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参照多重pcr片段分析法进行实时荧光PCR法对ABCB1三等位基因测定结果读取方法的确定

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四川精神卫生 2022年第2期35卷 137-143页

作者：张燕蒙卓成邢欢崔小花杨柳郑璇戴尊孝西安市精神卫生中心陕西西安710100 西安市药学(精神卫生)重点实验室陕西西安710100

目的为解决实时荧光PCR法对三等位基因测定结果无法正常读取的问题,通过参照多重pcr片段分析法,确定实时荧光PCR法读取方法,实现临床对ABCB1三等位基因准确、简便且价格低廉的检测。方法收集西安市精神卫生中心2020年3月-2021年3月DNA样... 详细信息

目的为解决实时荧光PCR法对三等位基因测定结果无法正常读取的问题,通过参照多重pcr片段分析法,确定实时荧光PCR法读取方法,实现临床对ABCB1三等位基因准确、简便且价格低廉的检测。方法收集西安市精神卫生中心2020年3月-2021年3月DNA样本2794例,抽取5%作为实验样本,分别进行实时荧光PCR法和多重pcr片段分析法测定。根据pcr曲线Ct值的比较以及多重pcr片段分析法碱基峰位强度的比较,对比分析两种方法的判读结果,对其中报告结果不相同的样本进行数据核查并确定pcr读取方法。结果共抽取139例样本,其中存在120例等位基因及19例三等位基因,实时荧光PCR法和多重pcr片段分析法对等位基因的检测结果完全一致。根据多重pcr片段分析结果,对19例三等位基因制定了实时荧光PCR法的读取方法:扩增曲线图中,当∣∣Ct._(G)-Ct._(T)∣-∣Ct._(G)-Ct._(A)∣∣法,修正实时荧光PCR法的测定结果为:1例G/G,1例A/A,4例T/G,5例T/A,8例T/T,与多重pcr片段分析法结果一致。结论通过多重pcr片段分析法制定实时荧光PCR法对ABCB1三等位基因的读取方法,两者判读结果一致性良好。

关键词：实时荧光PCR法多重pcr片段分析三等位基因 ABCB1

应用实时荧光PCR法建立献血者血小板特异性抗原HPA-1~6/10/15/21基因分型资料库

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中国输血杂志 2023年第3期36卷 204-208页

作者：袁文声陈前英林惠燕方育如郑晓兰邝永晴中山市中心血站广东中山528400

目的研究中山地区单采血小板献血者人类血小板特异性抗原HPA-1~6/10/15/21共9对抗原基因多态性区域分布特点,建立中山地区血小板献血者HPA基因分型资料库。方法用实时荧光定量pcr-TaqMan探针法对中山地区192名单采血小板献血者进行HPA-1... 详细信息

目的研究中山地区单采血小板献血者人类血小板特异性抗原HPA-1~6/10/15/21共9对抗原基因多态性区域分布特点,建立中山地区血小板献血者HPA基因分型资料库。方法用实时荧光定量pcr-TaqMan探针法对中山地区192名单采血小板献血者进行HPA-1~6/10/15/21基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果HPA-1~6/10/15/21中,HPA-4、10系统呈单特异性,只检测出aa基因型,未检出等位基因HPA-b;HPA-1、2、5、6、21基因型以aa占绝大多数;HPA-3、15具有较高的杂合度,基因型HPA-3aa、HPA-3ab、HPA-3bb频率分别是0.3073、0.4948、0.1979;基因型HPA-15aa、HPA-15ab、HPA-15bb频率分别是0.2708、0.5052、0.2240。结论中山地区血小板献血者HPA-1~6/10/15/21基因与其他地区的同类资料相比显示出地域差异性,建立HPA基因分型资料库有助于解决血小板不配合输注产生同种免疫的问题。

关键词：实时荧光PCR法血小板特异性抗原基因频率

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实时荧光PCR法检测芝麻酱中的芝麻成分

食品安全导刊 2023年第11期 129-131页

作者：李娟陈茵茵梅岩陈雪华王达黄嘉文广东省食品药品职业技术学校广东广州510000 广东省食品检验所广东广州510000

利用实时荧光PCR法检测芝麻酱中的芝麻源性成分,以鉴定预包装产品的真伪。选取3份市售芝麻酱产品,其中1份标示不含芝麻成分,利用荧光定量pcr法进行检测。结果显示该法检测结果与产品标签相符,建立的检测方法可行。

