检索结果-南通市图书馆

嵌合抗原受体t细胞经不同给药途径对小鼠心肌梗死后心律失常的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床医学 2024年第4期31卷 612-618页

作者：张源欣杨蒲媛付芃翰孔祥萌杨选明张庆勇上海交通大学医学院附属第九人民医院心内科上海200011 上海交通大学生命科学技术学院上海200240

目的探究嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)t细胞对心肌梗死的治疗作用,并观察不同给药途径对CAR-t细胞心脏毒性的影响。方法将成功建立心肌梗死模型的24只SCID Beige免疫缺陷小鼠随机均分为Hank’s平衡盐溶液(HBSS)组、CAR-... 详细信息

目的探究嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)t细胞对心肌梗死的治疗作用,并观察不同给药途径对CAR-t细胞心脏毒性的影响。方法将成功建立心肌梗死模型的24只SCID Beige免疫缺陷小鼠随机均分为Hank’s平衡盐溶液(HBSS)组、CAR-tIM组、CAR-tIV组及CAR-tIMIV组(均n=6),另设Sham组(n=6)。Sham组、HBSS组、CAR-tIM组和CAR-tIMIV组于造模后第7天,心肌局部注射HBSS或CAR-t细胞;Sham组、HBSS组、CAR-tIV组和CAR-tIMIV组于造模后第7天、第14天,尾静脉注射HBSS或CAR-t细胞。造模28 d后,观察小鼠电生理指标,并对心肌组织进行Masson染色,计算心肌梗死面积。结果与Sham组相比,HBSS组心肌梗死面积显著增加(Pt细胞治疗组的心肌梗死面积均显著缩小(均PtIV组与CAR-tIM组间心肌梗死的治疗效果和心律失常发生率无显著差异;CAR-tIMIV组较CAR-tIV组,心肌梗死面积显著降低(Pt细胞可有效降低心肌梗死面积,但增加心律失常发生率,其机制有待进一步研究。

关键词：嵌合抗原受体t 心肌梗死心律失常心肌注射静脉注射

嵌合抗原受体t细胞治疗原发性肿瘤的优势与研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

天津医药 2016年第2期44卷 253-256页

作者：张巍闫丹丹高莉邵明亮闫会敏石家庄市第五医院研究所 050021 河北师范大学

嵌合抗原受体(Car)t细胞因不仅具有较强特异性识别肿瘤抗原的特性,还具有杀伤性、亲和力高等优点,因而受到较多的关注。尽管其在抗肿瘤方面发挥了很多优势,但是仍存在不足之处,需要进一步优化来提高其临床应用的安全性。本研究对Car t... 详细信息

嵌合抗原受体(Car)t细胞因不仅具有较强特异性识别肿瘤抗原的特性,还具有杀伤性、亲和力高等优点,因而受到较多的关注。尽管其在抗肿瘤方面发挥了很多优势,但是仍存在不足之处,需要进一步优化来提高其临床应用的安全性。本研究对Car t细胞结构及其生物功能、治疗流程、应用进展以及应用风险进行综述,为进一步在临床开展Car t免疫治疗提供参考。

关键词：嵌合抗原受体t 细胞治疗肿瘤综述

嵌合抗原受体t细胞治疗产品生产工艺控制及质量管理关注点探讨

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海医药 2022年第11期43卷 8-10,63页

作者：刘芬孙程洁王冲上海药品审评核查中心上海201210

嵌合抗原受体t细胞(chimeric antigen receptor t cell,CAR-t)治疗产品的上市为恶性肿瘤治疗提供了新手段。能否持续生产高质量的CAR-t治疗产品对CAR-t治疗的成功至关重要。本文论述CAR-t治疗产品生产工艺控制及质量管理中应予以特别关... 详细信息

嵌合抗原受体t细胞(chimeric antigen receptor t cell,CAR-t)治疗产品的上市为恶性肿瘤治疗提供了新手段。能否持续生产高质量的CAR-t治疗产品对CAR-t治疗的成功至关重要。本文论述CAR-t治疗产品生产工艺控制及质量管理中应予以特别关注的几个要点,以期为该类产品质量的持续改进和监管机构的监管提供参考。

