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海洋产油真菌的简便初筛

台湾海峡 2010年第1期29卷 128-134页

作者：秦艳红叶德赞国家海洋局第三海洋研究所、国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

选取分离自大洋、深海的28株酵母和143株霉菌,采用在培养基中添加尼罗红比较表观荧光强度的方法来筛选出酵母2株和霉菌7株,但菌体呈红色的酵母(17株)及菌丝为黑色的霉菌(28株)不适用于此法;通过单位OD600荧光强度的高低筛选出1株菌落为... 详细信息

选取分离自大洋、深海的28株酵母和143株霉菌,采用在培养基中添加尼罗红比较表观荧光强度的方法来筛选出酵母2株和霉菌7株,但菌体呈红色的酵母(17株)及菌丝为黑色的霉菌(28株)不适用于此法;通过单位OD600荧光强度的高低筛选出1株菌落为微红色的酵母,产油性能好于用第一种方法挑选出的2株酵母,且菌体颜色对结果并无影响,但只适合筛选酵母.通过上述2种方法筛选出高油脂菌株,大多来源于深海.

关键词：海洋生物学尼罗红海洋油脂真菌脂肪酸方法

甘蓝型油菜油体数量及面积之和与含油量的相关性

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植物学报 2009年第1期44卷 79-85页

作者：董劲松石东乔高建芹李成磊刘洁戚存扣杨维才南京农业大学农学院南京210095 中国科学院遗传与发育生物学研究所中国科学院分子发育生物学重点实验室北京100101 江苏省农业科学院经济作物研究所南京210014

利用荧光染料尼罗红染色和激光扫描共聚焦显微观察技术,建立了油菜油体观察或生物体内中性脂类物质定性鉴定的研究体系。对高油品种宁油14号、宁油18号、ZH-088和低油品种ZL-366、NjY008、Westar共6个甘蓝型油菜品种子叶贮藏细胞内的油... 详细信息

利用荧光染料尼罗红染色和激光扫描共聚焦显微观察技术,建立了油菜油体观察或生物体内中性脂类物质定性鉴定的研究体系。对高油品种宁油14号、宁油18号、ZH-088和低油品种ZL-366、NjY008、Westar共6个甘蓝型油菜品种子叶贮藏细胞内的油体进行了观察。研究发现:油菜种子成熟过程中,油体从着色不明显的小颗粒,逐渐发育形成着色清晰的球状大油体。种子成熟干燥后,油体间很少发生聚合。在成熟干燥的种子中,油体集中分布于子叶贮藏细胞中央,呈椭圆形或不规则形状,较少为圆形。通过研究种子内油体与含油量的关系,发现高油品种组与低油品种组之间在单个子叶贮藏细胞内油体数量和截面积之和存在明显差异,而在高油品种组内或低油品种组内的差异不明显。结果显示,油菜种子细胞中油体的数量和总面积与含油量之间存在正相关,可作为高油分材料的选择依据。

关键词：甘蓝型油菜尼罗红油体含油量

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鱼富脂胃肠道中微塑料检测

环境化学 2024年第7期43卷 2181-2193页

作者：赵国强邓舒美朱翔赵利江勇江西科技师范大学生命科学学院南昌330013 江西省鄱阳湖水文生态监测研究重点实验室南昌330002 信江饶河水文水资源监测中心景德镇333000

为建立富含脂质的生物样本中微塑料的检测方法,以鱼胃肠道为研究对象,选取不同粒径(10-100μm、100-500μm、500-1000μm和1-5 mm)、不同密度(ρ1.3 g·cm^(-3))的6种微塑料为验证对象,对传统KOH消解法中回收率低、皂化反应干扰、计数... 详细信息

为建立富含脂质的生物样本中微塑料的检测方法,以鱼胃肠道为研究对象,选取不同粒径(10-100μm、100-500μm、500-1000μm和1-5 mm)、不同密度(ρ1.3 g·cm^(-3))的6种微塑料为验证对象,对传统KOH消解法中回收率低、皂化反应干扰、计数不准确等问题进行优化.结果表明,分液漏斗双密度浮选法能有效减少微塑料损失和降低泥沙等干扰,回收率达91%-100%;100℃热水和乙醇联用对皂化反应产生的肥皂的去除效率达98%±1.08%,生物样品的消解效率达99%±0.56%;尼罗红(Nile Red,NR)染色后,不同类型微塑料在不同滤光片下能观察到明显的荧光;除部分聚酰胺(PA)微塑料部分颜色变黄,该方法对PA、聚乙烯(PE)、聚丙烯(PP)、聚苯乙烯(PS)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)和聚氯乙烯(PVC)的红外光谱和羰基指数(carbonyl index,CI)无明显影响;实际样本应用表明,该方法对不同河段、不同种类的野生鱼类样本的消解率达97%-100%,对微塑料的检出率(84.70%)显著高于传统的体视显微镜镜检法(54.64%).

