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导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测人乳头瘤病毒的临床价值

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中国实用妇科与产科杂志 2011年第3期27卷 205-208页

作者：任佳玢隋龙上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院上海200030 复旦大学附属妇产科医院上海200011

目的评价导流杂交基因芯片(HybriMax)、实时定量PCR(RT-qPCR)在人乳头瘤病毒(HPV)分型和定量分析以及对筛查高级别宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌的临床价值。方法选取2007年5月至2007年10月103例在复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中... 详细信息

目的评价导流杂交基因芯片(HybriMax)、实时定量PCR(RT-qPCR)在人乳头瘤病毒(HPV)分型和定量分析以及对筛查高级别宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌的临床价值。方法选取2007年5月至2007年10月103例在复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中心就诊妇女作为研究对象,取宫颈脱落细胞行杂交捕获二代(HCⅡ)、HybriMax及RT-qPCR检测HPV,同时在阴道镜引导下取宫颈活体组织行病理学检查。以HCⅡ检测结果为对照,分析并比较HybriMax及RT-qPCR检测HPV感染与HCⅡ检测结果的一致性;以病理诊断为金标准,分析HybriMax及RT-qPCR对筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、阴性预测值。结果 HybriMax、RT-qPCR检测HPV与HCⅡ的符合率分别为86.41%、96.12%;HybriMax筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.30%、50.00%、40.63%、97.44%,RT-qPCR筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为100%、56.58%、45.00%、100%,且HybriMax、RT-qPCR分别能够将HPV分型和定量。结论导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测HPV与HCⅡ比较有较好的一致性,对于CINⅡ以上病变有较高的灵敏度和阴性预测值,且能行HPV分型及定量,可用于宫颈病变的初步筛查。

关键词：人乳头瘤病毒导流杂交实时定量PCR

导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测人乳头瘤病毒的临床价值初探

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导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测人乳头瘤病毒的临床价值初探

作者：任佳玢复旦大学

学位级别：硕士

目的①分析导流杂交基因芯片（flow-through hybridization gene chip,HybriMax）、实时定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）与杂交捕获二代（Hybrid CaptureⅡ,HCⅡ）比较的一致性及其对筛查宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelialneoplasia,CIN）Ⅱ以上病变的临床价值;②初步了解不同宫颈病变的主要HPV亚型分布;③探究HPV负荷量（HPV viral load）与宫颈病变程度之间的关系。方法选取2007年5月18日至2007年10月9日在复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中心就诊的有性生活史的妇女共103例为研究对象,分为慢性宫颈炎组48例、宫颈扁平湿疣及低级别CIN（CINⅠ）组28例、高级别CIN（CINⅡ、CINⅢ）及宫颈浸润癌组27例。所有研究对象取宫颈脱落细胞行HCⅡ、HybriMax及RT-qPCR检测HPV,同时在阴道镜引导下取宫颈活组织行病理组织学检查。以HCⅡ检测结果为对照分析HybriMax及RT-qPCR检测HPV与HCⅡ的一致性;以组织学诊断为金标准,分析HybriMax及RT-qPCR对筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、阴性预测值;根据HybriMax对HPV的分型检测了解研究对象的HPV各亚型感染分布,并结合组织病理学结果分析不同宫颈病变的主要HPV亚型;根据RT-qPCR对HPV-DNA的定量检测了解HPV负荷量与宫颈病变程度之间的关系。应用SPSS13.0软件进行统计分析,方法包括X检验、Fisher确切概率法、Kruskal-WallisH检验,P＜0.05定义为统计学有显著差异。结果①导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测HPV与HCⅡ的符合率分别为86.41%、96.12%,Kappa值分别为0.72、0.92;导流杂交基因芯片筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、阴性预测值为96.30%、97.44%,实时定量PCR为100%、100%。②根据HybriMax对HPV的分型检测,103例中HPV各亚型的感染比例依次为HPV16（28.16%）、HPV58（11.65%）、HPV52（7.77%）。HPV16、31、33型在高级别CIN及宫颈浸润癌组中的感染比例（分别为74.07%、11.11%、11.11%）高于宫颈扁平湿疣及低级别CIN组（分别为28.57%、3.57%、0.00%）和慢性宫颈炎组（分别为2.08%、6.25%、2.08%）;而HPV6、11型在宫颈扁平湿疣及低级别CIN组的感染比例（分别为10.71%、14.29%）高于慢性宫颈炎组（分别为2.08%、0.00%）和高级别CIN及宫颈浸润癌组（分别为3.70%、3.70%）。③根据RT-qPCR对HPV-DNA的定量检测结合病理组织学诊断,HPV负荷量随病变程度的加重而升高。结论①导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测HPV与HCⅡ比较有较好的一致性,对于CINⅡ以上病变有较高的灵敏度和阴性预测值,且能行HPV分型及定量,但结果稳定性不够,有一定误诊比例,尚需大样本实验进一步验证。②本研究中,HPV各亚型感染比例居前三位的是HPV16、58、52型。HPV16型是高级别CIN及宫颈浸润癌的主要亚型,而HPV6、11型是宫颈扁平湿疣及低级别CIN的主要亚型。③HPV负荷量随病变程度的加重而升高。

