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鼠巨细胞病毒感染c57bl/6小鼠急性肝炎动物模型的建立与鉴定

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温州医科大学学报 2022年第5期52卷 345-351,357页

作者：阮宇菲刘琦吴博许智勇陈珂蒋敏之张俊玲余金生陈益平温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童感染科浙江温州325027 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230000

目的:建立鼠巨细胞病毒(McMV)感染c57bl/6小鼠急性肝炎模型并对其感染特点进行分析及鉴定。方法:将24只c57bl/6小鼠随机分为阴性对照组(n=12)及病毒感染组(n=12),病毒感染组腹腔注射1.0×10^(6) PFU(200μL)McMV悬液,阴性对照组注射等... 详细信息

目的:建立鼠巨细胞病毒(McMV)感染c57bl/6小鼠急性肝炎模型并对其感染特点进行分析及鉴定。方法:将24只c57bl/6小鼠随机分为阴性对照组(n=12)及病毒感染组(n=12),病毒感染组腹腔注射1.0×10^(6) PFU(200μL)McMV悬液,阴性对照组注射等体积小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)悬液。于感染后第3天和第7天取外周血分离血清检测谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)。同时进行肝组织病毒分离、组织病理学及McMV IE和M55基因、细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的检测。结果:病毒感染组肝组织匀浆病毒分离均为阳性,肝炎发生率为100%。在感染后第3天即发生肝炎病理改变,病毒感染组血清ALT及AST较阴性对照组明显升高(PcMV IE及M55基因,且在感染后第7天仍可测得IE基因;感染后第3天及第7天病毒感染组炎性细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1βmRNA表达水平明显升高(PcMV感染c57bl/6小鼠急性动物肝炎模型,其感染表现主要集中在急性感染前期。

关键词：鼠巨细胞病毒小鼠,近交C57BL 病毒性肝炎模型,动物

两种不同血清型肺炎链球菌致c57bl/6小鼠急性中耳炎的敏感性差异

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013年第12期48卷 1028-1031页

作者：王维周爱娥黄益飞项云何於娟重庆医科大学检验医学院 400016

目的比较两种不同血清型肺炎链球菌致c57bl/6小鼠急性中耳炎的敏感性.方法实验组c57bl/6小鼠经鼓膜穿刺分别接种血清型为TIGR4和6B的肺炎链球菌,对照组采用相同方法接种等体积磷酸盐缓冲液（PBS）.观察小鼠发病情况,分别于感染后第1、... 详细信息

目的比较两种不同血清型肺炎链球菌致c57bl/6小鼠急性中耳炎的敏感性.方法实验组c57bl/6小鼠经鼓膜穿刺分别接种血清型为TIGR4和6B的肺炎链球菌,对照组采用相同方法接种等体积磷酸盐缓冲液（PBS）.观察小鼠发病情况,分别于感染后第1、3、5、7天制备中耳组织切片,HE染色观察中耳组织损伤及炎性细胞浸润变化,同时收集中耳灌洗液,检测灌洗液中细菌载量、炎性细胞数量和细胞因子含量.结果 6B组小鼠生存率明显低于TIGR4组和PBS对照组,差异具有统计学意义（P＜0.01）.接种肺炎链球菌后,小鼠中耳灌洗液中以中性粒细胞为主,TIGR4组募集的炎性细胞数量明显多于6B组;中耳灌洗液中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量明显升高,其中TIGR4组细胞因子水平均明显高于6B组;6B组小鼠中耳内的细菌清除更慢.结论在c57 bl/6小鼠急性中耳炎模型中,6B型肺炎链球菌比TIGR4型致病性更强.

