细胞损伤,其机制可能与调控内质网应激途径有关。

关键词：南蛇藤内质网应激氧化低密度脂蛋白巨噬细胞损伤

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基于通过lncRNAs调控TLR4/NF-κB信号通路探讨通塞颗粒改善肺巨噬细胞损伤治疗AECOPD机制研究

基于通过lncRNAs调控TLR4/NF-κB信号通路探讨通塞颗粒改善肺巨噬...

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作者：付子坚河南中医药大学

学位级别：硕士

目的1.以AECOPD大鼠模型为对象,从肺功能、肺组织病理以及肺巨噬细胞吞噬功能等方面,评价通塞颗粒干预AECOPD大鼠的疗效。2.基于lnc RNAs调控TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症反应,初步探讨通塞颗粒通过改善肺巨噬细胞损伤治疗AECOPD的作用... 详细信息

目的1.以AECOPD大鼠模型为对象,从肺功能、肺组织病理以及肺巨噬细胞吞噬功能等方面,评价通塞颗粒干预AECOPD大鼠的疗效。2.基于lnc RNAs调控TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症反应,初步探讨通塞颗粒通过改善肺巨噬细胞损伤治疗AECOPD的作用机制。方法SPF级SD大鼠50只,雌雄各半,随机分为空白(Control)组、模型(AECOPD)组、中药(通塞颗粒,TSG)组、西药(莫西沙星加沙丁胺醇,MXF+STL)组、中加西(通塞颗粒联合莫西沙星加沙丁胺醇,TSG+MXF+STL)组,每组10只,共5组。第1-8周,采用香烟烟雾暴露联合反复细菌感染,制备COPD稳定期大鼠模型,第9周第1天(Day1)采用一次性气管插管法向大鼠气管内注入高浓度菌液0.1m L,制备COPD急性加重期大鼠模型。急性加重前两天(Day-1,Day0),各治疗组开始预防给药,急性加重当天不给药,急性加重后,继续给药4天(Day2-Day5)。中药组给予通塞颗粒(1.62g/kg/d)灌胃;西药组给与莫西沙星(0.036g/kg/d)加沙丁胺醇(1.08mg/kg/d)灌胃;中加西联合组给予通塞颗粒(1.62g/kg/d)加莫西沙星(0.036g/kg/d)加沙丁胺醇(1.08mg/kg/d)灌胃;空白及模型组给与同等体积生理盐水灌胃,两次/天。于第9周第6天(Day6)取材,取材前采用PFT系统检测大鼠呼气峰流速(peakexpiratory flow,PEF)、0.3秒用力呼气量(forced expiratory volume 0.3,FEV 0.3)及用力肺活量(forced vital capacity,FVC)。采用苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法将大鼠左肺切片后染色,观察大鼠肺组织的病理改变,测量平均肺泡数(mean alveolar number,MAN)、肺泡平均截距(mean linear intercept,MLI)。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清及肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF)中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)以及白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-17含量的表达。采用免疫组化法(immunohistochemical,IHC)检测大鼠肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6表达面积及IOD值。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(quantitative polymerase chain reaction,q PCR)测定Inc RNA 175876、Inc RNA Lethe及m RNA TAK1结合蛋白3(TAK1-binding protein3,TAB3)、核因子-κB(nuclear factor-κappa B,NF-κB)、核因子-κB抑制蛋白ɑ(NF-kappa-B inhibitor alpha,IKBɑ)及Toll样受体4(Toll Like Receptor 4,TLR4)水平。采用蛋白质免疫印迹法(western blot,WB)测定TAB3、TLR4、NF-κB及磷酸化核因子-κB(phosphorylation-nuclear factor-κappa B,p-NF-κB)、IKBɑ及磷酸化核因子-κB抑制蛋白ɑ(phosphorylation-NF-kappa-B inhibitor alpha,p-IKBɑ)蛋白表达情况。结果1.体重与Control组比较,COPD各组大鼠从造模起体重增长减慢。第九周取材前,与Control组比较,AECOPD组体重显著减轻(P<0.01);与AECOPD组比较,TSG、MXF+STL、TSG+MXF+STL组体重显著升高(P<0.01);与TSG组比较,MXF+STL、TSG+MXF+STL组体重显著升高(P<0.01)。2.肺功能与Control组比较,AECOPD组FVC、FEV 0.3、FEV 0.3/FVC及PEF均显著降低(P<0.01)。与AECOPD组比较,TSG、MXF+STL、TSG+MXF+STL组FVC、FEV0.3、PEF显著升高(P<0.01);TSG+MXF+STL组FEV 0.3/FVC显著升高(P<0.01)。与TSG组比较,TSG+MXF+STL组FVC、PEF显著升高(P<0.01)。与MXF+STL组比较,TSG+MXF+STL组FVC、FEV 0.3、PEF显著升高(P

关键词：慢阻肺急性加重炎症反应巨噬细胞损伤通塞颗粒 TLR4/NF-κB

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