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衣康酸二甲酯对树突状细胞分泌促炎因子以及实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠辅助性T细胞17的影响

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眼科新进展 2024年第5期44卷 346-349页

作者：王加利杨超陈思思张开朗魏瑞华粘红天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所国家眼耳鼻喉疾病临床医学研究中心天津市分中心天津市视网膜功能与疾病重点实验室天津市300384

目的探究衣康酸二甲酯(DMI)对树突状细胞(DCs)分泌促炎因子的作用,并初步研究其对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠光感受器间维生素A类结合蛋白1-20(IRBP_(1-20))特异性辅助性T细胞17(Th17)的影响。方法分离C57BL/6J小鼠双侧股骨和... 详细信息

目的探究衣康酸二甲酯(DMI)对树突状细胞(DCs)分泌促炎因子的作用,并初步研究其对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠光感受器间维生素A类结合蛋白1-20(IRBP_(1-20))特异性辅助性T细胞17(Th17)的影响。方法分离C57BL/6J小鼠双侧股骨和胫骨得到骨髓细胞,利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4将其定向诱导分化为骨髓来源的DCs。诱导分化6 d,将细胞分为DMI组和PBS组,分别用250μmol·L^(-1)DMI及等量的磷酸盐缓冲液(PBS)预处理3 h后,每组加入100μg·L^(-1)脂多糖(LPS)刺激24 h。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组DCs中促炎因子IL-6、IL-1β和IL-23 mRNA相对表达量。采用IRBP_(1-20)、弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA主动免疫小鼠构建EAU模型,免疫后13 d,将分离的EAU小鼠脾脏及淋巴结T细胞与PBS或DMI处理的DCs在含有IRBP_(1-20)的培养基中共培养,并向Th17方向极化。流式细胞仪检测共培养细胞中Th17细胞比例。ELISA检测共培养上清液中IL-17水平。qRT-PCR检测共培养细胞中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、IL-17、IL-23R和GM-CSF mRNA相对表达量。结果qRT-PCR检测结果显示,DMI组DCs中IL-6、IL-1β和IL-23 mRNA相对表达量均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(均为P性Th17细胞反应。

关键词：衣康酸二甲酯树突状细胞辅助性T细胞17 实验性自身免疫性葡萄膜炎

实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）树鼩模型的建立及其初步应用

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实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）树鼩模型的建立及其初步应用

作者：胡开娇重庆医科大学

学位级别：硕士

研究背景与目的自身免疫性葡萄膜炎是世界范围内的一种常见致盲性眼病,其发生与免疫反应紊乱有关。尽管葡萄膜炎狭义地被认为是虹膜、睫状体及脉络膜的炎症,但实际上是指包含视网膜、脉络膜、玻璃体、视神经、巩膜和角膜等整个眼球组织... 详细信息

