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局灶性脑缺血后125Ⅰ-神经生长因子对血脑屏障的通透性

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解剖学报 2020年第3期51卷 344-351页

作者：曾倩马新宇曹中伟内蒙古自治区人民医院神经内科呼和浩特010017 内蒙古自治区人民医院甲乳疝外科呼和浩特010017

目的通过大鼠局灶性脑缺血实验,探讨神经生长因子(NGF)在大脑局部脑缺血情况下通过血脑屏障(BBB)的最佳时间及机制,为NGF在临床上的应用提供新的用药途径。方法对65只健康雄性SD大鼠采用改良的线栓法制备局灶性脑缺血模型,按缺血后不同... 详细信息

目的通过大鼠局灶性脑缺血实验,探讨神经生长因子(NGF)在大脑局部脑缺血情况下通过血脑屏障(BBB)的最佳时间及机制,为NGF在临床上的应用提供新的用药途径。方法对65只健康雄性SD大鼠采用改良的线栓法制备局灶性脑缺血模型,按缺血后不同时间点,给予每只大鼠注入125Ⅰ-NGF,利用γ射线计数仪检测γ计数量,观察缺血不同时间BBB通透性的改变。脑缺血后BBB通透性最大的时间点(缺血3 d)大鼠为实验组(15只),不制造脑缺血动物为对照组(15只)。对大鼠行脑冠状切片,通过放射自显影观察成影部位、面积及亮度。利用透射电子显微镜观察脑缺血不同时间BBB的变化。结果随脑缺血时间延长,BBB通透性逐渐增加,其中脑缺血后第3天BBB通透性最大,而后又逐渐减弱。在BBB相同通透性情况下,γ计数显示,伴随用药时间的延长对照组和实验组γ计数均有所增加,实验组各时间点γ计数高于对照组,两组比较差异均有显著性(P脑缺血时间延长BBB通透性增加,其中缺血3 d通透性最强;大鼠局灶脑缺血3 d用药4 h 125Ⅰ-NGF进入BBB量最大,在额叶、顶叶及颞叶显影最明显。NGF能通过局灶性脑缺血的血脑屏障,可能为临床给药途径提出新思路。

关键词：局灶性脑缺血血脑屏障神经生长因子改良线栓法放射自显影透射电子显微术大鼠

头部针刺对局灶性脑缺血大鼠神经功能和脑组织中HIF-1α及VEGFR2表达的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2023年第6期49卷 1431-1436页

作者：周秀玲丛德毓张野张红石长春中医药大学护理学院吉林长春130117 吉林省中医院推拿科吉林长春130021

目的:探讨头部针刺对局灶性脑缺血大鼠神经功能和脑组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮生长因子受体2 (VEGFR2)表达的影响,并阐明其相关机制。方法:采用改良大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血模型。成功制备模型的20只大... 详细信息

目的:探讨头部针刺对局灶性脑缺血大鼠神经功能和脑组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮生长因子受体2 (VEGFR2)表达的影响,并阐明其相关机制。方法:采用改良大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血模型。成功制备模型的20只大鼠随机分为模型组和治疗组,每组10只;同时另取10只SD大鼠作为假手术组。治疗组大鼠进行头部针刺处理。记录各组大鼠神经功能评分并验证模型。Morris水迷宫试验检测各组大鼠学习记忆功能,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清和脑组织中HIF-1α水平,Western blotting法检测各组大鼠脑组织中HIF-1α和VEGFR2蛋白表达水平。结果:神经功能评分,假手术组大鼠无神经功能缺陷;与假手术组比较,模型组和治疗组大鼠神经功能评分升高(P局灶性脑缺血大鼠脑组织功能并调控大鼠脑组织中HIF-1α和VEGFR2水平升高,其相关机制可能与激活HIF/VEGFR2血管再生通路。

关键词：头部针刺缺氧诱导因子血管内皮生长因子受体2 局灶性脑缺血缺血性脑卒中

局灶性脑缺血对腹部手术后大鼠海马星形胶质细胞活化和表皮生长因子受体表达的影响

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中华实验外科杂志 2024年第4期41卷 738-741页

作者：金峰何龙曹彬艾艳秋郑州大学第一附属医院麻醉与围术期及疼痛医学部郑州450052

目的探讨围术期急性缺血性卒中后,大鼠海马星形胶质细胞活化程度和表皮生长因子受体(EGFR)表达水平。方法30只18月龄雄性SD大鼠分为3组,假手术组(Sham)、腹部手术组(Surg)、腹部手术+局灶性脑缺血组(Surg+FCI),每组10只。分别予以仅麻... 详细信息