关键词：微塑料脂质密度浮选皂化反应尼罗红

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微藻细胞油脂含量的快速检测方法

中国生物工程杂志 2012年第1期32卷 64-72页

作者：张敬键吕雪娟李爱芬万凌琳吴洪尹顺吉张成武暨南大学生命科学技术学院热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心广州510632 华南农业大学测试中心广州510642 新奥科技发展有限公司煤基低碳能源国家重点实验室廊坊065001

以斜生栅藻(Scenedesmus obliquus JNU20)为实验材料,采用尼罗红(NR)荧光光谱法和傅里叶变换红外光谱法(FTIR)测定该藻细胞中的油脂含量。研究结果表明NR的最佳染色条件为:染色前微波处理40 s,二甲基亚砜体积分数1%,NR最终质量浓度1.5μ... 详细信息

以斜生栅藻(Scenedesmus obliquus JNU20)为实验材料,采用尼罗红(NR)荧光光谱法和傅里叶变换红外光谱法(FTIR)测定该藻细胞中的油脂含量。研究结果表明NR的最佳染色条件为:染色前微波处理40 s,二甲基亚砜体积分数1%,NR最终质量浓度1.5μg/ml,染色时间5 min,染色温度40℃。比较了NR荧光光谱法、FTIR与传统重量法测定的该藻在不同时相的油脂积累情况,利用激光共聚焦显微镜观察了细胞中油体形成的动态过程。实验结果表明NR荧光光谱法、FTIR与传统重量法测定的结果显著相关(R2=0.9258,R2=0.9844),但NR荧光光谱法和FTIR更简便快速,研究结果为规模化筛选高含油量藻株及跟踪产油微藻油脂积累过程奠定了基础。

关键词：斜生栅藻油脂尼罗红荧光光谱傅里叶变换红外光谱

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三种脂染色法快速检测小球藻油脂相对含量

农业生物技术学报 2015年第7期23卷 967-972页

作者：任洁郎筱宇刘志媛海南大学海洋学院

方便、快捷和低成本监测藻细胞油脂含量的方法对微藻生物质能源的研究有重要意义。本研究首先氮限处理培养小球藻（Chlorella vulgaris sp.）,采用索氏提取法测定不同生长阶段小球藻细胞脂质含量,结果显示随着培养时间增加,脂质含量相... 详细信息

方便、快捷和低成本监测藻细胞油脂含量的方法对微藻生物质能源的研究有重要意义。本研究首先氮限处理培养小球藻（Chlorella vulgaris sp.）,采用索氏提取法测定不同生长阶段小球藻细胞脂质含量,结果显示随着培养时间增加,脂质含量相应增加,培养第四天脂质增加至最高（12%;3%）。同时利用利用三种染色法（尼罗红荧光分光光度计法、苏丹黑B染色分光光度计法和油红O染色分光光度计法）测定不同生理状态小球藻细胞总脂相对含量,结果表明3种染色方法所测的吸光度值与索氏提取法测定的油脂含量均呈线性相关,可以用回归方程y=kx+b（y为脂质百分比含量,x为测定吸光值）表示。尼罗红染色法的回归方程为y=0.009543x+3.087（580 nm荧光测定值）,相关系数R2为0.957 7（P尼罗红法需采用测定荧光的分光光度计,方法简单快速,结果灵敏,但成本相对较高。苏丹黑B染色法测定步骤相对繁琐,但所用仪器较为普通,试剂成本也较低。油红O法测定结果灵敏度较低,且误差较大。本研究为不同实验室如何选择染色法测定微藻脂肪含量提供有益指导。

关键词：小球藻尼罗红苏丹黑B 油红O 总脂

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快速高通量测定三角褐指藻油脂含量

四川大学学报（自然科学版） 2018年第6期55卷 1331-1336页

作者：曹素娟柳科欢任玲萱侯兴国卿人韦兰利琼四川大学生命科学学院成都610064

为了实现三角褐指藻细胞内油脂含量的快速高通量测定,探索了尼罗红荧光染色法检测其油脂含量的检测条件.采用96孔板并配合酶标仪考察三角褐指藻的预处理液的种类及其用量、染色液尼罗红的用量、染色温度、染色时间以及细胞浓度对荧光强... 详细信息

