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富含脯氨酸的酪氨酸激酶2在肿瘤中调控作用的研究进展

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中国生物制品学杂志 2017年第12期30卷 1354-1358页

作者：吴延婷张昱郭强昆明理工大学医学院云南昆明650000 云南省第一人民医院消化内科云南昆明650000

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrsosine kinase 2,Pyk2)是一种非受体型酪氨酸激酶,与黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)共同组成黏着斑激酶家族。Pyk2在多种器官及组织中表达,受一系列因子激活,参与多条信号通路的信息传... 详细信息

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrsosine kinase 2,Pyk2)是一种非受体型酪氨酸激酶,与黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)共同组成黏着斑激酶家族。Pyk2在多种器官及组织中表达,受一系列因子激活,参与多条信号通路的信息传递,能够调节细胞的迁移、增殖、分化及凋亡等。在许多肿瘤中均发现Pyk2的异常表达,因此Pyk2可能成为肿瘤治疗的新靶点。本文就Pyk2的结构与分布、在多种肿瘤(骨髓瘤、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌)中的调控作用及其抑制剂的应用方面作一综述。

关键词：富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 骨髓瘤乳腺癌前列腺癌卵巢癌

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2在U251胶质瘤细胞侵袭迁移中的作用

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中华实验外科杂志 2015年第9期32卷 2050-2053页

作者：朱蒙周华张辰赵鹏飞陈磊赵恺王垒垒于圣平杨学军天津医科大学总医院神经外科 300052

目的观察应用RNA干扰沉默U251人胶质瘤细胞中富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（Pyk2）的表达对细胞侵袭迁移能力的影响.方法将Pyk2短发夹RNA（shRNA）和对照shRNA分别转染U251细胞,并将细胞分为Pyk2 shRNA组、对照shRNA组及未处理组.采用West... 详细信息

目的观察应用RNA干扰沉默U251人胶质瘤细胞中富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（Pyk2）的表达对细胞侵袭迁移能力的影响.方法将Pyk2短发夹RNA（shRNA）和对照shRNA分别转染U251细胞,并将细胞分为Pyk2 shRNA组、对照shRNA组及未处理组.采用Western blot检测转染前后U251细胞中Pyk2的蛋白表达及磷酸化水平.采用Transwell迁移及侵袭实验检测转染前后U251细胞的迁移及侵袭能力.应用免疫荧光染色观察转染前后细胞黏着斑的形态变化,应用Western blot检测侵袭相关基质金属蛋白酶（MMPs）的表达.结果 Pyk2 shRNA组U251细胞中Pyk2的蛋白表达及磷酸化水平明显下调.Pyk2沉默能显著抑制U251细胞的迁移及侵袭能力分别达72％及75％.未处理组细胞黏着斑面积较小,呈细丝状,而Pyk2 shRNA组细胞黏着斑面积增大,呈点状或斑片状.Pyk2 shRNA组细胞MMP-2和MMP-9的表达水平分别为0.24±0.07和0.18±0.06,显著低于未处理组（设定为1,P＜0.05）.结论 Pyk2沉默能够抑制U251胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力,可能与其参与调控黏着斑的周转及MMPs的表达有关.

关键词：胶质瘤富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 RNA干扰侵袭迁移

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2信号通路在血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化及主动脉夹层形成中的作用

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广西医学 2018年第13期40卷 1405-1409页

作者：熊锐王志维胡小平吴红兵霍天明武汉大学人民医院心血管外科湖北省武汉市430060

目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)信号通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞表型转化及主动脉夹层发生中的作用。方法应用免疫荧光染色和免疫印迹法分析人体正常主动脉及夹层主动脉组织中Pyk2及磷酸化Pyk2(p-Pyk2)的定... 详细信息

