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MYCN转基因型斑马鱼系岩藻糖转移酶基因谱表达的研究

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临床输血与检验 2014年第3期16卷 273-276页

作者：花紫菱沈莉菁李丽玮李志强上海交通大学附属第六人民医院 200233 上海交通大学附属仁济医院血液科

目的研究岩藻糖转移酶在髓系白血病的发生与发展中的作用。方法应用实时定量逆转录-聚合酶链反应检测具髓系白血病表型的MYCN转基因型斑马鱼系岩藻糖转移酶基因(DFs)表达。结果 MYCN转基因型斑马鱼系岩藻糖转移酶7/8/9/10/11(DF7/8/9/10... 详细信息

目的研究岩藻糖转移酶在髓系白血病的发生与发展中的作用。方法应用实时定量逆转录-聚合酶链反应检测具髓系白血病表型的MYCN转基因型斑马鱼系岩藻糖转移酶基因(DFs)表达。结果 MYCN转基因型斑马鱼系岩藻糖转移酶7/8/9/10/11(DF7/8/9/10/11)表达量与野生型斑马鱼相比显著改变(t=-32.756、8.405、12.719、34.673、27.113,P岩藻糖转移酶1/2(DF1、2)表达量的差异无统计学意义(t=-1.651、-0.244,P>0.05)。结论在MYCN转基因型斑马鱼系中,岩藻糖转移酶的表达与髓系白血病的发生与发展存在相关性。

关键词：髓系白血病岩藻糖转移酶斑马鱼

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岩藻糖基转移酶在肝癌中的作用

生命的化学 2020年第9期40卷 1564-1570页

作者：徐佳璐庞秀秀燕小梅大连医科大学检验医学院大连116044

肝癌的发病率和死亡率分别位于我国恶性肿瘤的第四位和第二位,严重威胁着人类健康。缺乏有效的治疗靶点以及多药耐药是制约肝癌治疗的关键因素,因此探究肝癌的发病原因、寻找合适的靶点以及耐药根源对肝癌的治疗有重要意义。蛋白质糖基... 详细信息

肝癌的发病率和死亡率分别位于我国恶性肿瘤的第四位和第二位,严重威胁着人类健康。缺乏有效的治疗靶点以及多药耐药是制约肝癌治疗的关键因素,因此探究肝癌的发病原因、寻找合适的靶点以及耐药根源对肝癌的治疗有重要意义。蛋白质糖基化在肝癌的生长、增殖、侵袭、转移等关键进程中发挥了重要作用。其中蛋白质岩藻糖基化形成的关键酶——岩藻糖基转移酶(fucosyltransferases,FUTs)调节的磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidyl inositol 3-kinase/protein kinase B, PI3K/PKB)和Notch等多种信号通路,在肿瘤进展和多药耐药性上有着重要影响,因此岩藻糖基转移酶可能是肝癌治疗的潜在靶点。本文主要阐述了岩藻糖基转移酶在肝癌发生、发展以及多药耐药中的作用。

关键词：糖基化岩藻糖基化岩藻糖转移酶肝癌

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迟缓爱徳华菌FucP蛋白的生物学功能分析

迟缓爱徳华菌FucP蛋白的生物学功能分析

作者：吴佳燕山东农业大学

学位级别：硕士

迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,E.tarda)是一种重要的人畜共患病原菌,特别是感染水生动物。研究发现,肠道是迟缓爱德华菌进入机体的主要途径,迟缓爱德华菌定植肠道可能与肠道中的营养源或肠上皮细胞特性有关。此外,有研究证实岩藻糖... 详细信息

迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,E.tarda)是一种重要的人畜共患病原菌,特别是感染水生动物。研究发现,肠道是迟缓爱德华菌进入机体的主要途径,迟缓爱德华菌定植肠道可能与肠道中的营养源或肠上皮细胞特性有关。此外,有研究证实岩藻糖信号调节FusKR双组分系统,可促进III型分泌系统(T3SS)等毒力因子的转录和表达,在细菌定植宿主细胞及细菌致病性等方面具有重要的作用。因此,我们构建了迟缓爱德华菌野毒株EIB202的fucP基因缺失突变株ΔfucP,通过与迟缓爱德华菌野毒株EIB202进行比较,研究FusKR双组分系统关键基因fucP的功能。本研究利用同源重组的方法成功构建了迟缓爱德华菌fucP基因缺失突变株ΔfucP,并与野毒株EIB202进行了一系列的比较分析研究。试验结果显示,EIB202和ΔfucP菌株在TSB培养基上均为半透明菌落,在SS培养基上均为具有黑色中心点的菌株,表明基因缺失对其基本生物学特性影响很小。L-岩藻糖影响野毒株和突变株的生长试验发现,L-岩藻糖能显著增加迟缓爱德华菌野毒株EIB202和缺失株ΔfucP的生长速度,并且迟缓爱德华菌EIB202的生长速度显著高于ΔfucP菌株(P岩藻糖的α-MEM培养基中的生长速度显著高于不含L-岩藻糖的α-MEM培养基中的生长速度,这表明迟缓爱德华菌fucP基因的缺失并没有显著影响L-岩藻糖的利用。野毒株和突变株感染斑马鱼测定其半数致死量(LD)结果显示,缺失株ΔfucP对斑马鱼LD的值显著高于EIB202,分别为6×10 CFU/鱼和3.4×10 CFU/鱼,表明fucP基因的缺失降低了迟缓爱德华菌的致病性。我们用野毒株和突变株穿透黏蛋白,模拟肠道试验的结果显示,在黏蛋白内添加或不添加L-岩藻糖,EIB202穿透的细菌平均总数均显著高于ΔfucP,表明fucP基因的缺失降低了迟缓爱德华菌的运动性和定植。我们还用野毒株和突变株通过灌胃感染罗非鱼,用PBS作对照组,测定迟缓爱德华菌定植肠道的能力。试验结果显示,罗非鱼感染EIB202后在前肠中定植的迟缓爱德华菌数量在6 h和12 h显著高于ΔfucP;在中肠和后肠中定植的迟缓爱德华菌数量在68 h显著高于ΔfucP;在肠道中定植的迟缓爱德华菌总数在6 h和12 h显著高于ΔfucP的定植细菌总数。表明岩藻糖信号能增强迟缓爱德华菌的运动性和定植能力。岩藻糖信号能激活迟缓爱德华菌FusKR和T3SS的关键基因,我们研究了岩藻糖及FucP对迟缓爱德华菌FusKR和T3SS关键基因的影响。结果显示,用不同浓度L-岩藻糖处理EIB202时,FusKR基因内通透酶基因(fucP),激酶基因(fucK)和调节子基因(fucR)等FusKR信号系统关键基因的mRNA转录水平显著高于无L-岩藻糖(P岩藻糖。并且在T3SS基因内,效应蛋白基因(eseB,eseC,eseD,eseE,eseG),结构蛋白基因(esaB,esaD,esaK,esaL),调节蛋白基因(esrA,esrB,esrC)和伴侣蛋白基因(escA,escB)的mRNA转录水平也均显著高于无L-岩藻糖,特别是加入30m M/L L-岩藻糖。此外,ΔfucP中fucP,fucK和fucR基因的mRNA转录水平分别是EIB202的0倍、0.48倍和0.64倍(P岩藻糖信号调控

关键词：迟缓爱德华菌岩藻糖转移酶 Ⅲ型分泌系统定植罗非鱼细胞因子

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内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用

第二军医大学学报 1996年第5期17卷 421-423页

作者：谢天培吴孟超顾天爵范俊刘彦君王皓王华菁郭亚军第二军医大学长海医院东方肝胆外科研究所肿瘤免疫和基因治疗中心上海医科大学生物化学教研室

目的：研究内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用。方法：采用地高辛标记探针原位杂交的方法，检测了正常肝脏、肝癌组织及癌旁肝组织中内皮细胞选择素（Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ）及其配体合成的关键酶岩藻糖转移酶（Ｆｕｃ－Ｔ）的... 详细信息

目的：研究内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用。方法：采用地高辛标记探针原位杂交的方法，检测了正常肝脏、肝癌组织及癌旁肝组织中内皮细胞选择素（Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ）及其配体合成的关键酶岩藻糖转移酶（Ｆｕｃ－Ｔ）的转录水平。结果：Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ的转录只局限于内皮细胞，且在肝癌及正常肝组织之间没有差别；但Ｆｕｃ－Ｔ的转录水平在肝癌与正常肝组织之间差别明显，表现为多发肝癌中子瘤的水平明显高于母瘤，母瘤明显高于单发肝癌，单发肝癌明显高于癌旁组织，而癌旁组织又明显高于正常肝组织。结论：Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ与其配体的相互粘附，在肝癌的转移中起了重要作用。

关键词：肿瘤转移岩藻糖转移酶内皮细胞选择素肝肿瘤