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川椒方含药血清对大鼠嗜碱性白血病细胞脱颗粒的影响

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中医杂志 2015年第5期56卷 427-430页

作者：沈志华宋剑涛尹连荣张丽霞接传红杨薇高健生中国中医科学院眼科医院

目的探讨川椒方治疗变态反应性结膜炎的可能作用机制。方法 SD大鼠20只,随机分为川椒方低、中、高剂量含药血清组和空白血清组,每组5只。川椒方低、中、高含药血清组分别以含川椒方生药0.334、0.668、1.336 g/ml的水煎剂20 ml/kg灌胃,... 详细信息

目的探讨川椒方治疗变态反应性结膜炎的可能作用机制。方法 SD大鼠20只,随机分为川椒方低、中、高剂量含药血清组和空白血清组,每组5只。川椒方低、中、高含药血清组分别以含川椒方生药0.334、0.668、1.336 g/ml的水煎剂20 ml/kg灌胃,空白血清组给予相同剂量的生理盐水灌胃,每日2次,连续给药3日,制备SD大鼠含药血清。筛选不同浓度含药血清对大鼠嗜碱性白血病细胞(RBL-2H3)的最佳作用浓度,并筛选含药血清最佳作用时间。实验再分为模型组、川椒方治疗高、中、低剂量组、酪氨酸激酶抑制剂(PP2)治疗组、对照组。川椒方高、中、低剂量含药血清组按筛选所得浓度和作用时间每孔分别给予含药血清40μl;PP2治疗组于加抗原前30 min给予终浓度为1μM的PP2 40μl;对照组于加抗原前2 h给予10%空白血清40μl,酶联免疫吸附(ELISA)法检测β-氨基己糖苷酶释放率。结果川椒方浓度为10%时细胞活力较好,故本实验选择了10%浓度血清作为实验浓度。川椒方高、中剂量组含药血清作用120 min时,释放量最少(P川椒方各剂量组及PP2治疗组β-氨基己糖苷酶释放率下降(P川椒方治疗变态反应性结膜炎的作用机制可能与抑制肥大细胞脱颗粒有关。

关键词：川椒方变态反应性结膜炎肥大细胞脱颗粒免疫球蛋白G

川椒方对小鼠变应性结膜炎肥大细胞脱颗粒的影响

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中国实验方剂学杂志 2014年第9期20卷 190-194页

作者：沈志华宋剑涛接传红吴正正尹连荣张丽霞高健生中国中医科学院眼科医院北京100040

目的:观察川椒方对小鼠变应性结膜炎肥大细胞脱颗粒的影响。方法:将68只Balb/c小鼠随机分为6组,即正常组8只,模型组(不给药)、阴性对照组(生理盐水ig)、川椒方水煎剂低、中、高剂量组(5.25,10.5,21.0 g·kg-1,ig,每天1次,ig体积均为10 m... 详细信息

目的:观察川椒方对小鼠变应性结膜炎肥大细胞脱颗粒的影响。方法:将68只Balb/c小鼠随机分为6组,即正常组8只,模型组(不给药)、阴性对照组(生理盐水ig)、川椒方水煎剂低、中、高剂量组(5.25,10.5,21.0 g·kg-1,ig,每天1次,ig体积均为10 mL·kg-1),每组各12只。用鸡卵清白蛋白免疫小鼠建立变应性结膜炎模型。ELISA检测小鼠血清中前列腺素D2(PGD2)、组胺(HIS)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平,RT-PCR观察结膜组织中白介素-4(IL-4)和TNF-α的表达。结果:与正常组相比,模型组和阴性对照组结膜肥大细胞聚集,脱颗粒明显(P川椒方各组结膜组织中肥大细胞数量减少,脱颗粒率下降(P川椒方能够治疗变应性结膜炎,其作用机制可能是通过稳定肥大细胞,抑制其脱颗粒。

关键词：川椒方变应性结膜炎鸡卵清白蛋白肥大细胞脱颗粒

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川椒方防治过敏性结膜炎的临床随机对照研究

川椒方防治过敏性结膜炎的临床随机对照研究

作者：孟青青中国中医科学院

学位级别：硕士

目的：评价川椒方治疗过敏性结膜炎和预防其复发的有效性和安全性,为川椒方防治过敏性结膜炎的临床推广应用提供科学依据。方法：本研究分为治疗性研究和预防复发研究两部分。治疗性研究：将符合纳入标准的季节性过敏性结膜炎和春季卡... 详细信息