目的探讨围术期急性缺血性卒中后,大鼠海马星形胶质细胞活化程度和表皮生长因子受体(EGFR)表达水平。方法30只18月龄雄性SD大鼠分为3组,假手术组(Sham)、腹部手术组(Surg)、腹部手术+局灶性脑缺血组(Surg+FCI),每组10只。分别予以仅麻醉不手术、麻醉下腹部手术、麻醉下腹部手术同时颈内动脉结扎处理。处理后24 h,大鼠心脏灌流处死全脑剥离,分离海马,固定切片后,进行免疫荧光染色和共聚焦观察,Image J计数IL-1R1阳性的神经元和小胶质细胞个数。组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),两两比较采用独立样本t检验。结果Sham组、Surg组和Surg+FCI组大鼠海马DG区神经细胞核DAPI阳性染色数目分别为(76.80±9.51)、(74.80±11.66)、(77.10±5.55)个;同Sham组比较,Surg组阳性染色数目差异无统计学意义(F=0.66,P>0.05)。Sham组、Surg组和Surg+FCI组大鼠海马DG区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性的星形胶质细胞数目分别为(54.30±9.56)、(46.70±11.73)、(18.60±5.64)个,差异无统计学意义(F=2.52,P>0.05),Surg+FCI组阳性染色数目显著减少(F=103.48,P0.05),Surg+FCI组阳性染色数目显著升高(F=103.48,P缺血性卒中后,大鼠海马的星形胶质细胞活化程度降低,活化的星形胶质细胞上EGFR表达增多。

关键词：局灶性脑缺血星形胶质细胞海马表皮生长因子受体围术期

银杏蜜环口服溶液对化学光栓塞型局灶性脑缺血小鼠模型微血管生成与重构的影响

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中国实验方剂学杂志 2022年第23期28卷 38-43页

作者：姚明江张伟杨斌宋文婷王光蕊王益民王勇赫少清刘建勋中国中医科学院西苑医院基础医学研究所中药药理北京市重点实验室北京100091 西安步长中医心脑病医院西安710082

目的:观察银杏蜜环口服溶液对化学光栓塞型局灶性脑缺血小鼠模型的影响,并探讨其在微血管生成与重构方面的作用机制。方法:将50只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,随机分为假手术组、模型组、金纳多组(12.5 mg·kg^(-1))、银杏蜜环口服溶液(银蜜... 详细信息

目的:观察银杏蜜环口服溶液对化学光栓塞型局灶性脑缺血小鼠模型的影响,并探讨其在微血管生成与重构方面的作用机制。方法:将50只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,随机分为假手术组、模型组、金纳多组(12.5 mg·kg^(-1))、银杏蜜环口服溶液(银蜜)低、高剂量组(412、824 mg·kg^(-1)),每组10只。采用化学光栓阻塞微血管法建立小鼠局灶性脑梗死模型,术后连续灌胃给药14 d。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)及前肢抓力测定评价小鼠神经功能;异硫氰酸荧光素葡聚糖(FITCdextran)染色法观察缺血灶周围区域毛细血管密度;苏木素-伊红(HE)染色观察缺血灶周围区域组织病理形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠缺血灶周边脑组织微血管生成与重构相关指标血管内皮生长因子(VEGF)、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管性血友病因子(vWF)、血管生成素(ANG)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠存在显著神经功能缺损(P缺血灶周围区域毛细血管密度显著增加(P缺血灶周围区域毛细血管密度进一步增加(P局灶性脑缺血小鼠模型运动功能及病理形态,其作用机制可能与促进缺血灶周围区域微血管生成与重构有关。

关键词：银杏蜜环口服溶液化学光栓塞局灶性脑缺血微血管生成与重构

局灶性脑缺血成年大鼠高压氧干预后神经干细胞增殖及分化研究

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中华物理医学与康复杂志 2015年第10期37卷 733-738页

作者：刘芳黄海龙陈红侯丽敏邓雨果尤春景华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学科武汉430030 厦门大学第一附属医院康复医学科郑州人民医院康复医学科

目的观察高压氧（HBO）干预对成年大鼠急性局灶性脑缺血后海马齿状回颗粒下区（SGZ）神经于细胞增殖及向神经元分化的影响。方法选取48只成年雄性SD大鼠，按随机数字表法分为模型组、高压氧组、高压空气组和常压氧组，每组12只。各组大... 详细信息