关键词：人乳头状瘤病毒(HPV) 导流杂交实时定量PCR 杂交捕获(HCⅡ) 宫颈上皮内瘤变负荷量

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导流杂交HPV检测在宫颈病变筛查中的价值

导流杂交HPV检测在宫颈病变筛查中的价值

作者：薛白大连医科大学

学位级别：硕士

研究背景根据最新的世界癌症统计,子宫颈癌(cervical cancer,CC)是全球女性中第四位最常见的癌症,位于癌症死因的第三位,作为目前惟一病因明确的妇科恶性肿瘤,因其筛查能明显的降低癌症的发生率和死亡率,目前国内外均高度重视宫颈癌及... 详细信息

研究背景根据最新的世界癌症统计,子宫颈癌(cervical cancer,CC)是全球女性中第四位最常见的癌症,位于癌症死因的第三位,作为目前惟一病因明确的妇科恶性肿瘤,因其筛查能明显的降低癌症的发生率和死亡率,目前国内外均高度重视宫颈癌及癌前病变的筛查,尤其是HPV的检测,近几年HPV-DNA检测已成为研究热点,检测技术也在不断得到完善。持续性的高危型人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染是导致CIN(宫颈上皮内瘤变,Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)和宫颈癌的最重要危险因素。目前被美国FDA已经认证的检测HPV的方法主要有4种:Hybrid Capture 2、Cervista、cobas 4800和Aptima HPV E6/E7 m RNA。最几年几项大型的实验结果认为,相比较宫颈细胞学而言HPV作为宫颈癌及癌前病变的一线初筛方法更有优势。2014年4月FDA机构又批准了对于25岁及以上的女性,Cobas4800HPV-DNA检测技术可以用于单独的宫颈癌初筛方案。我国作为发展中国家,目前临床上应用检测HPV的技术繁多,其中核酸导流杂交技术(Hybri Max)是我国国内开发且唯一通过中国国家CFDA认证的HPV检测方法,能够同时检测并具体分型21种HPV基因亚型,其中包括13种高危亚型HPV(HR-HPV)。目的评价应用导流杂交技术HPV检测法(Hybri Max)行宫颈癌及癌前病变筛查的效果。探讨导流杂交技术检测HPV作为宫颈癌及癌前病变的首选筛查方法的可行性。方法统计分析2013年12月至2015年12月间于大连市中心医院就诊,行宫颈病变筛查HPV检测的妇女共7056例,均采用导流杂交技术检测15种HR-HPV亚型,包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68型。其中5105例同时行TCT检查。其中有523例行阴道镜下宫颈组织活检,入选标准:TCT检查结果异常者(ASCUS及以上者);HPV16或18阳性者;有明显临床症状者。根据导流杂交技术对HPV的不同分型检测结果研究HR-HPV各亚型感染情况;年龄不同对HPV感染状况的影响及对高级别病变(CIN 2及以上)诊断的准确性;以组织病理诊断为金标准,计算导流杂交检测结果对筛查CIN 2及以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,评价其作为宫颈癌及癌前病变初筛方法的可能性;所有数据采用SPSS13.0软件进行统计分析,P导流杂交HPV分型检测的7056例妇女中,HPV高危型总感染率为17.96%(1267/7056)。感染率最高的3种亚型依次为HPV16型(340个)、58型(210个)、52型(207个),其感染率分别为4.81%(340/7056)、2.98%(210/7056)和2.93%(207/7056)。2.50～59岁年龄组HPV感染率最高,为22.70%;30-39岁组感染率最低,为16.44%。不同年龄组的女性,HR-HPV总感染率有统计学意义。3.以病理诊断为金标准,与宫颈高级别病变(≥CIN 2)最密切的亚型是HPV16、58和33型,占所有≥CIN 2病变的70.86%(124/175)。4.导流杂交技术HPV检测对筛查宫颈癌及癌前病变的敏感度为95.30%,特异度为40.64%,阳性预测值为39.01%,阴性预测值为95.59%。结论:1.本研究中,HPVl6、52、58型为HR-HPV亚型感染比例的前三位。HPV16、58和33型与宫颈高级别病变(≥CIN 2)关系密切。对以上亚型的感染、防治及随访给予更多重视。2.年龄是HPV感染的相关因素。中老年妇女HR-HPV感染比例高,不能忽视该人群HPV筛查及感染情况。3.导流杂交技术有较好的敏感度及阴性预测值,在筛查宫颈癌及癌前病变中有指导意义,但特异度及阳性预测值较低,容易造成不必要的过度治疗,且有一定的漏诊率,目前尚不是国际公认的HPV初筛方法,作为宫颈筛查方法仍需联合TCT等细胞学按目前指南进行联合筛查。

