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川蛭通络胶囊HPLC指纹图谱建立及9个成分测定

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中药材 2024年 1477-1481页

作者：杨柯楠关永霞范建伟袁晓梅李静山东中医药大学经方与现代中药融合创新全国重点实验室

目的:建立川蛭通络胶囊HPLC指纹图谱及9个成分的定量分析方法,为川蛭通络胶囊的质量控制提供依据。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm,3.5μm）色谱柱;流动相为1%醋酸溶液-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为2... 详细信息

目的:建立川蛭通络胶囊HPLC指纹图谱及9个成分的定量分析方法,为川蛭通络胶囊的质量控制提供依据。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm,3.5μm）色谱柱;流动相为1%醋酸溶液-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为268 nm;柱温为30℃,对HPLC指纹图谱进行聚类分析、主成分分析,同时测定绿原酸、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、迷迭香酸、丹酚酸B、藁本内酯、隐丹参酮、欧当归内酯A、丹参酮ⅡA 9个成分的含量。结果:12批川蛭通络胶囊样品指纹图谱含有18个共有峰,相似度>0.995。聚类分析可将12批样品分为3类,主成分分析得到4个主成分,累计方差贡献率为94.615%。含量测定结果显示,上述9个成分的平均加样回收率为95.25%～104.08%,RSD为0.59%～2.11%。结论:该研究建立的川蛭通络胶囊HPLC指纹图谱及9个成分的含量测定方法高效可行,可用于川蛭通络胶囊的质量控制。

关键词：川蛭通络胶囊 HPLC指纹图谱聚类分析主成分分析含量测定

川蛭通络胶囊联合替罗非班治疗急性脑梗死的临床研究

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现代药物与临床 2024年第7期39卷 1761-1766页

作者：井超吴春芳淄博市中心医院神经内科山东淄博255000 淄博市中心医院康复医学科山东淄博255000

目的探究川蛭通络胶囊联合替罗非班对48 h内脑梗死急性期患者的治疗效果。方法选取2022年6月—2023年6月在淄博市中心医院治疗的急性脑梗死患者103例,根据患者治疗方案分成对照组(51例)和治疗组(52例)。对照组静脉滴注盐酸替罗非班注... 详细信息

目的探究川蛭通络胶囊联合替罗非班对48 h内脑梗死急性期患者的治疗效果。方法选取2022年6月—2023年6月在淄博市中心医院治疗的急性脑梗死患者103例,根据患者治疗方案分成对照组(51例)和治疗组(52例)。对照组静脉滴注盐酸替罗非班注射液,初始滴注速度0.4μg/(kg·min),滴注30 min,随后按0.1μg/(kg·min)的速度连续给药;治疗组在对照组基础上口服川蛭通络胶囊,2粒/次,3次/d。两组患者治疗14 d。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者中医证候评分、巴氏指数(Barthel)评分和美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、CX3C基序趋化因子配体1(CX3CL1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和分拣蛋白(Sortilin)水平。结果治疗后,对照组和治疗组临床总有效率分别为78.43%和94.23%,两组比较差异具有统计学意义(P川蛭通络胶囊联合替罗非班治疗48 h内脑梗死急性期患者疗效显著,不仅能够显著改善患者神经功能和独立生活能力,同时还能够促进血清学指标的恢复并有效改善氧化应激损害。

关键词：川蛭通络胶囊盐酸替罗非班注射液脑梗死急性期中医证候评分氧化应激超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化酶过氧化氢酶 CX3C基序趋化因子配体1 碱性成纤维细胞生长因子

川蛭通络胶囊联合西药治疗急性脑梗死气虚血瘀证临床研究

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新中医 2024年第3期56卷 27-32页

作者：李舟姜艳涛平煤神马医疗集团总医院神经内科河南平顶山467000

目的:观察川蛭通络胶囊联合西药治疗急性脑梗死气虚血瘀证的临床疗效。方法:采用随机数字表法将90例急性脑梗死气虚血瘀证患者分为对照组和观察组各45例。对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上加用川蛭通络胶囊治疗,2组均连续治... 详细信息

