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褪黑素及其尿代谢产物诊断中枢性性早熟的价值与研究进展

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现代医学与健康研究电子杂志 2022年第17期6卷 28-31页

作者：郭豆豆江子艺李欣华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科湖北武汉430022

褪黑素(N-乙酰基-5-甲氧基色胺)是松果体分泌的一种受昼夜节律调节的神经内分泌激素,受下丘脑视交叉上核(SCN)调控,主要于夜间呈脉冲式分泌,使生物体的功能活动适应外界环境变化。调节生殖系统是其主要功能之一,褪黑素可通过影响下丘脑... 详细信息

褪黑素(N-乙酰基-5-甲氧基色胺)是松果体分泌的一种受昼夜节律调节的神经内分泌激素,受下丘脑视交叉上核(SCN)调控,主要于夜间呈脉冲式分泌,使生物体的功能活动适应外界环境变化。调节生殖系统是其主要功能之一,褪黑素可通过影响下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)介导的神经元的功能活动、直接抑制性腺组织等途径对下丘脑-垂体-性腺轴起负性调节作用,从而抑制性腺发育。褪黑素在人体中主要通过肝脏代谢,其次是肾脏,主要代谢产物从尿液排出。其中,尿6-羟基硫酸褪黑素可较准确地反映循环中褪黑素水平。因采样方便、无创可重复性强且不受昼夜激素变化的影响,检测尿6-羟基硫酸褪黑素逐渐被应用于探索中枢性性早熟的诊断方法的研究中。现结合既往研究情况,就褪黑素对下丘脑-垂体-性腺轴(HPG axis)及生殖系统的作用做一综述,并探讨检测尿代谢物6-羟基硫酸褪黑素这一无创检查辅助诊断中枢性性早熟(CPP)的临床意义和可行性,为进一步简化中枢性性早熟诊断流程及提高患者及家属依从性提供依据。

关键词：褪黑素尿代谢产物中枢性性早熟下丘脑-垂体-性腺轴儿童

早产儿视网膜病患儿出生尿代谢产物差异分析的初步研究

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中国儿童保健杂志 2018年第9期26卷 991-994页

作者：蔡尧雷辉郝虎杨秋萍李菲古霞李思涛中山大学附属第六医院儿科广东广州510655 深圳市盐田区人民医院儿科广东深圳518081

目的探讨早产儿视网膜病(ROP)患儿出生尿代谢产物特征性变化,以期为ROP的诊断提供新的生物标记物。方法收集2013年1月—2016年12月于中山大学附属第六医院住院的21例ROP实验组患儿及同期21例非ROP对照组患儿尿液标本,利用气相色谱-质谱... 详细信息

目的探讨早产儿视网膜病(ROP)患儿出生尿代谢产物特征性变化,以期为ROP的诊断提供新的生物标记物。方法收集2013年1月—2016年12月于中山大学附属第六医院住院的21例ROP实验组患儿及同期21例非ROP对照组患儿尿液标本,利用气相色谱-质谱技术进行代谢产物测定,运用正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)进行代谢组学分析。结果联合代谢聚类图与权重图分析发现10个权重较大的物质(油酸、犬尿酸、2-甲基3-羟基丁酸、3-氨基异丁酸、3-羟基3-甲基戊二酸、马尿酸、蛋氨酸、甘油酸、次黄嘌呤和4-羟基苯乳酸)中ROP组患儿尿甲硫氨酸、3-氨基异丁酸、马尿酸水平明显降低,3-羟基3-甲基戊二酸明显升高,与对照组比较差异均具有统计学意义(P均尿甲硫氨酸、3-羟基-3-甲基戊二酸、3-氨基异丁酸、马尿酸等代谢产物在ROP早期诊断中具有潜在的应用价值。

关键词：气相色谱-质谱早产儿视网膜病变早产儿尿代谢产物

尿有机酸代谢异常与早产儿视网膜病变的相关性分析

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中华眼底病杂志 2024年第6期40卷 434-442页

作者：何露孙慧清郑州大学附属儿童医院河南省儿童医院新生儿科系郑州450000

目的观察早产儿视网膜病变(ROP)患儿尿代谢产物氨基酸水平变化及其对ROP的影响,初步分析其可能参与ROP发生的氨基酸代谢途径。方法回顾性队列研究。2020年1月至2023年12月于郑州大学附属儿童医院住院治疗且出生胎龄1提示该物质为两组差... 详细信息

