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自组装寡肽在体外模拟牙釉柱晶体形成

北京大学学报（医学版） 2007年第1期39卷 46-49页

作者：王磊白薇冯海兰贾欣茹北京大学口腔医学院.口腔医院修复科北京100081 北京大学化学和分子工程学院

目的：探索自组装寡肽分子他在凝胶载体中对牙釉柱晶体结构进行体外模拟的可能性。方法：采用扫描电镜和透射电镜观察在自组装寡肽分子作用下凝胶载体中磷酸钙沉淀的形貌，并利用电子衍射分析沉淀的晶体结构，与牙釉质中的晶体进行对比... 详细信息

目的：探索自组装寡肽分子他在凝胶载体中对牙釉柱晶体结构进行体外模拟的可能性。方法：采用扫描电镜和透射电镜观察在自组装寡肽分子作用下凝胶载体中磷酸钙沉淀的形貌，并利用电子衍射分析沉淀的晶体结构，与牙釉质中的晶体进行对比。结果：在自组装寡肽影响下：（1）凝胶载体中先形成片状及针状的磷酸八钙晶体。2～4周后片状和针状的磷酸八钙晶体逐渐转变为棒状的羟基磷灰石晶体；（2）棒状羟基磷灰石晶体可以排列或生长为束状，与人牙釉柱中的晶体在形态和尺寸上相似；（3）棒状羟基磷灰石晶体具有多晶结构，而人牙釉质中晶体更多为单晶结构。结论：白组装寡肽分子在凝胶系统中，调控了羟基磷灰石晶体的成核速度、晶粒大小和晶体形态。自组装寡肽分子亿可以初步实现牙釉柱晶体形成的体外模拟。

关键词：寡肽类牙釉类仿生材料

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寡肽药物先导结构的发现与优化

北京大学学报（医学版） 2002年第5期34卷 506-512页

作者：赵明王超彭师奇北京大学药学院北京100083

本文综述了 (1)以纤维蛋白 β链降解产物ARPAK及γ链与GPⅡb/Ⅲa结合的关键序列RGD为基础发展新先导结构 ,例如对ARPAK优化导致的优秀溶栓寡肽GRPAK和QRPAK以及RGD序列对血栓的靶向性认识导致的杂交肽 ;(2 )针对ARPAK、GRPAK及QRPAK的... 详细信息

本文综述了 (1)以纤维蛋白 β链降解产物ARPAK及γ链与GPⅡb/Ⅲa结合的关键序列RGD为基础发展新先导结构 ,例如对ARPAK优化导致的优秀溶栓寡肽GRPAK和QRPAK以及RGD序列对血栓的靶向性认识导致的杂交肽 ;(2 )针对ARPAK、GRPAK及QRPAK的药代动力学性质导致的酶稳定性高的环肽以及酶稳定性高且可紫外监测的含咔啉羧酸伪肽先导结构 ;(3)依据ARPAK在体内的代谢产物发现的超短肽先导结构RPAK和PAK ;(4 )计算机辅助的构象分析 ;(5 )

关键词：寡肽类纤维蛋白纤维蛋白原降解物分子结构分子构象

精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸肽对实验性脉络膜新生血管的抑制作用

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中华眼科杂志 2006年第9期42卷 825-831页

作者：何花张虹王志涛赵春明项楠华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科武汉430030

目的观察精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸(Arg-Cly-Asp-Ser,RGDS)肽对半导体倍频激光诱导的棕色挪威(BN)大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成的抑制作用。方法选取27只 BN 大鼠通过半导体倍频激光(波长为532nm)眼底光凝方式建立 CNV 模型,另取... 详细信息

