检索结果-南通市图书馆

作者：李琳东北林业大学

学位级别：硕士

宽叶腹水草（Veronicastrum latifolium（Hemsl.）Yamazaki）是分布在江苏省、安徽省和浙江省等地的一种玄参科腹水草属植物。全草均可入药,医学临床可用于治疗或缓解肝腹水,肝硬化;胃溃疡;肾炎引起的水肿;民间常用于跌打损伤引起的软... 详细信息

宽叶腹水草（Veronicastrum latifolium（Hemsl.）Yamazaki）是分布在江苏省、安徽省和浙江省等地的一种玄参科腹水草属植物。全草均可入药,医学临床可用于治疗或缓解肝腹水,肝硬化;胃溃疡;肾炎引起的水肿;民间常用于跌打损伤引起的软组织损伤,肿胀疼痛等症状;疮痈肿毒引起的皮肤剧痛、红肿、化脓;寻常烫伤;毒蛇咬伤血液中毒导致的水疱、皮肤组织损伤等症状。宽叶腹水草富含黄酮、甾醇、鞣质等化合物使其拥有丰富的临床应用。目前,宽叶腹水草主要在民间应用,在现有的报道中发现,很多研究对于宽叶腹水草所含成分的阐述相对少见,且主要集中于水提物或醇提物的研究,没有相关研究使用更高效的提取方式对其含有的黄酮类化合物进行有效的提取分离。所以,本研究对其所含的八种黄酮类成分进行了提取、定量分析与抗菌生物活性的研究。以黄酮类化合物含量为指标,通过单因素实验及后期的响应面法优化了微波辅助低共熔溶剂提取法并且对比了此方法其他不同提取方法对各成分含量的影响,接下来选取大孔吸附树脂作为富集纯化材料展开对所得提取液中八种目标化合物的富集工作。将经过富集后的产物用于宽叶腹水草的黄酮类化合物的体外抗菌活性初步评价。本研究主要成果如下:1.建立了高效液相色谱法（HPLC）检测分析宽叶腹水草中的牡荆素（Vitexin,VIT）、木犀草素（Luteolin,LUT）、汉黄芩苷（Wogonoside,WOG）、芹菜素（Apigenin,API）、高车前素（Hispidulin,HIS）、金圣草黄素（Chrysoeriol,CHR）、金合欢素（Acacetin,ACE）、柳穿鱼黄素（Pectolinarigenin,PEC）方法。2.结合单因素实验结果,运用BBD实验和RSD法探究微波辅助低共熔溶剂提取宽叶腹水草中八种黄酮类成分的工艺条件,当提取工艺条件设定为:低共熔溶剂（氯化胆碱/三乙二醇=1/4,含水率为40%）,微波温度为62℃,微波时间为15 min,固液比为1:20（g/m L）时,得到的宽叶腹水草中的八个黄酮成分的提取率可达到1.542 mg/g、1.503 mg/g、0.558 mg/g、1.297 mg/g、1.805 mg/g、1.204 mg/g、3.747 mg/g、5.391 mg/g,体现最优提取效果,并且提取结果高于超声辅助低共熔溶剂、热回流辅助低共熔溶剂及乙醇辅助微波提取方法。3.选择大孔吸附树脂作为富集分离材料用于宽叶腹水草提取液的分离富集研究,探究了D-101、AB-8、HPD-100、HPD-400、HPD-826和NKA-9这六种型号的大孔吸附树脂对宽叶腹水草中黄酮类成分的分离富集能力,综合考察这6中树脂材料的吸附能力和解析能力后发现AB-8型树脂对八种成分的回收率最高。进一步考察了腹水草富集物的抗菌活性,发现宽叶腹水草富集物对实验选取的6种供试菌株表现出不同程度的抑菌效果,在一定浓度范围内呈现剂量依赖。但是金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）值说明,它们对宽叶腹水草富集物的的敏感程度更高;于是进一步通过时间-杀菌曲线考察富集物对三种菌株的动态杀菌效果,得出富集物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,通过细菌染色发现宽叶腹水草富集物可通过破坏细菌细胞膜从而发挥其抑菌作用。综上,本研究开发的微波辅助低共熔溶剂法,可以更加高效地提取宽叶腹水草黄酮类化合物,与传统的几种提取方法对比可知本方法绿色高效,纯度高,彰显了“绿色化学”的优势,并且研究表明宽叶腹水草黄酮类化合物具有较好的抗菌活性。本研究为宽叶腹水草资源的高效利用奠定了基础,宽叶腹水草中得到的黄酮类化合物,具有更广阔的研发与应用潜力,丰富了我国中草药资源的开发利用。