研究背景与目的自身免疫性葡萄膜炎是世界范围内的一种常见致盲性眼病,其发生与免疫反应紊乱有关。尽管葡萄膜炎狭义地被认为是虹膜、睫状体及脉络膜的炎症,但实际上是指包含视网膜、脉络膜、玻璃体、视神经、巩膜和角膜等整个眼球组织的炎症,特别是视网膜和脉络膜是其受累主要的部位。既往研究发现,在自身免疫性葡萄膜炎中,外来抗原或视网膜抗原等危险信号激活天然免疫细胞（如眼局部的小胶质细胞,外周单核巨噬细胞和树突状细胞等）,导致血眼屏障破坏,激发眼组织内获得性免疫反应导致眼内炎症和眼组织破坏,由此导致患者视力损伤是眼视科学研究的重要课题。由于受伦理道德和法律限制,难以直接利用人体深入研究葡萄膜炎的发病机制和防治策略。因此,实验性自身免疫性葡萄膜炎（Experimental Autoimmune Uveoretinitis,EAU）动物模型则为人类葡萄膜炎发病机制和治疗防治研究提供了有效手段。目前广泛用于人类自身免疫性葡萄膜炎的动物模型主要为由视网膜抗原如光感受器间维生素A类结合蛋白（Interphotoreceptor retinoid-binging protein,IRBP）诱导易感Lewis大鼠、B10RⅢ小鼠和C57BL/6J小鼠而形成的实验性自身免疫性葡萄膜炎。例如,应用源于人IRBP1169-1191抗原肽R14可诱导Lewis大鼠呈现依赖Th1细胞免疫反应的慢性自发复发-消退性葡萄膜炎。然而,在Lewis大鼠眼组织内缺乏色素上皮细胞,大鼠EAU模型不能反映人类色素上皮细胞在葡萄膜炎中的参与作用;在B10RⅢ小鼠和C57BL/6J小鼠EAU模型中,虽然B10RIII小鼠和C57BL/6J小鼠EAU表现人类葡萄膜炎的主要特征,但在这两种小鼠的视网膜组织结构中缺乏人类主要由视锥细胞组成的视网膜中央凹,无法模拟人类中央凹视锥细胞在自身免疫反应中对视力损伤的作用。树鼩作为一种新型的模式动物,与人类在生理机能、生化代谢和基因组学等方面的相似性远高于大鼠、小鼠等实验动物,被认为是灵长类动物的近亲。另外,树鼩作为昼行性动物,在视觉系统、色彩分辨能力和眼睛构造等方面比啮齿类更接近于人类。如在眼组织解剖结构方面,树鼩视网膜光感受器细胞由具有高达95%的视锥细胞和5%的视杆细胞组成视网膜,而这些高密度的视锥细胞位于视网膜中央,类似于人类视网膜中央凹,提示树鼩将可能成为研究人类葡萄膜炎的潜在可靠的模式动物。在我们课题组前期研究中,已应用人R14和树鼩IRBP1197-1211肽段初步建立起EAU树鼩模型,但其生物学特征和干预应用有待进一步研究。因此,我们以前期建立的树鼩IRBP1197-1211抗原肽诱导的树鼩EAU作为对照,进行下述三方面内容研究:（1）筛选诱导树鼩EAU发生的其他可能抗原和免疫条件:在添加或不添加百日咳毒素的两种条件下,应用包含不同浓度的树鼩IRBP1177-1191（R16）、树鼩IRBP1169-1191（R14）、牛R14、牛R16和树鼩IRBP1197-1211的抗原肽弗式完全佐剂（Complete Freund’s adjuvant,CFA）乳化物经皮下免疫树鼩,免疫后使用裂隙灯显微镜和眼底镜观察眼内炎症发生,在炎症高峰期或仁慈终点收集眼球进行病理组织学评价,观察眼组织病理损伤,筛选建立树鼩EAU发生的诱导条件;（2）将筛选出的抗原通过低,中,高四种浓度（50μg低剂量,300μg或400μg中剂量,800μg高剂量）分别免疫树鼩,通过临床表现、组织病理学切片、苏木素伊红（H＆E）染色、免疫组织化学染色、转录组RNA测序（RNA-seq）、T淋巴细胞增殖、流式荧光微球等技术,鉴定和评价树鼩EAU的临床表现、组织病理学损伤、免疫表型以及基因表达谱等特征;（3）应用RNA-seq测序筛选出的上调表达差异基因RGS4抑制剂CCG 203769和中成药双氢青蒿素对EAU模型的干预研究,评价其应用效果。通过上述研究,以期阐明实验性自身免疫性葡萄膜炎树鼩模型的创建条件、模型特征和应用效果,为葡萄膜炎的发病机制和防治研究提供一种新的理想策略。第一部分筛选建立树鼩EAU模型的诱导条件方法1.应用低剂量50μg和100μg的树鼩R14、树鼩R16、牛R16共三种抗原肽,经包含1mg/ml或5mg/ml结核分枝杆菌（H37Ra）的CFA形成乳化物200μl经皮下免疫树鼩,腹腔不注射百日咳毒素（Pertussis Toxin,PTX）;2.应用50μg低剂量、800μg高剂量的树鼩R14、树鼩R16、牛R14三种抗原肽,经包含3.5–5 mg/ml结核分枝杆菌的CFA形成乳化物200μl通过皮下免疫树鼩,腹腔注射1000 ng的PTX。同时,应用课题组前期筛选出的树鼩IRBP1197-1211多肽按相同剂量和免疫方式诱导树鼩作为阳性对照。免疫后7天通过裂隙灯显微镜和手持式眼底镜每周两次观察树鼩眼前段和眼底的炎症发生及进展规律。进一步对有临床表

