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世界华人消化杂志 2006年第21期14卷 2135-2138页

作者：成峰王学浩肇毅黄蓬南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心江苏省南京市210029 南京医科大学第一附属医院普通外科江苏省南京市210029 南京医科大学动物实验中心江苏省南京市210029

目的：采用尾静脉液压法注射SB转座元(sleeping beauty transposon)系统转人类白细胞介素10(human interleukin-10,hIL-10)在大鼠肝组织中的表达．方法：采用Ringers溶液20mL经尾静脉10-12 s内快速注射．实验分组：Rinzers 20mL对照组、... 详细信息

目的：采用尾静脉液压法注射SB转座元(sleeping beauty transposon)系统转人类白细胞介素10(human interleukin-10,hIL-10)在大鼠肝组织中的表达．方法：采用Ringers溶液20mL经尾静脉10-12 s内快速注射．实验分组：Rinzers 20mL对照组、DOTAP 100μg空白组、DOTAP 100μg+pT-hIL-10 50μg转基因组、pT-hIL-10 50μg+pCMV-SB 5μg共注射组(每组n=6)．尾静脉注射后采血检测肝功能和转基因组血清中hIL-10的表达．RT-PCR法检测转基因组术后7,14d肝组织中hIL-10 mRNA的表达．结果：尾静脉注射后1,4,7d Ringers 20mL组、DOTAP组、DOTAP+pT-hIL-10组、pT- hIL-10+pCMv-SB共注射组ALT水平分别为：4339±602,13516±535,6576±347,4451±465；984±125,4087±600,2117±243,1158±130；592±85,2339±300,1384±165,40±663nkat/***+pT-hIL-10组、pT- hIL-10+pCMV-SB共注射组术后1,4,7,14d血清hIL-10浓度分别为：818．3±24．9,640．7±20．6,441．3±25．4,322．3±15．4和1008．3±65．8,820．8±20．9,675．8±31．6,438．2±26．0μg/L,两组相比有显著差异(P＜0．01)．转座元转基因组2wk后仍有hIL-10 mRNA表达,高于DOTAP转基因组．结论：尾静脉液压法注射转hIL-10可在大鼠肝组织中较长时间表达,联合SB转座元系统转hIL-10可提高转基因的效率．

关键词：尾静脉液压法人类白细胞介素10 SB转座元大鼠

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尾静脉液压法导入人白细胞介素-10质粒在大鼠牙周膜的表达

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转化医学研究（电子版） 2013年第1期3卷 1-12页

作者：郭建斌闫福华马守治陈江福建医科大学附属口腔医院种植科福州350002 南京大学口腔医学院南京市口腔医院牙周科 210008 福建医科大学口腔医学院基础部福州350002

目的探讨尾静脉液压法导入质粒后外源基因在大鼠牙周膜的表达情况。方法选用24只SD大鼠，随机分为h1L-10组与Veetor组，尾静脉液压法导入质粒后，肝脏冰冻切片及血清检查外源基因的表达。取上颌第二磨页牙周膜，观察免疫组织化学法h1L-1... 详细信息

目的探讨尾静脉液压法导入质粒后外源基因在大鼠牙周膜的表达情况。方法选用24只SD大鼠，随机分为h1L-10组与Veetor组，尾静脉液压法导入质粒后，肝脏冰冻切片及血清检查外源基因的表达。取上颌第二磨页牙周膜，观察免疫组织化学法h1L-10的表达情况。结果荧光镜下可见她肝脏冰冻切片显示人丛绿色荧光蛋白的表达；采用尾静脉液压法导入h1L-10质粒24h后肝脏组织巾有较离的h1L-10蛋h表达。导人h1L-10质粒4h后即检测到h1L-10表达，8h时可达高峰。牙周膜区域未显示明显的h1L-10蛋白表达。未能检测到空载体组大鼠h1L-10蛋白的表达，结论尾静脉液压法导入h1L-10质粒后能使外源基因在大鼠体内获得相对稳定的表达，但在大鼠牙刷膜区域未能观察到h1L-10蛋白的表达。

关键词：人白细胞介素-10 尾静脉液压法牙周膜质粒

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滋水清肝饮加减方防治尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒诱发的原发性肝癌的作用与机制研究

滋水清肝饮加减方防治尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒诱发的原发...

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作者：王雅欢华中科技大学

学位级别：硕士

第一部分原发性肝癌模型的构建目的:尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒构建原发性肝癌模型。方法:本实验采用尾静脉液压法构建原发性肝癌动物模型,将AKT/N-Ras质粒通过尾静脉快速打入实验动物体内,实验动物选择FVB小鼠、C57BL/6J小鼠和C57B... 详细信息

