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临床与病理杂志 2017年第2期37卷 366-371页

作者：齐彩琴宗丽莉张静吴起县人民医院神经内科陕西吴起717600

目的:观察不同浓度红景天苷(salidroside)对实验性自身免疫脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyel it is,EAE)小鼠模型的作用,并探讨初步的作用机制。方法:建立实验性自身免疫性脊髓炎小鼠模型,免疫当天起给予高中低剂量的红... 详细信息

目的:观察不同浓度红景天苷(salidroside)对实验性自身免疫脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyel it is,EAE)小鼠模型的作用,并探讨初步的作用机制。方法:建立实验性自身免疫性脊髓炎小鼠模型,免疫当天起给予高中低剂量的红景天苷灌胃,1次/d,共给药35 d。给药完成后,进行神经功能评分,TUNEL染色检测脊髓髓鞘组织的细胞凋亡情况,ATP水平检测试剂盒检测脊髓组织ATP含量水平,免疫印迹法检测线粒体内细胞色素c氧化酶(mito cyto-c)、胞浆中细胞色素c氧化酶(cyto cyto-c)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cas-3)与活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(cleaved cas-9)蛋白表达水平。结果:红景天苷降低EAE小鼠的神经功能评分,后延发病时间;随红景天苷浓度升高,脊髓髓鞘组织的细胞凋亡数逐渐降低,脊髓组织ATP水平显著升高;EAE小鼠脊髓组织细胞胞浆中的cyto-c蛋白表达显著升高,同时cleaved cas-3与cleaved cas-9蛋白表达显著升高,红景天苷干预后,胞浆中cyto-c蛋白表达显著下降,同时cleaved cas-3与cleaved cas-9蛋白表达下降。结论:红景天苷对缓解实验性自身免疫性脊髓炎症状具有良好的效果,可能通过抑制内源性线粒体通路而降低脊髓组织细胞的凋亡而发挥作用。

关键词：红景天苷实验性自身免疫性脊髓炎线粒体凋亡

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丹参酮ⅡA对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠大脑GFAP和Caspase-3表达的影响

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神经疾病与精神卫生 2016年第1期16卷 50-54,F0003页

作者：闫俊杨雪冯娟中国医科大学附属盛京医院神经内科 110004

目的观察丹参酮ⅡA对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠的治疗作用以及对大脑中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）表达的影响。方法把40只大鼠随机分成4组，空白对照组（Naive组）、EAE高剂量用药组（... 详细信息

目的观察丹参酮ⅡA对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠的治疗作用以及对大脑中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）表达的影响。方法把40只大鼠随机分成4组，空白对照组（Naive组）、EAE高剂量用药组（50mg／kg，TSIIA—H纽）、EAE低剂量用药组（25mg／kg，TSIIA—L组）和EAE溶剂对照组（Vehicle组）。EAE模型诱导后每天对大鼠进行神经功能评分和体质量测量。发病高峰期（第18天）处死大鼠并取材，分别进行HE染色和劳克坚牢蓝（LFB）染色检测大鼠脑组织炎性浸润改变和脊髓脱髓鞘情况。采用免疫组化法和免疫印迹法（West-ernBlot）检测各组大鼠脑组织中GFAP和Caspase--3的表达水平。结果用药后TSⅡA—H组和TsⅡA—L纽大鼠临床症状好转，大脑炎性细胞浸润减少，脊髓脱髓鞘的改变减轻，大脑中GFAP和Caspase--3的表达水平下降。结论丹参酮ⅡA对EAE大鼠有治疗作用，其作用机制可能是通过下调GFAP和Caspase--3的表达来参与炎性反应和凋亡过程的调节。

关键词：多发性硬化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 实验性自身免疫性脊髓炎丹参酮ⅡA 胶质纤维酸性蛋白

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口服盐酸法舒地尔治疗小鼠EAE有效性初探

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中国病理生理杂志 2013年第11期29卷 2060-2065页

作者：张辉张海飞李艳花刘春云尉杰忠丁智斌杨兴旺杨琬芳李俊莲冯前进丰玲肖保国马存根山西医科大学第一临床医学院神经内科山西太原030001 山西大同大学脑科学研究所山西大同037009 大同市第五人民医院神经科山西大同037009 复旦大学华山医院神经病学研究所上海200025 山西中医学院第三中医院脑病科卫生部国家临床重点专科山西太原030024

目的:探讨盐酸法舒地尔口服对实验性自身免疫性脊髓炎(EAE)的治疗效果及机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35肽(MOG35-55)免疫雌性C57BL/6小鼠建立慢性EAE模型,随机分为EAE模型组和法舒地尔治疗组。免疫后第3天,对照组予以灌胃... 详细信息