目的：评价川椒方治疗过敏性结膜炎和预防其复发的有效性和安全性,为川椒方防治过敏性结膜炎的临床推广应用提供科学依据。方法：本研究分为治疗性研究和预防复发研究两部分。治疗性研究：将符合纳入标准的季节性过敏性结膜炎和春季卡他性结膜炎患者随机分为两组,即治疗组(口服川椒方)和对照组(点奥洛他定滴眼液),共纳入102例(204只眼),治疗28天,在治疗前及治疗后7天、14天、28天评价眼部症状、体征和眼外过敏症状,统计分析两组疗效,并于治疗前及治疗后28天检测血清P物质和IgE、泪液P物质水平,进行统计分析。预防复发研究：(1)将所有接受治疗的患者随防2年,观察第二年同样发病季节,有无复发及复发后症状、体征;(2)第二年对纳入的患者在复发前7天分别给予川椒方和奥洛他定滴眼液,连续用药14天,定期随访并记录有无复发及复发后症状、体征,统计分析复发情况。结果：1.治疗性研究： (1)基线情况：两组一般情况及治疗前病情程度比较均无明显差异(p>0.05)。 (2)眼部症状、体征改善比较：同组不同时间点的比较：两组治疗后眼部症状、体征评分随时间呈下降趋势,比较差异具有统计学意义(p0.05)。眼部体征评分比较,治疗后2周、4周两组比较差异具有统计学意义(均P0.05)。 (3)眼部总积分(症状和体征)比较：治疗后2周、4周两组比较差异具有统计学意义(均P0.05)。 (4)眼部总疗效比较：治疗后1周、2周、4周两组总疗效比较差异均具有统计学意义(均p0.05)。治疗后各随防时点,两组比较差异具有显著性(均p0.05)。 2.预防复发研究： (1)第二年未提前用药：治疗组复发率61.1%,对照组复发率88%,两组比较差异具有统计学意义(p0.05)。治疗组复发率55.6%,对照组复发率53.8%,两组比较差异无统计学意义(p=0.776)。 3.安全性评价：两组治疗前后眼部及全身均未出现不良反应。结论： 1.川椒方治疗过敏性结膜炎安全、有效,疗效优于奥洛他定滴眼液。 2.川椒方可有效减缓过敏性结膜炎复发的症状、体征,对预防过敏性结膜炎复发有一定作用。 3.川椒方可有效缓解过敏性结膜炎伴发的过敏性鼻炎症状。 4.川椒方和奥洛他定滴眼液均可降低泪液中P物质的水平;川椒方还可以降低血清中的P物质和IgE的水平。

关键词：川椒方过敏性结膜炎奥洛他定滴眼液治疗复发

川椒方的急性经口毒性评价及两种急性毒理实验方法的比较

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川椒方的急性经口毒性评价及两种急性毒理实验方法的比较

作者：李丹玉中国中医科学院

学位级别：硕士

目的:1.对川椒方进行急性经口毒性评价。2.运用传统急毒方法与新型急毒方法分别对治疗过敏性结膜炎有效的川椒方进行急性经口毒性实验研究,以比较这两种方法的毒性分级结果。方法:实验一:1.实验方法的选择:根据预实验最大耐药量实验结果... 详细信息