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎慢性树鼩差异表达基因代谢途径小胶质细胞 T细胞反应 G蛋白信号转导调节因子4

整合网络药理学和动物实验探讨藏族药六锐胶囊干预实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的药效机制

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中国中药杂志 2022年第24期47卷 6687-6695页

作者：边猛周政朱春胜聂安政李晓萍郑州大学第一附属医院河南郑州450000

该研究通过整合网络药理学和动物实验研究藏族药六锐胶囊干预实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis, EAU)的作用机制,为深入探讨六锐胶囊治疗EAU的药效机制提供实验依据与参考。结合中医药百科全书数据库、BATMAN-... 详细信息

该研究通过整合网络药理学和动物实验研究藏族药六锐胶囊干预实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis, EAU)的作用机制,为深入探讨六锐胶囊治疗EAU的药效机制提供实验依据与参考。结合中医药百科全书数据库、BATMAN-TCM数据库与文献筛选六锐胶囊的活性成分与靶点;借助GEO、GeneCards、OMIM、TTD数据库检索EAU相关靶点,并将药物靶点与疾病靶点取交集;运用STRING数据库进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction, PPI)网络分析;借助g:Profiler数据库进行GO(Gene Ontology)富集分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析。此外,通过光感受器间维生素A类结合蛋白(interphotoreceptor retinoid-binding protein, IRBP)诱导塑造EAU大鼠模型,给予六锐胶囊进行干预,通过观察各组大鼠眼前节炎性反应、大鼠视网膜组织病理形态及采用实时荧光定量PCR(q-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测六锐胶囊治疗EAU的作用机制。网络药理学分析预测了六锐胶囊与EAU的共同靶点51个;GO富集分析和KEGG分析结果主要涉及白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)信号通路、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路、脂质体受体等生物学过程与通路。动物实验结果提示成功构建EAU大鼠模型;与空白组比较,模型组大鼠眼前节的炎性反应明显,眼组织DLL4(delta-like 4)、Notch1、IL-17、TNF-α蛋白与基因表达升高。与模型组比较,六锐胶囊能减轻大鼠眼前节与视网膜的炎性反应,降低眼组织DLL4、Notch1、IL-17、TNF-α蛋白与基因表达。藏族药六锐胶囊可降低眼组织DLL4/Notch1/IL-17信号通路相关基因与蛋白表达,减轻眼部炎性反应,可能是其治疗EAU的效用机制之一。

关键词：六锐胶囊实验性自身免疫性葡萄膜炎网络药理学药效机制

实验性自身免疫性葡萄膜炎青紫蓝兔模型的建立及其特点比较

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中国中医眼科杂志 2023年第6期33卷 506-511页

作者：张欣欣谢立科郝晓凤中国中医科学院眼科医院北京100040

目的评价2种方法诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)青紫蓝兔模型的发生过程及特点。方法42只青紫蓝兔随机分为对照组(CG)6只、模型1组(MG1)18只、模型2组(MG2)18只。CG组不做任何处理;MG1组使用结核分枝杆菌H37Ra与弗氏完全佐剂的混悬... 详细信息

