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不同中医证型老年人高血压患者对寒冷暴露敏感性的临床研究

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不同中医证型老年人高血压患者对寒冷暴露敏感性的临床研究

作者：闫早兴山东中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨不同中医证型老年人高血压病患者对寒冷暴露敏感性的临床观察,并研究经补肾方药(益肾降压方)干预后,老年人高血压病肾气亏虚证患者对寒冷暴露敏感性的变化;同时探讨补肾方药对本型高血压病患者的临床疗效。方法:收集年龄在605... 详细信息

目的:探讨不同中医证型老年人高血压病患者对寒冷暴露敏感性的临床观察,并研究经补肾方药(益肾降压方)干预后,老年人高血压病肾气亏虚证患者对寒冷暴露敏感性的变化;同时探讨补肾方药对本型高血压病患者的临床疗效。方法:收集年龄在605岁之间,患有1、2级高血压病并符合肾气亏虚证或肝火上炎证的辨证标准者;选择理化检查均正常的健康老年人作为正常对照,每组30例,对以上3组人群进行对照研究。分别测量3组受试者夏季和冬季的血压及心率,比较不同中医证型老年人高血压病受试者对寒冷暴露敏感性的差异;另外对肾气亏虚证组患者给予益肾降压方治疗4周,观察治疗前后患者对寒冷暴露敏感性的变化及临床疗效。结果:与健康老年人和肝火上炎证患者相比,老年人高血压病肾气亏虚证患者受寒冷暴露引起血压波动的敏感性较高;益肾降压方能有效降压、减少血压波动,缓解临床症状。结论:寒冷暴露是导致老年人高血压病肾气亏虚证发生血压波动的重要病因,可作为冬季老年人高血压病防治管理的重要参考;益肾降压方是治疗老年人高血压病肾气亏虚证的有效复方。

关键词：老年人高血压病肾气亏虚证寒冷暴露益肾降压方临床研究

短期急性寒冷暴露对高盐高血压SD大鼠氧化应激状态的影响及其性别差异

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短期急性寒冷暴露对高盐高血压SD大鼠氧化应激状态的影响及其性别...

作者：雷光涛南昌大学

学位级别：硕士

[目的]通过建立高盐高血压SD大鼠动物模型,观察短期急性寒冷暴露环境对动物模型氧化应激态的影响及其雌雄差异,探讨寒冷环境所致氧化应激对血压影响的机制。[方法]实验分组:雌雄SD大鼠各16只,体重250-300g,随机分为4组(n=8):1.雄性对照... 详细信息

[目的]通过建立高盐高血压SD大鼠动物模型,观察短期急性寒冷暴露环境对动物模型氧化应激态的影响及其雌雄差异,探讨寒冷环境所致氧化应激对血压影响的机制。[方法]实验分组:雌雄SD大鼠各16只,体重250-300g,随机分为4组(n=8):1.雄性对照组(MC):常规喂养;2.雌性对照组(FC) :常规喂养;3.雄性高盐组(MS):含8%食盐饲料喂养;4.雌性高盐组(FS):含8%食盐饲料喂养。为期8周。从第9周始停止雄性高盐组及雌性高盐组8%食盐饲料喂养,四组SD大鼠均常规喂养1周;于第10周开始将四组SD大鼠每日置于4℃人工气候箱1小时,为期1周。标本采集:血压:实验前1周开始测量血压,第1周至第9周前4日采用尾套法隔日测定各组SD大鼠收缩压(SBP),测量三次取其平均值。第9周后3日、第10周采用尾袖法每日测定各组SD大鼠收缩压,测量三次。尿液:于实验第8周末、第9周末、第10周末利用生物代谢笼收集各组SD大鼠24小时尿液,准确计量,混匀后取5ml于离心管内,-20℃保存。第9周末,各组SD大鼠尾静脉穿刺取血1ml;第10周末,全部SD大鼠在全麻下,于颈总动脉处穿刺插管取血离心后获得血清,留取胸主动脉,于液氮中保存。待测组织匀浆,并检测组织蛋白定量。观察指标:血压:前8周每周收缩压(SBP)、第9周第1、3、5、6、7日收缩压(SBP)及第10周每日收缩压(SBP),并计算第10周寒冷暴露前后血压差值。尿液:尿微量白蛋白(mALB)、视黄醇结合蛋白(RBP)、钠(Na+)和钾(K+)浓度,计算24h尿mALB、RBP、Na+和K+排出量。ELISA法测定8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)浓度。血清:ELISA法测定血管紧张素II(AngII)的浓度、硝酸盐还原酶法测定一氧化氮(NO)浓度。胸主动脉:比色法测定NADPH氧化酶活性(NADPH oxidase activity)及总超氧化物歧化酶(SOD)活性。[结果]1. SBP变化:高盐饮食8周后,与对照组相比,雄性高盐组及雌性高盐组血压明显高于同性别对照组(P寒冷暴露后四组血压(BP)均有升高,MS组暴露前后血压差值△BP(△BP =暴露后BP-暴露前BP)明显大于MC组△BP(P寒冷暴露前雄性及雌性高盐组24h尿量、尿mALB、尿RBP、尿钠、尿钾排出量与8周末同组间比较明显降低;寒冷暴露后雄性及雌性高盐组24h尿mALB、尿RBP、尿钠、尿钾排出量与寒冷暴露前比较无明显变化,8周末、寒冷暴露前后均未表现出性别差异。3.各组大鼠24h尿8-iso-PGF2α的比较:寒冷暴露后高盐组24h尿8-iso-PGF2α排出量较寒冷暴露前显著升高(P寒冷暴露前后24h尿8-iso-PGF2α排出量无统计学差异。寒冷暴露前、后24h尿8-iso-PGF2α排出量雄性高盐组与雌性高盐组、雄性对照组与雌性对照组比较均无统计学差异。4.血清中AngII和NO浓度:寒冷暴露后高盐组血清AngII较寒冷前升高、NO浓度降低(P寒冷前后血清AngII及NO浓度无统计学差异。寒冷前、后血清AngII及NO浓度在雄性高盐组与雌性高盐组、雄性对照组与雌性对照组比较均无统计学差异。5.胸主动脉NADPH氧化酶活性(NADPH oxidase activity)及总超氧化物歧化酶(SOD)活性:寒冷暴露后NADPH氧化酶活性及SOD活性,雄性与雌性高盐组比较、雄性与雌性对照组比较未出现统计学差异,但不同性别的高盐组均明显高于对照组(P寒冷暴露可使高盐高血压大鼠模型血压明显升高;3.寒冷暴露后高盐高血压大鼠RAAS激活,NADPH氧化酶活化,SOD活性降低,体内氧自由基生成增多,氧化应激增强,导致NO大量损耗,NO生物利用率下降,血压升高;4.寒

