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小鼠腺病毒荧光定量PCR方法的建立及初步应用

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实验动物科学 2017年第3期34卷 49-54,65页

作者：杜江涛宋晓明周莎桑吕宇萨晓婴褚晓峰应华忠戴方伟浙江省医学科学院实验动物中心杭州310013 杭州师范大学实验动物中心杭州310036

目的基于TaqMan建立小鼠腺病毒(MAdV)特异的荧光定量PCR检测方法,用于调查长爪沙鼠和小鼠等实验动物中MAdV感染情况。方法从NCBI下载小鼠腺病毒(MAdV-A和MAdV-3)基因组序列,比对分析后选择保守性较好的基因设计引物和探针。筛选最佳引... 详细信息

目的基于TaqMan建立小鼠腺病毒(MAdV)特异的荧光定量PCR检测方法,用于调查长爪沙鼠和小鼠等实验动物中MAdV感染情况。方法从NCBI下载小鼠腺病毒(MAdV-A和MAdV-3)基因组序列,比对分析后选择保守性较好的基因设计引物和探针。筛选最佳引物对和探针,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行验证,运用所建立的方法对长爪沙鼠和野鼠的共41份样本进行检测。结果经特异性和灵敏度鉴定,在设计的3对引物探针中确定一对最佳引物探针MAD-3,可区分小鼠腺病毒与猴腺病毒、禽腺病毒和树鼩腺病毒等24种病原,MAdV质粒DNA最低检测限为4.5 copies/reaction;MAdV纯病毒液和病毒/组织模拟样本的最低检测限均为440 copies/reaction。结论建立的Taq Man荧光定量PCR检测方法特异、灵敏和稳定,可用于大鼠、小鼠、长爪沙鼠等实验动物及鼠源性生物制品MAdV的检测。

关键词：小鼠腺病毒荧光定量PCR

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小鼠腺病毒PCR检测方法的建立及初步应用

实验动物与比较医学 2014年第1期34卷 35-41页

作者：王吉付瑞卫礼李晓波冯育芳王淑菁巩薇岳秉飞贺争鸣中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物、遗传检测中心北京100050

目的建立小鼠腺病毒（MAdV） PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MAdV的检测.方法根据已发表的小鼠腺病毒（MAdV） E1B基因序列,设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用建立的方法对65... 详细信息

目的建立小鼠腺病毒（MAdV） PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MAdV的检测.方法根据已发表的小鼠腺病毒（MAdV） E1B基因序列,设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用建立的方法对65只长爪沙鼠、12只小鼠进行检测.结果建立的MAdV PCR检测方法与小鼠微小病毒、多瘤病毒无交叉反应;以MAdVDNA为模板,所能检测DNA最小模板浓度为1.67 pg/μl,可检测病毒最小滴度为10-7/ml; MAdVDNA在-30℃冰箱放置12个月,仍能扩增出大小约606 bp的可见目条带.经PCR检测,65只沙鼠和12只小鼠均为阴性.结论建立的小鼠腺病毒（MAdV） PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于小鼠、长爪沙鼠等实验动物MAdV的检测.

关键词：小鼠腺病毒聚合酶链式反应长爪沙鼠小鼠

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小鼠腺病毒检验方法例析

中国中医药咨讯 2011年第6期3卷 266-267页

作者：廖冬梅颜敏湖北医药学院附属人民医院检验科湖北十堰 442000

目的用IFA、ELISA及EIA三种小鼠的腺病毒检测方式进行实验研究，观察其各自的特异性与敏感性。方法进行IFA、ELISA及EIA三种小鼠腺病毒检测方法，完成检测的操作及抗原的制备，并比较各自的实验数据等。结果在感染一周之后，IFA达到7／1... 详细信息

目的用IFA、ELISA及EIA三种小鼠的腺病毒检测方式进行实验研究，观察其各自的特异性与敏感性。方法进行IFA、ELISA及EIA三种小鼠腺病毒检测方法，完成检测的操作及抗原的制备，并比较各自的实验数据等。结果在感染一周之后，IFA达到7／10，ELISA的阳性率为三者之最达到8／10，EIA为6／10，三种实验结果的比对没有统计学的意义，其中P〉0．05。结论对于小鼠腺病毒的检测比较，ELISA由于其高敏感性、强特异性及很好的重复性，最适宜实验进行。

关键词： IFA ELISA EIA 小鼠腺病毒病毒检测

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实验小鼠腺病毒检验方法

中国卫生产业 2011年第9Z期8卷 10-11页

作者：徐庆顾国平张立红江苏省无锡市中医医院检验科江苏无锡214001

目的通过ELISA、EIA和IFA3种小鼠腺病毒检测方法观察实验小鼠在敏感性和特异性方面的比较。方法通过观察实验小鼠分别在ELISA、EIA和IFA3种检测方法后的血清抗体程度来检验其敏感度和特异性。结果感染1周后ELISA阳性率最高,为8/10,EIA为... 详细信息

目的通过ELISA、EIA和IFA3种小鼠腺病毒检测方法观察实验小鼠在敏感性和特异性方面的比较。方法通过观察实验小鼠分别在ELISA、EIA和IFA3种检测方法后的血清抗体程度来检验其敏感度和特异性。结果感染1周后ELISA阳性率最高,为8/10,EIA为7/10,IFA为6/10,三者差异无统计学意义,P>0.05;2周后3种方法阳性率均为100%;3周以后,ELISA的抗体增长的幅度和抗体平均滴度最高。结论 3种检测病毒方法比较,ELISA敏感性最好,特异性强。

关键词：小鼠腺病毒 ELISA EIA IFA病毒检验

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实验小鼠腺病毒检验方法

中国中医药咨讯 2009年第2期1卷 237-237页

作者：王华洪陈俊芝岳阳市疾病预防控制中心桃江县人民医院

目的对ELISA、EIA和IFA三种小鼠腺病毒检测方法敏感性和特异性进行比较观察。方法：分别以ELISA、EIA和IFA三种方法，进行抗原制备和检测操作，比较检测结果。结果：感染1周后ELISA阳性率最高（8／10。），EIA为7／10，IFA为6／10，3者... 详细信息

目的对ELISA、EIA和IFA三种小鼠腺病毒检测方法敏感性和特异性进行比较观察。方法：分别以ELISA、EIA和IFA三种方法，进行抗原制备和检测操作，比较检测结果。结果：感染1周后ELISA阳性率最高（8／10。），EIA为7／10，IFA为6／10，3者差异无统计学意义，P〉0．05。2周后3种方法均阳性率均为100％，3周以后，抗体增长的幅度和抗体平均滴度ELISA最高。结论：3种检测MAdV方法比较，ELISA敏感性最好，且检查感染晚期抗体滴度较高，特异性强，重复性好。

关键词：小鼠腺病毒 ELISA EIA IFA 病毒检验