目的评价2种方法诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)青紫蓝兔模型的发生过程及特点。方法42只青紫蓝兔随机分为对照组(CG)6只、模型1组(MG1)18只、模型2组(MG2)18只。CG组不做任何处理;MG1组使用结核分枝杆菌H37Ra与弗氏完全佐剂的混悬液皮下注射进行预先免疫,19 d后右眼玻璃体腔注射结核分枝杆菌H37Ra建立EAU模型;MG2组采用牛血清白蛋白(BSA)耳缘静脉及玻璃体腔二次注射法建立EAU模型。所有动物分别于完成免疫后第1、4、7、14、21、28天行裂隙灯显微镜、前置镜、眼前节照相、眼B超、眼底照相观察眼部情况,根据自拟的EAU青紫蓝兔模型症状评分标准进行症状评分。结果(1)发病时间与周期:MG1组所有青紫蓝兔在完成诱导后第1天均初发炎症,第4天炎症达到高峰,第7天开始逐渐消退,症状持续4周以上。MG2组13只(72.22%)青紫蓝兔在完成诱导后第1天初发炎症,第4天炎症达到高峰,之后炎症开始逐渐消退,以眼前段炎症为主,症状持续4周以上;其余5只(27.78%)初发症状时间及症状高峰时间不一。(2)症状表现:2组青紫蓝兔眼部表现均为混合充血、角膜水肿、前房炎症及渗出、瞳孔受损、玻璃体混浊、视网膜出血。(3)症状评分:与CG组比较,MG1、MG2组青紫蓝兔各时间眼部症状评分均升高(MG1:t_(1d)=12.550,t_(4d)=12.620,t_(7d)=14.090,t_(14d)=11.610,t_(21d)=12.530,t_(28d)=41.470,均P=0.000。MG2:t_(1d)=2.600,P=0.016;t_(4d)=7.293,t_(7d)=8.354,t_(14d)=7.410,t_(21d)=6.843,t_(28d)=7.397,均P=0.000);与MG1组比较,MG2组青紫蓝兔诱导后第1、4天眼部症状评分降低(t_(1d)=4.062,P=0.000;t_(4d)=2.359,P=0.024),差异均有统计学意义。其余时间2组间眼部症状评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论2种EAU青紫蓝兔模型其眼部表现与人类葡萄膜炎相似,MG1的初发炎症时间、炎症高峰时间、炎症严重程度及炎症变化趋势均一致。MG1较MG2的稳定性更好,可重复性更强,可作为理想的全葡萄膜炎研究的动物模型。

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎青紫蓝兔动物模型表型

hUMSCs外分泌蛋白治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎模型大鼠的机制初探

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中国病理生理杂志 2023年第11期39卷 2053-2059页

作者：刘珏谢希婷沈树浩王颖薇穆亚君陈剑周清暨南大学附属第一医院广东广州510630 深圳深东爱尔眼科医院广东深圳518116

目的:探讨腹腔注射人脐带间充质干细胞外分泌蛋白(hUMSCs-S)治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型大鼠的可能性及其相关作用机制。方法:6~8周龄Lewis大鼠72只,用随机数字表分方法均分为3组,分别为正常对照(CTRL)组、EAU模型组及hUMSC... 详细信息