关键词：氧化应激寒冷暴露高血压性别差异

血浆来源细胞外小囊泡中miR-25-3p介导寒冷暴露诱导的骨量下降

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血浆来源细胞外小囊泡中miR-25-3p介导寒冷暴露诱导的骨量下降

作者：雷丽敏中南大学

学位级别：硕士

目的:随着人民平均寿命的增加、老年人口比重的上升,骨质疏松症已成为危害中老年人身体健康的重大慢性疾病。骨质疏松症是骨形成和骨吸收失衡所致的骨密度和质量下降、骨微结构破坏、骨脆性增加,从而引起骨折的全身性疾病。寒冷暴露对... 详细信息

目的:随着人民平均寿命的增加、老年人口比重的上升,骨质疏松症已成为危害中老年人身体健康的重大慢性疾病。骨质疏松症是骨形成和骨吸收失衡所致的骨密度和质量下降、骨微结构破坏、骨脆性增加,从而引起骨折的全身性疾病。寒冷暴露对于机体代谢以及疾病的发生发展起着重要的作用,寒冷暴露可以影响糖代谢、脂代谢、骨代谢。目前对于骨质疏松症的研究主要集中于绝经后骨质疏松和老年性骨质疏松,对于造成骨量下降的其他病因及其机制尚未完全阐明。本研究旨在探明寒冷暴露以及寒冷暴露诱导的血浆细胞外小囊泡(Small Extracellular Vesicles,sEVs)对骨量的作用及其机制,为寒冷暴露造成的骨量下降提供潜在的治疗靶点。方法:室温(room temperature,RT)组小鼠置于22-24℃环境下喂养,寒冷(cold temperature,CT)暴露组小鼠置于4-6℃环境下喂养2个月,心脏取血备用,μCT检测小鼠骨量与骨微结构变化。骨钙素(osteocalcin,OCN)免疫组织化学染色检测小鼠骨组织中成骨细胞数量。抗酒石酸性磷酸酶染色检测破骨细胞数量。钙黄绿素双标实验检测骨的动态形成参数。采用差速离心法提取血浆sEVs。透射电镜检测sEVs形态,纳米粒径分析检测sEVs直径,Western blot方法鉴定sEVs表面标志物。采用Western blot方法检测骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)中RUNX2、SATB2的表达,茜素红染色检测BMSCs矿化结节的形成。采用共聚焦显微镜检测BMSCs摄取sEVs。通过芯片检测筛选寒冷暴露组的血浆sEVs(CT-sEVs)和室温组的血浆细胞外小囊泡(RT-sEVs)差异表达的microRNA,我们选择了 5条在CT-sEVs中表达高且与成骨分化相关的miRNAs。用实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证CT-sEVs中miRNAs的表达量是否增高。通过向CT-sEVs中转染AgomiR-25-3p、AntagomiR-25-3p及其对照,探究过表达或低表达miR-25-3p的CT-sEVs对BMSCs成骨分化的影响。采用生物信息学技术预测miR-25-3p的潜在靶基因,并用荧光素酶报告基因实验验证miR-25-3p与SATB2的靶向关系。用siRNA转染技术沉默BMSCs中SATB2基因的表达以研究SATB2基因对BMSCs成骨分化的作用。使用活体成像仪检测小鼠体内骨组织对sEVs的摄取。结果:1.体外实验结果:从血浆中提取的sEVs的为典型的杯状或者椭球形结构,直径为50-150nm,表达sEVs表面标记物TSG101、CD9和CD81,并可被BMSCs摄取,同时sEVs可以通过尾静脉注射被摄取到体内,有一定骨组织靶向性。