目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)信号通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞表型转化及主动脉夹层发生中的作用。方法应用免疫荧光染色和免疫印迹法分析人体正常主动脉及夹层主动脉组织中Pyk2及磷酸化Pyk2(p-Pyk2)的定位和表达情况。将小鼠主动脉血管平滑肌细胞(MOVAS)分为对照组1(仅加入血管平滑肌细胞完全培养基)、0.01μmol AngⅡ组、0.1μmol AngⅡ组、1μmol AngⅡ组,加入相应的药物后处理24 h,免疫印迹法检测p-Pyk2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)的表达水平。将MOVAS分为对照组2(仅加入血管平滑肌细胞完全培养基)、1.2μmol酪氨酸激酶抑制剂TAE226组、1μmol AngⅡ组、1.2μmol TAE226+1μmol AngⅡ组,加入相应的药物后均处理24 h,免疫印迹法检测p-Pyk2、α-SMA和OPN的表达量。结果 Pyk2和p-Pyk2在正常主动脉及夹层主动脉中均有表达,但在夹层主动脉中表达更高(均P2及OPN的表达量依次增加,而α-SMA的表达量依次减少(均P2比较,1.2μmol TAE226组p-Pyk2及α-SMA蛋白的表达量降低,OPN蛋白的表达升高(均P2μmol TAE226+1μmol AngⅡ组p-Pyk2及OPN蛋白的表达量均降低,α-SMA蛋白的表达量升高(均P2信号通路可能通过介导AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞表型转化参与主动脉夹层的形成。

关键词：主动脉夹层富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 血管紧张素Ⅱ 血管平滑肌细胞表型转化

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2在肿瘤中的研究进展

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癌症进展 2021年第13期19卷 1315-1317,1332页

作者：朱彤茅国新南通大学附属医院肿瘤内科江苏南通226000 盐城市第一人民医院肿瘤科江苏盐城2240000

近年来肿瘤的发病率与病死率均呈持续上升趋势,传统治疗方法包括手术切除、放疗和化疗。由于肿瘤的高复发和转移率,目前病死率仍然较高。大量研究表明,肿瘤的发生和转移与某些致癌基因的过表达有关。因此,有必要寻找新的分子生物标志物... 详细信息

近年来肿瘤的发病率与病死率均呈持续上升趋势,传统治疗方法包括手术切除、放疗和化疗。由于肿瘤的高复发和转移率,目前病死率仍然较高。大量研究表明,肿瘤的发生和转移与某些致癌基因的过表达有关。因此,有必要寻找新的分子生物标志物和治疗靶点,以改善预后。富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)是一种能调节细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的非受体酪氨酸激酶。近年来,Pyk2在肿瘤进展中的作用引起了人们的广泛关注。Pyk2在肿瘤组织中的过表达与不良预后相关,为新型酪氨酸激酶抑制剂在肿瘤治疗中的应用提供了分子证据。本文就Pyk2在肿瘤进展中的作用及其分子机制作一综述。

关键词：富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 信号通路肿瘤

姜黄素对MRL／lpr狼疮鼠肾组织富含脯氨酸的酪氨酸激酶2信号转导途径表达的影响

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国际免疫学杂志 2013年第3期36卷 231-234页

作者：王梅英邹世海深圳市宝安区人民医院肾脏风湿内科 518101

目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（PYK2）信号转导途径在MRL／lpr模型鼠狼疮。肾炎中所起的作用以及姜黄素对PYK2信号转导途径活化的影响。方法选用MRL／lpr转基因狼疮鼠为研究对象，给予姜黄素干预治疗后，采用免疫组化方法研究狼疮... 详细信息

目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（PYK2）信号转导途径在MRL／lpr模型鼠狼疮。肾炎中所起的作用以及姜黄素对PYK2信号转导途径活化的影响。方法选用MRL／lpr转基因狼疮鼠为研究对象，给予姜黄素干预治疗后，采用免疫组化方法研究狼疮鼠肾脏磷酸化PYK2的组织分布情况，采用Westernblot方法研究磷酸化PYK2蛋白的定量表达。结果MRL／lpr狼疮鼠肾脏的磷酸化PYK2蛋白明显活化，给予姜黄素干预治疗后。肾脏的磷酸化PYK2蛋白表达降低。结论狼疮鼠肾脏PYK2信号转导途径的活化与狼疮。肾炎的发病密切相关，姜黄素可以降低PYK2信号转导途径的表达。

关键词：姜黄素富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 MRL lpr 狼疮肾炎

非受体酪氨酸激酶Pyk2在宫颈腺癌组织中的表达及意义

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中国妇产科临床杂志 2023年第5期24卷 516-517页

作者：张羽张璨章伟玲南通市肿瘤医院妇科江苏南通重226361

目的探究富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)在宫颈腺癌组织中的表达及意义。方法收集宫颈腺癌临床组织样本,用免疫组化法检测Pyk2的表达水平,分析Pyk2的表达与宫颈腺癌病理特点及患者预后的相关性。结果宫... 详细信息