关键词：链球菌,肺炎肺炎球菌感染中耳炎小鼠,近交C57BL

顺铂注射对c57bl/6小鼠肾脏功能和结构影响

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青岛大学学报（医学版） 2021年第6期57卷 801-806页

作者：王鑫李慧王向东李莉巩永凤青岛大学基础医学院病理学与病理生理学系山东青岛266071 滨州医学院基础医学院生理学教研室

目的改良并完善顺铂诱导小鼠慢性肾脏疾病模型,研究其肾功能、组织结构及分子水平的改变。方法对不同周龄雄性c57bl/6小鼠注射不同剂量顺铂,观察小鼠生存率,选取合适的顺铂剂量及小鼠周龄用以制备模型。通过酶联免疫吸附试验测定顺铂注... 详细信息

目的改良并完善顺铂诱导小鼠慢性肾脏疾病模型,研究其肾功能、组织结构及分子水平的改变。方法对不同周龄雄性c57bl/6小鼠注射不同剂量顺铂,观察小鼠生存率,选取合适的顺铂剂量及小鼠周龄用以制备模型。通过酶联免疫吸附试验测定顺铂注射后小鼠血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平的变化,采用免疫荧光(IF)、马松三色(MT)染色和实时荧光定量PcR(RT-qPcR)方法观察顺铂注射对肾纤维化的影响,采用IF、苏木精-伊红(HE)染色和RT-qPcR方法观察顺铂注射对小鼠肾组织中细胞因子和炎症细胞浸润的影响。结果选择8周龄小鼠,通过腹腔注射7 mg/kg顺铂(每周1次,共4次)构建慢性肾脏疾病模型。与对照组(小鼠腹腔注射无菌生理盐水)比较,顺铂注射24、42 d小鼠Scr和BUN水平显著升高(F=12.05、41.89,Pcol1α1)和纤连蛋白(Fn)mRNA表达水平明显升高(F=37.01、57.10,PcD3^(+)T细胞和F4/80^(+)巨噬细胞浸润明显增加,肾组织炎症相关细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(McP-1)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平显著升高(F=10.24~86.82,P小鼠上述指标变化较注射24 d小鼠更明显(P小鼠模型。

关键词：顺铂肾衰竭,慢性纤维化炎症小鼠,近交C57BL

c57bl/Ksj db/+小鼠作为妊娠期糖尿病模型的可行性

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中华围产医学杂志 2014年第4期17卷 267-271页

作者：李真辛静吴晓华王敏王亚男第三军医大学附属新桥医院妇产科

目的了解c57bl/Ksj db/+小鼠妊娠期糖代谢特点,为将其作为妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的动物模型提供依据。方法随机选取c57bl/Ksj db/+(杂合组)与野生型雌鼠(对照组)各10只,分别与同龄野生型c57bl/Ksj雄鼠配对。... 详细信息

目的了解c57bl/Ksj db/+小鼠妊娠期糖代谢特点,为将其作为妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的动物模型提供依据。方法随机选取c57bl/Ksj db/+(杂合组)与野生型雌鼠(对照组)各10只,分别与同龄野生型c57bl/Ksj雄鼠配对。以合笼前第3天、妊娠第6、11、17天和产后第6天分别为妊娠前期、妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期和产后期。分析2组雌鼠妊娠前期、妊娠不同时期及产后糖耐量、空腹胰岛素水平。为动态监测2组雌鼠妊娠期血清瘦素水平,以妊娠第6、11、14、17、20(临产前)天为妊娠期5个时间点,分析2组雌鼠妊娠不同时期的瘦素水平。数据采用单因素方差分析中的Tukey法进行分析。结果(1)杂合组孕鼠较对照组孕鼠糖耐量明显降低,空腹胰岛素水平随妊娠期进展明显升高[妊娠第6、11、17天分别为(8.6±0.6)mU/L与(7.5±1.1)mU/L、(9.8±0.6)mU/L与(8.5±1.1)mU/L和(10.4±0.8)mU/L与(9.9±0.5)mU/L,t值分别为1.859、4.056和3.078,P值分别为0.085、0.000和0.000],产后与妊娠前期差异无统计学意义。(2)杂合组孕鼠血清瘦素水平明显高于非妊娠期[妊娠前期、妊娠第6、11、14、17、20天,血清瘦素水平分别为(911.0±238.8)ng/L、(1342.2±132.3)ng/L、(1821.9±238.2)ng/L、(1816.3±142.3)ng/L、(1752.4±126.6)ng/L、(1 926.4±61.6)ng/L;t值分别为3.887、8.210、8.161、7.585和9.153,P值分别为0.005、0.000、0.000、0.000和0.0001,但妊娠中期以后瘦素水平未呈现随妊娠期进展明显升高的趋势。结论 c57bl/Ksj db/+雌鼠妊娠期空腹和餐后血糖的改变、胰岛素及瘦素水平的变化与GDM患者相似,即空腹胰岛素水平随妊娠期进展明显升高,产后恢复正常,糖耐量逐渐降低,瘦素水平明显高于非妊娠期,与孕周无明显相关性,可将其作为GDM的动物模型。

