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中国细胞生物学学报 2016年第10期38卷 1199-1207页

作者：田海英莫索刘秋菊施孟如金晶吕建新李伟温州医科大学检验医学院生命科学学院温州325035 浙江省医学遗传学重点实验室温州325035

该文研究了mi R-486在小鼠肝细胞内是否可通过调控其靶基因Pten(phosphatase and tensin homolog,同源性磷酸酶–张力蛋白)/Foxo1(forkhead box O1,叉头转录因子)进而影响甘油三酯(triglyceride,TG)和极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein,VLDL)的合成。采用腺病毒载体感染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,并测定靶基因Pten/Foxo1表达及VLDL和TG变化。腺病毒载体感染mi R-486的模拟剂(mimic)和抑制剂(antago)至细胞株Hepa1-6,Ad-mi R-486 mimic组mi R-486水平显著增加(P细胞内VLDL含量显著降低(P细胞内VLDL含量显著增加(P细胞内的VLDL和TG生成。

关键词： miR-486 小鼠肝癌细胞 Pten/Foxo1 脂质代谢极低密度脂蛋白

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生物热化学方法研究白藜芦醇抗癌作用机理

生物热化学方法研究白藜芦醇抗癌作用机理

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作者：黄琼湖南农业大学

学位级别：硕士

等温微量热法作为一种微量热和热分析方法,在生命科学研究工作中有着广泛的应用。采用近代微量热技术对肿瘤细胞的生长代谢进行研究,可探讨它的生长特点并找出其代谢规律,提供肿瘤代谢的各种信息,同时可探讨药物对肿瘤的抑制以及肿瘤热... 详细信息

等温微量热法作为一种微量热和热分析方法,在生命科学研究工作中有着广泛的应用。采用近代微量热技术对肿瘤细胞的生长代谢进行研究,可探讨它的生长特点并找出其代谢规律,提供肿瘤代谢的各种信息,同时可探讨药物对肿瘤的抑制以及肿瘤热疗新方法。微量热对肿瘤细胞等病变细胞的研究是组织细胞的微量热研究的热点。而白藜芦醇抗肿瘤作用的生物学功能目前是最令人瞩目和最有发展前景的,本论文采用等温微量热法从热化学的角度研究白藜芦醇对不同肿瘤细胞作用的抗癌机理,为获得合理的用药计量有重要的理论和实际应用价值。并希望能为天然药物抗癌作用机理的研究提供了一种新的测量手段和研究途径,为新药开发创造一种直观、简捷的方法。本论文主要包括三个方面的工作:1.测定了白血病细胞株HL-60在白藜芦醇药物作用下的生长代谢热谱,建立了白血病细胞株HL-60生长代谢与药物浓度之间的关系式,得出在白藜芦醇浓度范围为20μg/mL～80μg/mL时,有最佳的抑制效果。2.测定了人体乳腺癌细胞株MCF-7在白藜芦醇药物作用下的生长代谢热谱,得出在白藜芦醇浓度范围为20μg/mL～60μg/mL时,对该肿瘤细胞有最佳抑制作用。3.用微量热法测定了小鼠肝癌细胞在白藜芦醇药物作用下的生长代谢的热功率,得出在白藜芦醇浓度范围为40μg/mL～100μg/mL时,有明显的抑制效果。

关键词：微量热法白藜芦醇白血病细胞株HL-60 乳腺癌细胞株MCF-7 小鼠肝癌细胞

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油酸对小鼠hepa1-6细胞PGC-1α的影响及其信号通路