目的探究富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)在宫颈腺癌组织中的表达及意义。方法收集宫颈腺癌临床组织样本,用免疫组化法检测Pyk2的表达水平,分析Pyk2的表达与宫颈腺癌病理特点及患者预后的相关性。结果宫颈腺癌组织中Pyk2的表达水平显著高于对应的癌旁组织(P2的表达水平具有显著相关性(P2表达水平无显著相关性(P>0.05);Pyk2高表达组生存率显著高于低表达组(P2在宫颈腺癌组织中高表达,其表达水平与宫颈腺癌患者预后显著相关。

关键词：宫颈腺癌病理富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 预后

Pyk2在糖尿病小鼠的表达和肾小管上皮细胞的作用及ALM调控Pyk2延缓肾纤维化的研究

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中国病理生理杂志 2023年第4期39卷 623-631页

作者：蔡雪妮杨雨星张芮曾永秦文青李智恒周兴艳严瑞贵州医科大学附属医院肾内科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院内分泌与代谢病科贵州贵阳550004

目的:探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠中的表达和在肾小管上皮细胞的作用,以及α-硫辛酰胺(alpha-lipoamide,ALM)是否通过调控Pyk2延缓糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾纤维化。方法:选取8周龄野生型(wild-type,WT)小鼠和db/db小鼠各5只,正常饮食饲养至16周,Western blot检测肾组织纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、III型胶原α1链(collagen type III alpha 1 chain,COL3A1)、Pyk2和p-Pyk2(Y402)的蛋白水平,免疫组织化学染色观察Pyk2和p-Pyk2(Y402)蛋白分布及表达情况,RT-qPCR检测Pyk2的mRNA水平。体外培养大鼠肾小管上皮细胞系NRK-52E,取对数生长期细胞予以高糖高脂(high glucose and high palmitic acid,HP)、Pyk2抑制剂PF-562271、ALM处理及转染Pyk2过表达质粒后,分为正常糖(normal glucose,NG)组、HP组、HP+PF-562271组、HP+vector组、HP+OE-Pyk2组、HP+ALM组和HP+ALM+OE-Pyk2组,每组重复3次。免疫荧光染色观察Pyk2蛋白定位及表达,Western blot检测FN、COL3A1、Pyk2和p-Pyk2(Y402)的蛋白水平,RT-qPCR检测Pyk2的mRNA水平。结果:与WT组相比,db/db组小鼠纤维化指标(FN和COL3A1)蛋白表达升高,Pyk2和p-Pyk2(Y402)主要在肾小管中表达且蛋白表达水平显著升高,Pyk2的mRNA水平显著升高(P2和p-Pyk2(Y402)蛋白水平显著升高,Pyk2的mRNA水平显著升高(P2271处理后,与HP组比较,p-Pyk2(Y402)和纤维化指标蛋白水平显著降低,予转染Pyk2过表达质粒后,与HP+vector组比较,纤维化指标蛋白水平显著升高(P2、p-Pyk2(Y402)及纤维化指标蛋白水平显著降低(P2过表达质粒后,纤维化指标的变化趋势被逆转(P2在DM小鼠中表达升高,在肾小管上皮细胞表达可促进DKD肾纤维化进展;ALM可通过下调肾小管上皮细胞中Pyk2的表达及磷酸化延缓DKD肾纤维化进展。

关键词：富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 α-硫辛酰胺糖尿病肾病肾纤维化

FAK/Pyk2在高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞焦亡中的作用研究

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FAK/Pyk2在高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞焦亡中的作用研究

作者：李华贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:了解不同时间点高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞中FAK、p-FAK、Pyk2、p-Pyk2和细胞焦亡相关蛋白的表达变化;探讨FAK/Pyk2在高糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用。方法:1.通过免疫细胞化学染色检测上皮细胞标志性蛋白角蛋白CK-18、... 详细信息