目的观察早产儿视网膜病变(ROP)患儿尿代谢产物氨基酸水平变化及其对ROP的影响,初步分析其可能参与ROP发生的氨基酸代谢途径。方法回顾性队列研究。2020年1月至2023年12月于郑州大学附属儿童医院住院治疗且出生胎龄尿液中尿氨基酸及衍生物。两组比较采用独立样本t检验。采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型对尿氨基酸进行代谢组学分析,变量投影重要性(VIP)分值>1提示该物质为两组差异表达氨基酸。采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积比较尿氨基酸对重度ROP的预测价值。对t检验及代谢组学分析两组差异较大的氨基酸归一化后进行对比并行Pearson相关性分析。采用京都基因和基因组百科全书数据库富集分析差异表达氨基酸参与ROP发生的代谢通路。结果与对照组比较,ROP组患儿尿代谢产物中草酸-2、亚硫基二乙酸-2浓度明显降低,4-羟基丁酸-2、3-甲基戊烯二酸-2(1)、2-酮戊二酸-OX-2(2)、3,6-环氧-十二烷二酸-2浓度明显升高,差异有统计学意义(t=0.036、0.005、0.038、0.032、0.022、0.011,P尿代谢产物氨基酸分布于散点图的左右两个区域,两组之间呈现满意分离趋势(R2 Ycum=0.0574,Q2cum=0.0257,P1的差异表达氨基酸11个,其中VIP分值最高的是草酸-2、甘油酸-3、磷酸-3、3-甲基巴豆酰甘氨酸-1、尿黑酸-3、亚硫基二乙酸-2。两组氨基酸浓度差异最大的为4-羟基丁酸-2和亚硫基二乙酸-2;草酸-2与甘油酸-3之间相关性最大(r=0.830,P代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、硫辛酸代谢。结论4-羟基丁酸-2、3-甲基戊烯二酸-2(1)、亚硫基二乙酸-2、2-酮戊二酸-OX-2(2)、3,6-环氧-十二烷二酸-2氨基酸代谢异常可能对ROP的发生有一定影响。

关键词：早产儿尿代谢早产儿视网膜病变尿氨基酸尿代谢产物

孕期有机磷农药不同暴露水平对新生儿神经行为和体格发育的影响

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孕期有机磷农药不同暴露水平对新生儿神经行为和体格发育的影响

作者：苏微沈阳医学院

学位级别：硕士

目的本研究以沈阳市部分孕产妇为研究对象,调查其孕期有机磷农药暴露特征及相关因素,并对其生物样本进行实验室检测,随访其新生儿神经行为及体格发育情况,从而探索孕期有机磷农药暴露对新生儿神经行为和体格发育的影响,为发现有机磷农... 详细信息

