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对氯苯丙氨酸对果蝇脑内TPH含量变化的影响及行为失调机制初探

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对氯苯丙氨酸对果蝇脑内TPH含量变化的影响及行为失调机制初探

作者：刘琪东北师范大学

学位级别：硕士

阿尔茨海默症（AD）,又名痴呆,是一种与年龄相关的影响健康的病症。大量神经病理学研究表明:单胺能系统结构和功能的异常与AD病理学之间有着密切的联系,而与其它单胺相比5-HT对AD的影响更为严格。TPH是5-HT生物合成第一个酶又是限速酶,... 详细信息

阿尔茨海默症（AD）,又名痴呆,是一种与年龄相关的影响健康的病症。大量神经病理学研究表明:单胺能系统结构和功能的异常与AD病理学之间有着密切的联系,而与其它单胺相比5-HT对AD的影响更为严格。TPH是5-HT生物合成第一个酶又是限速酶,在前人的研究中已经证实了对TPH进行标记比标记5-HT本身更有意义。本实验以遗传学的经典模式生物—黑腹果蝇为实验材料,选用对氯苯丙氨酸（pCPA）为TPH的有效抑制剂,构建AD果蝇模型,探讨具有老年痴呆症状的果蝇脑内TPH含量的变化和行为失调机制。实验共分为5组,分别是空白对照组和pCPA浓度为3mM、4mM、5mM以及6mM的实验组。首先,观察对比对照组和实验组果蝇生长发育的变化和成蝇的性别比例进行统计分析。结果表明:pCPA能够有效延长幼虫生长时间和延迟幼虫结茧的时间,幼虫第一天结茧的个数和茧的羽化数目都受到不同程度的影响。除此之外,实验组与对照组所得茧的重量和大小都有显著的差异,成蝇的雌雄比例也发生了变化,但这种变化在统计学上并不显著。其次,将不同用药浓度的雌雄分开培养在相应用药浓度的培养基中饲养到21天,进行固定等处理。果蝇头部使用CP包埋切片技术制成连续切片并直接用于免疫组化。免疫组化中使用本实验室自主研制的免疫组化同步调控板,使不同的脑片在相同的条件下进行反应,这样可以有效的排除外界坏境对实验结果的影响。免疫组化结果表明:AMP细胞群随着用药浓度增加,细胞群的大小发生变化,跨越的脑片数目减少,但在6mM实验组中AMP跨越的脑片数目反而增多。位于前脑后侧方且邻近脑壳的IP细胞群在5mM的实验组中不存在,对照组和其它实验组中均正常存在。位于咽下神经节背侧方DLS细胞群周围的纤维投射也发生变化,总体上看实验组纤维数多于对照组,特别是在3mM和4m M的蕈形体周围存在着大量的阳性纤维。终上所述推测:5-HT作为神经激素对果蝇的生命活动进行调节。

关键词：黑腹果蝇阿尔茨海默症对氯苯丙氨酸 TPH 免疫组化

天麻素对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠小鼠的镇静催眠作用研究

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中药药理与临床 2021年第5期37卷 33-38页

作者：龙盼胡晓霞胡琦兰陶玲周雪沈祥春张敏贵州医科大学基础医学院贵阳550025 贵州医科大学药学院贵州省特色天然药物资源高效利用工程中心贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价特色重点实验室贵州医科大学-贵阳市联合重点实验室天然药物资源优效利用重点实验室贵阳550025

目的:探讨天麻素对对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠小鼠睡眠的改善作用。方法:将KM小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、天麻素10、20、40 mg/kg组、地西泮2.6 mg/kg组,除正常对照组外,其余各组采用腹腔连续注射2 d PCPA,建立失眠小鼠模型。... 详细信息

目的:探讨天麻素对对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠小鼠睡眠的改善作用。方法:将KM小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、天麻素10、20、40 mg/kg组、地西泮2.6 mg/kg组,除正常对照组外,其余各组采用腹腔连续注射2 d PCPA,建立失眠小鼠模型。造模成功后,各组灌胃给予相应药物,模型对照组及正常对照组灌胃给予相应体积生理盐水,连续6 d,每天称量小鼠体质量并记录其行为变化;第6 d末次给药后,观察腹腔注射戊巴比妥钠诱导小鼠的睡眠发生率、睡眠潜伏期及睡眠时间;苏木精-伊红染色法(HE)观察各组小鼠海马组织病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠大脑皮层5-羟色胺(5-HT)含量,蛋白免疫印迹法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达的变化。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠体质量下降,睡眠发生率下降,睡眠潜伏期延长,睡眠时间缩短(P对照组比较,天麻素10、20、40 mg/kg组小鼠体质量恢复,睡眠率升高,睡眠潜伏期缩短,睡眠时间延长(P对PCPA致失眠小鼠的睡眠具有显著的改善作用,其机制可能与调节脑内IL-6、IL-1β、BCL-2蛋白表达以及p-ERK/ERK比值有关。

