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异氟醚对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血管生成及Smad信号通路的影响

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中国药理学通报 2019年第12期35卷 1731-1738页

作者：彭莉王胜殷姜文葛明月张贵星徐锋张庆桐河南大学第一附属医院麻醉科河南开封475000 中国科学技术大学附属第一医院麻醉科安徽合肥230001 石河子大学医学院第一附属医院麻醉科新疆石河子832000

目的探讨异氟醚对脑缺血/再灌注大鼠血管生成的影响及其可能机制。方法健康成年♂SD大鼠40只,随机分为假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、异氟醚后处理组(ISO组)和异氟醚后处理+Smad3特异性抑制剂SIS3 HCl组(ISO+SIS3组)。线栓... 详细信息

目的探讨异氟醚对脑缺血/再灌注大鼠血管生成的影响及其可能机制。方法健康成年♂SD大鼠40只,随机分为假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、异氟醚后处理组(ISO组)和异氟醚后处理+Smad3特异性抑制剂SIS3 HCl组(ISO+SIS3组)。线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),24 h后Zea-Longa法评估大鼠神经功能损伤,HE染色评估脑组织病理学损伤情况,尼氏染色评估缺血脑组织中健存神经元情况,TUNEL法评估脑组织凋亡情况,免疫荧光检测脑组织中VEGF蛋白和CD34蛋白的表达水平,Western blot对脑组织中p-Smad3、Smad3、VEGF和CD34进行定量分析。结果异氟醚能明显降低大鼠的神经行为学评分,减轻脑组织病理学损伤,增加缺血脑组织中健存神经元数量,减少损伤脑组织中的凋亡细胞,增强p-Smad3、VEGF和CD34蛋白的表达;Smad3抑制剂逆转了异氟醚的脑保护作用,加重了脑缺血/再灌注损伤,抑制p-Smad3、VEGF和CD34的蛋白表达。结论异氟醚能改善大鼠脑缺血/再灌注损伤,其保护机制与激活Smad信号通路,促进VEGF和CD34蛋白表达,进而促进血管生成有关。

关键词：异氟醚后处理局灶性脑缺血/再灌注血管生成 Smad3 信号通路

片仔癀对局灶性脑缺血/再灌注大鼠皮质中NMDAR1和GluR2表达的影响

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中国药理学通报 2019年第2期35卷 288-292页

作者：张小琴侯丽颖强国芳顾嘉琪卢双红许文黄鸣清福建中医药大学药学院福建福州350122

目的研究片仔癀对局灶性脑缺血/再灌注大鼠皮质中NMDAR1、GluR2 mRNA及蛋白表达的影响。方法健康成年♂SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型对照组、片仔癀给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO)。Zea-Longa标准评分法... 详细信息

目的研究片仔癀对局灶性脑缺血/再灌注大鼠皮质中NMDAR1、GluR2 mRNA及蛋白表达的影响。方法健康成年♂SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型对照组、片仔癀给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO)。Zea-Longa标准评分法评价大鼠神经功能损伤;TTC染色法评价脑梗死体积变化;qPCR法和Western blot法分别检测大鼠缺血侧脑组织皮质中NMDAR1、GluR2 mRNA及蛋白的表达。结果与MCAO组比较,片仔癀能明显改善大鼠的神经功能损伤,降低大鼠脑梗死体积,促进NMDAR1、GluR2 mRNA及蛋白的表达。结论片仔癀可能通过抑制局灶性脑缺血/再灌注大鼠皮质NMDAR1、GluR2 mRNA及蛋白的下调而发挥脑保护作用。

关键词：片仔癀局灶性脑缺血/再灌注皮质 NMDAR1 GluR2 脑保护

红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生及Akt/GSK-3β/CRMP-2表达的影响

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中国药理学通报 2017年第9期33卷 1320-1324页

