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解放军医学院学报 2022年第2期43卷 211-218页

作者：史振伟罗东孙琦王聪聪杨齐马玥杨飞黄转青徐风华解放军总医院医疗保障中心药剂科药学基础研究室北京100853 解放军医学院北京100853

背景生物反应调节剂促吞噬肽(Tuftsin)具有抗肿瘤作用,但体内半衰期极短,为此课题组合成了其衍生物T肽(T Peptide),但其抗肿瘤作用还不明确。目的探讨Tuftsin衍生物T肽的抗肿瘤作用及其机制。方法建立小鼠黑色素瘤移植瘤模型:C57bL/6... 详细信息

背景生物反应调节剂促吞噬肽(Tuftsin)具有抗肿瘤作用,但体内半衰期极短,为此课题组合成了其衍生物T肽(T Peptide),但其抗肿瘤作用还不明确。目的探讨Tuftsin衍生物T肽的抗肿瘤作用及其机制。方法建立小鼠黑色素瘤移植瘤模型:C57bL/6小鼠12只,鼠龄6周,随机分为T肽(T Peptide)组和对照(Control)组,每组6只。两组小鼠右侧前肢腋下接种黑色素瘤细胞悬液0.1 m L,含b16-f10细胞5×105个。肿瘤细胞接种后当天(第0天)T肽组小鼠皮下注射T肽(药物剂量8 mg/kg),实验期间隔日给药,共计给药9次,共18 d^(+)对照组小鼠注射相同体积的0.9%氯化钠注射液,通过测定瘤重评价T肽对移植肿瘤生长的作用。利用流式细胞术(fACs)检测小鼠脾组织和移植瘤部位免疫细胞T淋巴细胞(CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD3^(+)CD44^(+))、自然杀伤细胞(NK1.1^(+))、髓系来源抑制细胞(CD11b^(+)Gr-1^(+))、巨噬细胞(f4/80^(+)CD86^(+)、f4/80^(+)CD206^(+))的含量,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)脾细胞培养上清液中的细胞因子、血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、TNf-α、TGf-β、IfN-γ的表达情况。体外实验采用CCK-8法测定T肽和黑色素瘤b16-f10细胞共培养后对细胞生长的影响。结果 T肽在体外对肿瘤细胞增殖没有影响,但体内实验对小鼠黑色素瘤b16-f10细胞移植性肿瘤表现出抑制作用。与对照组相比,T肽治疗对肿瘤生长抑制率为56.45%,T肽组脾组织CD8^(+)T淋巴细胞、M1型巨噬细胞(f4/80^(+)CD86^(+))、CD3^(+)CD44^(+)T淋巴细胞、髓系来源抑制细胞(CD11b^(+)Gr-1^(+))含量显著增加,M2型巨噬细胞(f4/80^(+)CD206^(+))和自然杀伤细胞(NK1.1^(+))无明显变化^(+)与对照组相比,T肽组小鼠肿瘤部位CD3^(+)CD44^(+)T淋巴细胞的含量显著增加,而CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK1.1^(+))、髓系来源抑制细胞(CD11b^(+)Gr-1^(+))、M1型巨噬细胞(f4/80^(+)CD86^(+))和M2型巨噬细胞(f4/80^(+)CD206^(+))无显著变化。与对照组相比,T肽组脾细胞培养上清液和血清中细胞因子IfN-γ的表达量明显增多,IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、TNf-α、TGf-β表达量无明显变化。结论 T肽体外没有明显细胞毒性,体内显著抑制肿瘤生长,其肿瘤抑制作用主要源于对免疫系统的激活,即增加脾CD8^(+)T淋巴细胞、f4/80^(+)CD86^(+)巨噬细胞等免疫细胞和杀瘤免疫因子IfN-γ的表达量而发挥作用。

关键词： T肽肿瘤抑制免疫增强小鼠黑色素瘤b16-f10细胞促吞噬肽

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花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷抑制b16-f10细胞增殖和迁移的机理

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生理学报 2019年第6期71卷 855-862页

作者：王丽程鹏曲晨菲李秀艳青岛滨海学院医学院

本研究旨在探讨花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside, Cy-3-glu)对小鼠黑色素瘤细胞b16-f10增殖和迁移的影响,并阐明相关机理。用不同浓度Cy-3-glu处理b16-f10细胞,采用CCK-8法检测细胞存活率,划痕法检测细胞迁... 详细信息

本研究旨在探讨花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside, Cy-3-glu)对小鼠黑色素瘤细胞b16-f10增殖和迁移的影响,并阐明相关机理。用不同浓度Cy-3-glu处理b16-f10细胞,采用CCK-8法检测细胞存活率,划痕法检测细胞迁移情况,流式细胞仪检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因的m RNA表达水平,Western blot检测p-AKT、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的相对表达水平,并用小动物活体成像仪检测b16-f10细胞在C57bL/6J小鼠体内的生长和迁移情况。结果显示,Cy-3-glu能明显抑制体外b16-f10细胞的生长(P 细胞周期阻滞在S期。Cy-3-glu作用后p-AKT (P 瘤模型C57bL/6J小鼠肿瘤大小和重量显著减小(P 瘤的转移水平也明显降低。以上结果提示,Cy-3-glu通过抑制PI3K/AKT信号、调节细胞黏附和迁移信号使b16-f10细胞周期停滞在S期,最终抑制其在体内和体外的增殖和迁移。

关键词：矢车菊-3-O-葡萄糖苷小鼠黑色素瘤b16-f10细胞增殖迁移

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