目的:观察川蛭通络胶囊联合西药治疗急性脑梗死气虚血瘀证的临床疗效。方法:采用随机数字表法将90例急性脑梗死气虚血瘀证患者分为对照组和观察组各45例。对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上加用川蛭通络胶囊治疗,2组均连续治疗14 d。比较2组治疗前后中医证候积分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、Barthel指数(BI)评分、脑血管储备功能(CVR)值、脉动指数(PI)值;比较2组治疗前后血栓弹力图参数[血凝块增长曲线角度(Angle)、血凝块增长至20 mm所需时间(K)、综合凝血指数(CI)、最大血凝块强度(MA)]、血清指标[白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、S100钙结合蛋白β (S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)];评估2组临床疗效及不良反应发生情况。结果:治疗期间,对照组、观察组各脱落3例,最终2组各完成研究42例。治疗后,对照组总有效率80.95%,观察组总有效率95.24%,2组比较,差异有统计学意义(P川蛭通络胶囊联合西药治疗急性脑梗死气虚血瘀证疗效确切,能够改善患者脑血管储备功能和凝血功能,减少炎症反应,加快神经功能恢复,安全性较高。

关键词：急性脑梗死气虚血瘀证川蛭通络胶囊脑血管储备功能凝血功能炎症反应神经功能

川蛭通络胶囊通过抑制神经炎症和氧化应激治疗小鼠脑缺血再灌注损伤

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中国中药杂志 2022年第12期47卷 3386-3391页

作者：库亚萍张丽李冰孙敬侠范建伟张贵民临沂市人民医院山东临沂276003 鲁南制药集团股份有限公司中药制药共性技术国家重点实验室山东临沂276000 上海交通大学药学院上海200240

川蛭通络胶囊(CZTL)具有活血化瘀、益气通络的功效,用于中风病中经络(脑梗死)恢复期血瘀气虚证,并在临床中得到广泛应用,但其现代药理学作用机制仍不清晰。该研究通过线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,探讨CZTL治疗缺血... 详细信息

川蛭通络胶囊(CZTL)具有活血化瘀、益气通络的功效,用于中风病中经络(脑梗死)恢复期血瘀气虚证,并在临床中得到广泛应用,但其现代药理学作用机制仍不清晰。该研究通过线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,探讨CZTL治疗缺血性脑中风的药效和作用机制。小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组和CZTL组,CZTL组连续3 d按0.3 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃CZTL,最后1次灌胃1 h后,模型组和CZTL组行MCAO/R手术。再灌注24 h后,检测CZTL对小鼠神经学评分、脑梗死面积、脑水肿及脑组织病理学,同时检测脑组织匀浆活性氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;利用Western blot技术检测脑组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Toll样受体4(TLR 4)以及磷酸化核因子-κB亚基P65(p-NF-κB P65)的表达。结果显示,CZTL显著降低MCAO/R小鼠神经学评分、脑水肿以及脑梗死面积,改善脑组织病理学,抑制脑组织ROS、MDA、IL-6、IL-1β以及TNF-α的分泌,提高SOD的活性,抑制脑组织促凋亡蛋白Bax的表达,促进抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,并同时抑制炎症相关蛋白TLR4的表达和NF-κB P65的磷酸化。以上结果表明,CZTL对MCAO/R小鼠具有显著的保护作用,且这种保护作用与CZTL抑制神经炎症、抵抗脑组织氧化应激密切相关。

关键词：川蛭通络胶囊氧化应激炎症脑缺血再灌注

川蛭通络胶囊联合头孢呋辛治疗成人大叶性肺炎的临床效果观察

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中药药理与临床 2017年第1期33卷 175-177页

作者：吴清强林亚发王永和海口市第四人民医院海口571100

目的:观察川蛭通络胶囊联合头孢呋辛治疗成人大叶性肺炎的临床效果。方法:纳入2014年4月至2015年7月我院收治的患大叶性肺炎的成人患者104例,按随机数字表法分为观察组和对照组各52例。对照组给予头孢呋辛治疗,观察组患者在对照组基础... 详细信息