目的:1.对川椒方进行急性经口毒性评价。2.运用传统急毒方法与新型急毒方法分别对治疗过敏性结膜炎有效的川椒方进行急性经口毒性实验研究,以比较这两种方法的毒性分级结果。方法:实验一:1.实验方法的选择:根据预实验最大耐药量实验结果,决定正式实验为最大给药量实验,24h内经口予小鼠最大浓度川椒方、最大剂量灌胃,随后根据小鼠的14天的生存情况,对川椒方进行急性经口毒性评价,同时计算小鼠对于川椒方的最大给药倍数量。2.分组及给药:将40只体重为20g左右的昆明小鼠,按照随机数字表法,分为川椒方实验组和空白对照组,每组8只,雌雄各半,分别于给药当天6点、12点、18点,给予最大浓度的川椒方水煎液以及等体积的蒸馏水。3.观察指标:以小鼠有无出现死亡为实验结局,同时并记录小鼠情况,例如:皮毛色泽、大小便情况等;记录给药前与给药后14天小鼠的体重情况。4.最大给药倍数:实验结束后,计算最大给药倍数。5.组织病理学观察:在实验观察14天结束后,每组取4只小鼠进行肝肾、眼球进行病理切片以及HE染色,采用HE染色法观察小鼠肝脏、肾脏、眼球各层组织病理学改变。同时取8张肝肾、眼球切片,于X40倍光学显微镜下拍摄图像。6.急性经口毒性等级判定:根据实验结果,依据急性毒性估计值(Acute Toxicity Estimate,ATE)和急性毒性危险GHS分类标准,对川椒方进行急性经口毒性分级。实验二1.实验方法的选择:采用固定剂量法,预实验需在24h内,经口给予小鼠川椒方,在口服用量5mg/kg,50mg/kg,500mg/kg和2000mg/kg中选择一个作为起始剂量灌胃,根据预实验摸索正式实验剂量,通过小鼠的14天的毒性反应情况,对川椒方进行急性经口毒性评价。2.分组及给药:正式实验用随机数字表法,取5只小鼠,空腹经口灌胃川椒方水煎液成人剂量2000mg/kg,无需对照组。3.观察指标:以小鼠出现毒性反应为结局指标,并记录小鼠情况例如:皮毛色泽、大小便情况等,记录给药前与给药后14天小鼠的体重情况。4.本次研究目的之一为比较新旧两种急毒方法结果,因此在实验二结束后,对小鼠进行了人道主义处死,取小鼠肝肾、眼球组织进行观察。5.病理学观察:实验观察14天结束后,处死小鼠,进行肝肾、眼球进行病理切片以及HE染色,采用HE染色法观察小鼠肝脏、肾脏、眼球各层组织病理学改变。于X40倍光学显微镜下拍摄图像。5.急性经口毒性等级判定:根据实验结果,依据急性毒性估计值(Acute Toxicity Estimate,ATE)和急性毒性危险GHS分类标准,将川椒方进行急性经口毒性分级。结果:实验一:1.小鼠生存情况:实验观察14天结束后,各剂量组小鼠均未出现死亡。实验观察期第1天见实验组小鼠出现稀软便,观察期第2天至观察期第14d结束,实验组小鼠排便未见异常。其余观察指标未见异常。2.体重变化情况:所有小鼠于实验当天、给药后14天称重,结果显示川椒方实验组与空白对照组雌性小鼠、雄性小鼠体重均有增加,属生理范围,两组小鼠组间于给药0天、14天体重变化差异均无统计学意义(P>0.05)。3.最大给药倍数:川椒方水煎液最大浓度7.37g/ml,最大容积0.4ml/10g灌胃,一天之内3次灌胃,即一天给药量为884.4g(生药)/kg,为临床成人每日推荐用药量(1.37g/kg)的646倍。4.组织病理学:小鼠剖检后未发现脏器的质地、形态、体积及颜色等有异常变化。(1)肝脏组织:川椒方实验组与空白对照组小鼠的肝脏病理切片镜下表现为肝细胞水肿(水样变性),弥漫性,未见其他病变。(2)肾脏组织:川椒方实验组雌性小鼠肾脏切片镜下可见部分肾小球内蛋白沉积,表现为红色均染的圆形小滴,但雄性动物表现不明显。空白对照组未见异常。(3)眼球组织:川椒方实验组与空白对照组小鼠眼球各结构均未见异常。实验二:1.小鼠生存情况:实验观察14天结束后,实验组小鼠均未出现死亡,观察指标未见异常。2.体重变化情况:所有小鼠于实验当天、给药后14天称重,结果显示每只小鼠体重均有增加,属生理范围。3.组织病理学:小鼠剖检后未发现脏器的质地、形态、体积及颜色等有异常变化。(1)肝脏组织:FDP正式实验组各小鼠的肝脏病理切片镜下表现为肝细胞水肿(水样变性),弥漫性,未见其他病变。(2)肾脏组织:FDP正式实验组的2只雄性小鼠的肾脏病理切片镜下未见异常,3只雌性小鼠见不同程度的肾小球内蛋白沉积、肾小管肿胀。(3)眼球组织:FDP正式各小鼠眼球各结构均未见异常。结论:(1)川椒方的急性经口毒性较低,较为安全。(2)最大给药量方法与固定剂量法可得到相同的毒性分级,且后者可节省实验成本,保护实验动物福利。