关键词：嵌合抗原受体t 细胞细胞治疗产品生产工艺质量管理

浅论嵌合抗原受体t细胞治疗产品的防混淆、防污染挑战

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海医药 2022年第11期43卷 11-13页

作者：丁力承金德庄李香玉上海药品审评核查中心上海201203

嵌合抗原受体t细胞治疗产品的上市,标志着个体化治疗进入了一个新阶段。但因该类产品生产工艺复杂,相关产业链尚未真正成熟,而此产业现又处在快速发展的上升阶段,整个业界存在一定的人才缺口,对产品上市后的质量管理和监管提出了挑战。... 详细信息

嵌合抗原受体t细胞治疗产品的上市,标志着个体化治疗进入了一个新阶段。但因该类产品生产工艺复杂,相关产业链尚未真正成熟,而此产业现又处在快速发展的上升阶段,整个业界存在一定的人才缺口,对产品上市后的质量管理和监管提出了挑战。本文从嵌合抗原受体t细胞治疗产品的特点出发,分析该类产品在防混淆、防污染方面面临的问题,以期业界加强质量管理,确保产品质量和安全。

关键词：嵌合抗原受体t 细胞质量管理药品监管

建立CAR-t细胞治疗产品质量控制检测方法及其定量参考品的数字PCR方法研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国新药杂志 2021年第24期30卷 2306-2314页

作者：豆敏华朱冰美宗伟英吴晓双杨志行中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心湖州313000 湖州申科生物技术有限公司湖州313000

目的:本研究建立嵌合抗原受体t(CAR-t)细胞治疗产品质量控制中猿猴病毒40大t抗原(SV40LtA),腺病毒早期区域1A蛋白(E1A)和质粒残留水平的荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法,同时采用微流控芯片式数字PCR技术对质粒定量参考品进行赋值... 详细信息

目的:本研究建立嵌合抗原受体t(CAR-t)细胞治疗产品质量控制中猿猴病毒40大t抗原(SV40LtA),腺病毒早期区域1A蛋白(E1A)和质粒残留水平的荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法,同时采用微流控芯片式数字PCR技术对质粒定量参考品进行赋值。方法:通过建立多重荧光定量PCR的方法,在一个反应中同时检测SV40LtA和E1A的残留水平。针对目前慢病毒等包装技术存在多种质粒组合系统(如四质粒和五质粒),对质粒的残留检测标准难以统一,本研究从同源性很高的复制子区域入手,设计和筛选引物探针,能同时检测多种不同质粒的总体残留水平。建立数字PCR技术分别对SV40LtA和E1A的质粒定量参考品拷贝数浓度标定方法进行方法学验证和赋值。结果:SV40LtA和E1A双重定量PCR方法的特异性好,最低定量限分别达到2.80×10和2.98×10 copies·μL^(-1)。质粒残留检测法的最低定量限可达到2.80×10 copies·μL^(-1)。通过采用目前快速发展的数字PCR技术进行赋值,经典吸光度法计算质粒定量参考品SV40LtA和E1A的拷贝数浓度为2.80×10^(8)和2.98×10^(8) copies·μL^(-1);经数字PCR标定分别为1.06×10^(8)和1.21×10^(8) copies·μL^(-1)。结论:本研究建立的SV40LtA,E1A和质粒检测方法灵敏度较高、特异性强,能满足CAR-t细胞治疗产品的质量控制要求。经典的吸光度法定值的结果大于数字PCR方法,大约有2倍左右的差别。

关键词：嵌合抗原受体t 细胞治疗猿猴病毒40大t抗原腺病毒早期区域1A蛋白质粒残留数字聚合酶链式反应

靶向c-Met/CD47 CAR-t细胞对卵巢癌细胞的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药物警戒 2024年第10期21卷 1103-1112页

作者：王如梦斯琴巴彦淖尔市医院中心实验室内蒙古巴彦淖尔015000 内蒙古自治区肿瘤医院妇瘤科内蒙古呼和浩特010059

目的体外研究敲减间充质上皮转化因子(c-Met)的表达对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡等影响,制备靶向c-Met的嵌合抗原受体t(CAR-t)并观察对卵巢癌细胞的杀伤效能。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Rt-qPCR)、蛋白质印迹(WB)检测... 详细信息