目的:观察川蛭通络胶囊联合头孢呋辛治疗成人大叶性肺炎的临床效果。方法:纳入2014年4月至2015年7月我院收治的患大叶性肺炎的成人患者104例,按随机数字表法分为观察组和对照组各52例。对照组给予头孢呋辛治疗,观察组患者在对照组基础上加用川蛭通络胶囊联合治疗。记录并分析两组患者治疗前和治疗后两周相关症状的消失时间、炎症水平、血浆白细胞水平和中性粒细胞比例以及治疗疗效。结果:观察组发热消失时间、肺部啰音消失时间和咳嗽消失时间分别为(4.65±0.47、6.75±0.54、5.93±0.58)d,均显著短于对照组(6.02±0.59、8.06±0.83、8.46±0.76)d。观察组治疗后血清超敏C反应蛋白(hsCRP)和降钙素原(PCT)水平分别为(19.43±2.86mg/L、1.15±0.42ng/L),均明显低于对照组(30.57±3.49mg/L、2.13±0.57ng/L)。3观察组治疗后白细胞水平和中性粒细胞比例分别为(9.62±0.48×109/L、70.53±2.41%),均明显低于对照组(10.98±0.59×109/L、78.62±3.05%);4观察组治疗后总有效率为94.23%,显著高于对照组78.85%。结论:川蛭通络胶囊联合头孢呋辛可有效治疗成人大叶性肺炎,调节患者体内炎症水平,提高治疗效率。

关键词：川蛭通络胶囊头孢呋辛成人大叶性肺炎

川蛭通络胶囊联合长春西汀治疗脑梗死恢复期的临床研究

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现代药物与临床 2021年第9期36卷 1821-1825页

作者：王世俊孙科王永革安阳市人民医院神经内科河南安阳455000

目的观察川蛭通络胶囊联合长春西汀注射液治疗脑梗死恢复期的临床疗效。方法选取2018年10月—2020年10月安阳市人民医院收治的122例脑梗死恢复期患者,采用随机数字表法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各61例。对照组静脉滴注长春西... 详细信息

目的观察川蛭通络胶囊联合长春西汀注射液治疗脑梗死恢复期的临床疗效。方法选取2018年10月—2020年10月安阳市人民医院收治的122例脑梗死恢复期患者,采用随机数字表法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各61例。对照组静脉滴注长春西汀注射液,初始剂量20 mg/次,随后视患者个人耐受情况逐渐增加至30 mg/次,加入生理盐水250m L,1次/d。治疗组患者在对照组治疗的基础上口服川蛭通络胶囊,0.5 g/次,3次/d。两组患者均连续治疗2周。观察两组临床疗效,比较两组日常生活能力、神经功能缺损程度、微循环指标、血清神经因子水平。结果治疗后,对照组的总有效率为72.13%,治疗组的总有效率为91.80%,治疗组的总有效率高于对照组(P川蛭通络胶囊联合长春西汀注射液治疗脑梗死恢复期具有较好临床疗效,可改善神经功能缺损程度、日常生活能力和机体微循环,调节血清神经因子水平。

关键词：川蛭通络胶囊长春西汀注射液脑梗死恢复期日常生活能力神经功能缺损程度微循环指标血清神经因子

基于网络药理学与分子对接技术探讨川蛭通络胶囊干预微循环障碍的机制研究

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中草药 2021年第24期52卷 7550-7560页

作者：牟艳芳陈文璐周冰李小倩库亚萍李冰李莎莎严诗楷鲁南制药集团股份有限公司中药制药共性技术国家重点实验室山东临沂276000 广州中医药大学第二附属医院广东广州510006 临沂市人民医院山东临沂276000 上海交通大学药学院上海200240

