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屏障系统常用消毒剂对金黄色葡萄球菌的杀菌效果

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动物医学进展 2023年第7期44卷 107-111页

作者：张泽辉吴运谱王春田辽宁中医药大学辽宁沈阳110847

金黄色葡萄球菌是一种常见的条件性致病菌,能够引发实验动物的化脓性感染,并严重威胁着实验动物的健康与安全。实验动物屏障设施是抵御有害致病菌的重要防线,因此屏障系统的消毒工作是保证实验动物不被金黄色葡萄球菌等致病菌感染的关... 详细信息

金黄色葡萄球菌是一种常见的条件性致病菌,能够引发实验动物的化脓性感染,并严重威胁着实验动物的健康与安全。实验动物屏障设施是抵御有害致病菌的重要防线,因此屏障系统的消毒工作是保证实验动物不被金黄色葡萄球菌等致病菌感染的关键。使用消毒剂是杀灭屏障系统中致病菌的有效手段。论文详细介绍了8种屏障系统常用的消毒剂(包括过氧化物类、季铵盐类、醛类、含氯类消毒剂)对金黄色葡萄球菌的杀菌效果及消毒策略,旨在为实验动物屏障系统应用消毒剂防治金黄色葡萄球菌污染提供参考。

关键词：金黄色葡萄球菌实验动物屏障系统消毒剂杀菌效果

屏障系统微生物气溶胶监测及SPF级实验动物微生物多重PCR分析

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屏障系统微生物气溶胶监测及SPF级实验动物微生物多重PCR分析

作者：王晶南京农业大学

学位级别：硕士

屏障系统微生物气溶胶监测是屏障环境监测的重要内容,病原微生物气溶胶可直接影响实验动物的质量。目前,国内动态屏障系统微生物气溶胶监测的研究报道较少,也缺乏动态屏障系统运行情况的评价指标和方法,不利于开展污染源监控;屏障系统... 详细信息

屏障系统微生物气溶胶监测是屏障环境监测的重要内容,病原微生物气溶胶可直接影响实验动物的质量。目前,国内动态屏障系统微生物气溶胶监测的研究报道较少,也缺乏动态屏障系统运行情况的评价指标和方法,不利于开展污染源监控;屏障系统内实验动物微生物的检测主要是采用传统的生理生化检验法,检测步骤多、周期长,难以适应对屏障内大量动物感染源的筛查要求。本研究通过监测动态屏障微生物气溶胶的变化规律及屏障系统有害微生物来源,以期为进一步建立屏障系统微生物气溶胶监控体系提供实验参考;通过对多重PCR反应体系的优化,以期建立屏障系统内实验动物微生物多重PCR快速分子检测技术。主要包括2项试验内容。 1.实验动物屏障系统微生物气溶胶监测本试验以大型实验动物屏障设施为研究对象,分析屏障设施微生物气溶胶的动态变化规律及其相关影响因素。测定并分析屏障设施各功能区域不同时间及不同工作状态下空气落下菌和直径≥0.3um气溶胶粒子的数量变化。结果表明,屏障系统内空气落下菌与气溶胶粒子在饲养工作后显著升高,喷雾消毒后明显降低;大、小鼠饲育室空气落下菌与气溶胶粒子数在凌晨时明显升高,而兔饲育室在凌晨时间段则较低;清洁走廊和污物走廊在工作状态时细菌含量明显上升,非工作状态时细菌含量一直处于较低的水平。实验动物屏障系统的环境微生物与气溶胶粒子的动态数量变化与动物品种、空气消毒、人员进出及动物室内的饲养操作等有关。实验动物繁殖屏障系统是生产实验动物的主要场所,在屏障系统运行过程中,人员、物品、动物都在不停地出入屏障。物品经过高压消毒或高浓度过氧乙酸喷雾或浸泡进入,空气经过四级过滤进入,动物是由隔离器内传出的SPF级动物,人员经过沐浴后换无菌服进入,但是屏障系统运行之后即很难完全达到SPF级标准,对屏障系统内人流、物流、动物流进行微生物检测,发现饲养人员清洁后仍可从口鼻腔分离到肺炎克雷伯菌和肺炎链球菌,人员流动可能是造成屏障内污染的主要因素。 ***级实验动物易感微生物多重PCR检测技术的建立本试验旨在建立SPF级实验动物易感菌类(主要包括金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和肺炎链球菌)的多重PCR快速检测方法。根据各细菌特有的毒力基因即金黄色葡萄球菌nuc、肺炎克雷伯菌Phoe、铜绿假单胞菌opr1和肺炎链球菌PspA设计多组特异的引物,通过单一PCR、双重PCR、多重PCR反应筛选,并对每对引物和随机混合引物进行单基因组和多基因组特异性分析,得到特异的引物组合。通过对反应温度Tm值、镁离子浓度、Taq酶浓度进行优化,最终确定4对引物合适的扩增条件为Tm值60.2℃,镁离子浓度3.0mM, Taq酶浓度0.125U/u1。通过对模板基因组梯度稀释,确定了该方法检测的有效灵敏度,经梯度稀释后各细菌检测灵敏度值在金黄色葡萄球菌为22.71pg,肺炎克雷伯杆菌77.67pg,铜绿假单胞杆菌65.63pg,肺炎链球菌45.88pg。在确定优化条件后,利用该方法对感染小鼠粪便及气管样品进行多重PCR分析,有效检测出目标细菌,表明该方法可用于SPF易感细菌的快速检测。