目的:了解不同时间点高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞中FAK、p-FAK、Pyk2、p-Pyk2和细胞焦亡相关蛋白的表达变化;探讨FAK/Pyk2在高糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用。方法:1.通过免疫细胞化学染色检测上皮细胞标志性蛋白角蛋白CK-18、钙黏蛋白(E-cadherin)和间质细胞标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)鉴定所培养细胞为大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)。2.细胞传代后分组:1)正常糖对照组;2)高糖组,其中高糖刺激组设置24h、48h和72h三个时间点。培养到相应时间后收集细胞并提取总RNA及蛋白进行后续实验:Real Time-PCR检测NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD、FAK、Pyk2的m RNA水平;Western Blot检测FAK、p-FAK、Pyk2、p-Pyk2及焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N的蛋白水平。ELISA检测细胞及细胞培养上清液中IL-1β及LDH释放量。3.选择高糖培养48小时的肾小管上皮细胞作为研究对象进行下一步研究。将体外培养的NRK-52E细胞分为4组:1)正常糖对照组;2)甘露醇高渗组;3)高糖组;4)高糖+PF-562271(FAK、Pyk2的小分子抑制剂)组;将各组细胞培养48小时后收集细胞并提取蛋白,Western Blot检测NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、FAK、p-FAK、Pyk2、p-Pyk2的蛋白表达。结果:1.Real Time-PCR结果显示:与正常糖对照组相比,高糖各组NLRP3、GSDMD、ASC、caspase-1、FAK、Pyk2的m RNA表达均是升高的(P2/Pyk2的蛋白表达均是升高的,其中48小时表达最高(P2.Western blot结果显示:与正常糖组相比,甘露醇高渗组相关蛋白未见明显改变(P>0.05),高糖组NLRP3、GSDMD-N、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、p-FAK/FAK、p-Pyk2/Pyk2的蛋白表达是升高的(P2271干预后,NLRP3、GSDMD、GSDMD-N、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、p-FAK/FAK、p-Pyk2/Pyk2蛋白表达是减低的(P2的活化。2.使用PF-562271抑制FAK、Pyk2的活化后,细胞焦亡相关蛋白表达有所降低,提示FAK/Pyk2可能参与了高糖诱导的肾小管上皮细胞的焦亡过程。

关键词：肾小管上皮细胞高糖细胞焦亡黏着斑激酶富含脯氨酸的酪氨酸激酶2

泼尼松对阿霉素肾病大鼠肾组织FAK/Pyk2表达的影响

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南方医科大学学报 2014年第8期34卷 1149-1153页

作者：陈小英王菊霞郑京吴心虹刘慈赟林秀芹福建中医药大学研究生院福建福州350122 福建中医药大学附属人民医院儿科福建福州350004 福建中医药大学附属人民医院肾内科福建福州350004

目的观察泼尼松对阿霉素肾病大鼠FAK、Pyk2表达的影响。方法利用随机数字表将SD大鼠分为正常组、模型组、泼尼松组,建立阿霉素肾病大鼠模型,于阿霉素注射后第7天干预组以泼尼松10 mg/(kg·d)灌胃,于实验不同时间点测定24 h尿蛋白定量,... 详细信息

目的观察泼尼松对阿霉素肾病大鼠FAK、Pyk2表达的影响。方法利用随机数字表将SD大鼠分为正常组、模型组、泼尼松组,建立阿霉素肾病大鼠模型,于阿霉素注射后第7天干预组以泼尼松10 mg/(kg·d)灌胃,于实验不同时间点测定24 h尿蛋白定量,观察肾组织电镜结果,实时荧光定量PCR检测FAK、Pyk2、Nephrin表达水平的变化,Western blot检测肾组织FAK、Pyk2蛋白及磷酸化蛋白,免疫组织化学法检测Nephrin表达水平。结果⑥与正常组比较,模型组尿蛋白升高(P21、35天,模型组、治疗组Nephrin mRNA表达较正常组低,FAK mRNA表达较正常组升高(P21、35天,模型组FAK总蛋白及其磷酸化蛋白表达、P-FAK/FAK、P-Pyk2/Pyk2较正常组高(P2/Pyk2较模型组降低(P2mRNA及pPyk2/Pyk2比值呈正相关(r=0.819、0.750、0.838、0.762、0.934,P2磷酸化导致肾病的发生;泼尼松能抑制FAK、Pyk2激活,降低阿霉素肾病大鼠蛋白尿,改善足突病变,从而保护肾小球滤过屏障。

关键词：阿霉素肾病泼尼松黏着斑激酶富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 Nephrin