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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 243-248页

作者：周俊郭长青王庆甫北京中医药大学第三附属医院骨伤科北京100029 北京中医药大学针灸推拿学院北京100029

目的观察脂多糖(LPS)诱导炎症后的不同滑膜细胞来源外泌体对软骨细胞的影响,探讨两种滑膜细胞外泌体在膝骨关节炎(KOA)疾病进展中引起软骨损伤的作用机制。方法将两种滑膜细胞以1∶4共培养并用LPS诱导炎症,提取上清液中外泌体,再分别提... 详细信息

目的观察脂多糖(LPS)诱导炎症后的不同滑膜细胞来源外泌体对软骨细胞的影响,探讨两种滑膜细胞外泌体在膝骨关节炎(KOA)疾病进展中引起软骨损伤的作用机制。方法将两种滑膜细胞以1∶4共培养并用LPS诱导炎症,提取上清液中外泌体,再分别提取正常及LPS诱导炎症后的两种滑膜细胞外泌体。将术中取得的人软骨组织分离培养成软骨细胞,分为五组:第Ⅰ组加入FLS外泌体;第Ⅱ组加入正常的FLS外泌体;第Ⅲ组加入两种滑膜细胞共培养后的外泌体;第Ⅳ组加入炎性的MLS外泌体;第V组加入炎性的FLS外泌体。CCK-8检测各组软骨细胞活力。ELISA法检测各组软骨细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6水平。Western blot法检测各组软骨细胞中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、核因子κB抑制因子激酶(IkK)、核因子κB抑制蛋白(IκB)、金属肽酶含血小板反应蛋白基元5(ADAMTS5)的蛋白表达量。结果CCK-8显示,与正常滑膜细胞来源外泌体相比,3组炎性外泌体均可使软骨细胞活力降低(P细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于Ⅰ、Ⅱ组(P细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于Ⅳ组而低于V组(P细胞中TLR4、NF-κB、IkK、IκB、ADAMTS5蛋白表达量高于Ⅰ、Ⅱ组(P细胞中TLR4、NF-κB、IkK、IκB、ADAMTS5蛋白表达量高于Ⅳ组而低于V组(P滑膜细胞来源外泌体均可通过调控软骨TLRs/NF-κB信号通路,引起软骨炎症。MLS外泌体致炎效果强于FLS外泌体,但两种共培养情况下的外泌体致炎效果弱于单纯MLS外泌体。

关键词：成纤维样滑膜细胞巨噬样滑膜细胞外泌体 TLRs/NF-κB信号通路膝骨关节炎软骨细胞

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大鼠胶原性关节炎两型滑膜细胞之间相互关系及白芍总苷的作用

大鼠胶原性关节炎两型滑膜细胞之间相互关系及白芍总苷的作用

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作者：朱蕾安徽医科大学

学位级别：硕士

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性、系统性和破坏性的自身免疫性疾病，其主要病理特点是滑膜细胞增生，衬里层增厚，炎性细胞浸润，血管翳形成，继而引起软骨和骨组织的破坏，最终导致关节畸形和功能障碍。在RA关节损... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性、系统性和破坏性的自身免疫性疾病，其主要病理特点是滑膜细胞增生，衬里层增厚，炎性细胞浸润，血管翳形成，继而引起软骨和骨组织的破坏，最终导致关节畸形和功能障碍。在RA关节损伤和组织重构中，滑膜细胞既是靶细胞，也通过多种途径成为参与者，其功能的改变在疾病的进程中起着至关重要的作用。由于RA的病因和发病机制至今仍不是十分清楚，尽管抗风湿药物很多，但目前临床尚无理想的治疗方法。白芍总苷(total glucosides of paeony，TGP)是从中药白芍(paeonia lactiflora Pall)中提取的有效部位，具有抗炎、止痛、调节免疫反应和抗应激等作用，已被批准生产上市，用于治疗RA，能有效改善RA患者的临床症状和体征。为了进一步明确其作用靶点，更加系统深入地研究其控制炎症、阻止关节破坏的机理，本研究在大鼠胶原性关节炎(collagen-induced arthritis，CIA)模型上，观察两型滑膜细胞之间的相互作用关系在关节破坏中的作用，以及TGP对其的影响，这将为TGP在临床的合理应用提供更加充分的依据。目的：研究TGP对CIA大鼠继发性炎症反应和关节破坏的治疗作用；以滑膜细胞为突破口，阐明CIA大鼠关节滑膜细胞具分泌功能细胞器的超微结构与滑膜细胞分泌功能之间的关系，两型滑膜细胞之间的相互关系及其在关节破

关键词：白芍总苷胶原性关节炎关节破坏巨噬样滑膜细胞成纤维样滑膜细胞

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基于TLRs/NF-κB信号通路观察不同滑膜细胞来源炎性外泌体对家兔膝关节的影响及其作用机制

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中国医药导报 2023年第27期20卷 12-15页

作者：周俊郭长青王庆甫北京中医药大学研究生院北京100029 北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院筋伤科北京100029

目的基于TLRs/NF-κB信号通路观察不同滑膜细胞来源炎性外泌体对家兔膝关节的影响及其作用机制。方法将两种滑膜细胞用脂多糖诱导炎症后,分别提取其外泌体。将20只实验用家兔用随机数字表法将其分为5组:正常组、盐水组、A组(注射A细胞... 详细信息

目的基于TLRs/NF-κB信号通路观察不同滑膜细胞来源炎性外泌体对家兔膝关节的影响及其作用机制。方法将两种滑膜细胞用脂多糖诱导炎症后,分别提取其外泌体。将20只实验用家兔用随机数字表法将其分为5组:正常组、盐水组、A组(注射A细胞外泌体混悬液)、B组(注射B细胞外泌体混悬液)、A+B组(注射两种外泌体混合混悬液),每组4只。正常组不作处理,盐水组注射生理盐水,分别在三组外泌体组家兔关节腔内注射对应外泌体混悬液(浓度为1×107/ml)。干预2周后,记录各组家兔行为学变化,酶联免疫吸附试验法检测各组家兔血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6及基质金属蛋白酶13(MMP-13)表达水平,蛋白质印迹法检测各组滑膜组织中Toll样受体2(TLR2)、P65、髓样分化因子88(MyD88)、TNF受体相关因子2(traf2)。结果正常组和盐水组干预前后家兔行为学Lequesne MG指数比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预后,A、B组及A+B组家兔行为学Lequesne MG指数高于干预前,且高于正常组(P滑膜组织中TLR2、P65、MyD88、traf2蛋白表达均高于正常组(P滑膜组织中TLR2、P65、MyD88、traf2高于A组和B组(P滑膜组织中TLR2、P65、MyD88、traf2蛋白表达量均高于B组(P滑膜细胞外泌体均可激活滑膜TLRs/NF-κB信号通路,加重滑膜炎症。

关键词：成纤维样滑膜细胞巨噬样滑膜细胞外泌体 TLRs/NF-κB信号通路膝骨关节炎

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