检索结果-南通市图书馆

基于蛋白质组学探讨马鞭草苷对人冠状病毒229E感染小鼠肺损伤的治疗作用及机制

中国实验方剂学杂志 2025年

作者：孙绮悦郭姗姗高双荣包蕾耿子涵李舒冉赵荣华张敬升刘宪谢锐崔晓兰孙静中国中医科学院中药研究所

目的：评价马鞭草苷对人冠状病毒229E（HCoV-229E）体内、外感染模型的药理作用，并通过蛋白质组学分析，初步探究马鞭草苷的抗病毒作用机制。方法：体外采用细胞活力检测试剂盒-8（CCK-8）建立HCoV-229E感染人肺腺癌细胞系（A549）细... 详细信息

目的：评价马鞭草苷对人冠状病毒229E（HCoV-229E）体内、外感染模型的药理作用，并通过蛋白质组学分析，初步探究马鞭草苷的抗病毒作用机制。方法：体外采用细胞活力检测试剂盒-8（CCK-8）建立HCoV-229E感染人肺腺癌细胞系（A549）细胞损伤的模型，将A549细胞作为5组，正常组、模型组和3个马鞭草苷处理浓度组(125 μmol·L-1、62.5 μmol·L-1、31.25 μmol·L-1)，通过细胞存活率检测、免疫荧光染色方法评价马鞭草苷的细胞保护活性；体内将30只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、磷酸氯喹组、马鞭草苷高、低剂量组(40、20 mg·kg-1)，每组6只。建立HCoV-229E感染小鼠肺损伤模型评价马鞭草苷的治疗作用。分别通过检测肺指数、肺抑制率评价肺部损伤情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）评价肺部炎症因子的严重程度、微型计算机断层扫描（micro-CT）检测肺部的形态和结构、苏木素-伊红（HE）染色评价肺组织病理学改变；进一步采用四维数据独立组识别（4D-DIA）蛋白质组学方法，通过差异表达蛋白筛选、功能注释、富集分析及蛋白互作网络分析方法，初步分析马鞭草苷治疗HCoV-229E感染小鼠肺损伤模型的可能机制。结果：A549细胞选用HCoV-229E原倍浓度感染36 h建立体外感染模型，马鞭草苷的最大无毒浓度为125 μmol·L-1，半数细胞毒性浓度(CC50)值为288.8 μmol·L-1。与正常组比较，模型组细胞存活率显著下降（P损伤，膜电位明显降低（P小鼠的治疗作用。与正常组相比，模型组小鼠肺指数显著升高（P损伤明显加重，肺部体积肿大，炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达显著升高（P损伤减轻，肺部体积肿大缓解，炎症因子表达也显著降低（P<0.01）。蛋白质组学分析结果显示，与正常组相比，模型组富集到多种与抗病毒免疫反应相关信号通路，包括核因子-κB（NF-κB）信号通路（P<0.05）。而与模型组相比，马鞭草苷组富集到多种与炎症反应和自噬相关的信号通路（P<0.05），提示马鞭草苷可能通过调节这些信号通路发挥其抗病毒和抗炎作用。结论：马鞭草苷在HCoV-229E感染体内、外模型中均表现出较好的治疗作用，其机制可能与NLRP3炎症小体通路和线粒体自噬有关。

关键词：马鞭草苷 HCoV-229E 蛋白质组学 A549 小鼠肺损伤肺部炎症

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