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新疆尉犁县黑湖嗜盐嗜碱菌的多样性及一株产溶栓酶菌株的筛选鉴定

新疆尉犁县黑湖嗜盐嗜碱菌的多样性及一株产溶栓酶菌株的筛选鉴定

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作者：依妮皮姑丽·麦麦提依明新疆师范大学

学位级别：硕士

由于干旱区极端环境湖泊的生物系统是受独特的水文、地貌和气候以及不同生态条件的限制和制约,新疆盐湖各类生物量的分布独特各具特色,分布物种的活性物质极具开发潜能。为了解我国新疆地区不明盐湖嗜盐嗜碱微生物资源多样性,以新疆尉... 详细信息

由于干旱区极端环境湖泊的生物系统是受独特的水文、地貌和气候以及不同生态条件的限制和制约,新疆盐湖各类生物量的分布独特各具特色,分布物种的活性物质极具开发潜能。为了解我国新疆地区不明盐湖嗜盐嗜碱微生物资源多样性,以新疆尉犁县科克苏湖周边黑湖嗜盐嗜碱菌的多样性及一株溶栓菌的筛选鉴定为研究题目,2014年9-11月从新疆尉犁县黑湖采集的土样,水样,泥样及湖边盐碱土壤样品中,利用1号培养基分离得到嗜盐嗜碱菌85株。经形态检测,多数为球形,菌落均带颜色。经产酶实验表明,其中53株菌具有过氧化氢酶活性,37株菌具有氧化酶活性,11株菌能够产淀粉酶,9株菌产蛋白酶,20株菌能水解吐温20,15株菌能水解吐温40,6株菌能水解吐温80产脂酶。经分子生物学与生物信息学研究鉴定,通过基于16S r RNA基因序列系统发育分析85株菌中分别属于Halorubrum属的有41株、Natrialba属的有40株、Halohasta属的有2株、Haloarcula属的有1株、Halopiger属的有1株。其中Halorubrum和Natrialba为优势属,Halopiger为特有属。属于Halopiger属的DH-66菌株同源性为95.75%,在基因Bank注册号为KU663028,该菌拟为该地区盐湖特有属中的潜在新种。为研究该地区微生物的溶栓功能为目的,利用酪蛋白平板法初筛和纤维蛋白平板方法复筛筛选出28株溶栓酶活性的细菌,通过溶栓酶活性测定从中得到1株能产高效溶血栓活性的菌株DR-33。经生理生化特性和分子鉴定,基于16S r RNA基因序列分析比对细菌鉴定为属于枯草芽孢杆菌属（Bacillus subtilis subsp.inaquosorum）的一个亚种,命名为Bacillus subtilis subsp.inaquosorum strain DR-33,Gen Bank登录号为KX867677。

关键词：尉犁县科克苏湖周边黑湖嗜盐嗜碱古菌 16S rRNA基因序列系统进化分析溶栓细菌

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