关键词：糖尿病,妊娠疾病模型,动物血糖瘦素小鼠,近交C57BL

制作c57小鼠烧伤模型时Meeh常数的取值研究

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天津医药 2011年第8期39卷 733-735页

作者：廖庚进罗鹏飞付晋凤贾一韬吕开阳金以超夏照帆第二军医大学长海医院烧伤科 200433 昆明医学院第二附属医院烧伤科

目的:研究制作c57bl/6小鼠烧伤模型时适于计算全身体表面积(BSA)的Meeh常数(k)值。方法:24只6～12周正常c57bl/6小鼠,雌雄各半,将其随机分为8AM组、4PM组和0AM组,每组8只。实验前3d在8AM、12N、4PM、8PM、0AM和4AM称小鼠体质量。测定每... 详细信息

目的:研究制作c57bl/6小鼠烧伤模型时适于计算全身体表面积(BSA)的Meeh常数(k)值。方法:24只6～12周正常c57bl/6小鼠,雌雄各半,将其随机分为8AM组、4PM组和0AM组,每组8只。实验前3d在8AM、12N、4PM、8PM、0AM和4AM称小鼠体质量。测定每只小鼠的BSA实际值,并据此计算其k值。分别应用4个常用k值(9.1、9.5、10和11.4)计算出每只小鼠的BSA计算值。结果:24h内小鼠的体质量差别有统计学意义,4PM时最低,0AM时最高;4PM组小鼠k值大于8AM组和0AM组,差别有统计学意义(P小鼠常用k值与本实验所得3个时点的k值分别进行比较,除常用k值9.5与0AM组k值之间差别无统计学意义外,其余比较差别均有统计学意义(P小鼠常用k值计算出的BSA计算值和c57bl/6小鼠的BSA实测值之间的差值最大达到了BSA实测值的23.02%。结论:制作c57bl/6小鼠烧伤模型时可按实验时间选用不同的k值,8AM时k值宜为9.617,4PM时为9.802。

关键词：烧伤体表面积疾病模型,动物小鼠,近交C57BL

c57bl/6小鼠的血循环DNA的定量研究

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肿瘤 2005年第5期25卷 427-429页

作者：陈颢陈震屠红刘鲁明于尔辛复旦大学附属肿瘤医院肝科上海200032 上海交通大学肿瘤研究所上海200032

目的探讨循环DNA的定量检测在荷瘤c57bl/6小鼠中的应用价值。方法以异位接种法在c57bl/6小鼠中建立B16黑色素瘤肝转移模型,以”微量基因组抽提试剂盒”抽提血清DNA,用SYBR Green I斑点荧光染色法对DNA进行定量。结果在正常小鼠中,血循环... 详细信息

目的探讨循环DNA的定量检测在荷瘤c57bl/6小鼠中的应用价值。方法以异位接种法在c57bl/6小鼠中建立B16黑色素瘤肝转移模型,以”微量基因组抽提试剂盒”抽提血清DNA,用SYBR Green I斑点荧光染色法对DNA进行定量。结果在正常小鼠中,血循环DNA为(62.4±25.52)ng/mL、荷瘤伴有肝转移小鼠为(241±73.7)ng/mL(P小鼠的血循环DNA水平与小鼠肝转移的分期相关,I期、Ⅱ期肝转移小鼠分别为(131.11±54.32)ng/mL和(170±10.96)ng/mL, Ⅲ期、Ⅳ期小鼠为(235±85.54)ng/mL和(271±65.76)ng/mL。用健脾理气中药抑制肿瘤生长和转移的同时,荷瘤小鼠血循环DNA也同步下降。结论循环DNA定量检测能客观反应小鼠荷瘤程度,并能动态反应药物的疗效,是一具有应用前景的肿瘤标志物。