目的观察高压氧（HBO）干预对成年大鼠急性局灶性脑缺血后海马齿状回颗粒下区（SGZ）神经于细胞增殖及向神经元分化的影响。方法选取48只成年雄性SD大鼠，按随机数字表法分为模型组、高压氧组、高压空气组和常压氧组，每组12只。各组大鼠均进行线栓法MCAO制模，除模型组制模后不接受任何干预外，其余3组均于线栓插入后2h分别给予高压氧，高压空气和常压氧干预，每日1次。采用免疫荧光双重标记制模成功后第2、3、7和14天脑梗死侧SGZ区增殖的神经干细胞（BrdU^＋／nestin^＋）及其分化的神经元（BrdU^＋／DCX^＋），并在荧光显微镜下计数。结果制模成功后第2天，高压氧组SGZ区BrdU／nestin和BrdU／DCX的共标细胞数分别为（2340．45±1109．59）个和（5520．66±1103．09）个，分别与常压氧组和模型组同时间点相同细胞比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；制模成功后第3和第7天，高压氧组的BrdU／nestin和BrdU／DCX共标细胞数均显著高于高压空气组、常压氧组和模型组，差异均有统计学意义（P〈0．05），且制模成功后第14天，高压氧组的BrdU／DCX共标细胞数亦显著高于高压空气组、常压氧组和模型组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高压氧干预可显著促进成年大鼠梗死侧SGZ区神经干细胞的增殖和向神经元分化。

关键词：高压氧局灶性脑缺血神经干细胞增殖神经元

阿加曲班对局灶性脑缺血模型大鼠血流动力学及血小板功能的影响

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中国临床药理学杂志 2022年第7期38卷 643-647页

作者：谢仁伟王明泉程凌利吴玲玲李丽群张清泉洪全龙李国前福建医科大学附属泉州第一医院输血科福建泉州362000 福建医科大学附属泉州第一医院药剂科福建泉州362000 福建医科大学附属泉州第一医院神经内科福建泉州362000

目的研究阿加曲班对局灶性脑缺血模型大鼠血流动力学及血小板功能的影响,并探讨相关机制.方法将24只大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠随机分为模型组和低、高剂量实验组,每组8只;另取8只大鼠仅分离颈动脉,不插入线栓,设为假手术组.假手术... 详细信息

目的研究阿加曲班对局灶性脑缺血模型大鼠血流动力学及血小板功能的影响,并探讨相关机制.方法将24只大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠随机分为模型组和低、高剂量实验组,每组8只;另取8只大鼠仅分离颈动脉,不插入线栓,设为假手术组.假手术组与模型组均给予腹腔注射0.9%NaCl 5 mL;低、高剂量实验组分别给予1.5和3.0 mg·kg^(-1)阿加曲班,腹腔注射.4组大鼠每天给药1次,连续给药7d.用超声诊断仪检测颅内血流动力学,用血小板功能分析仪检测血小板黏附和聚集功能,用蛋白质印迹法检测脑组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达情况.结果低、高剂量实验组和模型组、假手术组的收缩期最大峰值血流速度分别为(49.86±7.52),(58.84±8.97),(41.23±8.20)和(69.52±10.26)cm·s^(-1),血小板黏附率分别为(15.03±1.96)%,(12.27±1.81)%,(18.86±2.10)%和(9.32±1.57)%,最大血小板聚集率分别为(52.17±6.85)%,(45.22±5.82)%,(60.30±7.93)%和(34.26±4.10)%,脑组织p-NF-κB p65/NF-κB p65分别为0.75±0.09,0.63±0.07,0.98±0.08和0.27±0.03,iNOS蛋白表达量分别为1.01±0.11,0.52±0.06,1.26±0.19和0.30±0.04.模型组的上述指标与低、高剂量实验组和假手术组比较,低剂量实验组的上述指标与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论阿加曲班可改善MCAO大鼠血流动力学,抑制血小板黏附与聚集,减轻脑组织病理变化,推测其作用机制与抑制脑组织NF-κB p65磷酸化及iNOS表达有关.

