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植物病理学报 2024年

作者：秦艳红鲁书豪王凤丽刘玉霞文艺高素霞李绍建吴绪金王飞鲁传涛河南省农业科学院植物保护研究所河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

为开展河南省山药病毒种类及遗传变异的系统性研究，通过高通量测序（high-throughput sequencing）和RT-PCR检测疑似病毒病的山药样品188份，结果表明从山药样品中检测出5种病毒：日本山药花叶病毒(Japanese yam mosaic virus, JYMV)... 详细信息

为开展河南省山药病毒种类及遗传变异的系统性研究，通过高通量测序（high-throughput sequencing）和RT-PCR检测疑似病毒病的山药样品188份，结果表明从山药样品中检测出5种病毒：日本山药花叶病毒(Japanese yam mosaic virus, JYMV)、油菜花叶病毒（youcai mosaic virus,YoMV）、山药潜隐病毒（yam latent virus, YLV）、蚕豆萎蔫病毒-2(broad bean wilt virus 2, BBWV-2)和淮山药黄斑花叶病毒（yam yellow spot mosaicvirus,YYSMV）。JYMV、YoMV、YYSMV、BBWV-2和YLV的检出率分别为94.15%、87.23%、68.09%、42.02%和29.79%，其中98.94%的山药样品都存在复合侵染现象。本研究统计188份样品中共有20种复合侵染类型，其中JYMV+YYSMV+YoMV是主要复合侵染类型，检出率是26.60%。序列分析结果表明，YoMV和JYMV较保守，其次是YYSMV,YLV和BBWV2变异较大，遗传进化树分析结果表明本研究获得的分离物与同一地区的分离物亲缘关系较近。同时HTS分析结果表明在山药上检测到其他未明确分类地位的病毒种类，因此后续还需全面系统地对河南省山药病毒的种类开展研究。

关键词：山药病毒病高通量测序病原鉴定复合侵染序列分析

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瑞昌山药病毒病病原鉴定

瑞昌山药病毒病病原鉴定

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中国植物病理学会2016年学术年会

作者：贺哲黄婷秦双林崔朝宇蒋军喜江西农业大学农学院

山药是江西省瑞昌市重要的经济作物之一。近年来,山药病毒病在瑞昌山药种植区发生严重,其症状表现为叶片出现花叶、斑驳,明脉,影响山药正常的光合作用,对瑞昌山药的品质和产量造成很大影响。为了探明瑞昌山药病毒病病原,以便给当地山药... 详细信息

山药是江西省瑞昌市重要的经济作物之一。近年来,山药病毒病在瑞昌山药种植区发生严重,其症状表现为叶片出现花叶、斑驳,明脉,影响山药正常的光合作用,对瑞昌山药的品质和产量造成很大影响。为了探明瑞昌山药病毒病病原,以便给当地山药病毒病发生规律研究和有效防治提供理论依据,采用分子生物学技术对其病原种类进行了鉴定。从瑞昌市高丰、范镇、桂林及白杨4个乡镇的山药种植区中采集获得18个感病叶片样本,提取样本中的总RNA,利用RT-PCR技术,通过马铃薯Y病毒科通用引物,对病毒序列进行PCR扩增,对扩增产物进行割胶回收、序列测定和序列分析。结果表明,这18个分离物与日本山药花叶病毒均具有最高的序列同源性(86%7%),并且在构建的系统发育树上与日本山药花叶病毒共处于一个分支上;根据马铃薯Y病毒属CP同源性80%的种类划分标准,认为瑞昌山药病毒病病原为日本山药花叶病毒(Japanese yam mosaic virus)。18个分离物CP氨基酸序列之间同源性为92.9%9.5%,同源性大小与病害发生地及其与症状类型之间不存在明显的相关性。

关键词：山药病毒病分子鉴定 RT-PCR 日本山药花叶病毒

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瑞昌山药炭疽病菌初步研究及其病毒和线虫病害病原鉴定

瑞昌山药炭疽病菌初步研究及其病毒和线虫病害病原鉴定

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作者：黄婷江西农业大学

学位级别：硕士

山药(Dioscorea opposita Thunb),又名薯蓣,为一年生或多年生薯蓣科薯蓣属藤本植物,兼具食药同源作用,是一种重要的蔬菜作物,深受广大人们的喜爱。瑞昌山药是江西省瑞昌市的特色经济作物,然而近年来山药病害的发生日益严重,给该地山药... 详细信息