目的基于网络药理学与分子对接技术探讨川蛭通络胶囊干预微循环障碍的作用机制。方法通过TCMSP数据库及文献检索收集川蛭通络胶囊化学成分信息;在PubChem、SwissTargetPrediction、GeneCards等数据库收集化学成分作用靶点及微循环障碍靶... 详细信息

目的基于网络药理学与分子对接技术探讨川蛭通络胶囊干预微循环障碍的作用机制。方法通过TCMSP数据库及文献检索收集川蛭通络胶囊化学成分信息;在PubChem、SwissTargetPrediction、GeneCards等数据库收集化学成分作用靶点及微循环障碍靶点;利用DAVID数据库对共有靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;使用Cytoscape软件构建相关网络图,筛选主要成分、靶点进行分子对接研究。结果共整理得到川蛭通络胶囊的150个成分及其对应的480个靶点,微循环障碍靶点154个,二者共同靶点32个,富集分析发现共同靶点主要参与血压调节、缺氧应答等生物过程,以及催乳激素信号通路、Janus激酶(Janus kinase,JAK)-信号传导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)信号通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)信号通路、脂肪细胞因子信号通路、肾素-血管紧张素系统等信号通路。分子对接结果显示,亚麻油酸乙酯、木犀草素、丹酚酸J等成分能与前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)、血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)、凝血因子2(coagulation factor 2,F2)等靶点良好对接。结论川蛭通络胶囊可能是通过亚麻油酸乙酯、木犀草素、丹酚酸J等关键成分作用于PTGS2、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、STAT3、ACE、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)、F2等靶点改善氧化应激、减轻炎性反应,从而干预微循环障碍。

关键词：川蛭通络胶囊微循环障碍网络药理学分子对接亚麻油酸乙酯木犀草素丹酚酸J

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS和网络药理学的川蛭通络胶囊化学成分及作用机制研究

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中国中药杂志 2023年第19期48卷 5216-5234页

作者：杨柯楠关永霞范建伟袁晓梅张龙霏刘谦李静山东中医药大学山东济南250355 鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室山东临沂276005

采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对川蛭通络胶囊内化学成分进行分析和鉴定,明确其药效物质基础,同时结合网络药理学研究方法探讨川蛭通络胶囊治疗脑梗死的作用机制。以乙腈-1%乙酸... 详细信息

采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对川蛭通络胶囊内化学成分进行分析和鉴定,明确其药效物质基础,同时结合网络药理学研究方法探讨川蛭通络胶囊治疗脑梗死的作用机制。以乙腈-1%乙酸水为流动相进行梯度洗脱,质谱正、负离子模式扫描。采用Xcalibur 4.2软件,精确质荷比、二级质谱裂解碎片等信息结合对照品的比对和文献数据进行化合物解析。共鉴定得出152个化合物,包括有机酸类32个,黄酮及其苷类35个,二萜类33个,苯酞类13个,三萜及三萜皂苷类12个,含氮类23个以及其他类4个,并分析其裂解规律。利用SwissTargetPrediction、GeneCards、DAVID等数据库对川蛭通络胶囊发挥药效作用的核心靶点及作用机制进行预测分析,PPI网络拓扑分析得到TNF、VEGFA、EGFR、IL1B、CTNNB1等10个核心靶点,KEGG富集显示川蛭通络胶囊主要通过调控脂质和动脉粥样硬化、癌症中的糖聚蛋白、癌症中的microRNAs、流体剪切应力和动脉粥样硬化等通路发挥作用。对关键成分与核心靶点进行分子对接,分子对接结果显示川蛭通络胶囊关键成分与核心靶点初步展现出较强的结合能力。该研究阐明了川蛭通络胶囊中的化学成分,同时结合网络药理学探究川蛭通络胶囊治疗脑梗死的核心靶点及作用机制,为川蛭通络胶囊的药效物质基础研究及其制剂质量标准制定提供科学参考。