关键词：宽叶腹水草黄酮类成分微波辅助低共熔溶剂法大孔吸附树脂抗菌活性

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苗药宽叶腹水草对CCl_(4)致肝纤维化小鼠的治疗作用及其机制研究

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中药材 2023年第3期46卷 718-723页

作者：胡光线解小芬帅敏徐菁霞王恒许键炜贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心/中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 黔南民族医学高等专科学校贵州都匀558013 贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院白云医院贵州贵阳550002

目的:研究苗药宽叶腹水草对CCl_(4)所诱导肝纤维化小鼠的治疗作用及可能机制。方法:将60只SPF级昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.2 mg/kg)组及宽叶腹水草水提物低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(800 mg/kg)剂量组,每... 详细信息

目的:研究苗药宽叶腹水草对CCl_(4)所诱导肝纤维化小鼠的治疗作用及可能机制。方法:将60只SPF级昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.2 mg/kg)组及宽叶腹水草水提物低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(800 mg/kg)剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组小鼠均皮下注射CCl_(4)(CCl_(4)与橄榄油溶液1∶1混合)诱导肝纤维化,2次/w,连续8 w。从造模第5周开始,正常对照组和模型组小鼠灌胃生理盐水,其余各组小鼠均灌胃相应药物治疗,1次/d,连续4 w。末次给药处死所有小鼠后,收集肝脏,计算肝脏指数,HE及Masson染色观察肝组织病理学变化;全自动生化仪检测肝功能指标ALT、AST、ALP、ALB、TP水平;ELISA法检测纤维化指标PCⅢ、ColⅣ、LN、HA及炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平;试剂盒检测小鼠血清SOD、GSH-Px、MDA水平;Western Blot检测肝组织中α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3蛋白表达。结果:宽叶腹水草能显著升高CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠体质量,降低肝脏指数,减少肝组织炎症浸润及胶原沉积,显著升高血清ALB、TP、SOD、GSH-Px水平,显著降低血清ALT、AST、ALP、PCⅢ、ColⅣ、LN、HA、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平及肝组织中TGF-β、α-SMA、Smad2、Smad3蛋白表达。结论:宽叶腹水草对CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠具有治疗作用,其机制可能与抑制TGF-β/Smad2/3信号通路、炎症反应及氧化应激有关。

关键词：宽叶腹水草肝纤维化 TGF-β/Smad2/3通路炎症氧化应激

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宽叶腹水草黄酮类化合物的提取纯化及生物活性研究

宽叶腹水草黄酮类化合物的提取纯化及生物活性研究

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作者：尹璐军东北林业大学

学位级别：硕士

宽叶腹水草(Veronicastrum latifolium(Hemsl.)Yamazaki)为玄参科(Scrophulariaceae)腹水草属(Veronicastrum *** Farbic)植物宽叶腹水草的全草,可全草入药,主治肝硬化腹水、肾炎消肿、跌打损伤、烫伤和毒蛇咬伤。宽叶腹水草含有丰富的... 详细信息