关键词：黑色素瘤肿瘤移植血液循环 DNA 抗肿瘤剂(中药)/治疗应用小鼠,近交C57BL

基于单细胞测序技术构建小鼠磨牙牙髓细胞的发育图谱

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中华口腔医学杂志 2023年第5期58卷 442-450页

作者：温泉任惠惠赵玉鸣闫文娟葛立宏陈小贤北京大学口腔医学院·口腔医院第一门诊部、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100034 北京大学口腔医学院·口腔医院儿童口腔科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

目的通过在单细胞水平分析小鼠磨牙细胞间异质性,构建牙髓细胞发育的时空图谱,进一步揭示牙齿发育的过程和调控机制。方法分别收集出生后0、3 d的c57bl/6小鼠下颌第一磨牙各10颗,制备单细胞悬液,采用单细胞转录组测序(single-cell RNA s... 详细信息

目的通过在单细胞水平分析小鼠磨牙细胞间异质性,构建牙髓细胞发育的时空图谱,进一步揭示牙齿发育的过程和调控机制。方法分别收集出生后0、3 d的c57bl/6小鼠下颌第一磨牙各10颗,制备单细胞悬液,采用单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术进行测序。从本课题组前期研究中提取出生后7 d小鼠磨牙scRNA-seq数据,与0、3 d数据进行合并分析。使用Seurat程序对测序数据进行质控、标准化、降维和聚类分析;Monocle程序进行拟时序分析,预测发育轨迹;Scillus程序进行基因本体分析,对细胞功能进行注释。使用原位杂交技术对标记基因进行体内定位,明确不同亚群细胞的体内分布和时空变化。结果Seurat分析显示小鼠磨牙细胞具有26个细胞亚群,可分为牙髓细胞、牙囊细胞、上皮细胞、免疫细胞、内皮细胞、管周细胞、胶质细胞和红细胞等八大类细胞,其中牙髓细胞包含5个亚群:成熟牙髓细胞,标记基因为柯萨奇病毒腺病毒受体(coxsackie virus and adenovirus receptor,cxadr);牙乳头细胞,标记基因为SPARc相关模块化钙结合蛋白2(SPARc related modular calcium binding 2,Smoc2);周期细胞,标记基因为Ⅱ型DNA拓扑异构酶(DNA topoisomeraseⅡalpha,Top2a);前成牙本质细胞,标记基因为棕榈酰蛋白羧酸酯酶(notum palmitoleoyl-protein carboxylesterase,Notum);成牙本质细胞,标记基因为牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,Dspp)。随着牙胚发育,成熟牙髓细胞的比例逐渐增加,周期细胞和成牙本质细胞比例逐渐降低。原位杂交染色和基因本体分析结果显示,cxadr+成熟牙髓细胞定位于牙冠上部,主要功能为成骨和“细胞外结构组织”;Smoc2+牙乳头细胞位于根尖,主要功能与“细胞外结构组织”和器官发育相关;Top2a+周期细胞位于牙冠下部,进行有丝分裂;Notum+前成牙本质细胞邻近上皮根鞘,和Dspp+成牙本质细胞的主要功能同为生物矿化。Monocle分析显示牙髓细胞有2条发育轨迹,从Smoc2+牙乳头细胞起始,经过Top2a+周期细胞,再分化为cxadr+成熟牙髓细胞或成牙本质细胞。结论scRNA-seq技术能在转录组水平充分揭示细胞间的异质性,为研究器官发育过程和调控机制提供了有力工具。

关键词：牙髓牙乳头单细胞转录组测序牙齿发育成牙本质细胞细胞图谱小鼠,近交C57BL

下瘀血汤对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠模型的治疗作用及机制

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临床肝胆病杂志 2024年第4期40卷 712-719页