关键词：川椒方过敏性结膜炎时复目痒急性经口毒性实验最大给药量固定剂量法动物保护

川椒方对过敏性结膜炎小鼠IL4-JAK1-STAT6信号通路的影响

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中国中医眼科杂志 2013年第4期23卷 240-243页

作者：宋剑涛沈志华高健生杨薇中国中医科学院眼科医院北京100040

目的观察川椒方对过敏性结膜炎小鼠IL 4-JAK1-STAT6信号通路的影响。方法用卵清蛋白免疫小鼠建立过敏性结膜炎模型,随机分为高、中、低剂量川椒方组、阳性药奥洛他定滴眼液组、模型组,另以健康小鼠作为空白对照组。川椒方各剂量组给予... 详细信息

目的观察川椒方对过敏性结膜炎小鼠IL 4-JAK1-STAT6信号通路的影响。方法用卵清蛋白免疫小鼠建立过敏性结膜炎模型,随机分为高、中、低剂量川椒方组、阳性药奥洛他定滴眼液组、模型组,另以健康小鼠作为空白对照组。川椒方各剂量组给予不同浓度的川椒方水煎剂灌胃,奥洛他定滴眼液组予盐酸奥洛他定滴眼液点眼,各组均治疗7 d。观察各组动物眼睑和结膜充血水肿、分泌物情况并做评分,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清IL 4、JAK1、STAT6含量。结果各剂量川椒方均能减轻动物眼睑和结膜水肿、充血。模型组的体征评分均值最高,明显高于空白对照组(P川椒方各剂量组的体征评分均较模型组降低(P川椒方剂量组体征评分均值与奥洛他定滴眼液组结果接近(P>0.05)。川椒方高、中、低剂量组及奥洛他定滴眼液组的血清IL 4、JAK1、STAT6含量均低于模型组(P川椒方高、中、低剂量组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论川椒方能减轻过敏性结膜炎小鼠的眼部体征,并可能抑制IL4-JAK1-STAT6信号通路的激活。

关键词：川椒方过敏性结膜炎小鼠 IL4-JAK1-STAT6信号通路

川椒方和奥洛他定滴眼液治疗过敏性结膜炎的疗效观察

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中国中医眼科杂志 2013年第6期23卷 398-402页

作者：孟青青高健生接传红杨薇赵丹丹郭欣璐许超严京吴正正任燕如陈子燕宋剑涛中国中医科学院眼科医院北京100040

目的研究比较川椒方和奥洛他定滴眼液治疗过敏性结膜炎的疗效。方法将102例过敏性结膜炎患者(包括季节性和春季卡他性),随机分为2组。治疗组口服川椒方,每日1剂;对照组予奥洛他定滴眼液点眼,每日2次。分别于治疗前、治疗后1周、2周、4... 详细信息

目的研究比较川椒方和奥洛他定滴眼液治疗过敏性结膜炎的疗效。方法将102例过敏性结膜炎患者(包括季节性和春季卡他性),随机分为2组。治疗组口服川椒方,每日1剂;对照组予奥洛他定滴眼液点眼,每日2次。分别于治疗前、治疗后1周、2周、4周随防,评估眼部症状、体征及眼外过敏症状(鼻部症状)。结果基线情况:2组一般情况及治疗前病情程度比较均无明显差异(P>0.05)。组内比较:2组治疗后眼部症状、体征评分随时间呈下降趋势,比较差异具有统计学意义(P0.05),治疗2周、4周后,治疗组眼部总体改善优于对照组(P0.05)。治疗后各随防时点,2组比较差异具有统计学意义(P川椒方治疗过敏性结膜炎安全、有效,疗效优于奥洛他定滴眼液;川椒方可有效缓解过敏性结膜炎伴发的过敏性鼻炎症状。

关键词：川椒方奥洛他定滴眼液过敏性结膜炎

川椒方含药血清对RBL-2H3细胞IL-4、TNF-α的影响

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中国中医眼科杂志 2017年第3期27卷 154-157页

作者：沈志华宋剑涛接传红尹连荣张丽霞吴正正高健生深圳市眼科医院深圳眼科学重点实验室深圳大学眼视光学院深圳518040 中国中医科学院眼科医院北京100040

目的探讨川椒方治疗变态反应性结膜炎可能的作用机制。方法实验分为空白组、模型组、阴性对照组、阳性对照组(酪氨酸激酶抑制剂,PP2)、川椒方治疗高、中、低剂量组共7组,观察川椒方含药血清对大鼠嗜碱性白血病细胞(rat basophilic leuke... 详细信息