目的观察精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸(Arg-Cly-Asp-Ser,RGDS)肽对半导体倍频激光诱导的棕色挪威(BN)大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成的抑制作用。方法选取27只 BN 大鼠通过半导体倍频激光(波长为532nm)眼底光凝方式建立 CNV 模型,另取3只 BN 大鼠作为正常对照。激光功率、光凝斑直径和曝光时间分别为525mw,50μm及0.05s。光凝后立即将27只模型大鼠随机分为3组,每组9只(18只眼)。分别为大剂量治疗组、小剂量治疗组和对照组,各组每只眼每天玻璃体腔内注射 RGDS 肽300、100和0μg,各组给药均持续7d。激光光凝后14d 各组大鼠均行眼底照相观察、荧光素眼底血管造影(FFA)和吲哚氰绿眼底血管造影(ICGA)检查。每组选取1只大鼠(2只眼)视网膜标本用透射电镜进行毒性观察,8只大鼠16只眼球标本分别行 FITC-右旋糖酐标记脉络膜巩膜铺片新生血管定量分析和组织病理学光镜、免疫组化观察,以评估 RGDS 肽对 CNV 的抑制效果。结果光凝后14d 对照组、小剂量治疗组、大剂量治疗组3组 FFA 检查中发现荧光渗漏且ICGA 检查证实 CNV 充盈的光凝斑所占百分率分别为69.4%、57.8%、38.9%。脉络膜巩膜铺片新生血管定量分析及组织学切片观察结果显示大剂量治疗组、小剂量治疗组脉络膜新生血管的形成与对照组相比均减少,差异有统计学意义(P<0.01)。一定剂量的 RGDS 肽能抑制脉络膜新生血管的生长,并呈剂量依赖关系。透射电镜结果提示玻璃体腔内注射 RGDS 肽对大鼠视网膜毒性不明显。结论 RGDS 肽可以抑制实验性脉络膜新生血管的形成,有望成为防治 CNV 的一种有效方法。

关键词：激光凝固术脉络膜新生血管化寡肽类

靶向整合素αvβ3受体的新型RGD肽二聚体的131I标记与生物活性的初步评价

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北京大学学报（医学版） 2011年第2期43卷 295-300页

作者：张春丽王荣福张丽郭凤琴李玲康磊闫平杨铭北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 北京大学第一医院核医学科北京100034

目的:对所设计的新型精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰(Arg-Gly-Asp,RGD)肽进行131I标记,研究其在肿瘤组织中的靶向性及其在荷瘤鼠体内的生物分布与显像,探讨将其应用于肿瘤血管生成显像的可能性。方法:参照文献报道的对环五肽c(RGDfV)构效关系... 详细信息

目的:对所设计的新型精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰(Arg-Gly-Asp,RGD)肽进行131I标记,研究其在肿瘤组织中的靶向性及其在荷瘤鼠体内的生物分布与显像,探讨将其应用于肿瘤血管生成显像的可能性。方法:参照文献报道的对环五肽c(RGDfV)构效关系的研究结果及多肽的化学修饰方法,设计了新型二硫键成环的并经亲水性修饰的cRGD肽二聚体[c(RGD)2],采用ChT法进行131I标记,测定c(RGD)2的亲和常数、标记物的稳定性与油水分配系数;建立荷黑色素瘤动物模型,研究131I-c(RGD)2的体内分布、非标记肽竞争抑制及肿瘤显像。结果:131I对c(RGD)2的标记率为(76.35±2.33)%,经Sephadex G10分离纯化后其放射化学纯度达(95.20±3.25)%。c(RGD)2对受体的亲和常数Ka为(0.137±0.057)×109/mol/L,油水分配系数lgP正辛醇/水为-1.628,131I-c(RGD)2在静脉注射后1 h、3 h、5 h与24 h在肿瘤中的摄取率分别为(0.67±0.13)%ID/g、(0.42±0.08)%ID/g、(0.51±0.11)%ID/g与(0.18±0.02)%ID/g,其在肿瘤中的清除相对缓慢,靶本比(T/NT)随时间延长而增高,静脉注射后24 h,肿瘤与肌肉(T/M)和肿瘤与血液(T/B)的摄取比值分别为4.42±1.70与2.27±0.45。131I-c(RGD)2的肝脏摄取低,静脉注射后1 h肿瘤与肝的摄取比可达2.10±0.60;未标记肽可明显抑制肿瘤对131I-c(RGD)2的摄取。荷瘤小鼠全身显像可见肾显影,在静脉注射后3 h胸部显像可见清晰的肿瘤影像。结论:所设计的通过二硫键成环的c(RGD)2可应用ChT法成功完成131I标记,其可被肿瘤组织特异性摄取,有可能应用于肿瘤血管的生成显像。131I-c(RGD)2的肝脏摄取低,在肿瘤显像中具有一定优势。

关键词：寡肽类二聚作用碘放射性同位素整合素αvβ3

大鼠血浆中活性寡肽RX 31的HPLC-MS/MS定量分析方法研究

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军事医学科学院院刊 2010年第3期34卷 206-209页

作者：葛华向慎思王清清贾彦波宋海峰王东援沈阳药科大学分析化学教研室沈阳110016 军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理毒理研究室北京100850 南京军区南京总医院药品科南京210002