关键词：微生物气溶胶落下菌气溶胶粒子屏障系统多重PCR 实验动物

创立实验动物屏障系统的消毒灭菌压力设备的安全管理及质量管理体系

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中国消毒学杂志 2008年第1期25卷 96-98页

作者：林健黄忠兴何宏星张望平福建医科大学实验动物中心福州350004

在生命科学研究领域中,实验动物是生命科学基础和重要的支撑条件之一.在屏障系统运行中,锅炉、双扉压力蒸汽灭菌器是维持屏障系统内实验动物饲养与动物实验的重要支撑条件之一,使屏障设施内免受微生物侵袭而设置的一个内外物品传递通道.

关键词：动物实验屏障系统压力蒸汽灭菌安全管理

实验动物屏障系统的微生物质量控制体系的建立

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实验技术与管理 2009年第4期26卷 165-167页

作者：俞利平俞诚亢晓冬吴培林杭州师范大学医学动物中心浙江杭州310018 杭州师范大学设备与实验室管理处浙江杭州310018

通过对屏障环境和所需物品进行科学的消毒和灭菌、加强对员工素质和技能的培训、制订并严格执行标准化操作规程（SOP）和工作制度、定期维护、保养各种仪器设备、定期对屏障环境内的实验动物微生物质量跟踪监测等方法，确保屏障环境内... 详细信息

通过对屏障环境和所需物品进行科学的消毒和灭菌、加强对员工素质和技能的培训、制订并严格执行标准化操作规程（SOP）和工作制度、定期维护、保养各种仪器设备、定期对屏障环境内的实验动物微生物质量跟踪监测等方法，确保屏障环境内实验动物微生物质量符合国家标准。

关键词：屏障系统实验动物微生物质量

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高校屏障系统动物实验室的开放管理

实验技术与管理 2011年第4期28卷 156-158页

作者：徐绍业邵晓云桂林医学院实验动物中心广西桂林541004 桂林医学院组织学与胚胎学教研室广西桂林541004

科学研究对实验动物和动物实验,尤其是对实验及术后观察的环境,提出了新的要求,而一些科研人员只注重实验动物本身的清洁等级,却不太考虑实验环境及术后观察的环境要求,因此,对屏障系统动物实验室开放的必要性、屏障系统动物实验室开放... 详细信息

科学研究对实验动物和动物实验,尤其是对实验及术后观察的环境,提出了新的要求,而一些科研人员只注重实验动物本身的清洁等级,却不太考虑实验环境及术后观察的环境要求,因此,对屏障系统动物实验室开放的必要性、屏障系统动物实验室开放管理的意义,以及规范化管理的措施等有必要进行探讨。