目的:探讨腹腔注射人脐带间充质干细胞外分泌蛋白(hUMSCs-S)治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型大鼠的可能性及其相关作用机制。方法:6~8周龄Lewis大鼠72只,用随机数字表分方法均分为3组,分别为正常对照(CTRL)组、EAU模型组及hUMSCs-S治疗组,每组24只。EAU组与hUMSCs-S组大鼠采用光感受器间维生素A结合蛋白(IRBP)联合弗氏完全佐剂建立EAU模型,hUMSCs-S组大鼠在建模的同时予以腹腔注射hUMSCs-S,EAU组及CTRL组大鼠均腹腔注射等量PBS。裂隙灯显微镜拍摄记录各组大鼠眼前段情况,根据Caspi评分标准评价眼前段炎症程度;于免疫后第7天(初发期)、14天(高峰期)、21天(恢复期)取眼球组织制成石蜡切片进行HE染色、免疫组化及免疫荧光染色,分别用于眼球组织病理学评分、前房浸润细胞情况评估,观察眼球组织中CD3^(+)T细胞及紧密连接蛋白ZO-1的表达。无菌操作下采腹主动脉血,制备血清,行ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素10(IL-10)和IL-17的浓度。结果:(1)通过裂隙灯显微镜观察和比较,EAU组大鼠出现明显眼前段炎症反应,在建模后第11~17天,hUMSCs-S治疗有降低眼前段Caspi评分的作用(P免疫组化及免疫荧光染色结果显示,hUMSCs-S组大鼠虹膜睫状体、前房和视网膜中CD3^(+)T细胞浸润较EAU组减少,视网膜及视网膜色素上皮(RPE)层ZO-1表达量较EAU组增加;(4)ELISA法检测大鼠外周血血清IL-17及IL-10浓度结果显示,与EAU组相比,hUMSCs-S组大鼠外周血IL-17表达下降、IL-10表达增加(P<0.05)。结论:hUMSCs外分泌蛋白对EAU模型大鼠治疗有效;腹腔注射hUMSCs外分泌蛋白可影响EAU大鼠外周血中炎症因子表达,减少眼内炎症细胞浸润,减轻RPE层紧密连接蛋白的破坏程度。

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎人脐带间充质干细胞外分泌蛋白血-视网膜屏障

白细胞介素-23受体过表达对实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

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中华眼底病杂志 2022年第5期38卷 389-395页

作者：吴怡媛陈思思杨超魏瑞华粘红天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所国家眼耳鼻喉疾病临床医学研究中心天津市分中心天津市视网膜功能与疾病重点实验室天津300384

目的初步探讨白细胞介素(IL)-23受体(IL-23R)过表达对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型小鼠辅助性T细胞17(Th17细胞)/调节性T细胞(Treg细胞)平衡的影响。方法8周龄雌性C57BL/6J小鼠12只,随机分为LV-Ctrl组、LV-IL-23R组,每组各6只。... 详细信息

目的初步探讨白细胞介素(IL)-23受体(IL-23R)过表达对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型小鼠辅助性T细胞17(Th17细胞)/调节性T细胞(Treg细胞)平衡的影响。方法8周龄雌性C57BL/6J小鼠12只,随机分为LV-Ctrl组、LV-IL-23R组,每组各6只。两组小鼠经尾静脉分别注射LV-Ctrl、LV-IL-23R慢病毒;注射后7 d采用光感受器间维生素A类结合蛋白1-20主动免疫构建EAU小鼠模型。免疫后13 d开始,每2天使用间接检眼镜观察小鼠眼底并进行临床评分。免疫后30 d,苏木精-伊红染色观察小鼠视网膜组织病理学改变。酶联免疫吸附测定检测两组小鼠血清中IL-17水平;流式细胞仪检测Th17细胞和Treg细胞比例;实时荧光定量聚合酶链反应检测IL-23R、IL-17、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、IL-10和叉头状转录因子p3(Foxp3)mRNA相对表达量。组间比较采用重复测量方差分析、独立样本Mann-Whitney U检验和独立样本t检验。结果与LV-Ctrl组比较,LV-IL-23R组小鼠视网膜炎症反应更重。免疫后13 d,LV-IL-23R组、LV-Ctrl组小鼠眼底炎症评分差异无统计学意义(t=-2.001,P=0.058);免疫后15~29 d,LV-IL-23R组小鼠眼底炎症评分均高于LV-Ctrl组,差异有统计学意义(t=-4.429、-6.578、-7.768、-10.183、-6.325、-7.304、-4.841、-6.872,P性细胞浸润增多,视网膜结构破坏更为严重,组织病理学评分显著升高,差异有统计学意义(t=-4.339,P=0.001)。与LV-Ctrl组比较、LV-IL-23R组小鼠脾脏中IL-23R mRNA相对表达量显著升高,差异有统计学意义(Z=2.087,P=0.037);T细胞中IL-17、RORγt mRNA相对表达量增加,IL-10、Foxp3 mRNA相对表达量降低,差异均有统计学意义(t=-6.313、-5.922、4.844、7.572,P=0.003、0.004、0.008、0.002)。与LV-Ctrl组比较、LV-IL-23R组小鼠血清中IL-17水平明显升高,差异有统计学意义(t=-5.423,P=0.002);脾脏和淋巴结中Th17细胞比例明显升高,Treg细胞比例显著降低,差异有统计学意义(t=-4.290、3.700,P=0.002、0.006)。结论IL-23R过表达可促使EAU小鼠的Th17/Treg失衡,加重EAU临床及病理表现。

