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食品科学 2010年第15期31卷 186-189页

作者：殷捷卢姗姗张少辉高艳玲付丽娜上海交通大学农业与生物学院上海200240 上海交通大学陆伯勋食品安全中心上海200240

为了从3株瑞士乳杆菌(JCM1120、CICC 6024和实验室保存菌株L0906)中筛选出1株产肽丰富的瑞士乳杆菌作为后续实验用菌株。采用水解度、pH值、小肽含量3个指标设计实验。结果表明:产酸能力最强的菌株CICC 6024在相同发酵过程中最大水解度... 详细信息

为了从3株瑞士乳杆菌(JCM1120、CICC 6024和实验室保存菌株L0906)中筛选出1株产肽丰富的瑞士乳杆菌作为后续实验用菌株。采用水解度、pH值、小肽含量3个指标设计实验。结果表明:产酸能力最强的菌株CICC 6024在相同发酵过程中最大水解度明显高于其他菌株;菌株CICC 6024和菌株JCM1120的小肽含量在发酵时间16h处达到最大,菌株L0906的发酵活性较为缓慢,在发酵时间28h尚未达到顶峰;另外小肽的反相液相色谱峰图显示,菌株16h时CICC 6024菌对应的20mAU以上的小肽峰多达19个。通过比较,最后选定CICC 6024菌株作为后续实验用菌株,发酵时间为16h。

关键词：瑞士乳杆菌 pH值水解度小肽含量

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中性蛋白酶对菜粕品质改良的研究

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饲料工业 2010年第4期31卷 18-21页

作者：杨家帅汤江武姚晓红孙宏葛向阳华中农业大学生命科学与技术学院湖北武汉430074 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所

试验研究中性蛋白酶的添加量、酶解料水比、酶解时间及酶解温度对菜粕蛋白品质和硫甙降解的影响,并通过正交试验确定中性蛋白酶最佳酶解条件。结果表明:中性蛋白酶酶解菜粕的最佳条件是酶添加量125U/g、料水比1:1.2、酶解时间48h、酶解... 详细信息

试验研究中性蛋白酶的添加量、酶解料水比、酶解时间及酶解温度对菜粕蛋白品质和硫甙降解的影响,并通过正交试验确定中性蛋白酶最佳酶解条件。结果表明:中性蛋白酶酶解菜粕的最佳条件是酶添加量125U/g、料水比1:1.2、酶解时间48h、酶解温度45℃。在此条件下,菜粕经酶解后,小肽含量从33.54mg/g提高到137.26mg/g,比原菜粕提高了4.09倍;硫甙含量从50.94μmol/g减少到26.31μmol/g,比原菜粕降低了48.34%。

关键词：菜粕中性蛋白酶酶解小肽含量

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生物转化鱼粉的研发及替代血浆蛋白粉在仔猪饲料中的应用

生物转化鱼粉的研发及替代血浆蛋白粉在仔猪饲料中的应用

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作者：林俊宏华南农业大学

学位级别：硕士

目前,我国养殖业常用生猪品种为杜洛克猪、长白猪、大白猪等,以及以上各品种间的二元、三元杂交猪。经杜洛克猪、长白猪、大白猪三元杂交而成的杜长大猪具有生长快、饲料利用率高、瘦肉率高、经济效益明显等特点,受到国内猪场的欢迎,推... 详细信息