关键词：局灶性脑缺血阿加曲班血流动力学血小板功能

补阳还五汤通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

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中国中药杂志 2024年

作者：张修红傅开龙林侃李楠姚明龙郑关毅福建医科大学附属协和医院中医科

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制，180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miRNA-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组，每组36只；每组又按再灌注时间分为第... 详细信息

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制，180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miRNA-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组，每组36只；每组又按再灌注时间分为第3、7、14 天亚组。除假手术组外，其余各组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞(MCAO)模型，缺血90 min后再灌注。补阳还五汤组、激动剂组、激动剂阴性对照组建模24 h后开始给予补阳还五汤灌胃，每日2次；假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃，直至处死的前1天。激动剂组和激动剂阴性对照组建模24 h后分别于侧脑室注射miRNA-26a-5p激动剂和miRNA-26a-5p激动剂阴性对照剂，其他各组注射等量生理盐水。各组建模24 h后腹腔注射Brdu，每日1次，直至处死的前1天。采用改良版神经损伤严重程度评分(mNSS)评价神经功能缺损，2.3.5-三苯四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积，TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡，免疫荧光双标记法检测Brdu/NeuN双阳性(BrdU+/ NeuN+)细胞数评估新生神经元，双荧光素酶实验验证PTEN是miR-26a-5p的靶基因，实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)检测PTEN及miR-26a-5p的表达，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达。结果显示，与模型组比较，补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复，缩小梗死体积，增加BrdU+/ NeuN+细胞数，上调miRNA-26a-5p的表达，调控PTEN/PI3K/Akt信号通路，促进神经元新生；侧脑室注射miR-26a-5p激动剂后加强上述效应。综上所述，补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复，减小梗死体积，促进脑缺血大鼠神经元新生，其机制可能是通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路。

关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注神经保护 miR-26a-5p 大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血 PTEN/PI3K/Akt

局灶性脑缺血再灌注大鼠神经血管单元的空间构筑

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中国康复理论与实践 2015年第1期21卷 31-34页

作者：金媛媛胡静冯璐李杨陈烨胡晓松李帅成都医学院临床医学系四川成都市610500 成都医学院形态学实验室四川成都市610500

目的研究局灶性脑缺血不同再灌注时间段大鼠脑血管、神经元和星形胶质细胞的空间构筑。方法 24只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=16),模型组再平均分为再灌注1 d和2周两个亚组。线栓法大鼠大脑中动脉闭塞1 h后再灌... 详细信息

目的研究局灶性脑缺血不同再灌注时间段大鼠脑血管、神经元和星形胶质细胞的空间构筑。方法 24只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=16),模型组再平均分为再灌注1 d和2周两个亚组。线栓法大鼠大脑中动脉闭塞1 h后再灌注。各组活体灌注明胶墨汁。按时间取脑组织冰冻连续切片,免疫组织化学法观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(Neu N)的表达。结果血管在皮质或神经核等处分布较多,多数星形胶质细胞突起与血管及神经元接触。模型组缺血侧GFAP表达较假手术组持续增多,Neu N表达减少。再灌注1 d缺血侧血管数目明显减少,再灌注2周后增多,但仍低于假手术组及非缺血侧。结论观察到脑缺血再灌注大鼠神经血管单元的构筑。

关键词：局灶性脑缺血再灌注神经血管单元空间构筑大鼠

局灶性脑缺血大鼠纹状体区域Shh信号通路成分的表达变化及对髓鞘修复的影响

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中风与神经疾病杂志 2016年第7期33卷 629-632页

作者：赵红吴晓君刘赞华王苏平闫旭大连市中心医院神经内科大连辽宁116033 大连医科大学在读研究生大连辽宁116044

目的检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路及其转录因子Gli1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化,探讨该通路对脑缺血后髓鞘再生的影响。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和RT-PCR... 详细信息

目的检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路及其转录因子Gli1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化,探讨该通路对脑缺血后髓鞘再生的影响。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和RT-PCR的方法观察脑缺血后1 d,3 d,7 d和14 d Shh,Gli1的表达变化。碱性髓鞘蛋白(myelin basic protein,MBP)是髓鞘的组成成分,用作髓鞘的标志物,观察脑缺血后上述各时间点MBP的表达变化。结果正常大鼠Shh和Gli1广泛分布于脑白质和灰质,如皮质,胼胝体和纹状体等区域。Shh和Gli1的表达在脑缺血后3 d^14 d呈逐渐上升趋势。MBP的表达在脑缺血后1 d^28 d逐渐下降。结论脑缺血性损伤可激活Shh信号通路,激活的Shh可能通过调控细胞的增殖参与神经修复,针对Shh的表达量进行干预治疗将为脱髓鞘疾病的治疗提供理论依据。

关键词：局灶性脑缺血 Shh信号通路 Gli1 髓鞘再生