山药(Dioscorea opposita Thunb),又名薯蓣,为一年生或多年生薯蓣科薯蓣属藤本植物,兼具食药同源作用,是一种重要的蔬菜作物,深受广大人们的喜爱。瑞昌山药是江西省瑞昌市的特色经济作物,然而近年来山药病害的发生日益严重,给该地山药产业的发展带来了严重的障碍。本文采用传统形态学和分子生物学手段对瑞昌山药炭疽病的病原菌种类归属、病菌生物学特性、杀菌剂室内毒力测定等进行了系列研究,对瑞昌山药病毒病和根腐线虫病的病原进行了鉴定,取得如下研究结果:从采集于瑞昌市范镇、洪岭乡、高丰镇3个乡镇的山药炭疽病样品中分离获得9个培养特性和形态特征一致的真菌菌株,其性状与文献报道的胶孢炭疽菌性状相符;选择代表性菌株FZ-1进行人工致病性测定,结果该菌株能使健康山药发病并导致与田间一致的发病症状;对菌株FZ-1进行ITS序列测定,所获序列与GenBank中胶孢炭疽菌的对应序列具有100%的同源性。根据上述研究结果,将瑞昌山药炭疽病的病原鉴定为半知菌类中的胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。生物学特性研究结果表明:C.gloeosporioides最适生长培养基为PDA,25℃为最适生长温度,最适生长pH7.0,最适生长光照为12 h光暗交替,最适生长碳源为麦芽糖,最适生长氮源为酵母膏。采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对胶孢炭疽菌的室内毒力,结果表明不同杀菌剂的毒力大小不同。125 g/L氟环唑的抑菌作用最强,其EC50为0.1264μg/m L,52.5%噁酮·霜脲氰的抑菌作用最弱,其EC50值可忽略不计。其他27种杀菌剂:300g/L苯甲·丙环唑、41%甲硫·戊唑醇、10%苯醚·甲环唑、40%丁香·戊唑醇、23%醚菌·氟环唑、325 g/L苯甲·嘧菌酯、18.7%烯酰·吡唑酯、75%肟菌·戊唑醇、40%已唑醇、250 g/L吡唑嘧菌酯、50%福美林、60%唑醚·代森联、42.4%唑醚·氟酰胺、500 g/L异菌脲、300 g/L醚菌·啶酰菌、60%霜脲·嘧菌酯、24%腈苯唑、20%噻唑锌、22.5%啶氧菌酯、70%丙森锌、46%氢氧化铜、240 g/L噻呋酰胺、42.8%氟菌.肟菌酯、250 g/L嘧菌酯、50%烯酰吗啉、50%啶酰菌胺、68.75%氟菌·霜霉威的抑菌作用逐渐减弱。从范镇、洪岭乡和高丰镇3个乡镇各采集1个山药病毒病样品,提取样品总RNA,按照文献报道的马铃薯Y病毒属基因组序列设计引物,对样品RNA进行反转录PCR扩增,再对扩增产物进行克隆和序列测定,结果获得序列,将该序列递交到GenBank中比对,与日本山药花叶病毒病(Japanese yam mosaic virus,JYMP)的对应序列具有85%的同源性,而与其他病毒的同源性较低。根据序列鉴定结果,我们认为瑞昌山药病毒病的病原为日本山药花叶病毒。从上述三地采集了11个山药根腐线虫样品,经分离获得11个根腐线虫分离物,对这11个分离物进行了形态观察、大小测量,同时选择代表性分离物进行了16S rDNA核苷酸序列扩增和序列测定,全部结果符合文献对咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae)的描述,因此,我们将瑞昌山药根腐线虫病的病原鉴定为咖啡短体线虫。

关键词：瑞昌山药山药炭疽病生物学特性杀菌剂毒力山药病毒病山药根腐线虫病

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