目的本研究以沈阳市部分孕产妇为研究对象,调查其孕期有机磷农药暴露特征及相关因素,并对其生物样本进行实验室检测,随访其新生儿神经行为及体格发育情况,从而探索孕期有机磷农药暴露对新生儿神经行为和体格发育的影响,为发现有机磷农药暴露易感人群、协助政府部门制定健康干预措施提供依据。方法本课题选择2011年3月—2012年3月在沈阳医学院附属中心医院分娩的健康产妇为研究对象,通过问卷调查了解产妇孕期有机磷农药接触情况及特征,通过GC-14A气相色谱仪检测产妇孕期尿中有机磷农药5种非特异性代谢产物浓度,评估其孕期有机磷农药内暴露水平;以NBNA量表评估新生儿神经行为情况,以出生体重、身长和头围作为新生儿体格发育指标;采用RFLP-PCR技术检测新生儿脐血PON1 192和PON1 55基因型,从而分析孕期OPs暴露对新生儿神经发育和体格发育的影响。结果(1)249 名产妇平均年龄(28.80±3.32)岁,平均 BMI 为(22.41±3.83)kg/m2,平均孕周(38.89±0.98)周。249名新生儿平均身长(51.04±2.02)cm,平均体重(3502.29±464.14)g,平均头围(34.93±1.24)cm。87.15%产妇生活在城市,大多数产妇经常食用蔬菜(63.45%)和水果(63.05%),但有农药职业暴露史者较少(孕前3人,孕后4人)。RFLP-PCR检测PON1 192基因型结果QR型132人(53.01%),突变纯合子RR基因型产妇有74人(29.72%);对于PON1 55基因型,本研究人群91.97%产妇为LL型,其余为LM型,未检测出PON1 55 MM基因型产妇;(2)5种有机磷农药代谢产物中,DMP、DMTP、DEP、DETP的检出率均在 80%以上,其几何均数分别为:13.78μg/L、3.40μg/L、3.54μg/L、7.04μg/L,DEDTP检出率为6.8%。比较不同特征产妇尿代谢产物水平,30-34岁组孕产妇尿DMs代谢产物水平明显高于24-29岁孕产妇(P=0.008);从不使用杀虫剂产妇DAP和DMs浓度低于偶尔使用者(P<0.05)和经常使用者(P<0.05),从不使用杀虫剂产妇DEs明显低于偶尔使用者(P=0.02);很少吃水果和蔬菜者DAP和DMs均高于偶尔吃者(P<0.05)和经常吃者(P<0.05);(3)采用NBNA量表,比较不同特征产妇其新生儿神经发育特征,结果表明:初产妇的新生儿行为能力得分高于非初产妇(P=0.032);月收入3001-5000元组的原始反应得分高于1000元以下组(P=0.016)和5000元以上组(P=0.009);偶尔被动吸烟组其新生儿主动肌张力得分高于很少组(P=0.019)和经常被动吸烟组(P=0.043);产妇孕前有OPs职业暴露者其新生儿原始反应得分高于孕前无职业暴露者(P<0.001);孕后职业暴露者NBNA总分(P<0.001)和主动肌张力得分(P<0.001)较低,原始反应得分较高(P<0.001);从不使用杀虫剂的产妇其新生儿被动肌张力得分明显高于偶尔使用者(P=0.011);从不食用水果组新生儿NBNA总分和行为能力低于偶尔食用组(P<0.05)和经常食用组(P<0.05),经常食用组被动肌张力得分高于从不食用组(P=0.007)和偶尔食用组(P=0.043);比较不同DAP、DMs及DEs组之间NBNA总分及各维度得分情况,三个DAP组之间NBNA总分和行为能力得分均不相同(P<0.005),高DAP组被动肌张力和原始反应得分均低于低DAP组(P<0.001)和中DAP组(P<0.001),低DAP组主动肌张力得分高于中DAP组(P=0.004)和高DAP组(P=0.002);三个DMs组之间NBNA总分和行为能力得分均不相同(P<0.005),高DMs组被动肌张力和原始反应得分均低于低DMs组(P<0.001)和中DMs组(P<0.005),低DMs组主动肌张力得分高于高DMs组(P=0.019);三个DEs组NBNA总分和原始反应得分均不相同(P<0.05),低DEs组行为能力得分高于中DEs组(P<0.001)和高DEs组(P<0.001),高DEs组被动肌张力得分低于低DEs组(P=0.013)和中DEs组(P=0.043),低DEs组主动肌张力得分高于中DEs组(P=0.001)和高DEs组(P=0.004)。比较PON1不同基因型新生儿NBNA总分及各维度得分情况,QQ型的新生儿原始反应得分高于QR型(P=0.023)和RR型(P=0.006);(4)比较不同特征产妇其新生儿体格发育情况,结果表明:偶尔吸烟组新生儿身长大于很少吸烟组(P=0.047)和经常吸烟组(P=0.009),经常吸烟组新生儿体重和头围低于偶尔

关键词：有机磷农药尿代谢产物神经行为发育体格发育孕妇新生儿

孕期有机磷农药暴露与新生儿神经行为发育关系研究

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孕期有机磷农药暴露与新生儿神经行为发育关系研究

作者：袁媛吉林大学

学位级别：硕士

我国是农药的使用大国，其中1/3以上是有机磷农药（OPs）。由于农药的过量使用和高残留，人群通过食物途径对OPs普遍暴露。国外有文献报告，孕妇、儿童等人群已成为OPs暴露的敏感人群。OPs对神经系统的损害是其重要的毒性作用之一。但宫... 详细信息