目的探讨川椒方治疗变态反应性结膜炎可能的作用机制。方法实验分为空白组、模型组、阴性对照组、阳性对照组(酪氨酸激酶抑制剂,PP2)、川椒方治疗高、中、低剂量组共7组,观察川椒方含药血清对大鼠嗜碱性白血病细胞(rat basophilic leukemia,RBL-2H3)白介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。川椒方高、中、低剂量含药血清组按筛选所得浓度和作用时间每孔分别给予含药血清40μL;PP2组于加抗原前30 min给予终浓度为1μM的PP2 40μL;阴性对照组于加抗原前2h给予10%空白血清40μL,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中IL-4、TNF-α的分泌量,Real-Time PCR检测IL-4、TNF-α mRNA的表达。结果与空白组相比,模型组和阴性对照组肥大细胞脱颗粒明显(P川椒方各浓度组和PP2组肥大细胞脱颗粒现象明显抑制(P川椒方抑制肥大细胞脱颗粒作用与浓度呈正相关。结论稳定肥大细胞,抑制其脱颗粒,减少炎症因子释放可能是川椒方治疗变应性结膜炎的作用机制。

关键词：川椒方变态反应性结膜炎大鼠嗜碱性白血病细胞白介素4 肿瘤坏死因子α

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川椒方对小鼠变态反应性结膜炎P物质的影响

中国中医眼科杂志 2015年第2期25卷 87-90页

作者：沈志华宋剑涛杨薇高健生中国中医科学院眼科医院北京100040

目的观察川椒方对小鼠变态反应性结膜炎P物质(SP)的影响。方法将72只Balb/c小鼠随机分为6组,即正常组,模型组(给予等体积的生理盐水灌胃)、阳性药物组(给予0.1%奥洛他定滴眼液点眼)、川椒方水煎剂低、中、高剂量组(分别给予川椒方5.25,1... 详细信息

目的观察川椒方对小鼠变态反应性结膜炎P物质(SP)的影响。方法将72只Balb/c小鼠随机分为6组,即正常组,模型组(给予等体积的生理盐水灌胃)、阳性药物组(给予0.1%奥洛他定滴眼液点眼)、川椒方水煎剂低、中、高剂量组(分别给予川椒方5.25,10.5,21.0 g·kg^(-1)灌胃,每日1次,灌胃体积均为10ml·kg^(-1)),每组各12只。用鸡卵清白蛋白免疫小鼠建立变态反应性结膜炎模型。HE染色,行结膜嗜酸性粒细胞计数,ELISA检测小鼠血清中SP的表达水平,免疫组织化学法观察结膜组织中SP的表达。结果与正常组相比,模型组血清中SP表达明显升高(P川椒方各组血清中SP的表达显著降低(P川椒方治疗变态反应性结膜炎的作用机制可能是通过抑制P物质的表达。

关键词：川椒方变应性结膜炎鸡卵清白蛋白 P物质

川椒方对眼结膜炎患者泪液中P物质及血清IgE水平的影响

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四川中医 2016年第6期34卷 131-133页

作者：刘艳琳菏泽市中医医院山东菏泽274036

目的:观察川椒方对眼结膜炎患者泪液中P物质及血清IgE水平的影响。方法:随机双盲法将96例眼结膜炎患者分为2组各48例,对照组采取单纯色甘酸钠滴眼液滴眼治疗,观察组在对照组基础上加以川椒方治疗,比较2组临床疗效、治疗前后症状及体征... 详细信息

目的:观察川椒方对眼结膜炎患者泪液中P物质及血清IgE水平的影响。方法:随机双盲法将96例眼结膜炎患者分为2组各48例,对照组采取单纯色甘酸钠滴眼液滴眼治疗,观察组在对照组基础上加以川椒方治疗,比较2组临床疗效、治疗前后症状及体征积分、泪液中P物质及血清IgE水平。结果:观察组总有效率100.0%显著高于对照组的87.5%(P0.05)。结论:川椒方治疗过敏性结膜炎疗效明确,能显著降低泪液P物质及血清IgE水平。

关键词：川椒方眼结膜炎泪液P物质血清IgE