目前,我国养殖业常用生猪品种为杜洛克猪、长白猪、大白猪等,以及以上各品种间的二元、三元杂交猪。经杜洛克猪、长白猪、大白猪三元杂交而成的杜长大猪具有生长快、饲料利用率高、瘦肉率高、经济效益明显等特点,受到国内猪场的欢迎,推广效果较好。生猪的生长阶段一般分为哺乳阶段、保育阶段、生长育肥阶段。保育阶段指仔猪断奶至保育结束这一时期,该阶段的生猪称为断奶仔猪。断奶仔猪早期断奶易出现断奶应激反应,从而对断奶仔猪饲料的消化吸收造成严重影响,进而影响断奶仔猪的健康和成长发育,而饲料的优劣对断奶仔猪断奶应激反应的强度和时间长度有巨大的影响。另外,我国动物性蛋白供需关系相对紧张,饲料原料价格不断上涨,饲料成本不断增加。因此,利用现代生物工程技术的生物转化开发新的蛋白饲料来源,同时通过生物转化作用提高蛋白饲料的利用率、小肽含量和消化水平,对缓解饲料蛋白短缺、降低断奶仔猪不良反应有重大意义。本课题以断奶仔猪为研究对象,通过嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌发酵处理鱼粉,研究不同发酵条件对发酵鱼粉小肽含量、挥发性盐基氮含量和总抗氧化能力的影响,确定最佳发酵条件;采用酶解处理鱼粉,研究不同酶解条件对酶解鱼粉小肽含量和挥发性盐基氮含量的影响,确定最佳酶解条件;通过研究不同酶解时间和蛋白酶添加量对生物转化鱼粉小肽含量、挥发性盐基氮含量及其他理化指标的影响,确定生物转化鱼粉的生产工艺和生产流程。结果如下:（1）适宜的鱼粉发酵处理工艺条件为:菌种接种比（嗜酸乳杆菌:枯草芽胞杆菌）1:2、料水比1:1、接种量5%、发酵温度35℃、发酵时间24 h。此条件下,发酵鱼粉小肽含量达到24.77%,挥发性盐基氮仅为42.5 mg·（100 g）-1,总抗氧化能力提升70%以上。（2）适宜的鱼粉酶解处理工艺条件为:蛋白酶复配比（木瓜蛋白酶:中性蛋白酶:菠萝蛋白酶）为3:2:1、酶解初始p H为6.0、酶解温度为50℃。（3）酶解与发酵分步进行的工艺,最佳酶解时间为8 h。（4）酶解与发酵同步进行的工艺,最佳蛋白酶添加量为160 U。（5）生物转化鱼粉较鱼粉小肽含量提高69.69%、挥发性盐基氮含量下降35.71%,氨基酸含量提高30.52%,各项指标有所提升。（6）断奶仔猪饲料添加3%生物转化鱼粉,较血浆蛋白粉,平均采食量提高11.98%、平均日增重提高17.75%、料肉比降低4.89%、腹泻率提高11.03%;较鱼粉,平均采食量提高10.16%、平均日增重提高5.01%、料肉比提高4.90%、腹泻率降低10.34%。结论如下:（1）获得生物转化鱼粉发酵菌种:一株嗜酸乳杆菌和一株枯草芽孢杆菌;（2）获得生物转化鱼粉复合酶配方;（3）获得两套生物转化鱼粉的生产工艺:酶解与发酵分步进行的生产工艺和酶解与发酵同步进行的生产工艺;（4）设计了两套生物转化鱼粉的生产流程:鱼粉与生物转化鱼粉同步生产的生产流程和鱼粉与生物转化鱼粉独立生产的生产流程;（5）鱼粉经酶解、发酵制备生物转化鱼粉,能有效提高产品小肽含量和氨基酸含量,降低挥发性盐基氮含量,极大提升产品品质;（6）断奶仔猪饲料添加3%生物转化鱼粉,可提高断奶仔猪平均采食量、平均日增重,降低腹泻率,提高经济效益。

关键词：断奶仔猪生物转化鱼粉血浆蛋白粉发酵酶解小肽含量挥发性盐基氮含量

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兼性厌氧产蛋白酶菌株的筛选及其发酵豆粕工艺研究

兼性厌氧产蛋白酶菌株的筛选及其发酵豆粕工艺研究

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作者：唐晓星南昌大学

学位级别：硕士

本论文以兼性厌氧、产蛋白酶为条件，筛选发酵豆粕优良菌种;对筛选菌株进行毒理性实验和蛋白酶相对酶活力的测定，并结合实验室保藏的植物乳杆菌NCU116对豆粕发酵技术进行研究，跟踪分析发酵过程，确定最佳发酵工艺条件。本文的主要研... 详细信息