作者：张小琴苗学蒸周丽英许力伟赖文芳洪桂祝福建中医药大学药学院福建福州350122

目的研究红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生的影响及可能的机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型对照组、红景天苷给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO),ZeaLonga标准评分法评价大鼠神经... 详细信息

目的研究红景天苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生的影响及可能的机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型对照组、红景天苷给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO),ZeaLonga标准评分法评价大鼠神经功能损伤,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织p-Akt(Ser473)、Akt、p-GSK-3β(Ser9)、GSK-3β、p-CRMP-2(Thr514)、CRMP-2蛋白的表达,免疫荧光染色法检测大鼠缺血侧脑组织NF200蛋白的表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显改善大鼠的神经功能损伤,促进NF200、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达,抑制p-CRMP-2蛋白表达。结论红景天苷能改善局灶性脑缺血/再灌注大鼠的神经功能缺损,此作用可能与促进Akt、GSK-3β的磷酸化,抑制CRMP-2的磷酸化,进而促进轴突再生有关。

关键词：红景天苷局灶性脑缺血/再灌注轴突再生 Akt GSK-3β CRMP-2

电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血和骨髓内皮祖细胞的作用

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针刺研究 2012年第3期37卷 179-185页

作者：孙宏毅罗勇卢桃利周承秦文熠李扬蔡艳丽重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血及骨髓中与血管再生相关的因子及细胞的影响。方法:54只SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,采用线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,并按局灶性脑缺血2h再灌注后的观察时间点,将模型... 详细信息

目的:探讨电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血及骨髓中与血管再生相关的因子及细胞的影响。方法:54只SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,采用线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,并按局灶性脑缺血2h再灌注后的观察时间点,将模型组和电针组分为1、2、3、7d各4个亚组,每个时间点6只大鼠。电针刺激大鼠双侧"合谷"穴,刺激时间15min,每日1次。采用流式细胞术检测外周血内皮祖细胞(EPCs)、趋化因子受体4+(CXCR 4+)细胞和骨髓EPCs占单核细胞的百分比,酶联免疫法检测血清中基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)蛋白浓度。结果:局灶性脑缺血/再灌注大鼠1d模型组和电针组较正常组外周血EPCs和CXCR 4+细胞数量均显著增高(P局灶性脑缺血/再灌注大鼠外周血EPCs、CXCR 4+细胞和骨髓EPCs数量的增加,该作用可能与SDF-1α表达上调相关。

关键词：电针局灶性脑缺血/再灌注 "合谷"穴基质细胞衍生因子-1α 内皮祖细胞外周血骨髓

红景天苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用

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中国药理学通报 2015年第6期31卷 775-780页

作者：赖文芳张小琴洪海棉谢秀利洪桂祝福建中医药大学药学院福建福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的探讨红景天苷(salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(sham)、模型对照组(MCAO组)、红景天苷给药组(MCAO+Sal组)。通过线栓法制作大鼠局灶性脑缺血... 详细信息

目的探讨红景天苷(salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(sham)、模型对照组(MCAO组)、红景天苷给药组(MCAO+Sal组)。通过线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,Longa评分法对大鼠神经功能损伤评分,焦油紫染色法对神经细胞内尼氏(Nissl)小体染色,RT-q PCR技术检测大鼠缺血侧脑组织Neun、Nogo-A与Ng R m RNA的表达,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织Bcl-2、Neun、BDNF、NGF、Nogo-A与Ng R蛋白的表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显降低神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞的数量,促进Bcl-2、Neun、NGF、BDNF的蛋白表达,降低Nogo-A及其受体Ng R的m RNA及蛋白表达。结论红景天苷能够降低MCAO模型大鼠神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞数目,提高Neun的表达,具有神经保护作用,此作用是通过促进抗凋亡因子Bcl-2及神经营养因子NGF、BDNF的蛋白表达,下调轴突生长抑制因子Nogo-A及其受体Ng R的蛋白表达所实现。