关键词：川蛭通络胶囊 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS 化学成分网络药理学

川蛭通络胶囊减轻光化学卒中小鼠脑损伤作用机制的研究

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川蛭通络胶囊减轻光化学卒中小鼠脑损伤作用机制的研究

作者：汪青青青岛大学

学位级别：硕士

研究目的:川蛭通络胶囊(Chuanzhitongluo capsule,CZTL)是一种中药混合制剂,有效成分包括水蛭、川芎、丹参以及黄芪。临床上,CZTL目前用于急性缺血性脑卒中患者的恢复期,从而可有效减轻缺血性脑卒中患者的神经功能缺损。在本次研究中,... 详细信息

研究目的:川蛭通络胶囊(Chuanzhitongluo capsule,CZTL)是一种中药混合制剂,有效成分包括水蛭、川芎、丹参以及黄芪。临床上,CZTL目前用于急性缺血性脑卒中患者的恢复期,从而可有效减轻缺血性脑卒中患者的神经功能缺损。在本次研究中,我们的宗旨是评估CZTL是否能够调节急性缺血性脑卒中急性期的小胶质细胞极化和炎症反应,从而可以减少急性期的脑损害,进而为CZTL治疗急性缺血性脑卒中患者提供实验数据和理论基础。研究方法:采用光化学血栓法制备急性缺血性脑卒中的小鼠模型。成功制备光化学卒中小鼠后,将卒中小鼠随机分为CZTL组和对照组。CZTL组小鼠进行不同的药物浓度(30mg/Kg,50 mg/Kg,70 mg/Kg,90 mg/Kg,110 mg/Kg,130mg/Kg)干预,对照组小鼠口服等体积的0.9%氯化钠溶液,干预频次为每天2次,连续3天。完成3天的CZTL药物干预后,通过改良的神经损伤严重程度评分(Modified Neurological Severity Scores,m NSS)进行小鼠神经功能的评估。利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色分析光化学卒中小鼠脑梗死体积变化趋势。使用末端脱氧核苷酸转移酶d UTP缺口末端标记(Terminal deoxynucleotidyl transferase d UTP nick end labeling,TUNEL)法评估神经元细胞的凋亡。通过基因芯片技术探索卒中小鼠基因表达谱的变化。利用蛋白芯片技术进一步分析炎症因子的变化趋势。利用试剂盒测定超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的水平。通过蛋白质印迹(Western blotting)评估NLRP3炎性小体的表达水平。利用免疫荧光双标记法检测脑缺血半暗带区CD16/Iba1和CD206/Iba1的共表达。采用体外实验进一步评估小鼠小胶质细胞系(Murine microglia cell lines,BV2cells)的极化。研究结果:与对照相比,CZTL可减轻急性缺血性脑卒中小鼠的神经功能损伤(6.5±0.62 vs.3.93±0.5;P<0.01),减少了脑梗死的体积(77.03±6.45 vs.51.5±2.78;P<0.01),抑制了神经元细胞的凋亡(69.29±3.11 vs.51.72±1.73;P<0.01)。CZTL对卒中小鼠的炎症相关基因在RNA水平上表达上存在差异,这提示CZTL可能参与了神经炎症反应的调节。CZTL通过下调促炎症细胞因子的表达,增强抗炎细胞因子的水平来抑制神经炎症反应。CZTL降低了MDA的表达水平(2.67±0.14vs.2.26±0.14;P<0.01)而增加了SOD的活性(45.6±0.51 vs.60.01±2.29;P<0.01),这表明CZTL可以抑制急性缺血性脑卒中小鼠的氧化应激损害。进一步的实验研究表明,CZTL抑制了NLRP3炎症小体的激活(0.85±0.05 vs.0.64±0.07;P<0.05),进一步减轻了炎症反应。另一方面,CZTL还促进了小胶质细胞从促炎作用的M1表型向抗炎作用的M2表型的转化。研究结论:CZTL可能通过调节小胶质细胞的极化和抑制神经炎症反应而发挥脑保护作用。

关键词：川蛭通络胶囊急性缺血性脑卒中小胶质细胞炎症反应