目的体外研究敲减间充质上皮转化因子(c-Met)的表达对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡等影响,制备靶向c-Met的嵌合抗原受体t(CAR-t)并观察对卵巢癌细胞的杀伤效能。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Rt-qPCR)、蛋白质印迹(WB)检测卵巢癌细胞系c-Met的表达情况;转染敲减c-Met,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、细胞克隆检测细胞增殖情况;细胞侵袭(transwell)、细胞划痕检测细胞侵袭、迁移能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡情况及慢病毒感染细胞的阳性率;CCK-8检测CAR-t细胞在靶细胞刺激下的增殖能力;乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞的杀伤率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)的释放情况。建立裸鼠皮下移植瘤模型,注射t、CAR-t、c-Met CAR-t、c-Met/CD47 CAR-t效应细胞组,测肿瘤重量,苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化,研究CAR-t细胞对卵巢癌的治疗作用。结果显示SKOV3细胞系c-Met表达量高;与对照组相比,敲减c-Met组细胞增殖、侵袭、迁移能力降低及凋亡率增加;G1、S期降低,G2期增加;流式细胞术检测显示CAR-t、c-Met CAR-t、c-Met/CD47 CAR-t细胞的感染效率分别为97.42%、97.39%、97.35%;CCK-8检测显示c-Met/CD47 CAR-t细胞对靶细胞的增殖潜力显著增强;LDH检测显示c-Met/CD47 CAR-t细胞对靶细胞的杀伤率显著增加;ELISA检测表明SKOV3诱导c-Met/CD47 CAR-t细胞释放更多的IFN-γ和IL-2;皮下注射SKOV3细胞时c-Met/CD47 CAR-t细胞组裸鼠移植瘤重量小于t、CAR-t、c-Met CAR-t细胞组;HE结果显示各细胞治疗组中组织器官均未见生理结构破坏;免疫组化结果显示c-Met/CD47 CAR-t细胞组中c-Met阳性着色较弱。结论c-Met/CD47可作为CAR-t细胞治疗卵巢癌的分子靶点,并能够对c-Met表达越高的卵巢癌细胞靶向识别、杀伤能力越强,同时更能提高增殖能力和细胞因子释放水平。

关键词：卵巢癌间充质上皮转化因子间充质上皮转化因子/分化簇嵌合抗原受体t 靶向细胞

酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼调节CAR-t细胞功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼调节CAR-T细胞功能研究

作者：王琳玲重庆理工大学

学位级别：硕士

癌症是威胁人类健康的主要危害之一。近年来,靶向CD19的嵌合抗原受体t细胞疗法（CAR-t）在血液系统肿瘤治疗中显现出卓越的治疗效果,已被FDA批准用于治疗B细胞恶性肿瘤。然而,将这一治疗策略向实体肿瘤转化的效果不佳,这与实体肿瘤复杂... 详细信息