目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中活性寡肽RX31的浓度。方法血浆样品经甲醇蛋白沉淀后,以0.1%甲酸-甲醇为流动相梯度洗脱,CapcellMGⅢCl8柱分离。采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子... 详细信息

目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中活性寡肽RX31的浓度。方法血浆样品经甲醇蛋白沉淀后,以0.1%甲酸-甲醇为流动相梯度洗脱,CapcellMGⅢCl8柱分离。采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z640.3→m/z623.3(RX31)和m/z596.1→m/z287.1(内标,RX20)。结果在本实验条件下,血浆中RX31的线性范围为3.91～500ng/ml,定量下限为3.91ng/ml,日内、日间精密度(相对标准差,RSD)均小于12%,准确度(相对误差,RE)在-11%～5%。结论该法快速、灵敏、准确,可用于RX31的药代动力学研究。

关键词：寡肽类色谱法,高压液相光谱法,质量,电喷雾电离血浆药代动力学

Caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk治疗兔外伤性视神经损伤的研究

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中华眼科杂志 2010年第12期46卷 1084-1089页

作者：张蔚于金国王兴申占省张静楷颜华天津市环湖医院眼科 300060 天津医科大学总医院眼科

目的观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）抑制剂z-DEVD-fmk对兔外伤性视神经损伤的治疗效果.方法实验研究.选取2～3月龄中国白兔52只（104只眼）,4只（8只眼）作为空白对照,48只（96只眼）应用液压冲击颅脑损伤仪建立兔外伤性... 详细信息

目的观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）抑制剂z-DEVD-fmk对兔外伤性视神经损伤的治疗效果.方法实验研究.选取2～3月龄中国白兔52只（104只眼）,4只（8只眼）作为空白对照,48只（96只眼）应用液压冲击颅脑损伤仪建立兔外伤性视神经损伤模型,左眼玻璃体腔注射2%二甲基亚砜5μl为对照组（A组）;右眼玻璃体腔注射Capase-3抑制剂z-DEVD-fmk 5μl为实验组（B组）.给药后1 d、4 d、7 d、10 d、14 d、21 d行闪光视觉诱发电位（F-VEP）,视网膜病理学检查,并应用免疫组织化学方法检测视网膜中Caspase-3表达.所得数据采用t检验、单因素方差分析、q检验及直线相关分析进行统计学处理.结果给药后7 d,实验组的F-VEP P1波潜伏（90.50±7.61）ms与对照组（113.59±12.92）ms相比缩短（t=4.060,P＜0.05）,视网膜神经节细胞计数实验组（237.62±8.50）较对照组（207.03±11.04）有所增多（t=-5.843,P＜0.05）,均可持续至给药后21 d,实验组的F-VEP P1波潜伏（67.97±7.93）ms与对照组（134.22±8.50）ms相比缩短（t=13.950,P＜0.05）;视网膜神经节细胞计数实验组（207.13±12.21）较对照组（156.32±8.45）增多（t=-10.307,P＜0.05）.Caspase-3的A值于给药后7 d,实验组（0.396±0.023）低于对照组（0.458±0.024）,差异有统计学意义（t=6.200,P＜0.05）.F-VEP P1波潜伏期与Caspase-3 A值呈正相关（r=0.95,P＜0.05）.结论 z-DEVD-fmk通过抑制视网膜Caspase-3的表达,对兔外伤性视神经损伤具有治疗作用,可促进神经功能的恢复.

关键词：视神经损伤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 寡肽类视网膜神经节细胞免疫组织化学

超高效液相色谱-质谱法检测妇科止带胶囊中马皮源成分

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药品评价 2022年第7期19卷 407-409页

作者：黄晓燕李荣玮刘雁鸣梁晟李瑞莲湖南省药品检验检测研究院湖南省药品质量评价工程技术中心湖南长沙410001

目的:建立妇科止带胶囊中可能掺杂的马皮源成分的测定方法。方法:以马皮中的专属性特征肽段为检测指标,对样品进行恒温酶切处理,采用超高效液相色谱-串联质谱技术进行识别。ESI正离子化模式,以马皮源的特征离子对进行检测,多反应监测。... 详细信息