关键词：天麻素对氯苯丙氨酸戊巴比妥钠失眠

交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的代谢组学研究

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中国中药杂志 2016年第18期41卷 3451-3456页

作者：岳贺周祥羽李春苑邹忠杰王淑美梁生旺龚梦鹃广东药科大学中药学院广东广州510006 国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东广州510006 广东高校中药质量工程技术研究中心广东广州510006

为了阐明交泰丸干预对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)致大鼠失眠的药效及作用机制,SD大鼠一次性腹腔注射PCPA建立失眠模型,试验期间观察大鼠自发活动变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清神经... 详细信息

为了阐明交泰丸干预对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)致大鼠失眠的药效及作用机制,SD大鼠一次性腹腔注射PCPA建立失眠模型,试验期间观察大鼠自发活动变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清神经生长因子(nerve growth factor,NGF)水平,并利用核磁共振氢谱(1H-NM R)代谢组学技术建立大鼠血清及海马组织代谢物谱,分析交泰丸干预下大鼠自发活动,NGF水平及与失眠相关潜在生物标志物的变化。结果显示交泰丸能明显抑制失眠大鼠的自发活动,显著升高失眠大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平。交泰丸能对失眠所致大鼠血清和海马组织代谢紊乱产生有效的干预,并分别对血清和海马组织中6种和5种与失眠相关潜在生物标志物产生显著的回调。研究表明交泰丸干预PCPA所致失眠的机制可能与调节NGF水平及调控机体氨基酸代谢、脂质代谢和胆碱代谢有关。

关键词：交泰丸失眠代谢组学核磁共振对氯苯丙氨酸

对氯苯丙氨酸抑制野百合碱诱导的大鼠肺动脉和右心室重构

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解剖科学进展 2016年第4期22卷 372-374页

作者：白洋王韵李中夏高明奇廉国超王怀良中国医科大学临床药理教研室沈阳110122 沈阳医学院附属中心医院沈阳110024

目的研究对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DL-phenylalanine,PCPA)对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的大鼠肺动脉和右心室重构的影响。方法建立MCT诱导的大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)模型,腹腔注射给予不同剂量PCPA。检测肺动脉压力、右心指数等血流动力学指标。HE染色观察肺动脉及心肌形态学的改变。Western Blot方法检测右心室基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases 13,MMP-13)的表达。结果 MCT诱导的大鼠肺动脉压力、右心指数、肺动脉血管壁厚度、心肌细胞的损伤及右心室中MMP-13蛋白表达水平比对照组明显增加,而PCPA则剂量依赖性的降低以上各个指标。结论 PCPA抑制MCT诱导的大鼠肺动脉和右心室的重构可能与降低MMP-13蛋白表达相关。

关键词：对氯苯丙氨酸野百合碱肺动脉高压重构大鼠

射干制剂对氯苯丙氨酸致失眠大鼠单胺类神经递质的影响

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2022年第6期 0083-0085页

作者：朱竟赫李国信包玉龙甘雨慕杨娜辽宁中医药大学附属第二医院(辽宁省中医药研究院)实验动物中心辽宁沈阳110034

探讨射干制剂对氯苯丙氨酸致失眠大鼠单胺类神经递质的影响。方法:选取60只SD大鼠按随机数字表法将其分为空白组、模型组、朱砂安神丸组、射干制剂低剂量、中剂量组和高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠均建立失眠模型,建立成... 详细信息

探讨射干制剂对氯苯丙氨酸致失眠大鼠单胺类神经递质的影响。方法:选取60只SD大鼠按随机数字表法将其分为空白组、模型组、朱砂安神丸组、射干制剂低剂量、中剂量组和高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠均建立失眠模型,建立成功后,除空白组和模型组给予蒸馏水灌胃,其余各组均给予相应的药物灌胃。比较各组大鼠脑组织5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NA)水平。结果:射干制剂组大鼠脑组织5-HT、5-HIAA含量高于模型组(P0.05),DA、NA含量低于模型组(P0.05);射干制剂高剂量组大鼠脑组织5-HT、5-HIAA含量高于朱砂安神丸组(P0.05),NA含量低于朱砂安神丸组(P0.05),射干制剂中剂量组与朱砂安神丸组比较相当(P>0.05)。结论:射干制剂高剂量治疗失眠症状较朱砂安神丸以及中低剂量药物浓度作用效果更好,值得临床应用。