关键词：宫颈病变 HR-HPV-DNA检测导流杂交年龄

PCR结合导流杂交法和细胞培养法在生殖道解脲支原体和人型支原体检测中的临床应用比较

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中国实用妇科与产科杂志 2022年第10期38卷 1029-1032页

作者：肖玲刘晨蔡逸轩张丽丽郑凤英兰红霞刘芸首都医科大学附属北京友谊医院妇产科北京100050

目的探讨传统细胞培养法和PCR结合导流杂交法对解脲支原体(UU)和人型支原体(MH)的检出率、灵敏度、检测速度等差异,判断PCR结合导流杂交法在生殖道感染检测中应用的可行性。方法选取2020年12月至2021年2月在首都医科大学附属北京友谊... 详细信息

目的探讨传统细胞培养法和PCR结合导流杂交法对解脲支原体(UU)和人型支原体(MH)的检出率、灵敏度、检测速度等差异,判断PCR结合导流杂交法在生殖道感染检测中应用的可行性。方法选取2020年12月至2021年2月在首都医科大学附属北京友谊医院(通州院区)妇产科就诊的患者301例,将收集的子宫颈脱落细胞分成2份,1份用于细胞培养法进行UU、MH培养鉴定,药敏试剂盒进行病原体的检测;另外1份样本通过PCR结合导流杂交法进行MH、UU[含解脲脲原体(Uu)和微小脲原体(Up1/3/6/14)共5种亚型]、生殖支原体(MG)、淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)共10种微生物的检测。结果细胞培养法检出率:MH 6.64%(20/301)、UU 47.18%(142/301)。PCR结合导流杂交法检测结果如下:MH 17.28%(52/301)、UU(含Uu和Up1/3/6/14):53.82%(162/301)、MG 6.98%(21/301)、NG 2.33%(7/301)、CT 10.30%(31/301)、HSVⅡ6.98%(21/301)。2种方法对UU检测的一致性标本占76.08%(229/301),47例差异标本的Sanger测序结果与PCR结合导流杂交法检测结果一致,25例与细胞培养法一致;MH一致性的标本占85.38%(257/301),31例差异标本的Sanger测序结果与PCR结合导流杂交法检测结果一致,13例与细胞培养法一致。结论 PCR结合导流杂交法与细胞培养法对MH、UU的检测具有较高的一致性,均具有较高的特异度和准确率。PCR结合导流杂交法在检测耗时、阳性检出率、检测通量和检测指标数量上均有较大优势,对NG、CT、MG和HSVⅡ的结果输出以及协同感染的检出,对后续的治疗均有重要的参考意义。