CT-sEVs可抑制BMSCs的成骨分化能力,RT-sEVs具有相反的作用。我们通过测序以及qRT-PCR验证,确认miR-25-3p在CT-sEVs中高表达,且差异倍数最大。于是我们选用miR-25-3p验证其在CT-sEVs介导的抑制成骨分化中的作用。过表达miR-25-3p的CT-sEVs显著加强了其抑制BMSCs成骨分化的作用,敲低miR-25-3p的CT-sEVs缓解其抑制BMSCs的成骨分化的能力。miR-25-3p与SATB2基因之间具有直接的靶向关系,沉默SATB2基因的表达可抑制BMSCs的成骨分化水平。在BMSCs上直接转染miR-25-3p inhibitor可以显著促进BMSCs的成骨分化能力,而当 siSATB2 与 miR-25-3p inhibitor 共转染进细胞后,miR-25-3p inhibitor的促成骨分化能力被逆转。2.体内实验:寒冷暴露显著降低了小鼠骨量,通过减少成骨细胞数量,增加破骨细胞数量。CT-sEVs抑制小鼠骨量,而RT-sEVs既可以促进室温小鼠的骨量又可以升高寒冷暴露条件下的小鼠骨量。GW4869(sEVs释放抑制剂)干预寒冷暴露小鼠可升高寒冷暴露小鼠的骨量。尾静脉注射AntagomiR-25-3p可升高寒冷暴露小鼠骨量。结论:寒冷暴露诱导的血浆来源的sEVs中的miR-25-3p通过抑制BMSCs成骨分化能力从而导致小鼠骨量下降。图24幅,表5个,参考文献51篇

关键词：寒冷暴露成骨分化细胞外小囊泡骨髓间充质干细胞 miR-25-3p SATB2

寒冷暴露对大白鼠肝细胞膜β-肾上腺素能受体的影响

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中国应用生理学杂志 1988年第2期 105-109页

作者：易华杨亚莉陈秋红姜在福刘恩菠沈阳军区军事医学研究所

我们有~3H-DHA为放射配基,测得寒冷暴露后大鼠肝细胞膜β受体变化。结果是大鼠寒冷暴露1～3天,肝细胞膜β受体迅速增加,亲和力呈下降趋势。寒冷暴露1～4周,β受体明显减少,亲和力则显著增强。所测得β受体主要是β受体。提示寒冷暴露β... 详细信息

我们有~3H-DHA为放射配基,测得寒冷暴露后大鼠肝细胞膜β受体变化。结果是大鼠寒冷暴露1～3天,肝细胞膜β受体迅速增加,亲和力呈下降趋势。寒冷暴露1～4周,β受体明显减少,亲和力则显著增强。所测得β受体主要是β受体。提示寒冷暴露β受体介导的NST,初期依赖于β受体数量变化,后期则是靠β受体质量更为有效而实现的。

关键词：寒冷暴露 β-肾上腺素能受体 ~3H-DHA 肝细胞膜

复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能的保护作用

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实用预防医学 2010年第3期17卷 425-427页

作者：王基野陈耀明张文斌郑刚沈学峰车红磊柯涛陈香郡马金龙骆文静陈景元徐玫第四军医大学体育教研室陕西西安710032 第四军医大学劳动卫生与环境卫生学教研室

目的观察复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能的保护作用。方法雄性SD大鼠32只,按体重随机平均分为饮用水灌胃室温对照组(n=8)、复合营养素灌胃室温对照组(n=8)、饮用水灌胃寒冷暴露组(n=8)和复合营养素灌胃寒冷暴露组(n=8)。灌胃3周后... 详细信息