我国是农药的使用大国，其中1/3以上是有机磷农药（OPs）。由于农药的过量使用和高残留，人群通过食物途径对OPs普遍暴露。国外有文献报告，孕妇、儿童等人群已成为OPs暴露的敏感人群。OPs对神经系统的损害是其重要的毒性作用之一。但宫内OPs的早期暴露，对婴幼儿神经发育作用的研究在国内外仍刚刚起步。目前对于有机磷农药暴露水平的有效测量仍是研究的难点。本研究组通过与上海市疾病预防控制中心合作，采用气相色谱法（GC）检测OPs的体内代谢产物烷基磷酸酯化合物（DAP），可以准确有效的反映机体对低剂量OPs的暴露水平，从而为进行孕期体内OPs的暴露水平评估及对新生儿神经发育的危险性评价奠定了基础。本研究采用流行病学现况研究的方法，以沈阳医学院附属中心医院分娩的健康孕产妇及其新生儿为研究对象，收集分娩前产妇尿样、用于有机磷农药体内代谢产物的测定，于新生儿出生第3天采用新生儿20项行为神经测定法（NBNA）评价新生儿神经行为发育情况。本研究应用气相色谱法测定体内五种有机磷农药尿代谢产物（DAP），包括磷酸二甲酯（DMP）、二甲基硫代磷酸酯(DMTP)，磷酸二乙酯（DEP）、二乙基硫代磷酸酯（DETP），作为OPs的体内暴露标志物，对沈阳市孕产妇体内OPs的累积暴露水平进行了评估，并探讨其影响因素及对新生儿神经发育影响的危险性评价。研究表明：202名产妇孕期有机磷农药尿代谢产物的检出率从92.89%（DEP）到5.2%（DEDTP）。各代谢产物的最大检出值（未经肌酐校正）分别为DMP为334.02μg/L，DEP为167.06μg/L，DMTP为137.95μg/L, DETP为133.0μg/L, DEDTP为2.49μg/L;有机磷农药尿代谢产物的几何均数分别为DMP为18.03μg/L, DMTP为8.53μg/L，DEP为7.14μg/L，DETP为5.64μg/L，DEDTP由于检出率较低，几何均数未计算。比较不同特征产妇孕期体内有机磷农药代谢产物DMs、DEs水平，30岁以上产妇体内DMs水平明显高于其他年龄组产妇水平，差异有统计学意义（P＜0.05）;产妇孕期有机磷农药的体内暴露水平与新生儿神经行为评分之间呈负相关（P＜0.05）;且孕期有机磷农药高暴露水平的产妇，其新生儿神经发育NBNA评分总分以及行为能力、被动肌张力、主动肌张力和原始反射评分，均明显低于有机磷农药中、低暴露水平组，差异有统计学意义（P＜0.05）。综上，沈阳市30岁以上产妇体内有机磷农药暴露水平比其他年龄产妇暴露水平略高，提示年龄可能是有机磷农药暴露的危险因素;产妇孕期有机磷农药暴露水平与新生儿神经行为发育有关，孕期有机磷农药暴露可能是新生儿神经系统发育的危险因素，即孕期有机磷农药暴露的水平越高，可能越对新生儿神经发育不利。本研究对沈阳孕产妇体内OPs的累积暴露水平进行了初步评估，并探索了孕期OPs暴露对新生儿神经发育的影响，为进一步开展孕期OPs暴露水平监测，为国内育龄妇女长期接触OPs设定体内安全限值提供了科学依据。

关键词：有机磷农药尿代谢产物神经行为发育孕妇新生儿

尿样中四种有机化合物代谢产物的富集及气相色谱检测方法的研究

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尿样中四种有机化合物代谢产物的富集及气相色谱检测方法的研究

作者：徐梵姝东北大学

学位级别：硕士

正己烷、苯、甲苯和硝基苯等有机化合物被广泛用于工业生产和科学研究领域中,是最常用的有机溶剂。这些物质通过呼吸道吸入或皮肤接触,会对人体健康产生一定程度的危害,此类有害物质经体内代谢后可在其尿、血等生物材料中检出其相应的... 详细信息