目的:探讨盐酸法舒地尔口服对实验性自身免疫性脊髓炎(EAE)的治疗效果及机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35肽(MOG35-55)免疫雌性C57BL/6小鼠建立慢性EAE模型,随机分为EAE模型组和法舒地尔治疗组。免疫后第3天,对照组予以灌胃生理盐水,治疗组予以法舒地尔,每天1次至免疫后第27天。比较2组小鼠体重变化和临床评分。第28天处死动物,脊髓冰冻切片进行髓鞘染色和HE染色,流式细胞术检测脾细胞M1型和M2型巨噬细胞的表型,ELISA法检测脾细胞培养上清液白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放。结果:法舒地尔口服推迟EAE发病时间,减缓EAE症状,减少体重下降,减少EAE髓鞘脱失和中枢神经系统炎症浸润,抑制M1型巨噬细胞CD16/32表达,增加M2型巨噬细胞CD206和IL-10表达,同时抑制炎症细胞因子IL-1β和TNF-α的释放。结论:法舒地尔口服具有良好的治疗效果,可明显减轻中枢神经系统的髓鞘脱失和炎症病灶。其作用机制可能使M1型巨噬细胞向M2型转化,从而抑制炎症细胞因子释放。

关键词：法舒地尔口服实验性自身免疫性脊髓炎巨噬细胞细胞因子类

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盐酸法舒地尔口服治疗EAE有效性初探

盐酸法舒地尔口服治疗EAE有效性初探

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作者：张辉山西医科大学

学位级别：硕士

目的：本实验探讨口服盐酸法舒地尔（Fasudil）对MOG35-55免疫诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）小鼠模型的治疗效果及其可能的作用机制，为临床上Fasudil口服途径的推广和治疗多发性... 详细信息

目的：本实验探讨口服盐酸法舒地尔（Fasudil）对MOG35-55免疫诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）小鼠模型的治疗效果及其可能的作用机制，为临床上Fasudil口服途径的推广和治疗多发性硬化（multiple sclerosis, MS）提供可靠的理论和实验依据。方法：采用MOG35-55诱导雌性C57BL/6小鼠建立慢性EAE模型，随机分为EAE生理盐水对照组和Fasudil治疗组。免疫后第三天，对照组予以灌胃生理盐水，治疗组予以Fasudil，每天一次至免疫后27天。比较两组小鼠体重变化和临床评分。第28天处死动物，脊髓冰冻切片进行髓鞘染色和HE染色，流式细胞术检测脾细胞M1型和M2型巨噬细胞的表达，ELISA法检测脾细胞培养上清液IL-10、IL-1β、TNF-α因子的释放。实验所得数据采用统计分析软件GraphpadPrism5.0进行分析处理。结果：1.与EAE对照小鼠比较，口服Fasudil可推迟EAE的发病，减轻了EAE的症状。口服Fasudil组体重减轻程度、起病时间均延长（P＜0.01，P＜0.05）。 2.口服Fasudil抑制了EAE中枢神经系统炎性细胞的侵润和髓鞘脱失。HE染色可见小鼠脊髓白质区内均浸润有不同程度的炎性细胞。髓鞘染色可见小鼠脊髓白质区均有不同程度的髓鞘脱失。口服Fasudil明显抑制炎性细胞的侵润和髓鞘脱失。 3．与EAE组相比，口服Fasudil组可下调外周免疫系统中CD16/32阳性巨噬细胞的表达，上调CD206、IL-10阳性巨噬细胞的表达（P＜0.05）。 4. Fasudil口服可诱导抗炎细胞因子IL-10的释放，抑制炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的释放（P＜0.05）。结论：口服Fasudil对EAE小鼠具有良好的治疗效果，Fasudil口服可减轻中枢神经系统的炎性细胞侵润和髓鞘脱失，下调CD16/32阳性巨噬细胞的表达，上调CD206、IL-10阳性巨噬细胞的表达，抑制炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的释放，促进抗炎性细胞因子IL-10的释放。Fasudil的疗效机制可能与抑制中枢神经Rho激酶活性，使M1型巨噬细胞向M2型转化，进而抑制中枢神经系统的炎性浸润和髓鞘脱失，最终抑止EAE的发生和发展。