作者：侯林圻王知意赵鑫张洁马文婷刘旭凌张玮陶乐刘成吴柳上海中医药大学附属普陀医院实验中心实验室上海200062 上海中医药大学附属普陀医院感染科上海200062

目的探讨下瘀血汤调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)抑制高脂饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法15只雄性c57bl/6小鼠随机分为低脂饮食(LFD)组、HFD组和下瘀血汤-HFD(XYXD)组,每组... 详细信息

目的探讨下瘀血汤调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)抑制高脂饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法15只雄性c57bl/6小鼠随机分为低脂饮食(LFD)组、HFD组和下瘀血汤-HFD(XYXD)组,每组各5只。测量肝功能指标ALT和AST、血脂代谢指标TG、Tc水平;肝组织经过HE染色、油红O染色,观察小鼠组织形态、脂滴沉积;实时荧光定量PcR检测肝组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及NLRP6表达水平;Western blot检测NLRP6、NF-κB和NF-κB p65蛋白水平;免疫组化检测NLRP6和cD68表达。棕榈酸(PA)、脂多糖(LPS)和下瘀血汤含药血清处理鼠Raw264.7细胞,检测炎症情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与LFD组比较,HFD组血清ALT、AST和Tc、TG水平显著升高(P值均cR结果显示,IL-1β、IL-18等炎症相关因子显著升高,NLRP6表达显著下调(P值均cD68重合。Western blot显示,NLRP6表达下调后,磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)显著上调(P小鼠的肝脏炎症,上调NLRP6的表达,下调p-NF-κB p65(P小鼠模型的肝脂肪变性和炎症,调控NLRP6/NF-κB减轻巨噬细胞活化可能是其作用机制之一。

关键词：非酒精性脂肪性肝病下瘀血汤巨噬细胞 NLR蛋白质类小鼠,近交C57BL

复方灵丹胶囊对肝纤维化小鼠模型肝功能及纤维化程度的影响

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临床肝胆病杂志 2023年第4期39卷 804-809页

作者：涂芷馨王妍黄剑洁金清龙吉林大学第一医院肝胆胰内科长春130000

目的研究复方灵丹胶囊对肝纤维化小鼠模型血清生化指标及肝脏纤维化程度的影响。方法125只SPF级雄性c57bl/6小鼠随机分为正常对照组(n=5);ccl 4模型组(n=15),ccl 4造模低、中、高剂量给药组(0.8、1.6、3.2 mg·g^(-1)·d^(-1))(每组各15... 详细信息

目的研究复方灵丹胶囊对肝纤维化小鼠模型血清生化指标及肝脏纤维化程度的影响。方法125只SPF级雄性c57bl/6小鼠随机分为正常对照组(n=5);ccl 4模型组(n=15),ccl 4造模低、中、高剂量给药组(0.8、1.6、3.2 mg·g^(-1)·d^(-1))(每组各15只);DDc模型组(n=15),DDc造模低、中、高剂量给药组(0.8、1.6、3.2 mg·g^(-1)·d^(-1))(每组各15只)。造模成功后,给药组予以相应剂量复方灵丹胶囊混悬液灌胃,正常对照组及模型组以等量生理盐水灌胃,连续给药4周,眼球取血,留取血清,检测AST、ALT、白蛋白、胆红素,留取肝右叶同一部位组织进行病理观察及天狼星红、α1-Ⅰ型胶原蛋白抗体及α-平滑肌肌动蛋白抗体染色。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Bonferroni法。结果与模型组对比,复方灵丹胶囊给药后,各剂量组小鼠血清ALT明显下降、白蛋白升高(P值均小鼠肝组织病理变化均得到不同程度的改善,天狼星红染色阳性细胞显著减少,α-平滑肌肌动蛋白、α1-Ⅰ型胶原蛋白表达出现不同程度的下降。结论复方灵丹胶囊能够改善肝纤维化小鼠肝功能、降低其肝纤维化程度。

关键词：肝硬化小鼠,近交C57BL 复方灵丹胶囊