关键词：芝麻酱芝麻成分实时荧光PCR法

ELISA法和实时荧光PCR法在麻疹检测上的应用分析

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中国科技期刊数据库医药 2023年第10期 0037-0039页

作者：鲁建英张宇张丽丽巴彦淖尔市疾病预防控制中心内蒙古巴彦淖尔015000 嘉誉检验检测有限公司内蒙古巴彦淖尔015000

分析ELISA法和实时荧光PCR法在麻疹检测上的应用。方法选择2022年1月-2023年3月院中采集160份可疑麻疹(Measles)咽拭子标本作为观察对象,均采用ELISA法[酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)]和实时荧光PCR法(... 详细信息

分析ELISA法和实时荧光PCR法在麻疹检测上的应用。方法选择2022年1月-2023年3月院中采集160份可疑麻疹(Measles)咽拭子标本作为观察对象,均采用ELISA法[酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)]和实时荧光PCR法(Rlealtime fluorescence pcr),观察两种检测方法检测出的免疫球蛋白(ImmunoglobulinM,IgM)抗体阳性检出率及一致性情况。结果两种方法对于检测Measles情况分析情况相近,其中表现为阳性检出率分别为(ELISA法:139/160,86.87%;pcr法:140/160,87.50%);一致性经Kappa检验(置信区:0.95)分析为0.96。结论 Measles检测用ELISA法及pcr法检出率无异,亦可依据实际应用情况选择适宜检验方式。

关键词： ELISA法实时荧光PCR法麻疹检验应用阳性率分析一致性

应用实时荧光PCR法检测食品中的酿脓链球菌

维普期刊数据库评论

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中国食品添加剂 2018年第5期29卷 161-166页

作者：王远洋刘钟栋兰全学河南工业大学郑州450000 深圳市计量质量检测研究院深圳518000

目的:建立一种简单、快速、准确的检测酿脓链球菌的方法,为食品中酿脓链球菌的检测提供依据和便利。方法:实验采用Taq Man探针法,针对酿脓链球菌DNase B基因设计引物探针,用特异性实验、灵敏性实验、模拟样品实验对该方法进行验证。结果... 详细信息

目的:建立一种简单、快速、准确的检测酿脓链球菌的方法,为食品中酿脓链球菌的检测提供依据和便利。方法:实验采用Taq Man探针法,针对酿脓链球菌DNase B基因设计引物探针,用特异性实验、灵敏性实验、模拟样品实验对该方法进行验证。结果:该实时荧光pcr体系的特异性良好,酿脓链球菌的DNA扩增结果为阳性,链球菌属的其他细菌以及属外的常见菌DNA扩增均为阴性;灵敏性实验和模拟样品试验中最低检出限分别为50和23pg/μL,数量级一致,说明了该pcr体系在对含有肉类食品中酿脓链球菌的检测仍然保持有较高灵敏度。结论:目前国内单独的应用实时荧光PCR法对酿脓链球菌检测的文章比较少,本实验建立了检测酿脓链球菌的实时荧光pcr方法,特异性和灵敏性良好,实验过程省时省力,具有较高应用价值。

关键词：酿脓链球菌 DNaseB基因实时荧光PCR法食品

实时荧光PCR法与环介导等温扩增法检测食品中动物源性成分的比较

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食品安全质量检测学报 2018年第12期9卷 2908-2913页

作者：李娟丁清龙曾晓琮陈科周露广东省食品检验所广州510435

目的比较实时荧光pcr(real-time pcr)法及环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测食品中动物源性成分,为食品安全监管部门动物源性成分鉴定提供准确、高效的检测方法。方法采用实时荧光PCR法及LAMP法分别对... 详细信息

目的比较实时荧光pcr(real-time pcr)法及环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测食品中动物源性成分,为食品安全监管部门动物源性成分鉴定提供准确、高效的检测方法。方法采用实时荧光PCR法及LAMP法分别对市售肉及其制品进行牛、猪和鸡源性成分鉴定,并与标签明示的肉源成分比对,以准确性和时效性2个指标对上述2个方法进行评价。结果 Real-time pcr法检出4份样品与标签明示肉源不符,LAMP法检出5份样品与标签明示肉源不符,而16份样品中仅有1份样品2种方法检测结果不同。Real-time pcr法检测用时1.5 h,提取检测用DNA用时1.5 h,总用时3 h;而LAMP法检测用时45 min,提取检测用DNA用时20 min,总用时65 min。结论 LAMP法与Real-time pcr均具有较好的特异性、准确性,但LAMP法耗时短、成本低、操作简单,便于现场快速监督抽检。

