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小分子抗体技术研究进展

生物学通报 2004年第8期39卷 1-3页

作者：邓宁向军俭黄峙暨南大学生命科学学院广东广州510632

小分子抗体的研究近年来发展迅速。本文综述了小分子抗体近年来的研究,介绍了小分子抗体的类型及其特点;小分子抗体在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞、昆虫细胞等表达系统中的表达研究;小分子抗体在肿瘤、病毒病、基因治疗以及临床诊断... 详细信息

小分子抗体的研究近年来发展迅速。本文综述了小分子抗体近年来的研究,介绍了小分子抗体的类型及其特点;小分子抗体在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞、昆虫细胞等表达系统中的表达研究;小分子抗体在肿瘤、病毒病、基因治疗以及临床诊断、显像分析等临床应用研究。显示小分子抗体在临床肿瘤、病毒病的治疗以及显像分析。

关键词：小分子抗体表达治疗肿瘤病毒病

抗体技术研究进展(2):小分子抗体及功能复合化抗体

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第5期34卷 556-563页

作者：向军俭童吉宇王宏广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广东广州510632 暨南大学抗体工程研究中心广东广州510632

随着分子生物学的发展,基因工程小分子抗体以及纳米抗体由于其分子质量小、结构简单、异源性低、组织穿透能力强及易于大量生产等优点而越来越受到人们的关注,并且其与毒素、酶、细胞因子等生物活性物质融合可产生功能复合化抗体——抗... 详细信息

随着分子生物学的发展,基因工程小分子抗体以及纳米抗体由于其分子质量小、结构简单、异源性低、组织穿透能力强及易于大量生产等优点而越来越受到人们的关注,并且其与毒素、酶、细胞因子等生物活性物质融合可产生功能复合化抗体——抗体融合蛋白,在肿瘤的诊断和治疗中具有广阔的应用前景.本研究主要就小分子抗体、功能复合化抗体以及纳米抗体近几年的发展与应用进行综述.

关键词：小分子抗体抗体融合蛋白功能复合化抗体纳米抗体

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抗体和抗体偶联药物的机遇和挑战

药学进展 2024年第1期48卷 1-5页

作者：邱均专尚玉栓赵民陈如雷夏明德英诺湖医药(杭州)有限公司

1单克隆抗体药物自Trastuzumab(Herceptin)于1998年被批准用于抗肿瘤治疗到具有细胞毒性的T淋巴细胞相关联抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4,CTLA-4)和程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)抗体被用于肿瘤的免疫治疗以来,抗体药物研发已取得迅猛发展。新的技术和平台不断出现,包括抗体展示技术、全人源化小鼠和单B细胞技术。抗体药物的结构模式也出现了多样化,开发出了双特异性抗体、抗体融合蛋白、小分子抗体片段等多种形式,尤其是以PD-1抗体为代表的免疫检查点抑制剂、抗体药物偶联物(antibody drug conjugate,ADC)。

关键词：双特异性抗体抗体偶联药物免疫检查点抑制剂单克隆抗体药物小分子抗体 Herceptin T淋巴细胞细胞毒性

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含组氨酸标签的小分子抗体临床应用现状

中国医药生物技术 2012年第6期7卷 460-462页

作者：刘晓屈琳黄昌发余馨罗勤四川希尔思生物分子有限责任公司成都610041

单链抗体（scFv）是由免疫球蛋白的重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过一条连接肽，如（GGGGS）4连接而成的小分子抗体（图1）。与全抗相比，它因分子小、容易进入实体肿瘤、体内清除快、免疫原性低、成像清晰等优点成为目前医用... 详细信息

单链抗体（scFv）是由免疫球蛋白的重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过一条连接肽，如（GGGGS）4连接而成的小分子抗体（图1）。与全抗相比，它因分子小、容易进入实体肿瘤、体内清除快、免疫原性低、成像清晰等优点成为目前医用抗体研究的热剧。

关键词：小分子抗体临床应用组氨酸标签轻链可变区重链可变区免疫球蛋白单链抗体

原核表达一种新型抗Aβ42小分子抗体Aβ42ScFv及其作用研究

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原核表达一种新型抗Aβ42小分子抗体Aβ42ScFv及其作用研究

作者：罗珅吉林大学

学位级别：硕士

目的:设计并原核表达一种可与Aβ特异性结合的新型小分子抗体AβScFv,验证该抗体可体外与Aβ结合并抑制其聚集。方法:根据GenBank提供的Aβ单克隆抗体已知序列,选取其重链可变区CDR1、轻链可变区CDR3并增加穿膜肽TAT及内质网滞留信号肽S... 详细信息