目的:建立妇科止带胶囊中可能掺杂的马皮源成分的测定方法。方法:以马皮中的专属性特征肽段为检测指标,对样品进行恒温酶切处理,采用超高效液相色谱-串联质谱技术进行识别。ESI正离子化模式,以马皮源的特征离子对进行检测,多反应监测。结果:经方法学验证,马源寡肽A对照品在0.03638~0.7276μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9978),建立的限量检查方法专属性强、重复性佳、稳定性好。用建立的方法测定妇科止带胶囊样品,均未发现马皮源成分。结论:该检测方法灵敏度高、专属性强、准确快速,为妇科止带胶囊中马皮源成分的检测提供了参考。

关键词：寡肽类皮肤马皮成分妇科止带胶囊特征肽超高效液相色谱-质谱法

局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸蛋白酶-3和其激活的DNA酶与神经元损伤的关系及半胱氨酸蛋白酶-3抑制剂的保护作用

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中华神经科杂志 2009年第8期42卷 546-550页

作者：杨春晓金永华刘玮蔡文进梁庆成朱丹哈尔滨医科大学附属第二医院神经内科 150081

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸蛋白酶．3（caspase-3）及由半胱氨酸蛋白酶激活的DNA酶（caspase—activateddeoxyribonuclease，CAD）的表达变化与神经元损伤的关系，研究caspase-3特异性抑制剂Ac—DEVD—CHO对缺血神经元... 详细信息

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸蛋白酶．3（caspase-3）及由半胱氨酸蛋白酶激活的DNA酶（caspase—activateddeoxyribonuclease，CAD）的表达变化与神经元损伤的关系，研究caspase-3特异性抑制剂Ac—DEVD—CHO对缺血神经元的保护作用。方法实验设干预组和模型组，线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞Ih后再通模型，干预组于侧脑室给予Ac-DEVD—CHO，模型组给予二甲基亚砜（DMSO）。应用HE、免疫组织化学、TUNEL染色及电镜观察大鼠大脑中动脉栓塞1h后再灌注6、12、24、48、72h时caspase-3和CAD蛋白的表达及神经元损伤程度的变化。结果HE染色和电镜观察下，模型组和干预组差异不明显；TUNEL染色阳性细胞数除6h外，两组间其余时间点相比差异具有统计学意义；模型组和干预组caspase-3蛋白表达24h达高峰，分别为2．360±0．318与0．804±0．206（t=10．039，P〈0．01），12～48h与模型组同期相比差异均有统计学意义；模型组和干预组CAD蛋白表达于48h达高峰，分别为3．061±0．567与0．812±0．240（t=8．960，P〈0．01），12—72h与模型组同期相比差异均有统计学意义。结论caspase-3-CAD—DNA降解途径是鼠脑缺血再灌注神经元损伤的重要途径，caspase-3抑制剂具有一定程度的神经保护作用。

关键词：脑缺血再灌注半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 脱氧核糖核酸酶类寡肽类细胞凋亡

神经营养素-4-神经短肽NAPVSIPQ融合基因对兔眼虹膜色素上皮细胞的转染和保护作用

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中华眼科杂志 2006年第11期42卷 1008-1012页

作者：佘华宁孙乃学郑玉萍权彦龙曹振平王肖华西安交通大学附属第二医院眼科 710004

目的探讨神经营养素-4(NT4)-神经短肽(NAP)对兔虹膜色素上皮细胞(IPECs)的保护作用。方法分离培养兔IPECs,采用非对称互补引物/模板方法构建神经短肽NAP和神经营养因子NT4的融合基因,构建重组腺相关病毒(rAAV)-绿色荧光蛋白(GFP)和rAAV-... 详细信息

目的探讨神经营养素-4(NT4)-神经短肽(NAP)对兔虹膜色素上皮细胞(IPECs)的保护作用。方法分离培养兔IPECs,采用非对称互补引物/模板方法构建神经短肽NAP和神经营养因子NT4的融合基因,构建重组腺相关病毒(rAAV)-绿色荧光蛋白(GFP)和rAAV-NAP,并以此转染体外培养的兔IPECs,以荧光表达来检测病毒的转染情况。对体外培养的兔IPECs进行紫外线光损伤,并用MTT法和流式细胞仪来检测NAP对兔IPECs的保护作用。结果转染了rAAV-GFP的兔IPECs表达了明显的GFP荧光。与对照细胞相比,转染了rAAV-NAP的兔IPECs经紫外线光损伤后,细胞的增殖正常,细胞凋亡率降低。结论本研究所构建的rAAV-NAP可有效地转染体外培养的兔IPECs,NAP对兔IPECs有光保护作用。(中华眼科杂志,2006,421008-1012)

关键词：寡肽类基因融合色素上皮,眼转染