本论文以兼性厌氧、产蛋白酶为条件，筛选发酵豆粕优良菌种;对筛选菌株进行毒理性实验和蛋白酶相对酶活力的测定，并结合实验室保藏的植物乳杆菌NCU116对豆粕发酵技术进行研究，跟踪分析发酵过程，确定最佳发酵工艺条件。本文的主要研究内容与结论如下： (1)优良发酵豆粕菌种的筛选与鉴定。在发酵豆粕、自然发酵的豆豉中筛选得到1株兼性厌氧、产蛋白酶菌株。经生理生化实验、分子生物学实验，确定其为甲基营养型芽孢杆菌，并命名为NCU507。 (2)甲基营养型芽孢杆菌NCU507(Bacillus methylotrophicus NCU507)的毒理性研究。首先对甲基营养型芽孢杆菌NCU507生长曲线的进行测定，0h，NCU507菌数迅速增加至9.1×107cfu/mL(7.96logCFU/mL);8h0h,菌数缓慢增加，在20h时达到最大，为4.8×108cfu/mL (8.68logCFU/mL);之后，菌数缓慢减少，40h时减少至1.8×107cfu/mL (7.26logCFU/mL)。然后，测定NCU507的细胞毒性，发现其在106cfu/mL和107cfu/mL时的加入量不会引起Caco-2细胞膜结构的破坏，无细胞毒性。 (3)甲基营养型芽孢杆菌NCU507(Bacillus methylotrophicus NCU507)的酶学性质研究。在不同的温度、pH、保温时间等因素的限制下测定蛋白酶的相对酶活力。结果表明，在40℃、pH为7.0时相对酶活力和酶的稳定性最高，Mn2+对酶反应促进作用最为明显。 (4)甲基营养型芽孢杆菌NCU507(Bacillus methylotrophicus NCU507)单菌发酵豆粕工艺研究。单因素实验表明最佳发酵时间为96h、最佳发酵温度为37℃、最佳接种量为4%、最佳料水比为1:1。.响应面实验优化结果表明最佳发酵温度36.8℃，最佳料水比为1:1.2，最佳发酵时间为85h;在此条件下，理论可预测的水解度为26.24%。根据理论预测条件进行验证实验，结果显示其水解度为26.13%，与预测值接近，表明实验优化所得工艺条件可靠。对单菌发酵豆粕过程动态分析，在前48h内，菌数维持在大约8.85logCFU/g;随着时间的增加，甲基营养型芽孢杆菌NCU507的菌数逐渐下降。终点96h时，下降至6.66logCFU/g。总蛋白的含量逐渐上升。0h时，初始总蛋白含量为47.68%(w/w)，终点96h时，总蛋白含量增加至52.90%(w/w)。小肽含量持续增加。在0h6h内，小肽的含量迅速增加，由0.30%增加至21.40%(w/w)，之后在36h6h内，小肽的含量缓慢增加，终点96h时，达到28.13%(w/w)。有机酸含量呈逐渐减少趋势，在0h4h内，有机酸含量维持在0.49%(w/w)，接着在24h2h内迅速下降，在72h时，有机酸含量降至0.15%(w/w);在72h6h内，有机酸含量持续下降并逐渐降低至0%(w/w)。 (5)甲基营养型芽孢杆菌NCU507(Bacillus methylotrophicus NCU507)与植物乳杆菌NCU116混菌固态发酵豆粕工艺研究。单因素实验表明，NCU116与NCU507最佳接种比例为1:4、最佳总接种量为9%、最佳发酵时间为96h、最佳料水比比例为1:1。响应面优化结果表明，最佳接种比例为5:1、最佳总接种量为7.50%、最佳料水比为1:1.2。此优化结果，理论可预测的水解度为26.52%。根据理论预测条件进行验证实验，结果显示其水解度的为26.37%，与预测值接近，表明实验优化所得工艺条件可靠。对混菌发酵豆粕过程动态分析，植物乳杆菌NCU116的加入使得甲基营养型芽孢杆菌NCU507菌数的稳定期从48h缩短为24h，0h4h时，NCU507的菌数维持在9.58log CFU/g左右，然后在24h6h内，迅速下降至4.72logCFU/g;NCU116的菌数的稳定期时间较长，在0h8h时一直维持在8.83logCFU/g，然后在48h6h内，下降至6.00log CFU/g。总蛋白含量逐渐上升，终点96h时，总蛋白含量为57.08%(w/w)。与单菌发酵相比，混菌发酵实验总蛋白含量上升了4.18%(w/w);小肽含量在整个发酵过程中呈上升趋势，终点96h时，豆粕中小肽含量达到26.78%(w/w)，与单菌发酵相比，数值偏低。有机酸含量呈先上升，后下降，再稳定的趋势，且与单菌发酵相比，有机酸含量在整个发酵过程中维持较高水平。

关键词：发酵豆粕甲基营养型芽孢杆菌兼性厌氧总蛋白含量小肽含量

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碱性蛋白酶酶解豆粕及对其品质改善的研究

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现代畜牧兽医 2022年第7期 16-19页

作者：周宇朦孙洪浩吕福军辽宁波尔莱特农牧实业有限公司辽宁沈阳110122

试验旨在探究不同碱性蛋白酶酶解对豆粕品质的影响。在酶解条件一致(加酶200 U/g、料水比1∶1、温度40℃、酶解时间48 h)的情况下,使用不同的碱性蛋白酶对豆粕进行酶解。结果显示,豆粕经过酶解后,颜色、气味变重,质地水润黏稠,pH值下降... 详细信息

试验旨在探究不同碱性蛋白酶酶解对豆粕品质的影响。在酶解条件一致(加酶200 U/g、料水比1∶1、温度40℃、酶解时间48 h)的情况下,使用不同的碱性蛋白酶对豆粕进行酶解。结果显示,豆粕经过酶解后,颜色、气味变重,质地水润黏稠,pH值下降约35%,干物质含量减少约10%,蛋白水解度增加约43%,小肽含量最少增加103%,最多增加307%,抗原蛋白几乎全部被降解。研究表明,不同的碱性蛋白酶对豆粕品质的改善效果不同,可以选择适宜的碱性蛋白酶进行降解试验,提高利用率。

关键词：豆粕碱性蛋白酶酶解小肽含量抗原蛋白

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