关键词：屏障系统动物实验室开放管理

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屏障系统微生物学监测经验

实验动物与比较医学 1987年第4期 244-250页

作者： J.R.Needham 朱贞英上海实验动物研究中心

引言实验动物会引进屏障系统的历史已有15年之久。第一代繁殖用无菌动物的培育,可通过两条途径。对于啮齿动物之类小型动物不需保留其母代者,可施行子宫摘除术,将胎儿放在隔离器内,按无菌动物的条件进行培育,然后移入屏障设施。大型动物... 详细信息

引言实验动物会引进屏障系统的历史已有15年之久。第一代繁殖用无菌动物的培育,可通过两条途径。对于啮齿动物之类小型动物不需保留其母代者,可施行子宫摘除术,将胎儿放在隔离器内,按无菌动物的条件进行培育,然后移入屏障设施。大型动物,则采用剖腹产术,以保留母代供继续繁殖。屏障系统对科研用动物的供应,特别是啮齿类,已愈来愈重要。这类设施有助于繁殖和生产完全没有内、外寄生虫,也没有已知致病或非致病的细菌和病毒的动物。其空气供应管道系统内,设有可消除0.01μ大小微粒的一组过滤器,使进入设施的空气保持无菌。进

关键词：金黄色葡萄球菌屏障系统血琼脂啮齿动物小鼠肺炎病毒屏障设施噬菌体型微生物学

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SPF鸡屏障系统及其管理特点

中国家禽 2005年第4期27卷 37-41页

作者：秦卓明张世栋李新华金维江山东省农科院家禽所SPF鸡研究中心 250100

SPF鸡的质量、生产潜能以及是否符合实验动物质量标准,在很大程度上取决于饲育环境的好坏,即人为地造成一个适于SPF鸡生长发育的洁净小环境。文章从SPF鸡的无菌生长环境要求和生物学要求,结合作者的经验,对SPF鸡屏障系统及其管理要点作... 详细信息

SPF鸡的质量、生产潜能以及是否符合实验动物质量标准,在很大程度上取决于饲育环境的好坏,即人为地造成一个适于SPF鸡生长发育的洁净小环境。文章从SPF鸡的无菌生长环境要求和生物学要求,结合作者的经验,对SPF鸡屏障系统及其管理要点作了精辟的阐述,供读者参考。

关键词： SPF鸡生长环境传染性病原饲育环境鸡群繁殖性能饲养管理屏障系统无菌流行

安徽科技学院SPF鸡实验屏障系统的建设与应用

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安徽科技学院SPF鸡实验屏障系统的建设与应用

作者：龚争南京农业大学

学位级别：硕士

SPF (Specific Pathogen Free)鸡,指无特定病原体的鸡,生长在屏障系统或隔离器中,具有良好的生长和繁殖性能,其所产蛋即为SPF蛋[1]。SPF鸡与鸡胚无主要的传染病、无垂直传染性疾病、无人禽共患病、无对实验研究可能产生干扰的微生物;SP... 详细信息