关键词：性传播感染支原体分型检测导流杂交

人乳头状瘤病毒快速导流杂交与传统杂交法比较基因分型及临床应用

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中华医院感染学杂志 2005年第6期15卷 618-621页

作者：吕晓萍李体远戴勇童秋生熊峰李放娟季卉许小庄深圳市人民医院暨南大学医学院附二院广东深圳518001

目的利用快速导流杂交法对人乳头瘤病毒进行快速基因分型,并探讨该技术临床应用前景. 方法 144例尖锐湿疣患者皮损脱落细胞或组织中提取DNA,PCR扩增后与9种常见HPV亚型探针进行反斑点印迹杂交(reverse dot blot, RDB)检测HPV DNA,通过... 详细信息

目的利用快速导流杂交法对人乳头瘤病毒进行快速基因分型,并探讨该技术临床应用前景. 方法 144例尖锐湿疣患者皮损脱落细胞或组织中提取DNA,PCR扩增后与9种常见HPV亚型探针进行反斑点印迹杂交(reverse dot blot, RDB)检测HPV DNA,通过与传统膜杂交结果做对比,评估导流杂交法的效果. 结果 144例样本中得到134例PCR阳性结果;HPV分型包括:高危HPV亚型16、18、31、33、58;低危亚型6、11、53;未知危险程度的亚型CP8304;68例样本中包括了2～4种亚型的混合感染. 结论两种杂交方法检测结果97%一致;快速导流法优势主要具有更高速度、操作更方便,和节省试剂用量;敏感性和特异性与传统杂交方法相同.

关键词：导流杂交传统杂交乳头状瘤病毒基因分型

液基细胞学标本中p16INK4a、Ki67的表达及导流杂交HPV分型在子宫颈癌及癌前病变中的意义

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液基细胞学标本中p16INK4a、Ki67的表达及导流杂交HPV分型在子宫...

作者：杨彦华青岛大学

学位级别：硕士

目的:探讨LCT细胞学标本中p16、Ki67的免疫细胞化学染色及导流杂交HPV基因分型在筛查子宫颈鳞状细胞癌和子宫颈癌前病变的价值。方法:应用免疫细胞化学和免疫组织化学方法对194例细胞学标本和91例组织活检标本进行p16、Ki67检测;应用... 详细信息

目的:探讨LCT细胞学标本中p16、Ki67的免疫细胞化学染色及导流杂交HPV基因分型在筛查子宫颈鳞状细胞癌和子宫颈癌前病变的价值。方法:应用免疫细胞化学和免疫组织化学方法对194例细胞学标本和91例组织活检标本进行p16、Ki67检测;应用导流杂交的方法检测48例细胞学标本的HPV基因型并与组织学诊断结果做对比。对所得结果应用SPSS10.0分析软件进行卡方检验、Spearman等级相关检验、单因素方差分析和Kendall’s tau-b等级相关检验。结果:①p16在NILM、ASC-US、ASC-H、LSIL、HSIL、SCC各组中的阳性率分别为4.17%(1/24)、35.14%(26/74)、85.71%(6/7)、80%(36/45)、100%(41/41)、100%(3/3)。炎症、ASC(ASC-US+ASC-H)、LSIL、HSIL(HSIL+SCC),各组间阳性表达率经两两比较差异有统计学意义,P值均小于0.0083。ASC-H阳性表达率明显高于ASC-US组,经卡方检验,差异有统计学意义(X=87.58,P=0.0000)。经Spearman等级相关分析,p16的平均染色强度与病变级别正相关(r=0.722,p导流杂交是一种融导流杂交与基因芯片于一体的快速杂交平台,具有高敏高效性。

关键词：子宫颈癌 p16INK4a Ki67 液基细胞学导流杂交免疫细胞化学

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导流杂交HPV检测在宫颈病变筛查中的价值

大连医科大学学报 2016年第5期38卷 444-449页

作者：张辉薛白金仙玉大连市中心医院妇产科辽宁大连116011

目的评价应用导流杂交技术（凯普导流杂交）HPV检测法（Hybri Max）行宫颈癌及癌前病变筛查的效果及作为首选筛查方法的可行性。方法统计分析2013年12月至2015年12月采用导流杂交技术,检测HR-HPV亚型的女性共7056例,分为5个年龄段：≤29... 详细信息