第一部分原发性肝癌模型的构建目的:尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒构建原发性肝癌模型。方法:本实验采用尾静脉液压法构建原发性肝癌动物模型,将AKT/N-Ras质粒通过尾静脉快速打入实验动物体内,实验动物选择FVB小鼠、C57BL/6J小鼠和C57BL/6J Ang-1(-/-)小鼠,每种动物各24只,雌雄各半,将动物随机分为正常组和模型组,模型组小鼠尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒诱导原发性肝癌,造模后,观察小鼠一般情况,观察小鼠肝脏颜色、大小、质地和病变程度等,称量肝脏重量,计算肝器官系数,取病变肝脏组织进行固定、石蜡包埋、切片及HE染色,显微镜观察肝脏组织学情况。免疫组织化学法检测肝脏组织AKT、P-AKT、ANG和CD133的表达情况。结果:1)FVB小鼠模型中:模型组小鼠第三周开始出现腹部隆起,肝脏较正常组明显增大,造模后最长生存时间为五周。正常组肝脏色红,表面光滑,质地软,模型组小鼠第一周时肝脏呈粉红色,表面可见白色病变,第三周时,外观较正常组已发生明显变化,肝脏表面布满大小不等的灰白色颗粒,整体呈红褐色,第四周时,肝脏整体呈黄白色,脂肪性病变明显,质地硬。模型组肝脏系数较正常组大,具有显著性差异(p尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒诱发的FVB小鼠原发性肝癌的作用与机制研究目的:本部分旨在通过尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒诱发的FVB小鼠原发性肝癌模型,探讨滋水清肝饮加减方防治原发性肝癌的作用与机制。方法:选取健康FVB小鼠36只,将动物随机分为正常组、模型组、滋水清肝饮***-1.d-1、***-1.d-1、***-1.d-1、***-1.d-1剂量组,每组6只,雌雄各半,除正常组外,所有小鼠采用尾静脉液压法注射AKT/N-Ras质粒诱导原发性肝癌模型,每天观察小鼠一般情况,质粒注射一周后,正常组和模型组给予生理盐水,滋水清肝饮四个剂量组

关键词：尾静脉液压法 AKT/N-Ras 原发性肝癌小鼠模型滋水清肝饮加减方原发性肝癌

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不同重组慢病毒介导人凝血因子ⅨcDNA在血友病B小鼠中表达的影响

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复旦学报（自然科学版） 2004年第2期43卷 152-155,162页

作者：宫菊丽陈晓光朱焕章薛京伦复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

血友病B是凝血因子Ⅸ (hFⅨ )缺乏所导致的严重凝血功能障碍、X 连锁隐性遗传性疾病 ,在男性中的发病率为三万分之一 .目前没有理想的治疗措施 ,而基因治疗可能是根治该病的安全、有效方法 .该实验构建了ubiquitin c和ABP(肝特异性 )启... 详细信息

血友病B是凝血因子Ⅸ (hFⅨ )缺乏所导致的严重凝血功能障碍、X 连锁隐性遗传性疾病 ,在男性中的发病率为三万分之一 .目前没有理想的治疗措施 ,而基因治疗可能是根治该病的安全、有效方法 .该实验构建了ubiquitin c和ABP(肝特异性 )启动子指导hFⅨ表达的载体FUXW、FAXW ,利用磷酸钙法共转染三质粒制备高滴度的重组慢病毒 .将不同剂量的重组FUXW、FAXW病毒 ,分别用尾静脉液压法和静脉缓注法注射入血友病B小鼠体内 ,各治疗组小鼠血浆均可持续检测到hFⅨ抗原 ,最高峰值为 4 5ng/mL ,表达持续超过 6 0d .结果表明 :hFⅨ蛋白的表达与病毒的剂量成正相关 ,重组FAXW病毒的hFⅨ表达量高于重组FUXW病毒 ,而尾静脉液压组和静脉缓注组在表达量、表达时间上没有显著差异 .

关键词：血友病B 重组慢病毒磷酸钙转染法尾静脉液压法

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应用整合酶ΦC31治疗1型糖尿病的实验研究

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中国临床医学 2004年第3期11卷 397-399页

作者：盛卫忠沈坤堂秦新裕复旦大学附属中山医院普外科上海200032

目的 :将整合酶ΦC31和尾静脉液压法结合用于 1型糖尿病的基因治疗。方法 :应用尾静脉液压法 (hydrodynamic) ,将携带attB位点的、突变后的人胰岛素原cDNA(mhINS)表达质粒pCMV -mhINS -attB及ΦC31整合酶表达质粒 pCMV -Int同时导入STZ... 详细信息

目的 :将整合酶ΦC31和尾静脉液压法结合用于 1型糖尿病的基因治疗。方法 :应用尾静脉液压法 (hydrodynamic) ,将携带attB位点的、突变后的人胰岛素原cDNA(mhINS)表达质粒pCMV -mhINS -attB及ΦC31整合酶表达质粒 pCMV -Int同时导入STZ诱导的糖尿病小鼠体内。结果 :注射后 ,治疗组糖尿病小鼠血糖水平恢复正常并维持 4周 ,小鼠体重增加 ,血清胰岛素水平显著升高。免疫组化检测证实mhINS在小鼠肝脏有效表达。结论 :整合酶ΦC31能介导人胰岛素原cDNA在糖尿病小鼠肝脏中持续表达 ,将是糖尿病基因治疗的有用工具。

关键词：整合酶ФC31 治疗 1型糖尿病实验尾静脉液压法胰岛素依赖

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