关键词：红景天苷局灶性脑缺血/再灌注轴突生长抑制因子神经生长因子神经保护细胞凋亡

rhAng-1对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障血管内皮细胞间连接的影响

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中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 147-152页

作者：于航贾庆波薛一雪哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学附属第五医院胸外科黑龙江大庆163319 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:研究重组人血管生成素1(rhAng-1)对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响及脑微血管内皮细胞间连接蛋白表达的变化。方法:大鼠随机分8组(n=10):①手术组;②缺血组;③～⑤生理盐水+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组;⑥～⑧rhAng... 详细信息

目的:研究重组人血管生成素1(rhAng-1)对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响及脑微血管内皮细胞间连接蛋白表达的变化。方法:大鼠随机分8组(n=10):①手术组;②缺血组;③～⑤生理盐水+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组;⑥～⑧rhAng-1+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组。用伊文思兰渗透性实验检测血脑屏障通透性;TTC法检测脑梗死面积;按Zea Longer评分标准对大鼠神经功能损伤进行评分;用免疫组化、RT-PCR和West-ern blot法检测occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达。结果:rhAng-1可明显降低局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性,降低脑梗死面积;rhAng-1可使细胞间连接蛋白occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达增加。结论:rhAng-1通过上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达降低局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性。

关键词：重组人血管生成素1 局灶性脑缺血/再灌注 ZO-1 occludin VE-cadherin

延龄草甾体皂苷类成分对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

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中国老年学杂志 2020年第23期40卷 5013-5017页

作者：陈林林李中炼万登峰曹文锋左月明张忠立江西中医药大学药学院江西南昌330004 江西中医药大学实验动物科技中心江西南昌330004 江西省人民医院

目的探讨延龄草中4个甾体皂苷类单体对大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法将96只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组),模型组(I/R组),尼莫地平片组(Contrast 1组),银杏叶片组(Contrast 2组),偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖... 详细信息

目的探讨延龄草中4个甾体皂苷类单体对大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法将96只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组),模型组(I/R组),尼莫地平片组(Contrast 1组),银杏叶片组(Contrast 2组),偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y2T组)中、高剂量组,偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称Y3T组)中、高剂量组,偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y4T组)中、高剂量组,偏诺皂苷元(YP组)中、高剂量组。采用改良Zea Longa线栓法构建局灶性脑I/R损伤动物模型,Sham组不插入线栓,其余操作同I/R组,各给药组在造模手术前连续给药8 d,造模后各组进行神经功能缺陷评分,然后麻醉处死,取材检测。干湿称重法检测大鼠脑指数,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法检测大鼠脑梗死体积,试剂盒法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷氨酸的活性和一氧化氮(NO)、Ca^2+的含量,酶联免疫吸附试验检测大鼠脑组织中炎症介质肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的变化,苏木素-伊红(HE)染色观察海马CAI区和皮质层区病理学改变。结果与I/R组比较,给药各组能明显降低脑I/R大鼠翻正反射恢复时间、减轻I/R部位的病理损伤,降低脑组织含水量、减少脑梗死体积,提高SOD活性,降低MDA、谷氨酸、NO和Ca^2+含量,抑制激活小胶质细胞释放TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子,病理形态学有明显改善,差异均有统计学意义(P局灶性脑I/R损伤具有明显保护作用,其机制可能与抗炎及抗氧化应激有关。

关键词：延龄草甾体皂苷局灶性脑缺血/再灌注抗氧化偏诺皂苷

组织自发荧光在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中的应用

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中国药理学通报 2015年第10期31卷 1473-1476页

作者：田树红王日超邢桂兰符健海南医学院海南省药物安全性评价研究中心海南海口571199

目的基于特定的荧光检测技术,探讨组织自发荧光在大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤中的应用。方法本研究通过caliper精诺真IVIS活体成像技术检测大鼠脑组织的自发荧光。通过荧光检测,比较正常大鼠和局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织对应... 详细信息