关键词：食品动物源性成分实时荧光PCR法环介导等温扩增法

实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用分析

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标记免疫分析与临床 2019年第11期26卷 1872-1875页

作者：张杨武江西省南昌市江纺职工医院

目的探讨实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用效果。方法选取2017年3月至2018年12月在我院接受治疗的疑似手足口病患儿93例,均实施荧光pcr法及病毒分离培养法检测肠道病毒,以临床表现、实验室检查、血清及病原学综合诊断结果为金标准... 详细信息

目的探讨实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用效果。方法选取2017年3月至2018年12月在我院接受治疗的疑似手足口病患儿93例,均实施荧光pcr法及病毒分离培养法检测肠道病毒,以临床表现、实验室检查、血清及病原学综合诊断结果为金标准,对比两种不同检测方法诊断结果、诊断价值,并分析实施荧光pcr检查肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)、A组柯萨奇病毒(coxsachie virus A16,CoxA16)、其他肠道病毒(EV)检出情况。结果经临床表现、实验室检查、血清及病原学综合诊断,93例疑似病例中手足口病患儿53例。实时荧光PCR法检测手足口病的准确性、灵敏度、特异性、阳性预测值及阴性预测值均高于病毒分离培养法,差异有统计学意义(P实时荧光PCR法检查EV71阳性检出率48.84%,Cox A16阳性检出率9.30%,其他EV阳性检出率41.86%。结论在手足口病病毒检测中实时荧光PCR法具有较高应用价值,可有效提高临床诊断的准确性、灵敏度及特异性。

关键词：手足口病实时荧光PCR法病毒分离培养法病毒检测

实时荧光PCR法和国标法检测乳粉中单增李斯特菌的比较研究

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食品安全质量检测学报 2020年第24期11卷 9425-9429页

作者：林玉双蓝福胜廖燕萍刘晓玲周双辉福建省食品药品质量检验研究院福州350001

目的探究实时荧光PCR法是否可用于实验室乳粉中单增李斯特菌的检测。方法依据GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》和能力验证作业指导书对乳粉中单增李斯特菌进行检测。利用实时荧光PCR法(re... 详细信息

目的探究实时荧光PCR法是否可用于实验室乳粉中单增李斯特菌的检测。方法依据GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》和能力验证作业指导书对乳粉中单增李斯特菌进行检测。利用实时荧光PCR法(real-time fluorescent polymerase chain reaction,RT-pcr)对能力验证中的2个样品进行快速检测,同时采用VITEK2 Compact30全自动微生物鉴定系统对国标法中挑取的可疑菌落进行鉴定,比较国标法和RT-pcr法的检测结果。结果RT-pcr法和国标法对2个样品的检测结果一致,即样品CODE:FC02220028检出单增李斯特菌,样品CODE:FC02220098未检出单增李斯特菌。结论RT-pcr法可用于实验室乳粉中单增李斯特菌的检测。

关键词：乳粉单增李斯特菌实时荧光PCR法

实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用价值研究

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2020年第12期 0002-0003页

作者：雷小念冯丽重庆市巴南区疾病预防控制中心重庆401320 重庆市巴南区人民医院重庆400055

分析实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用价值。方法:择取2019年1月-2020年6月期间院内就诊的手足口病疑似病例105例,分别采取实时荧光PCR法、逆转录聚合酶链反应法(RT-pcr)进行检测,分析应用效果差异。结果:105例疑似手足口病患者... 详细信息

分析实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用价值。方法:择取2019年1月-2020年6月期间院内就诊的手足口病疑似病例105例,分别采取实时荧光PCR法、逆转录聚合酶链反应法(RT-pcr)进行检测,分析应用效果差异。结果:105例疑似手足口病患者经实时荧光PCR法检测EV阳性率、EV-71阳性率、CA-16阳性率与RT-pcr法阳性率间差异均有统计学意义(P实时荧光PCR法检出率与RT-pcr法检出率比较,差异有统计学意义(P实时荧光PCR法在手足口病病毒检测中应用价值良好。

关键词：实时荧光PCR法手足口病病毒临床价值