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养犬 2007年第4期18卷 5-6页

作者：田克恭乔明明中国动物疫病预防控制中心

一、PCR技术聚合酶链反应(Poly-merase Chain Reaction,PCR)是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。目前已广泛应用到分子生物学研究的各个领域,在犬病毒病诊断中也得到广泛应用。(一)

关键词：分子生物学诊断犬病聚合酶链反应 DNA 临床应用诊断方法实时荧光定量寡核苷酸引物液相杂交犬猫

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微卫星研究中 PCR反应体系的优化试验

中国草食动物 2006年第Z1期26卷 65-66页

作者：毛凤显贵州省畜禽品种改良站贵阳550001

　　1 前言　　微卫星研究很大程度取决于PCR扩增技术的效果,影响PCR扩增效果的因素包括PCR技术所涉及的任何反应因子和循环参数.一般主要包括以下几个方面:①TaqDNA聚合酶浓度;②模板DNA浓度及纯度;③人工合成的寡核苷酸引物浓度;④Mg... 详细信息

　　1 前言　　微卫星研究很大程度取决于PCR扩增技术的效果,影响PCR扩增效果的因素包括PCR技术所涉及的任何反应因子和循环参数.一般主要包括以下几个方面:①TaqDNA聚合酶浓度;②模板DNA浓度及纯度;③人工合成的寡核苷酸引物浓度;④MgCl2浓度;⑤温度循环参数(变性、复性和延伸的温度时间,循环的次数).……

关键词：微卫星反应体系循环参数酶浓度寡核苷酸引物温度人工合成扩增效果扩增技术因子模板聚合复性纯度程度变性

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聚合酶键反应与DNA测序

华南预防医学 1992年第2期25卷 30-33页

作者：王荇广东省卫生防疫站 510300

用一对寡核苷酸引物和DNA聚合酶对基因组中一特定的DNA片段进行体外扩增,这一技术称为聚合酶链反应(Polymerase chain Reaction,PCR),又称体外DNA放大。其过程是;DNA加热而变性解链→退火时引物与相应的DNA顺序(靶基因)

关键词： DNA 聚合酶测序法寡核苷酸引物 Polymerase 基因克隆体外扩增直接测序转录酶斑点杂交

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肝细胞性肝癌中生长抑素受体亚型的差异表达

世界核心医学期刊文摘（胃肠病学分册） 2005年第1期1卷 60-61页

作者： Blker M. Schmitz M. Gocht A. 刘娜 MedizinischeKlinik I Zentrum fü r Innere MedizinUniv.Klin.Hamburg-EppendorfM.HamburgGermany

Background/Aims Somatostatin analogues inhibit cell proliferation by stimulation of distinct somatostatin receptor(SSTR) subtypes. In recent years, these compounds have been introduced into the therapy of advanced hepatocellular carcinoma(HCC). The efficacy of this treatment is under debate due to the controversial results of clinical trials. Despite the widespread clinical use of somatostatin analogues in HCC,little is known about the expression of each of the five SSTRs in these tumors. Methods We analyzed the expression of SSTR subtypes in 56 HCCs by immunohistochemistry using subtype-specific antibodies. Six of the samples were also investigated by RT-PCR using subtype-specific oligonucleotide primers. Results HCCs display differential, individual expression patterns as well as variable expression levels for SSTRs. The overall expression rate of SSTR1, SSTR2,SSTR3, SSTR4, and SSTR5 is 46, 41, 64, 0, and 75% , *** significant correlation was observed between SSTR expression and tumor stage, differentiation, histological tumor type, or underlying liver disease. Conclusions Individual patterns and levels of SSTR expression might determine the response to treatment with somatostatin analogues in HCC. Selective treatment of these tumors based on the analysis of SSTR subtype expression might lead to an increase in response rates.

关键词：肝细胞性肝癌受体亚型生长抑素差异表达分化程度型特异性免疫组化技术选择性治疗寡核苷酸引物细胞增殖

let-7a慢病毒对人胃癌细胞影响的体外实验研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2012年第6期26卷 F0002-F0002页

作者：朱益民董来荣徐其刘志明浙江省嘉兴市第二医院肿瘤外科嘉兴314000 南宁广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科

lethal-7（1et-7）是1993年后被发现的第二个微小RNA（microRNA，miRNA）[1]，我们从正常组织中克隆let-7a全长基因，并将其连接到了慢病毒载体，利用重组慢病毒将let-7a转导人胃癌SGC-7901细胞，研究转基因前后SGC-7901细胞生物学特性... 详细信息

lethal-7（1et-7）是1993年后被发现的第二个微小RNA（microRNA，miRNA）[1]，我们从正常组织中克隆let-7a全长基因，并将其连接到了慢病毒载体，利用重组慢病毒将let-7a转导人胃癌SGC-7901细胞，研究转基因前后SGC-7901细胞生物学特性的变化。1 材料与方法 1．1材料人胚胎肾上皮细胞293T、人胃癌细胞系SGC-7901均购自中国科学院上海细胞库。质粒Pwpxl—MOD2、pRsv—REV、pMDlg—pRRE、pMD2G购自美国Invitrogen公司；Iet-7a表达质粒Pwpxl—MOD2-let-7a由本实验室构建。let-7a特异性寡核苷酸引物由美国Invitrogen公司设计合成。