目的:设计并原核表达一种可与Aβ特异性结合的新型小分子抗体AβScFv,验证该抗体可体外与Aβ结合并抑制其聚集。方法:根据GenBank提供的Aβ单克隆抗体已知序列,选取其重链可变区CDR1、轻链可变区CDR3并增加穿膜肽TAT及内质网滞留信号肽SEKDEL设计小分子抗体AβScFv序列,通过Phyre2(http://www.***.bio.***.ac.uk/phyre2/html/page.cgi?id=index)预测AβScFv三级结构。利用基因工程原理设计构建其原核表达序列,PCR反应获得目的片段并TA克隆后电泳验证及测序。将目的片段与PET-28a质粒载体通过XhoⅠ和NcoⅠ酶切位点相连构建原核表达质粒,酶切后电泳验证目的片段重组于载体中。将原核表达质粒转化入JM109菌。将原核表达载体转入B L-21表达菌中,表达产物通过非变性蛋白电泳、透射电子显微镜等验证体外结合并抑制Aβ聚集。结果:1、PCR反应所得目的片段进行电泳可见150bp左右片段,与预期目的片段大小相符;连接至T载体后DNA测序与设计相同。2、目的片段TA克隆后与PET-28a质粒载体相连,限制性内切酶XhoⅠ和NcoⅠ双酶切连接产物并电泳,可见150bp目的片段条带和5200bp酶切后载体条带,符合预期。3、原核表达载体PET28a-AβScFv转化入JM109菌,回收JM109菌表达目的蛋白经1%琼脂糖凝胶电泳可见约6kD目的蛋白,与预期相符。4、由于BL-21表达产物AβScFv与Aβ等电点相差大(AβAβScFv等电点10.43,Aβ为5.31),行正向Native-PAGE电泳后时,仅见Aβ单体、寡聚体及纤维体正常显影,AβScFv由于携带大量正电荷未从加样孔游出。两者共孵育后未见Aβ相关条带显影,证实Aβ与AβScFv在反应体系中结合而未游出。5、透射电子显微镜下可见在与AβScFv共孵育37℃1d后,单独Aβ聚集程度明显加重,较相同条件下二者共孵育后Aβ聚集程度有所减轻。结论:1、成功设计并克隆了可与Aβ特异性结合的新型小分子抗体AβScFv基因。2、成功构建携带AβScFv的PET28a-AβScFv重组质粒,重组质粒转化入BL-21菌后经诱导可稳定表达具有功能的AβScFv蛋白。3、BL-21菌表达的AβScFv可在体外与Aβ结合并抑制其聚集。

关键词：阿尔茨海默病 Aβ42 小分子抗体

人抗狂犬病毒小分子抗体ScFv-Fc在毕赤酵母中的表达与鉴定

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人抗狂犬病毒小分子抗体ScFv-Fc在毕赤酵母中的表达与鉴定

作者：陈磊吉林大学

学位级别：硕士

巴斯德毕赤酵母表达系统是近年来广泛用于表达外源基因的表达系统。该系统具有真核细胞和原核细胞的双重特点,既可以对外源蛋白进行适当加工、修饰,使目的蛋白的抗原性、免疫原性和活性与天然蛋白接近,也可以将外源蛋白以可溶的形式分... 详细信息

巴斯德毕赤酵母表达系统是近年来广泛用于表达外源基因的表达系统。该系统具有真核细胞和原核细胞的双重特点,既可以对外源蛋白进行适当加工、修饰,使目的蛋白的抗原性、免疫原性和活性与天然蛋白接近,也可以将外源蛋白以可溶的形式分泌到培养基中,使纯化更为简便,还可以在简单培养基中迅速生长至高密度,从而得到大量有活性的目的蛋白。本研究利用基因重组技术构建了可融合表达人抗狂犬病毒小分子抗体ScFv-Fc的表达载体pPICZα-Fc/ScFv,电转化毕赤酵母X-33后,筛选出稳定高效的分泌表达ScFv-Fc抗体的基因工程菌株,并通过Protein A层析柱纯化。经SDS-PAGE,Western blot,ELISA鉴定重组抗体的生物学活性,结果表明,在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生具抗原结合活性的小分子分泌型抗体ScFv-Fc,并可方便的应用Protein A进行纯化。在抗体分子的克隆、筛选及小分子抗体的表达制备方面具有潜在价值。

关键词：狂犬病小分子抗体 ScFv 毕赤酵母融合表达

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小分子抗体制备技术及临床应用进展

实用医药杂志 2014年第3期31卷 263-265页

作者：陈丽娟张丽华李杰陈永新解放军456医院检验科山东济南250031 山东省千佛山医院检验科山东济南250014

自20世纪80年代以来,随着各种分子生物学技术的发展和抗体基因结构的进一步阐明,DNA重组技术开始广泛应用于抗体的改造,抗体制备技术已从多克隆抗血清、单克隆抗体发展到基因工程抗体.随着近年来各种抗体制备相关技术如噬菌体抗体库技... 详细信息

自20世纪80年代以来,随着各种分子生物学技术的发展和抗体基因结构的进一步阐明,DNA重组技术开始广泛应用于抗体的改造,抗体制备技术已从多克隆抗血清、单克隆抗体发展到基因工程抗体.随着近年来各种抗体制备相关技术如噬菌体抗体库技术、核糖体展示技术等的不断发展,人们可制备各种类型的小分子抗体,如Fab抗体、ScFv抗体、单域抗体等,这些抗体的分子量只有完整抗体的1/6～1/2大小,除具有分子量小,穿透性强,不与Fc受体结合等特点外,还易于在各种表达系统表达及便于操作和大量生产,已成为基因工程抗体家族的主要成员和研究热点.现对小分子抗体的制备技术及其在临床医学和疾病诊断治疗等领域应用的研究进展作一综述.

关键词：小分子抗体制备临床应用