目的观察复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能的保护作用。方法雄性SD大鼠32只,按体重随机平均分为饮用水灌胃室温对照组(n=8)、复合营养素灌胃室温对照组(n=8)、饮用水灌胃寒冷暴露组(n=8)和复合营养素灌胃寒冷暴露组(n=8)。灌胃3周后进行急性寒冷暴露,暴露温度-15℃,时间6h。观察每组大鼠骨骼肌细胞ATP含量变化及细胞超微结构的改变。结果①寒冷暴露使大鼠骨骼肌细胞ATP含量下降(1.353±0.873μmol/L),明显低于室温对照组(6.594±0.421μmol/L)(P寒冷暴露大鼠骨骼肌细胞ATP含量(5.887±0.385μmol/L),与室温对照组(6.594±0.421μmol/L)相比差异无统计学意义(P>0.05),电镜结果显示:骨骼肌细胞超微结构正常,线粒体形态完整、排列整齐。结论复合营养素对寒冷暴露大鼠骨骼肌功能有很好的保护作用。

关键词：寒冷暴露骨骼肌功能复合营养素 ATP 超微结构

寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响

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中国应用生理学杂志 2019年第5期35卷 454-457页

作者：赵海李曦张莉武帅张永强李军张格祥杨丹凤兰州大学公共卫生学院甘肃兰州730000 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所天津300050 中国人民解放军32110部队卫生连黑龙江黑河164300

目的:研究寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响。方法:12只雌性小鼠随机分为对照组、低温组,每组6只;低温组每天4℃暴露4 h,每天阴道涂片法观察小鼠动情状况,对照组饲养于常温动物房;每2 d称量体重,2周后心脏取血、子宫和卵巢,检测小... 详细信息

目的:研究寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响。方法:12只雌性小鼠随机分为对照组、低温组,每组6只;低温组每天4℃暴露4 h,每天阴道涂片法观察小鼠动情状况,对照组饲养于常温动物房;每2 d称量体重,2周后心脏取血、子宫和卵巢,检测小鼠血清E2、FSH、LH、Prl、P水平,进行子宫、卵巢的组织病理学检查。结果:与对照组比较,低温组小鼠体重无显著性差异(P>0.05),小鼠子宫脏器系数明显较低、动情间期明显延长(P寒冷可使雌性C57BL/6小鼠动情周期延长,进而可能影响生殖功能。

关键词：寒冷暴露动情周期 C57BL/6小鼠子宫卵巢

寒冷对雌性C57BL/6小鼠子宫氧化应激反应的影响

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军事医学 2019年第7期43卷 506-509页

作者：赵海李曦张莉武帅张永强张格祥杨丹凤军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所天津300050 兰州大学公共卫生学院兰州734000

目的研究寒冷对雌性C57BL/6小鼠子宫组织氧化应激水平的影响。方法32只雌性小鼠随机分为4组(各8只),即对照2、4周组与冷暴露2、4周组(低温组),低温组实验期间内每天4℃暴露4 h,对照组饲养于常温动物房,分别于实验结束时处死并称重取子... 详细信息

目的研究寒冷对雌性C57BL/6小鼠子宫组织氧化应激水平的影响。方法32只雌性小鼠随机分为4组(各8只),即对照2、4周组与冷暴露2、4周组(低温组),低温组实验期间内每天4℃暴露4 h,对照组饲养于常温动物房,分别于实验结束时处死并称重取子宫组织。ELISA法检测每只小鼠子宫组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、C-反应蛋白(CRP)水平。对子宫组织进行组织病理学检查。结果低温组与对照组小鼠体质量增加量无显著性差异(P>0.05),2周低温组小鼠子宫脏器系数明显较低(P0.05),2周(P寒冷损伤生殖功能的早期或中间改变。

关键词：寒冷暴露氧化应激 C57BL/6小鼠子宫

维生素E对冷暴露大鼠尿中环核苷酸含量的影响

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营养学报 1985年第4期 289-293页

作者：易华中国人民解放军第四军医大学 403室西安

本研究旨在探讨维生素E是否对冷暴露大鼠环核苷酸代谢有影响。我们采用了放射免疫法测定4℃下大鼠口服维生E后尿中环核管酸含量。结果表明:冷暴露大鼠尿中环核苷酸排泄持续增加,而cAMP/cGMP比值未见改变。维生素E增加冷暴露大鼠cAMP排泄... 详细信息

本研究旨在探讨维生素E是否对冷暴露大鼠环核苷酸代谢有影响。我们采用了放射免疫法测定4℃下大鼠口服维生E后尿中环核管酸含量。结果表明:冷暴露大鼠尿中环核苷酸排泄持续增加,而cAMP/cGMP比值未见改变。维生素E增加冷暴露大鼠cAMP排泄,与单纯冷暴露组对比,P<0.025。cGMP排泄相差不显著。冷暴二周后提高了cAMP/cGMP比值,P<0.025。提示维生素E可能提高以cAMP为“第二信使”的低温环境下的能量代谢。

关键词：维生素E 环核苷酸寒冷暴露