关键词：人胃癌细胞系慢病毒载体人胃癌SGC-7901细胞实验研究细胞生物学特性体外寡核苷酸引物表达质粒

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DNA引物合成起始的分子基础

广东药科大学学报 2022年第3期38卷 142-142页

作者：赵林(编译) 不详

在DNA复制开始期间,寡核苷酸引物由引物酶从头合成,随后由复制聚合酶延伸以完成基因组复制。引物酶-聚合酶(Prim-Pol)超家族是一组多样性的引物酶,包括复制型引物酶和参与适应性免疫的与CRISPR相关的引物酶-聚合酶(CAPPs)。尽管对这些... 详细信息

在DNA复制开始期间,寡核苷酸引物由引物酶从头合成,随后由复制聚合酶延伸以完成基因组复制。引物酶-聚合酶(Prim-Pol)超家族是一组多样性的引物酶,包括复制型引物酶和参与适应性免疫的与CRISPR相关的引物酶-聚合酶(CAPPs)。尽管对这些酶的活性了解很多,但引物酶用于启动引物合成的精确机制尚未阐明。在此,研究人员确定了通过CAPP启动引物合成的分子基础,并表明这一机制在复制型引物酶中也是保守的。

关键词：适应性免疫聚合酶寡核苷酸引物 CAPP 从头合成 DNA复制复制型超家族

RT—PCR—ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究

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浙江省医学科学院学报 2005年第2期16卷 34-37页

作者：钱汶陈悦青洪艳唐彩华周康凤庄昉成陈勇浙江省医学科学院病毒病研究所，杭州310013 浙江省医学科学院生物工程研究所，杭州310013

目的应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用RT-PCR-ELISA，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化... 详细信息

目的应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用RT-PCR-ELISA，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色，读取吸光度(A值)，判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度，并与常规细胞培养法(CCID50）比较。结果本方法与细胞培养法的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论RTPCR—EUSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。

关键词：甲肝减毒活疫苗病毒滴度 ELISA方法检测 RT-PCR-ELISA 步研究细胞培养法核酸扩增产物病毒基因产物寡核苷酸引物辣根过氧化物特异性探针 EUSA法 RTPCR 固相杂交方法应用酶联显色链亲和素判断结果疫苗滴度显色法

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一种新的诊断方法——聚合酶链反应技术

医学研究生学报 1991年第1期4卷 48-48页

作者：李芳秋金陵医院微生物科

聚合酶链反应技术(Polymerase ch-ain reaction,PCR)又称 DNA 扩增(DNAAmplification)技术,是在体外迅速、大量地扩增,人们选定的一定长度的核酸序列,从而进行分子生物学诊断的一项新技术。它的原理类似于 DNA 的天然复制过程,即在待扩... 详细信息

聚合酶链反应技术(Polymerase ch-ain reaction,PCR)又称 DNA 扩增(DNAAmplification)技术,是在体外迅速、大量地扩增,人们选定的一定长度的核酸序列,从而进行分子生物学诊断的一项新技术。它的原理类似于 DNA 的天然复制过程,即在待扩增 DNA 片段的两侧,加两个寡核苷酸引物,经过加热使 DNA 成为单链(变性),降低温度,引物与之互补结合(复性,又称退火)。在 DNA 聚合酶的作用下,使引物按模板 DNA 的碱基序列延长(延伸)。变性。

关键词：寡核苷酸引物 DNA Polymerase 聚合酶分子生物学诊断互补结合碱基序列核酸序列复制过程

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聚合酶链反应

中国医刊 1999年第6期34卷 37-37页

作者：陈关君首都儿科研究所

聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是一种模拟ＤＮＡ复制的特定核酸序列体外扩增技术。在ＰＣＲ扩增的首轮循环中，待扩增的ＤＮＡ在高温下变性成为单链模板，在复性温度下，人工合成的两个寡核... 详细信息

聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是一种模拟ＤＮＡ复制的特定核酸序列体外扩增技术。在ＰＣＲ扩增的首轮循环中，待扩增的ＤＮＡ在高温下变性成为单链模板，在复性温度下，人工合成的两个寡核苷酸引物与目标片段两侧的两条链互补...

关键词：寡核苷酸引物聚合酶链反应体外扩增

宫颈癌中C-Ha-ras癌基因点突变的研究

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医学研究杂志 1990年第10期24卷 29-29页

作者：刘学锋赵文先杨平伍欣星丁晓华湖北医学院病毒所生化和分子生物学室

宫颈癌是妇女生殖系统最常见的恶性肿瘤,严重威胁着我国妇女的身体健康和生命安全,对宫颈癌癌基因的研究有助于宫颈癌的早期诊断、防治以及肿瘤的分型。我们在国内首次将体外基因扩增技术(即PCR技术)应用于宫颈癌癌基因的研究,先人工合... 详细信息

宫颈癌是妇女生殖系统最常见的恶性肿瘤,严重威胁着我国妇女的身体健康和生命安全,对宫颈癌癌基因的研究有助于宫颈癌的早期诊断、防治以及肿瘤的分型。我们在国内首次将体外基因扩增技术(即PCR技术)应用于宫颈癌癌基因的研究,先人工合成两个特异性的寡核苷酸引物,在耐热DNA多聚酶的催化下,将宫颈癌DNA中C-Ha-ras癌基因第一个外显子的核苷酸序列放大百万倍左右,再以同位素标记的特异寡核苷酸探针杂交。

关键词： C-Ha-ras癌基因基因点突变体外基因扩增寡核苷酸探针核苷酸序列寡核苷酸引物 DNA 多聚酶核昔酸生殖系统