油酸对小鼠hepa1-6细胞PGC-1α的影响及其信号通路

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作者：王喜南华大学

学位级别：硕士

目的：探讨油酸(OleicAcid,OA)对hepa1-6细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor gammacoactivator-1α,PGC-1α）mRNA和蛋白表达的影响，明确P38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase, p38MAPK)在其中的调控作用。方法：不同浓度的油酸（0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L）处理hepa1-6细胞，采用RT-PCR检测油酸对hepa1-6细胞中PGC-1αmRNA的时效和量效关系，采用流式细胞技术检测油酸对hepa1-6细胞凋亡的影响，采用特异性的p38MAPK分子旁路阻断剂SB203580作用于hepa1-6细胞，应用Westernblot技术检测PGC-1α的蛋白表达，以明确p38信号通路是否参与其表达调控。结果：1、不同浓度的油酸（0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L）干预hepa1-6细胞2h，与DMEM组及BSA组相比，0.2mmol/L浓度组中PGC-1α的mRNA的表达升高（P细胞12h，与DMEM组及BSA组比较，0.2mmol/L以及0.5mmol/L浓度组中PGC-1α的mRNA的表达均显著增高（P细胞24h，与DMEM组及BSA组比较，0.2mmol/L以及0.5mmol/l浓度组中PGC-1α的mRNA的表达增高（P细胞中PGC-1α蛋白表达明显高于DMEM组及BSA组,有统计学意义（P 细胞，随着油酸浓度的增加，hepa1-6的细胞凋亡率增加，且均高于DMEM组及BSA组，有统计学意义（P小鼠hepa1-6细胞中PGC-1αmRNA和蛋白表达水平升高，且这一影响能p38MAPK抑制剂所阻断;hepa1-6细胞凋亡与油酸浓度呈正相关。

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α 油酸小鼠肝癌细胞 P38 丝裂原活化蛋白激酶

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分泌抗H815单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

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细胞与分子免疫学杂志 1988年第3期 35-36页

作者：吴中明刘祖林莫宁平顾榴珍程一櫂遵义医学院遵义医学院

制备兔抗正常615小鼠肝癌细胞免疫血清,以此处理615小鼠肝癌细胞用处理过的瘤细胞免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0融合,以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测,建立两株分泌抗615小鼠肝癌细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤... 详细信息

制备兔抗正常615小鼠肝癌细胞免疫血清,以此处理615小鼠肝癌细胞用处理过的瘤细胞免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0融合,以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测,建立两株分泌抗615小鼠肝癌细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615小鼠的肝、脾、肺、肾、脑、心肌、横纹肌、胸腺组织细胞和多

关键词：杂交瘤细胞系单克隆抗体免疫血清小鼠肝癌细胞脾细胞间接免疫荧光法胸腺组织肝细胞肝癌特异性 IgG

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明日叶查尔酮抑制小鼠肝癌肿瘤新血管生成的VEGF表达

明日叶查尔酮抑制小鼠肝癌肿瘤新血管生成的VEGF表达

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2016年第六届全国药物毒理学年会

作者：李子超郭培志陆香珍刘芳钟进义青岛大学青岛大学化学化工学院

目的:研究明日叶查尔酮对小鼠肝癌细胞新血管内皮生长因子（VEGF）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响。方法:将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、低剂量组分别每日经口灌胃给予50和5mg/kg的查尔酮,恩度组... 详细信息

目的:研究明日叶查尔酮对小鼠肝癌细胞新血管内皮生长因子（VEGF）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响。方法:将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、低剂量组分别每日经口灌胃给予50和5mg/kg的查尔酮,恩度组给予等量生理盐水灌胃,并腹腔注射恩度4mg/kg,空白对照组及阴性对照组则分别给予等量的生理盐水灌胃及腹腔注射,连续10d。用免疫组化法检测各组肝癌细胞VEGF的表达水平,用E LISA法检测血清中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）含量。结果 ,高剂量组及协同组中阳性表达细胞数目少且颜色浅,呈现弱表达,阳性表达率分别31.12%和12.22%,明显低于肿瘤对照组的56.26%（P＜0.05）。阴性对照组和高剂量明日叶查尔酮组HIF-1α含量分别为88.92±11.73ng/L和77.35±11.39ng/L,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:明日叶查尔酮具有降低VFGF蛋白表达水平、HIF-1α浓度作用,说明它通过抑制肿瘤新生毛细血管的生成,产生抑癌作用。