关键词： Th17细胞 T淋巴细胞,调节性实验性自身免疫性葡萄膜炎白细胞介素-23受体

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实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的发病特点

中华实验眼科杂志 2014年第7期32卷 588-592页

作者：刘正峰崔彦李姣滕达唐凯毕宏生山东中医药大学济南250002 山东中医药大学附属眼科医院山东中医药大学眼科研究所济南250002

背景 Lewis大鼠是建立实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）动物模型的常用种系,对其发病特点,尤其是EAU大鼠眼部超微结构改变的研究尚未见报道. 目的观察EAU大鼠的发病体征及其眼部超微结构的改变. 方法选取SPF级6～8周龄雌性Lewis大鼠18... 详细信息

背景 Lewis大鼠是建立实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）动物模型的常用种系,对其发病特点,尤其是EAU大鼠眼部超微结构改变的研究尚未见报道. 目的观察EAU大鼠的发病体征及其眼部超微结构的改变. 方法选取SPF级6～8周龄雌性Lewis大鼠18只,采用随机数字表法随机分为对照组6只和模型组12只.模型组大鼠后肢足底、两侧腹壁和躯干上皮下各注射含有光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP,1177-1191）和结核菌素（TB）的完全弗氏佐剂（CFA）乳化液,对照组大鼠不作处理.注射后观察两组大鼠饮食、体温和活动情况,每天裂隙灯显微镜下观察大鼠眼部炎症表现,于免疫后12d获取大鼠眼组织标本,对虹膜、睫状体和视网膜进行常规组织病理学检查,并分别在扫描电子显微镜和透射电子显微镜下观察虹膜、睫状体和视网膜的超微结构改变.结果模型组大鼠免疫后采食量为（190.00± 18.03）g,明显少于对照组的（285.33±28.02）g,差异有统计学意义（t=4.955,P=0.012）;模型组和对照组大鼠的饮水量分别为（241.67±18.56）ml和（289.67±18.18）ml,差异有统计学意义（t=3.201,P=0.033）;模型组大鼠体温升高,精神倦怠.裂隙灯显微镜下观察发现,模型组大鼠免疫后6d出现虹膜充血、前房积脓和瞳孔膜闭,免疫后12d眼部炎症最严重,炎症评分为（3.83±0.41）分,而对照组大鼠眼前节未见异常.组织病理学检查发现,模型组大鼠前房、虹膜、睫状体组织和玻璃体腔内均可见大量淋巴细胞、中性粒细胞和单核巨噬细胞浸润.扫描电子显微镜下可见模型组大鼠虹膜肌纤维粗细不均,睫状体上皮表面粗糙及RPE细胞绒毛疏松.透射电子显微镜下观察可见,模型组大鼠虹膜单核巨噬细胞浸润,睫状体上皮细胞膜褶皱蓬松及排列紊乱,视网膜Müller细胞中有髓样小体,RPE细胞中有线粒体空泡出现,而对照组大鼠虹膜、睫状体及视网膜的形态结构均未发现异常.结论用含IRBP（1177-1191）和TB的CFA乳化液诱导的EAU大鼠机体处于自身免疫炎症状态,其眼部组织形态学和超微结构的改变充分反映了EAU的炎症表现特征.