正己烷、苯、甲苯和硝基苯等有机化合物被广泛用于工业生产和科学研究领域中,是最常用的有机溶剂。这些物质通过呼吸道吸入或皮肤接触,会对人体健康产生一定程度的危害,此类有害物质经体内代谢后可在其尿、血等生物材料中检出其相应的代谢产物,其中2,5-己二酮、苯酚、邻甲酚和对硝基苯酚依次为上述四种物质的尿代谢产物。随着社会的发展,职业危害及预防越来越受到人们的关注,对这些有害、有毒物质的尿代谢产物进行监测,能客观反映出机体接触有害物质的水平及中毒程度,可为职业中毒诊断和治疗提供重要的依据。然而,目前我国尚缺乏尿样中多种有害物质代谢产物同时检测的成熟方法,更缺少这些有害物质代谢物在正常人群尿中的本底值和样本库。为此,建立一种同时检测尿样中多种有害物质代谢产物的分析方法十分必要。本研究建立了一种同时检测四种尿代谢产物的毛细管气相色谱方法(GC)。通过考察色谱柱类型、柱温、进样方式、进样量、载气流速、柱前压等条件对四种组分的分离和检测情况的影响,确定最佳色谱分离及检测条件：以DB-1毛细管柱(15m×0.53mm×O.50μm)为色谱分离柱;采取程序升温方式：初始温度60℃,以25℃/min升至140℃,并保持2min;以氮气为载气,流速为20mL/min;尾吹气(氮气)流速为11.7mL/min;氢气流速为434mL/min;空气流速为430mL/min;采用不分流进样,最佳进样量为1.6μL;进样口温度为260℃,FID检测器温度为300℃。在最佳色谱条件下,四种组分在5min内全部出峰,且达到完全分离,可以满足四种有害物质尿代谢产物的同时分离与检测。本研究同时建立了分散液相微萃取(DLLME)和固相萃取(SPE)两种样品前处理方法,用于尿样中四种有害物质尿代谢产物的提取与富集。通过一系列实验参数的优化,确定两种预处理方法的最佳实验条件。其中,分散液相微萃取是以150μL二氯甲烷作为萃取剂,0.6mL异丙醇为分散剂,萃取时间6min,尿样最佳pH值为6左右,加盐量0.2g。固相萃取时,固定相为ProElut C18,尿样最大上样体积25mL,尿样pH为6左右,洗脱剂为二氯甲烷-四氯乙烷(v：v=17：3),洗脱剂用量0.5mL在最佳实验条件下,分别建立了用于四种尿代谢产物定量分析的DLLME-GC和SPE-GC的工作曲线,线性相关系数在0.9990～0.9999,线性范围0.01～83μg/mL。其中,DLLME-GC对各组分的富集倍数在19～31倍之间,检出限为0.002～0.2μg/mL(S/N=3),尿样加标平均回收率为86.7%～105%,相对标准偏差为3.1%～5.0%。SPE-GC对各组分的富集倍数在14～42倍之间,检出限为0.002～0.4μg/mL (S/N=3),样品加标平均回收率为88.2%～108%,相对标准偏差为3.0%～4.9%。研究表明,所建立的DLLME-GC和SPE-GC两种尿中有害物质代谢产物的同时测定方法均具有简便、快速、灵敏、准确、对环境友好的特点,能够满足尿样中有害物质代谢产物生物监测工作的需要。

关键词：尿代谢产物分散液相微萃取固相萃取气相色谱

质谱-色谱技术在早产儿蛋白质代谢中的应用研究

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新疆医科大学学报 2018年第6期41卷 728-730,736页

作者：马丽霞郑晓玲朱小敏珠海市第二人民医院新生儿科广东珠海519000

目的利用气相色谱-质谱技术分析早产儿尿液中重要的蛋白质代谢产物(赖氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、鸟氨酸、延胡索酸、苹果酸)水平,进而探讨早产儿尿代谢产物特点,为早产儿实现合理的肠道内、外营养提供依据。方法收集2016年7月-2017年12月... 详细信息

目的利用气相色谱-质谱技术分析早产儿尿液中重要的蛋白质代谢产物(赖氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、鸟氨酸、延胡索酸、苹果酸)水平,进而探讨早产儿尿代谢产物特点,为早产儿实现合理的肠道内、外营养提供依据。方法收集2016年7月-2017年12月的47例早产儿(胎龄28~36w)及45例同期分娩的正常足月儿(胎龄37~41w)的尿液标本,利用尿素酶预处理-气相色谱-质谱法(UP-GC-MS)测定2组新生儿尿液中的赖氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、鸟氨酸、延胡索酸、苹果酸的水平。结果早产儿组的尿液中赖氨酸、苯丙氨酸以及组氨酸水平均明显低于足月儿组,差异均有统计学意义(P尿液中鸟氨酸、延胡索酸及苹果酸水平均明显低于足月儿组,差异均有统计学意义(P代谢,而足月儿的分解代谢水平较早产儿高。测定尿代谢产物可在临床工作中用于评估新生儿体内代谢状况,从而进一步指导临床实施合理的营养支持方案。

关键词：气相色谱-质谱早产儿蛋白质尿代谢产物