关键词：明日叶查尔酮小鼠肝癌细胞肿瘤新血管生成 VEGF HIF-1α

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明日叶查尔酮抑制小鼠肝癌肿瘤新血管生成的VEGF表达

明日叶查尔酮抑制小鼠肝癌肿瘤新血管生成的VEGF表达

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中国毒理学会中药与天然药物毒理专业委员会第一次（2016年）学术交流大会

作者：李子超郭培志陆香珍刘芳钟进义青岛大学青岛大学化学化工学院

目的:研究明日叶查尔酮对小鼠肝癌细胞新血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、低剂量组分别每日经口灌胃给予50和5mg/kg的查尔酮,恩度组给予... 详细信息

目的:研究明日叶查尔酮对小鼠肝癌细胞新血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、低剂量组分别每日经口灌胃给予50和5mg/kg的查尔酮,恩度组给予等量生理盐水灌胃,并腹腔注射恩度4mg/kg,空白对照组及阴性对照组则分别给予等量的生理盐水灌胃及腹腔注射,连续10d。用免疫组化法检测各组肝癌细胞VEGF的表达水平,用ELISA法检测血清中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)含量。结果,高剂量组及协同组中阳性表达细胞数目少且颜色浅,呈现弱表达,阳性表达率分别31.12%和12.22%,明显低于肿瘤对照组的56.26%(P<0.05)。阴性对照组和高剂量明日叶查尔酮组HIF-1α含量分别为88.92+11.73ng/L和77.35±11.39ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:明日叶查尔酮具有降低VEGF蛋白表达水平、HIF-1α浓度作用,说明它通过抑制肿瘤新生毛细血管的生成,产生抑癌作用。

关键词：明日叶查尔酮小鼠肝癌细胞肿瘤新血管生成 VEGF HIF-1α

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Hyper-IL-6基因转染的瘤苗诱导的抗小鼠肝癌实验研究

Hyper-IL-6基因转染的瘤苗诱导的抗小鼠肝癌实验研究

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第四届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、浙江省医学会肝病、感染病学学术年会

作者：郄春花李顺天曹武奎李秀梅陆伟天津市传染病医院

目的建立稳定表达Hyper-IL-6基因的小鼠肝癌细胞克隆株制备基因瘤苗,探讨Hyper-IL-6用于诱导抗肝癌主动免疫治疗的可行性。方法用脂质体法将Hyper-IL-6基因导入小鼠肝癌细胞系MM45 ***,通过G418筛选获得抗性细胞克隆制备基因瘤苗,Wester... 详细信息

目的建立稳定表达Hyper-IL-6基因的小鼠肝癌细胞克隆株制备基因瘤苗,探讨Hyper-IL-6用于诱导抗肝癌主动免疫治疗的可行性。方法用脂质体法将Hyper-IL-6基因导入小鼠肝癌细胞系MM45 ***,通过G418筛选获得抗性细胞克隆制备基因瘤苗,Western-blot法验证目的基因的表达。体内实验观察野生型及Hyper-IL-6基因瘤苗的成瘤性,流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4+,CD8+T淋巴细胞水平。结果 Western-blot法检测结果表明,我们筛选到的小鼠肝癌细胞克隆株中存在Hyper-IL-6的表达,而野生型不表达。体内成瘤实验结果显示,与野生型小鼠肝癌细胞相比,Hyper-IL-6基因修饰肿瘤细胞MM45T-HIL-6的成瘤性显著下降;与接种野生型肝癌细胞的小鼠相比,接种MM45T-HIL-6瘤苗的小鼠外周血中CD4+,CD8+T淋巴细胞水平明显升高,差异有统计学意义(P小鼠抗肝癌主动免疫反应,其抗肿瘤机制可能与T细胞活化有关。

关键词：外周血小鼠肝癌细胞 Hyper-IL-6 基因转染

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