目的基于特定的荧光检测技术,探讨组织自发荧光在大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤中的应用。方法本研究通过caliper精诺真IVIS活体成像技术检测大鼠脑组织的自发荧光。通过荧光检测,比较正常大鼠和局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织对应部位自发荧光强弱的变化,并进行定量分析。结果实验结果表明,局灶性脑缺血/再灌注损伤脑组织的自发荧光发生了明显变化,损伤部位的自发荧光信号明显增强,将荧光信号通过活体成像系统进行定量,与正常脑组织比较差异有统计学意义,P局灶性脑缺血/再灌注损伤后,脑组织的自发荧光明显增强,为大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型的研究及其评价提供新的方法。

关键词：大鼠脑组织自发荧光局灶性脑缺血/再灌注活体成像系统

Ku70在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中与TERT结合共同保护端粒长度机制的研究

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Ku70在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中与TERT结合共同保护端粒长...

学位级别：硕士

目的:检测并分析Ku70与TERT在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后脑组织的动态表达情况,探究并分析Ku70与TERT对神经功能缺损以及细胞凋亡的保护作用,并且进一步探索Ku70与TERT在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中保护端粒长度的机制。方法:1.... 详细信息

目的:检测并分析Ku70与TERT在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后脑组织的动态表达情况,探究并分析Ku70与TERT对神经功能缺损以及细胞凋亡的保护作用,并且进一步探索Ku70与TERT在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中保护端粒长度的机制。方法:1.建立大鼠大脑中动脉阻塞/再灌注(Middle Cerebral Artery Occlusion/Reperfusion;MCAO/R)模型。2.随机将大鼠分为假手术组、MCAO/R 4h组、MCAO/R 12h组、MCAO/R24h组、MCAO/R 48h组、MCAO/R 72h组。3.通过实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real-time PCR;RT-q PCR)分别检测各组大鼠脑组织中Ku70 m RNA与TERT m RNA的表达情况。3.通过蛋白免疫印迹(Western Blot;WB)分别检测各组大鼠脑组织中Ku70与TERT的表达情况。4.通过实时荧光定量PCR技术检测大鼠脑组织的相对端粒长度。5.通过免疫共沉淀证明Ku70与TERT的关系。6.对大鼠脑组织进行氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色,分析比较各组大鼠的脑梗死面积百分比。7.对大鼠脑组织进行原位末端标记法(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)染色,分析比较各组大鼠的细胞凋亡率。结果:1.本实验RT-q PCR结果显示Ku70 m RNA与TERT m RNA在各组中都有表达,与假手术组相比,Ku70 m RNA在MCAO/R 12h组,MCAO/R24h组,MCAO/R 48h组和MCAO/R 72h组的表达量均增高(P0.05)。而与假手术组相比,TERT m RNA在MCAO/R 24h组,MCAO/R 48h组和MCAO/R 72h组的表达均增高(P0.05)。与MCAO/R 24h组相比,MCAO/R 48h组和MCAO/R 72h组的端粒长度均变长了(P0.05)。大鼠脑组织的相对端粒长度在24小时缩短,在48小时开始恢复。4.本实验的免疫共沉淀结果表明Ku70与TERT具有相互作用关系。5.本实验的TTC染色结果显示MCAO/R 12h组的梗死面积比MCAO/R4h组的梗死面积大,MCAO/R 24h组的梗死面积比MCAO/R 12h组的梗死面积大(P<0.05)。而MCAO/R 48h组的梗死面积比MCAO/R 24h组的梗死面积小,MCAO/R 72h组的梗死面积比MCAO/R 48h组的梗死面积小(P<0.05)。MCAO/R 24h组的梗死面积最大。6.本实验的TUNEL染色结果显示MCAO/R 12h组的细胞凋亡率比MCAO/R 4h组的细胞凋亡率高,MCAO/R 24h组的细胞凋亡率比MCAO/R12h组的细胞凋亡率高

关键词：局灶性脑缺血/再灌注 Ku70 TERT 端粒长度