关键词：射干制剂对氯苯丙氨酸失眠 5-羟色胺 5-羟吲哚乙酸

基于代谢组学技术研究交泰丸干预对氯苯丙氨酸致失眠的作用机制

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基于代谢组学技术研究交泰丸干预对氯苯丙氨酸致失眠的作用机制

作者：岳贺广东药科大学

学位级别：硕士

目的:基于核磁共振(H-NMR)代谢组学技术,结合生化指标分析,研究交泰丸对失眠模型大鼠的干预作用,探讨交泰丸干预失眠的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和交泰丸组。交泰丸组灌胃交泰丸水提液,每天1次,连续5天,正常... 详细信息

目的:基于核磁共振(H-NMR)代谢组学技术,结合生化指标分析,研究交泰丸对失眠模型大鼠的干预作用,探讨交泰丸干预失眠的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和交泰丸组。交泰丸组灌胃交泰丸水提液,每天1次,连续5天,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水。实验第3天,模型组和交泰丸组一次性腹腔注射PCPA甲酯盐酸盐(564 mg·kg-1,相当于PCPA 450mg·kg-1)建立失眠模型,正常组一次性腹腔注射等体积生理盐水。实验期间观察大鼠自发活动变化。基于H-NMR代谢组学技术测定尿液样本、血清样本和海马组织的代谢物图谱,对代谢物图谱进行正交偏最小二乘判别分析(Orthogonal Partial Least-Squares Discriminant Analysis,OPLS-DA),运用变量重要性投影(Variable Importance in the Projection,VIP)和t检验筛选出组间具有显著差异的代谢物。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中神经保护因子如脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)水平,凋亡相关因子如B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)及其相关X蛋白(Bax),神经递质如谷氨酸(Glu)、胆囊收缩素8(CCK-8)水平,细胞因子白细胞介素(IL)-2、IL-6和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)水平,并采用考马斯亮蓝法(Bradford法)测定组织样品蛋白含量。结果:1.交泰丸能明显抑制失眠大鼠自发活动。2.(1)与正常组相比,模型组大鼠尿液中N-乙酰糖蛋白、丙酮、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、二甲胺水平显著降低(P氨酸、牛磺酸、苯乙酰甘氨酸水平显著升高(P氨酸、牛磺酸、苯乙酰甘氨酸水平显著降低(P氨酸、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、O-乙酰糖蛋白、胆碱、磷酸胆碱、氧化三甲胺水平显著升高(P氨酸、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、胆碱、磷酸胆碱水平显著降低(P丙氨酸、γ-氨基丁酸、肌醇水平显著降低(P氨酸、肌酸/磷酸肌酸、甘油磷酸胆碱、牛磺酸水平显著升高(P丙氨酸、γ-氨基丁酸、肌醇水平显著升高(P<0.05),甘油磷酸胆碱、牛磺酸水平显著降低(P<0.05)。3.与正常组比较,模型组大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中IL-2、IL-6、BDNF、NGF、CCK-8水平显著降低(P<0.05),下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中GFAP、Glu水平显著升高(P<0.05),下丘脑、海马和前额叶皮质中的Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.05),血清中Bcl-2/Bax比值没有显著差异;与模型组比较,交泰丸组大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中IL-2、IL-6、BDNF、NGF、CCK-8水平显著升高(P<0.05),下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中GFAP、Glu水平显著降低(P<0.05),同时交泰丸组大鼠下丘脑、海马和前额叶皮质中的Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.05),但血清中Bcl-2/Bax比值没有明显改变。结论:1.交泰丸能明显抑制失眠大鼠自发活动。2.交泰丸干预失眠的机制可能与调节机体脂质代谢、能量代谢、氨基酸代谢、胆碱代谢和肠道菌群代谢有关。3.交泰丸干预失眠的机制可能与调节神经保护因子BDNF、NGF,凋亡相关因子Bcl-2、Bax,神经递质Glu、CCK-8和细胞因子IL-2、IL-6水平,抑制星形胶质细胞增生活化有关。