SPF (Specific Pathogen Free)鸡,指无特定病原体的鸡,生长在屏障系统或隔离器中,具有良好的生长和繁殖性能,其所产蛋即为SPF蛋[1]。SPF鸡与鸡胚无主要的传染病、无垂直传染性疾病、无人禽共患病、无对实验研究可能产生干扰的微生物;SPF鸡与蛋对各种病原有敏锐的感受性,且反应一致,重复性好。因此,SPF鸡和鸡胚是生物医学、畜牧兽医等领域中从事高水平科研和多种人畜禽生物制品生产、鉴定所不可缺少和无法替代的实验动物和原材料。SPF鸡质量的好坏直接关系到诸多研究成果的可靠性、准确性。SPF鸡饲养成功与否,很大程度上取决于物理隔离屏障环境的设计、建造以及日常的管理等。本文以安徽科技学院SPF鸡实验屏障系统为研究对象,通过对SPF鸡实验屏障系统的建设与运行管理的探讨,积累了一些SPF鸡生产实践经验,以期为我国SPF级禽类实验动物的研究与生产提供可参考的资料。安徽科技学院SPF鸡实验屏障系统的设计与建设在符合国家标准的基础上,进行了较大限度的节能设计,建设中主要考虑设施的布局、设备的选用、区域的设置与应用等要求。设施建设一次性通过了安徽省实验动物质量监督检测中心的监测验收,各项运行指标符合设计要求并达到或超过国家标准。安徽科技学院SPF鸡实验屏障系统既不同于其他SPF级实验动物屏障系统,也有别于商业生产型SPF鸡舍。布局设计为单走廊,做到了人流、物流、动物流和空气流的单向移动。在设施的运行上主要体现安全、节能的特点。设施安装两套空调通风系统,鸡饲养区一套空调系统,采用全新风设计,小区空调控制形式;辅助区为另外一套空调通风系统并设置有部分回风条件。两套系统配备一套共用制冷(热)设备,采用风冷热泵机组和辅助电加热设备。风系统采用两次处理,第一次在屋顶,新风在组合空调器内做预处理,包括冷热处理,三级过滤。第二次在夹层,预处理后的新风做进一步的热湿处理,以及中效、高效两级过滤,然后再送入各个房间内。空调送风有三套运行方案,这与生产型SPF鸡舍有较大的差异,每套方案的运行都能满足实验动物环境与设施国家标准的要求。屏障系统相关参数的控制分别为：温度10℃～28℃可调;湿度40%～70%可调;换气次数10-28次／h;气流速度0.1～0.3m/S,光照强度1～14日龄201x,15～120日龄51x,121～500日龄10～301x。为有利于微生物控制和便于进行相关的试验研究,在育雏室、育成室和成鸡室分别安装了二台、三台和五台鸡隔离器。为尽量减少人员的进出,便于教学与指导学生进行相关的试验研究和实验观察,在设施内的实验室和SPF鸡饲养房间内装备有全方位旋转、可变焦的视频摄像头,可以自动记录和监视SPF的生长发育、饲养管理和试验情况。运行管理上重点进行了SPF鸡实验屏障系统标准操作规程的制定和执行工作,对设施运行进行记录与归档管理;制定了设施运行前和运行期间的清洁、消毒程序;通过灭菌实验,建立了设施运行期间饲料、饮水、用具、隔离器、饲养笼具、工作衣等进入屏障系统的灭菌方法等。该屏障系统共饲养SPF雏鸡316只,饲养SPF产蛋鸡78只。通过对蛋鸡产蛋率与国内其他生产单位SPF鸡同期产蛋率比较分析,最高产蛋率与国内其他SPF鸡生产单位基本一致。但56周龄以后的产蛋率明显高于其他单位饲养的SPF鸡群的产蛋率。在SPF蛋鸡的饲养期间,我们利用MDV琼扩抗原油苗对本设施所生产的SPF蛋鸡进行免疫和加强免疫,检测并收集合格的免疫鸡蛋,通过不同方法提取卵黄中的IgY。经琼脂扩散试验检测,所提取的MD卵黄IgY具有活性好、特异性强且成本低、产量高等优点,可以替代相对高昂的MD阳性血清。

关键词： SPF鸡屏障系统建设管理生产 IgY 制备

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屏障系统内层流柜中繁育裸鼠的初探

中国实验动物学杂志 2002年第5期12卷 312-313页

作者：陈玉升李艳玲张梅英中国医科大学实验动物部沈阳110001

目的　繁育裸鼠。方法　在屏障系统内的层流柜中放置过滤帽鼠盒 ,建立裸鼠种群。结果　经 11个月后 ,培育 4 0余对裸鼠。平均每窝产仔 8 90只 ,产裸鼠 3 70只。结论　此方法是繁育SPF裸鼠的方便快捷的好方法。

关键词： SPF裸鼠种群小鼠繁育过滤帽屏障系统