目的评价应用导流杂交技术（凯普导流杂交）HPV检测法（Hybri Max）行宫颈癌及癌前病变筛查的效果及作为首选筛查方法的可行性。方法统计分析2013年12月至2015年12月采用导流杂交技术,检测HR-HPV亚型的女性共7056例,分为5个年龄段：≤29岁;30~39岁;40~49岁;50~59岁;≥60岁。研究HR-HPV各亚型感染情况,不同年龄的HPV感染状况。计算导流杂交检测结果对筛查CIN2及以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,评价其作为宫颈癌及癌前病变初筛方法的可能性。所有数据采用SPSS13.0软件进行统计分析,P〈0.05定义为统计学有显著差异。结果 HR-HPV感染率总体呈现随年龄增长而增高趋势,各年龄段HR-HPV感染率总体比较差异有显著性意义（χ2=23.61,P〈0.05）。以病理诊断为金标准,与宫颈高级别病变（≥CIN2）最密切的亚型是HPV16、58和33型,占所有≥CIN2病变的70.86%（124/175）;导流杂交技术HPV检测对筛查宫颈癌及癌前病变的敏感度为95.30%,特异度为40.64%,阳性预测值为39.01%,阴性预测值为95.59%。结论中老年女性HR-HPV感染比例高,不能忽视该人群HPV筛查及感染情况;导流杂交技术有较好的敏感度及阴性预测值,在筛查宫颈癌及癌前病变中有指导意义;作为宫颈筛查方法仍需联合TCT等细胞学筛查进一步分流或按目前指南进行联合筛查。

关键词：宫颈病变 HPV HR-HPV-DNA检测导流杂交中老年

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导流杂交法检测人乳头状瘤病毒的结果分析

遵义科技 2010年第1期38卷 36-39页

作者：李彦肖瑜遵义医学院贵州省细胞工程重点实验室 563003

目的：分析本院就诊的女性人乳头状瘤病毒（HPV）感染的型别分布和年龄特征。方法：采用核酸分子快速导流杂交分型技术对本院就诊的1530例女性进行HPV分型检测。结果：HPV阳性率为25．9％，在被检测到的21个HPV亚型中，高危型HPV16感染... 详细信息

目的：分析本院就诊的女性人乳头状瘤病毒（HPV）感染的型别分布和年龄特征。方法：采用核酸分子快速导流杂交分型技术对本院就诊的1530例女性进行HPV分型检测。结果：HPV阳性率为25．9％，在被检测到的21个HPV亚型中，高危型HPV16感染率最高，为8．4％，其次是HPV52、58型。本次调查中HPV感染高峰年龄在50～60岁，感染率为40．6％，混合型感染占总阳性感染的24．5％，主要分布在30～39年龄段，50～60年龄段混合型感染最少。结论50岁以后的女性患者更易持续感染单一高危型HPV，运用导流杂交技术检测HPV感染具有较好的临床应用价值。

关键词：人乳头状瘤病毒 HPV基因分型导流杂交免疫耐受

导流杂交检测生殖道人乳头状瘤病毒感染的临床意义

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中国医学工程 2009年第12期17卷 14-16页

作者：牛淑芳谢云芝郭庆枝山东滨州医学院附属医院 256603 寿光市人民医院妇产科

目的:评价导流杂交基因分型技术在检测生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)感染中的应用价值。方法:用导流杂交法进行21种HPV亚型的分型检测,同时用杂交捕获二代(HC-2)进行13种高危型HPV检测。结果:在宫颈病变中6种最常见的HPV基因型为16、18、52... 详细信息

目的:评价导流杂交基因分型技术在检测生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)感染中的应用价值。方法:用导流杂交法进行21种HPV亚型的分型检测,同时用杂交捕获二代(HC-2)进行13种高危型HPV检测。结果:在宫颈病变中6种最常见的HPV基因型为16、18、52、58、33、31。多重感染率分别为35.80%、45.9%、54.9%、60.8%、70.2%。结论:导流杂交检测效果与HC-2具有可比性,且能明确HPV亚型及多重感染,是目前为止最理想的HPV检测方法。

关键词：导流杂交 HC-2 人乳头瘤病毒