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎炎症超微结构

实验性自身免疫性葡萄膜炎的中医药干预研究进展

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现代中西医结合杂志 2022年第7期31卷 1015-1019页

作者：王琦妙张远龙庞雅菊天津市眼科医院/天津市眼科学与视觉科学重点实验室天津300020

葡萄膜炎是一类严重致盲的眼病,自身免疫是其主要致病原因之一,因其难治、病程久、反复发作等特点,一直以来困扰着患者及医生。实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)是研究人类自身免疫性葡萄膜炎的实验动物... 详细信息

葡萄膜炎是一类严重致盲的眼病,自身免疫是其主要致病原因之一,因其难治、病程久、反复发作等特点,一直以来困扰着患者及医生。实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)是研究人类自身免疫性葡萄膜炎的实验动物模型,通过用视网膜抗原在易感动物中诱导,临床特征明显、可重复性好,易于追踪研究与指标量化,是药物干预治疗评估的理想模型[1-2]。

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎中药穴位埋线

短期高浓度葡萄糖摄入对小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎发展的作用

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眼科新进展 2022年第3期42卷 210-213页

作者：郭晓宇陈震邢怡桥武汉大学人民医院眼科中心湖北省武汉市430060

目的探索短期高浓度葡萄糖摄入对小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展的促进作用。方法选取健康SPF级6~8周龄小鼠38只,随机分为模型对照组(EAU组)和高糖模型组(GLU组),每组19只小鼠。GLU组小鼠从造模前14 d开始给予200 g·L^(-1)葡... 详细信息

目的探索短期高浓度葡萄糖摄入对小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展的促进作用。方法选取健康SPF级6~8周龄小鼠38只,随机分为模型对照组(EAU组)和高糖模型组(GLU组),每组19只小鼠。GLU组小鼠从造模前14 d开始给予200 g·L^(-1)葡萄糖溶液饮水直至处死,EAU组小鼠给予正常饮水,同时保证EAU组和GLU组小鼠每日摄入饲料量相同。造模后14 d,用裂隙灯对各组小鼠进行临床评分;分离小鼠眼球组织,HE染色进行各组小鼠组织病理学评分;分离小鼠视网膜组织,QT-PCR检测各组小鼠视网膜IL^(-1)7和IFN-γ的相对表达量;分离小鼠眼球和血清,ELISA检测各组小鼠眼球和血清中IL^(-1)7和IFN-γ的蛋白水平;分离脾脏,流式细胞仪检测各组小鼠脾脏中Th17细胞占CD4+细胞的比例。结果造模后14 d,GLU组小鼠临床评分为(3.00±0.27)分,高于EAU组[(1.58±0.25)分],差异有统计学意义(P=0.002);GLU组小鼠组织病理学评分为(3.08±0.23)分,高于EAU组[(1.88±0.30)分],差异有统计学意义(P=0.008)。QT-PCR结果显示,GLU组小鼠视网膜IL^(-1)7和IFN-γ的相对表达量均高于EAU组,IL^(-1)7表达差异有统计学意义(P=0.017),IFN-γ表达差异无统计学意义(P=0.081)。ELISA结果显示,GLU组小鼠眼球和血清IL^(-1)7含量分别为(102.70±8.32)ng·L^(-1)、(113.20±6.80)ng·L^(-1),均高于EAU组[(78.23±5.79)ng·L^(-1)、(82.34±2.48)ng·L^(-1)],差异均有统计学意义(P=0.030、0.002),而两组小鼠眼球和血清中IFN-γ水平差异均无统计学意义(P=0.781、0.589)。流式细胞仪检测结果显示,GLU组小鼠脾脏Th17细胞占CD4+细胞比例为(2.15±0.06)%,高于EAU组[(1.81±0.06)%],差异有统计学意义(P=0.007)。结论短期高浓度葡萄糖摄入可以加重EAU小鼠模型的炎症,增加眼内IL^(-1)7的表达,其可能与外周血中Th17细胞的过度激活有关。

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎葡萄糖白细胞介素-17 辅助性T细胞17