关键词：盐酸法舒地尔口服途径巨噬细胞实验性自身免疫性脊髓炎细胞因子

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帕歌斯对EAE大鼠脊髓中NFP及CCL5表达的影响

帕歌斯对EAE大鼠脊髓中NFP及CCL5表达的影响

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作者：邓桂芳南华大学

学位级别：硕士

目的：观察药物帕歌斯（Pagosid,PGS）的干预对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）大鼠脊髓中神经丝蛋白（neurofilament protein，NFP）及CCL5（CC Chemokine Ligand5）表达的影响，探讨其对EAE是否有神经保护作用及可能的作用机制，为MS的临床治疗提供新思路和实验依据。方法：78只成年雌性Wistar大鼠随机分为5组：正常组（N组）、免疫诱导组（EAE组）、免疫诱导组+小剂量PGS组（LPGS组）、免疫诱导组+大剂量PGS组（HPGS组）、免疫诱导组+激素组（PAT组）。使用自制完全免疫抗原（GPSCH-CAF）诱导EAE模型。N组不作任何处理，EAE组造模后不予给药，LPGS组、HPGS组分别予以PGS20mg/kg· d、100mg/kg· d灌胃，PAT组予以醋酸泼尼松8mg/kg·d灌胃。比较各组大鼠的发病率并进行神经功能评分，并分别于第7天、第14天、第21天处死后取脊髓行Bielschowsky银染色、NFP及CCL5免疫组化染色。结果：1.各组实验大鼠的发病率：EAE组发病率为88.89%;PGS干预组及PAT干预组发病率较EAE组降低（P免疫诱导后第7天、第14天、第21天分别予以评分，在第14、21天，LPGS组、HPGS组及PAT组神经功能评分均低于EAE组;第14天HPGS组、PAT组神经功能评分低于LPGS组（P0.05）。3.组织病理学：Bielschowsky银染色示N组轴索大多走形方向一致，结构紧密，连续性好，粗细较均匀，其余各组都不同程度地出现轴索改变，如结构紊乱，连续性破坏，空泡样缺失、断裂。4.免疫组织化学染色：4.1大鼠脊髓中NFP的表达：染色结果示五组均有NFP阳性表达，其中N组表达最多;EAE组NFP阳性表达较同期N组明显减少，而HPGS组、LPGS组、PAT组药物干预后，NFP阳性表达神经元数较同期EAE组增多，且差异有统计学意义（P0.05）。4.2大鼠脊髓中CCL5的表达：染色结果示除N组外，其余四组均有CCL5阳性表达，其中EAE组CCL5阳性表达较同期其他组明显增多;药物干预组CCL5阳性表达量有所减少，且HPGS组、PAT组CCL5表达量较同期LPGS组为低，差异有统计学意义（P0.05）。结论：1.帕歌斯的干预可减低EAE大鼠的发病率，改善其轴索损伤程度;其干预效应与剂量有关。2.帕歌斯的干预对EAE大鼠的神经保护作用机制可能与上调NFP、下调CCL5有关。

关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脊髓炎帕歌斯神经丝蛋白趋化因子CCL5

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新型Rho激酶抑制剂FSD-C10经鼻治疗EAE有效性初探

新型Rho激酶抑制剂FSD-C10经鼻治疗EAE有效性初探

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山东省2013年神经内科学学术会议暨中国神经免疫大会2013

作者：李艳花尉杰忠刘春云张辉张海飞张鑫晨杨兴旺杨琬芳李俊莲冯前进丰玲肖保国马存根山西大同大学脑科学研究所国家卫生部临床重点专科(第三中医院脑病科) 山西中医学院复旦大学华山医院神经病学研究所

目的:筛选新型的Rho激酶抑制剂,盐酸法舒地尔异构体FSD-10经鼻途径,小剂量治疗实验性自身免疫脑炎(EAE)的有效性和可能的作用机理,为今后进一步深入研发和可能的临床应用提供实验依据。方法:成年雌性C57BL/6小鼠用MOG肽免疫制作慢性EAE... 详细信息

目的:筛选新型的Rho激酶抑制剂,盐酸法舒地尔异构体FSD-10经鼻途径,小剂量治疗实验性自身免疫脑炎(EAE)的有效性和可能的作用机理,为今后进一步深入研发和可能的临床应用提供实验依据。方法:成年雌性C57BL/6小鼠用MOG肽免疫制作慢性EAE模型,在免疫后第3天经鼻给予FSD-C10-,以同样方式给予生理盐水作为对照。结果:经鼻给予FSD-C10可以推迟EAE起病时间,减轻EAE临床症状,减少EAE髓鞘脱失和CNS炎性细胞浸润;同时抑制CNS炎性因子表达,促进抗炎性细胞因子的产生。除此之外,FSD-C10也能影响外周脾细胞的免疫反应,转化炎性M1型巨噬细胞至抗炎和修复的M2型巨噬细胞。结论:经鼻FSD-C10具有良好的治疗效果,可明显减轻CNS的髓鞘脱失和炎性病灶。其作用机制可能是使中枢和外周的炎性巨噬细胞向抗炎巨噬细胞转化,从而抑制炎性细胞因子释放和免疫炎症反应的放大。

关键词： FSD-C10-Fasudil异构体实验性自身免疫性脊髓炎鼻腔给药

来源： cnki会议评论

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