癌症是威胁人类健康的主要危害之一。近年来,靶向CD19的嵌合抗原受体t细胞疗法（CAR-t）在血液系统肿瘤治疗中显现出卓越的治疗效果,已被FDA批准用于治疗B细胞恶性肿瘤。然而,将这一治疗策略向实体肿瘤转化的效果不佳,这与实体肿瘤复杂的肿瘤微环境和CAR-t细胞的分化耗竭有关。已有研究发现CAR强直性信号诱导细胞自我激活引发细胞分化和耗竭,通过优化CAR-t细胞培养方案提升记忆t细胞比例逆转细胞衰竭是延长CAR-t细胞体内存续和提升临床疗效的重要策略。酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼可逆地抑制tCR和CAR-t信号传导,通过药理开关作用调控CAR-t细胞功能,我们的研究发现达沙替尼在靶向CEA的CAR-t细胞培养中具有提升记忆细胞比例下调免疫抑制表型的功能。因此,本论文基于靶向CEA的CAR-t细胞,研究了达沙替尼在调节CAR-t细胞功能上的作用,并确认了其最佳作用浓度及使用周期,为CAR-t细胞治疗产品生产工艺改进及提升实体肿瘤的治疗效果提供新的策略。研究目的:本论文旨在探究酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼对靶向CEA的CAR-t细胞的调节作用,研究不同作用浓度和使用周期对CAR-t细胞活力、生长状态、记忆细胞亚群和免疫抑制表型的影响。进一步评估经达沙替尼处理后的CAR-t细胞对表达CEA肿瘤细胞系的杀伤作用和CEA抗原刺激的反应,筛选并优化CAR-t细胞培养方案中达沙替尼的最佳使用浓度和作用时间。通过小鼠模型确认达沙替尼在提升CAR-t细胞治疗CEA阳性实体肿瘤中的作用。研究内容和方法:（1）测试达沙替尼抑制CAR-t细胞肿瘤杀伤功能的可逆性基于RtCA实时无标记细胞分析系统,测试不同浓度的达沙替尼对CAR-t细胞体外杀伤CEA肿瘤细胞功能的影响以及撤除后CAR-t细胞的功能改善,确定达沙替尼抑制CAR-t细胞功能的可逆性。（2）确定达沙替尼用于CAR-t细胞培养的最佳浓度通过在靶向CEA CAR-t细胞培养时加入不同浓度的达沙替尼,研究CAR-t细胞增殖、活力和功能的影响。通过流式细胞术检测CAR-t细胞记忆表型和免疫抑制指标的差异,确定达沙替尼的最优使用浓度。（3）研究达沙替尼不同作用时间对CAR-t细胞生长和表型的影响在靶向CEA CAR-t细胞培养不同时间加入达沙替尼,监测其不同作用时间对CAR-t细胞生长和活率的影响。流式细胞术检测细胞表型和冻存复苏后凋亡,研究达沙替尼在抑制CAR强直性信号诱导的细胞分化耗竭和提升细胞抗冻性上的作用。（4）研究达沙替尼不同作用时间对CAR-t细胞抗原刺激和体外功能的影响基于RtCA实时无标记细胞分析系统,评估达沙替尼不同作用时间对CAR-t细胞体外杀伤功能的影响,通过监测细胞对CEA抗原刺激的反应性和ELISA的方法检测细胞IFN-γ分泌水平,评估达沙替尼不同作用时间对CAR-t细胞体外功能的调节作用。（5）达沙替尼调节CAR-t细胞体内抗肿瘤功能建立表达CEA-DLD1的小鼠皮下实体肿瘤模型,静脉输注靶向CEA的CAR-t细胞,通过测量肿瘤体积并基于活体成像系统监测肿瘤的治疗效果,研究达沙替尼对CAR-t细胞的体内抗肿瘤功能的调节作用。研究结果:（1）达沙替尼抑制CAR-t细胞杀伤肿瘤能力和因子分泌水平,作用浓度为50n M时撤除达沙替尼可实现CAR-t细胞杀伤功能快速恢复;（2）达沙替尼对CEA-CAR-t细胞增殖和活率的影响具有浓度依耐性。高浓度影响细胞生长和活力,低浓度未观察到细胞毒性和对CAR阳性细胞比例的影响。25n M～100n M浓度的达沙替尼提升tnaive的比例,下调细胞活化指标CD25和免疫抑制表型tIM-3的表达,其中50n M的作用浓度效果最优;（3）达沙替尼调节CAR-t细胞的活率和表型具有时间依耐性。50n M达沙替尼作用3d、6d、9d,均可明显抑制CAR强直性信号导致的细胞过度激活,提高细胞活率;随作用时间延长tnaive的比例明显升高,细胞活化指标CD25和免疫抑制表型tIM-3、LAG-3的比例显著降低;同时达沙替尼增加了CAR-t细胞耐冻性和抗凋亡的能力;（4）达沙替尼调节CAR-t细胞的体外功能具有时间依耐性。与长期作用9d相比,达沙替尼短时间作用3d的CAR-t细胞显示出最优的靶细胞杀伤功能和IFN-γ分泌水平;CEA-Fc抗原刺激结果显示,达沙替尼处理CAR-t细胞3d显示出最优的细胞扩增潜能;（5）在CEA肿瘤的小鼠模型中,达沙替尼提升CAR-t细胞体内抗肿瘤功能,使用5d优于3d和9d。其调节CAR-t细胞的体内功能具有时间依耐性,适中的作用时间提升CAR-t细胞的抗肿瘤功能。结论:酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼通过抑制CAR强直性信号调节CAR-t细胞的表型和功能,逆转CAR-t细胞分化提升tnaive记忆细胞比例,同时下调细胞活化水平和免疫抑制表型

关键词：达沙替尼嵌合抗原受体t 细胞治疗实体肿瘤