关键词：交泰丸对氯苯丙氨酸失眠代谢组学核磁共振

百合水提物对对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠睡眠改善作用研究

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食品安全质量检测学报 2023年第15期14卷 252-258页

作者：张玉林李阳西北大学化工学院西安710069 西北大学生物医药研究院西安710069

目的研究不同剂量的百合水提取物对对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)失眠模型大鼠睡眠的改善作用。方法大鼠腹腔注射PCPA混悬液制备大鼠失眠模型。造模成功大鼠随机分为模型对照组、百合水提物低剂量组[100 mg/(kg·d)]、百合... 详细信息

目的研究不同剂量的百合水提取物对对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)失眠模型大鼠睡眠的改善作用。方法大鼠腹腔注射PCPA混悬液制备大鼠失眠模型。造模成功大鼠随机分为模型对照组、百合水提物低剂量组[100 mg/(kg·d)]、百合水提物中剂量组[200 mg/(kg·d)]、百合水提物高剂量组[300 mg/(kg·d)],另设正常对照组。各给药组大鼠连续7 d给予相应浓度药液灌胃,模型对照组和正常对照组连续7 d给予生理盐水灌胃。给药期间,观察大鼠一般状态;给药结束后,观察大鼠体质量变化、睡眠潜伏期、总睡眠时间,同时评价不同脑组织中五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)、多巴胺(dopamine,DA)含量的变化。结果百合水提物各剂量组大鼠的一般状态均优于模型对照组,体质量增加量与正常对照组无显著差异(P>0.05);与模型对照组相比,百合水提物低、中、高各剂量组的睡眠时间显著延长(P对照组比较,海马中仅百合水提物高剂量组的DA含量显著降低(P<0.05)。结论百合水提物具有改善PCPA失眠模型大鼠睡眠情况的作用。

关键词：百合水提物对氯苯丙氨酸失眠模型改善睡眠大鼠

针灸治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠基础研究进展

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针灸临床杂志 2017年第2期33卷 76-79页

作者：王红吴建丽王晓磊杜冬梅王天琪王薇黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

针灸干预治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠模型大鼠的实验文献进行搜集、整理,发现与针灸改善失眠作用相关的基础研究主要集中在动物行为学、免疫功能、神经递质系统、氧化应激反应等方面,研究表明针灸是通过对这些异常的生物学行为或微... 详细信息

针灸干预治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠模型大鼠的实验文献进行搜集、整理,发现与针灸改善失眠作用相关的基础研究主要集中在动物行为学、免疫功能、神经递质系统、氧化应激反应等方面,研究表明针灸是通过对这些异常的生物学行为或微观分子产生良性调节作用,以神经-体液调节为基础的多靶点、多途径发挥改善睡眠作用。本研究对这些研究文献进行综述,一方面表明了针灸促眠作用的有效性,为临床治疗提供依据,另一方面分析了当前探索针灸改善睡眠机制研究中存在的问题和不足,并对今后的研究提出了建议和期望。

关键词：针灸对氯苯丙氨酸基础研究失眠综述

GATA-4参与调节对氯苯丙氨酸抑制野百合碱诱导大鼠肺动脉高压

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解剖科学进展 2018年第1期24卷 53-55,60页

作者：白洋李中夏刘沫王韵王怀良中国医科大学药学院临床药理教研室辽宁沈阳110122 沈阳医学院附属中心医院骨外科辽宁沈阳110024

目的研究GATA-4在对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DL-phenylalanine,PCPA)抑制野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)中的调节机制。方法雄性SD大鼠[体重(180±10)g]40只,随机分为对照组(control)、野百合碱组(MCT)、PAPC低剂量组(P1,腹腔注射PCPA 50mg/kg)、PCPA高剂量组(P2,100mg/kg)。21d后,检测肺动脉压力等血流动力学指标。HE染色观察肺血管重构。Western blot检测肺组织GATA-4及MMP-13蛋白表达。结果与对照组相比,MCT诱导大鼠的平均肺动脉压力、肺血管壁面积比显著增加,肺组织GATA-4及MMP-13蛋白表达明显增多。PCPA抑制肺血管重构,剂量依赖性地降低GATA-4及MMP-13的表达水平。结论GATA-4参与MCT诱导的大鼠PAH肺血管重构。色氨酸羟化酶抑制剂PCPA抑制大鼠PAH肺血管重构可能与调控GATA-4相关。

关键词：对氯苯丙氨酸 GATA-4 野百合碱肺动脉高压重构