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中国组织工程研究 2013年第37期17卷 6682-6688页

作者：张亚楼赵阳唐莉吴起清白生宾钟近洁新疆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011 新疆医科大学第一附属医院烧伤整形科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011 新疆医科大学第一附属医院传染病中心新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011

背景:前期研究发现MCM3与氟中毒相关,但其在氟中毒早期暴露者中的表达情况尚不清楚。目的:分析氟暴露患者及对照人群外周血中MCM3 mRNA的表达量。方法:选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合... 详细信息

背景:前期研究发现MCM3与氟中毒相关,但其在氟中毒早期暴露者中的表达情况尚不清楚。目的:分析氟暴露患者及对照人群外周血中MCM3 mRNA的表达量。方法:选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法实时定量PCR检测外周血单个核细胞中MCM3 mRNA的表达,同时测定两组肝肾功能指标。结果与结论:暴露组及非暴露组MCM3 mRNA表达量分别为0.573 60±0.102 59、0.550 0±0.171 81,两组差异无显著性意义(P>0.05)。所测的肝肾功能指标在两组中差异无显著性意义。结果显示轻度氟暴露对患者外周血单个核细胞中MCM3 mRNA表达无显著影响。氟对暴露者肝、肾功能的影响需要选取更多的指标综合分析。

关键词：组织构建组织构建临床实践氟 MCM3基因定量反转录聚合酶链反应肝功能肾功能国家自然科学基金

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miR-126、EGFL7和微血管密度在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义

miR-126、EGFL7和微血管密度在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义

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作者：刘星烁郑州大学

学位级别：硕士

卵巢癌是女性生殖系统常见三大恶性肿瘤之一,其发病率低于宫颈癌及子宫内膜癌,但恶性程度最高,病情发展快,且由于缺乏有效的早期诊断指标,疾病发现时多已为中晚期,死亡率居妇科肿瘤疾病的第一位,目前国内外有关卵巢癌的研究众多,然而其... 详细信息

卵巢癌是女性生殖系统常见三大恶性肿瘤之一,其发病率低于宫颈癌及子宫内膜癌,但恶性程度最高,病情发展快,且由于缺乏有效的早期诊断指标,疾病发现时多已为中晚期,死亡率居妇科肿瘤疾病的第一位,目前国内外有关卵巢癌的研究众多,然而其发病机制仍不清楚。卵巢癌的早期症状不明显、缺乏有效的早期诊断方法,70%患者在确诊时已出现腹水、恶病质等远处转移晚期症状。卵巢癌预后差,虽然通过手术和化疗等方法能够显著改善晚期卵巢癌患者的生存质量,但5年生存率仍较低,仅在30%左右。因此,卵巢癌是威胁广大女性生命健康的妇科肿瘤疾病。大多数卵巢癌起源于卵巢上皮组织,其中上皮性卵巢癌患者占卵巢癌总数的75%-90%。因此,研究上皮性卵巢癌发生和发展机制,找寻有效、敏感的标记物及治疗靶点、改善患者预后目前仍然是卵巢癌研究最重要的目标。microRNA是近年来新发现的一类长21～25个核苷酸的小分子RNA。通过与其靶mRNA分子3’端非编码区域(3'-UTR)互补配对使目标mRNA分子受到翻译水平调控或直接导致其降解,来参与调控细胞生长分化、能量代谢、凋亡等各个重要而基本的细胞生理过程。近年来研究发现microRNA与肿瘤的发生、发展、转移、预后密切相关。在卵巢癌中microRNA也发挥重要作用,如miR-21[64]、miR-181a[65],其中miR-181a通过作用于其功能靶点Smad7,促进TGF-β介导上皮间质转化信号通路参与卵巢癌的侵袭、转移过程。而miR-126在多种肿瘤中表达下调,可能在肿瘤发生过程中发挥抑癌基因的作用,但其在卵巢癌中的研究在国内外甚少且存在差异。类表皮生长因子域7(EGFL7)是在内皮细胞中特异性表达的因子,在多种实体肿瘤中表达均增高,但其在卵巢癌中的表达及作用国内外鲜有研究。miR-126基因定位于EGFL7基因7号内含子内,同时在非小细胞肺癌、前列腺癌等研究资料中提示EGFL7也是miR-126的靶基因。本研究通过qRT-PCR及免疫组化方法检测了miR-126、EGFL7在上皮性卵巢癌的表达情况,及与微血管密度表达的相关性,以探讨miR-126和EGFL7在上皮性卵巢癌发病机制中的作用,希望能为上皮性卵巢癌早期诊断、预后评估和治疗提供新的思路和理论依据。目的研究不同卵巢上皮组织中miR-126、EGFL7和微血管密度的表达,探讨它们在上皮性卵巢癌发病机制及发展过程中的作用,并分析三者在上皮性卵巢癌组织中表达的相关性。研究对象和实验方法1.研究对象：收集郑州大学第一附属医院及第三附属医院2011年3月-2014年3月手术标本89例,正常组21例,良性组23例,恶性组45例。其中正常组卵巢取材于因良性宫体疾病行附件切除患者;恶性组卵巢组织取材于术前未行化疗、放疗等辅助治疗上皮性卵巢肿瘤患者(按FIGO2008分期标准：Ⅰ、Ⅱ期12例,Ⅲ、Ⅳ期33例;低分化25例,中分化11例,高分化9例;浆液性囊腺癌29例,粘液性囊腺癌8例,子宫内膜样癌4例,透明细胞癌4例;有淋巴结转移31例,无淋巴结转移14例。所有病例均经手术和病理证实。患者年龄27-73(47.6±5.5)岁。经过伦理委员会批准及受试者同意后进行收集。2.研究方法：对上述89例卵巢组织采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测miR-126 mRNA的表达,对其中45例卵巢癌组织中EGFL7 mRNA的表达进行检测;对上述89例卵巢组织采用免疫组织化学SP法检测EGFL7蛋白和微血管密度(CD34)的表达。3.统计学方法：采用SPSS 19.0进行数据统计分析。miR-126相对表达量以M(P25-P75)表示,余定量资料以x±s表示。非正态定量资料比较应用Kruskal-Wallis检验(组间比较用Nemeyi法);定性资料比较用χ2检验;正态定量资料多组比较用单因素方差分析(组间比较用LSD-t法)、两组比较用t检验。相关性分析采用秩和spearman法、Pearson积矩相关系数分析。检验水准a=0.05,组间两两比较时检验水准a'=a/比较次数=0.0167。结果***-126 mRNA在正常组、良性组、恶性组中的表达量分别为2.865(1.491～4.879)、1.339(0.904～2.099)、0.310(0.209～0.858),存在显著差异(P0.05),在正常组、恶性组;良性组、恶性组差异均有统计学意义(P<0.05)。2. EGFL7蛋白表达阳性染色位于细胞浆,不仅位于血管内皮细胞中,在肿瘤组织上皮细胞中也存在。EGFL7蛋白在正常组、良性组、恶性组中的阳性表达率分别为23.81%(5/21)、52.17%(12/23)、93.33%(42/45),存在显著差异(P<0.001

关键词：上皮性卵巢癌 miR-126 EGFL7 MVD 免疫组化定量反转录聚合酶链反应

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