为了实现三角褐指藻细胞内油脂含量的快速高通量测定,探索了尼罗红荧光染色法检测其油脂含量的检测条件.采用96孔板并配合酶标仪考察三角褐指藻的预处理液的种类及其用量、染色液尼罗红的用量、染色温度、染色时间以及细胞浓度对荧光强度的影响,确立最优染色条件,并研究荧光强度与油脂含量之间的对应关系.结果表明,TritonX-100终浓度为0.05%时,通透效果最佳,每100μL藻悬液中加3μL尼罗红染液(0.1mg/mL),温度40℃,时间10min,细胞浓度低于3×106个/mL时,荧光强度(y)与油脂含量(x)之间呈现良好的线性关系:y=927.37x+15.913,R2=0.9247.方法优化后,90min即内可完成对96个样品的处理及分析,极大提高了分析的通量.

关键词：三角褐指藻高通量油脂含量尼罗红荧光染色

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中性脂含量高的微拟球藻藻株的快速筛选

中国海洋大学学报（自然科学版） 2023年第12期53卷 32-39页

作者：陈小凡王路路肖腾飞朱葆华李赟潘克厚海水养殖教育部重点实验室(中国海洋大学) 山东青岛266003 崂山实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266237

微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)生长速度快、油脂含量高,已成为生产生物柴油的理想材料。为获得中性脂产率高的藻株,本研究从染色时间和染色浓度两个方面优化了尼罗红染色测定中性脂含量的方法,对不同育种方法得到的75株微拟球藻... 详细信息

微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)生长速度快、油脂含量高,已成为生产生物柴油的理想材料。为获得中性脂产率高的藻株,本研究从染色时间和染色浓度两个方面优化了尼罗红染色测定中性脂含量的方法,对不同育种方法得到的75株微拟球藻藻株的产油能力进行了评价。采用优化后的染色条件(尼罗红浓度1 mg/mL,染色时间10 min),测定了第9天微藻的中性脂相对含量及对应的生物量,获得藻株中性脂的相对产率。研究表明,与原始藻株相比,088号转基因藻株相对产率为252.16%,甲基磺酸乙酯(EMS)诱变藻株101号相对产率为259.02%,亚硝基胍(NTG)诱变藻株231号相对产率为323.84%。本研究获得了3株中性脂产率高的微拟球藻藻株,这3株藻株有望应用于生物柴油的生产,研究结果可为高油脂含量微藻的快速筛选提供参考。

关键词：微拟球藻中性脂尼罗红藻种选育

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荧光光谱法检测微藻中油脂

中国油脂 2011年第4期36卷 70-74页

作者：胡小文马帅弓淑芬付莉莉孙雪飘张家明中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101 海南大学农学院海南儋州571701

研究了尼罗红染色荧光光谱法检测微藻中油脂含量的方法。探讨了染色时间、尼罗红质量浓度、二甲基亚砜体积分数、细胞密度对藻液细胞发射光谱的影响,得到最佳测定条件为:染色时间6min,尼罗红质量浓度0.8μg/mL,二甲基亚砜体积分数20%,... 详细信息

研究了尼罗红染色荧光光谱法检测微藻中油脂含量的方法。探讨了染色时间、尼罗红质量浓度、二甲基亚砜体积分数、细胞密度对藻液细胞发射光谱的影响,得到最佳测定条件为:染色时间6min,尼罗红质量浓度0.8μg/mL,二甲基亚砜体积分数20%,细胞密度(0.248～0.448)×109个/mL。该研究为规模化筛选高含油量藻株及跟踪产油微藻油脂积累过程奠定了基础。

关键词：微藻尼罗红油脂荧光检测

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三株栅藻属藻株光合自养产油脂的比较研究

生物技术通报 2016年第6期32卷 238-243页

作者：陈传红吴洪李青尹顺吉罗少敬崔春莉新奥科技发展有限公司煤基低碳能源国家重点实验室廊坊065001

通过柱式光生物反应器培养,比较研究三株栅藻(Scenedesmus sp简写***、Scenedesmus deserticola、Scenedesmus dimorphus)的生长及油脂含量情况,得出3株藻生物量最高的是***为0.48 g/(L·d);其次是***为0.41 g/(L·d);***产量最低为0.35 g/(L·d)。且培养后期经尼罗红染色清楚可见油脂分布,其中***总脂含量达到了干重的55.3%,总脂产量为0.29 g/(L·d);***为46.7%,0.18 g/(L·d);***为43.6%,0.20 g/(L·d)。三株栅藻主要脂肪酸为C18和C16,占总脂肪酸组成的85%以上,符合生物柴油的生产要求。综合比较,***是一株性能优良的产油藻株。

关键词：栅藻生长尼罗红生物量油脂