宽叶腹水草(Veronicastrum latifolium(Hemsl.)Yamazaki)为玄参科(Scrophulariaceae)腹水草属(Veronicastrum *** Farbic)植物宽叶腹水草的全草,可全草入药,主治肝硬化腹水、肾炎消肿、跌打损伤、烫伤和毒蛇咬伤。宽叶腹水草含有丰富的黄酮类化合物,黄酮类化合物具有多种生物活性如抗氧化、抑菌、抗病毒、抗炎、增强机体免疫力、降血压血脂和保护心脑血管等。因此本论文以宽叶腹水草为研究对象,采用HPLC-MS/MS对宽叶腹水草中的黄酮类化合物进行分析鉴定;首次建立了 HPLC法对黄酮类化合物进行定量分析;在定量分析的基础上对提取工艺条件进行优化,结合大孔吸附树脂对宽叶腹水草提取液中黄酮类化合物进行富集纯化;首次探讨了宽叶腹水草粗提物和纯化物的抗氧化活性、抑菌活性、抗炎活性。研究结果表明:1.通过LC-MS/MS和HPLC定性分析,鉴定出宽叶腹水草中的八种黄酮类化合物主要为牡荆素、木犀草素、汉黄芩苷、芹菜素、高车前素、金圣草黄素、金合欢素、柳穿鱼黄素;建立的 HPLC 色谱条件:色谱柱:Diamonsil C18 column,(250 × 4.6 mm i.d..5 μm),流动相:A为0.5%的磷酸水溶液,B为乙腈;梯度洗脱条件为:0-6 min,10-15%(B);6-7 min,15-18%(B);7-30 min,18-25%(B);30-65 min,25-40%(B);65-85 min,40-52%(B);检测波长为 350 nm;柱温为35℃;流速为0.8mL/min;进样量为20μL。证实此法可成功的用于宽叶腹水草中主要黄酮类化合物的定性和定量分析。2.在单因素实验的接础上,结合响应曲面法实验考察了微波辅助提取宽叶腹水草中牡荆素、木犀草素、汉黄芩苷、芹菜素、高车前素、金圣草黄素、金合欢素、柳穿鱼黄素的工艺条件,并确定了最工艺条件:70%的乙醇为溶剂,微波温度为56℃,微波时间为14min,间液比为1:48(g/mL)。在最佳工艺条件下,宽叶腹水草中的牡荆素、木犀草素、汉黄芩苷、芹菜素、高车前素、金圣草黄素、金合欢素、柳穿鱼黄素的提取率分别为0.284 mg/g、0.298 mg/g、5.59 mg/g、0.161 mg/g、0.297 mg/g、0.263 mg/g、0.285 mg/g、0.781 mg/g。证实此法对宽叶腹水草中的黄酮类化合物提取率比价高,该提取工艺完全可行。D101树脂对宽叶腹水草中黄酮类化合物的吸附率、解吸率、纯度及回收率分别为83.7%、81.2%、88.5%、41.4%,表明D101树脂适用于宽叶腹水草黄酮类化合物的富集纯化。经D101树脂富集纯化后,宽叶腹水草纯化物中黄酮类化合物的纯度与粗提物相比,其纯度提高了 9.36倍。3.以Vc为对照,对宽叶腹水草的粗提物和纯化物进行DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验、FRAP总抗氧化能力实验,在三种抗氧化实验中,粗提物和纯化物均具有抗氧化作用,且纯化物的抗氧化能力均强于粗提物。选择革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、白色念球菌、枯草芽孢杆菌)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌)进行宽叶腹水草粗提物和纯化物的抑菌活性研究,纯化物和粗提物对六种供试菌株表现出一定的抑制作用,但对革兰氏阳性菌的抑制作用明显强于革兰氏阴性菌;纯化物对六种供试菌株的抑菌作用强于粗提物,且纯化物对白色念球菌的抑菌作用最强。采用MTT法测定25-500 μg/mL范围内的粗提物和纯化物对RAW 264.7细胞活力的影响。研究发现,在25-300 μg/mL浓度范围内,粗提物和纯化物对细胞活力无显著影响;经LPS诱导致炎的RAW 264.7巨噬细胞,通过Griess法检测给药后细胞NO的分泌量,研究发现宽叶腹水草粗提物和纯化物均抑制了NO的分泌量,且纯化物的抑制作用强于粗提物,验证了宽叶腹水草粗提物和纯化物具有抗炎作用,且纯化物的抗炎效果强于粗提物。

关键词：宽叶腹水草黄酮类化合物微波辅助提取大孔吸附树脂抗氧化活性抑菌活性抗炎活性

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