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定点饱和突变提高β-(2,6)果聚蔗糖酶热稳定性的研究

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定点饱和突变提高β-(2,6)果聚蔗糖酶热稳定性的研究

第十二届中国酶工程学术研讨会

作者：徐炜沐万孟江南大学食品学院江南大学食品科学与技术国家重点实验室

Inulin(菊糖)和levan是两种常见的β-果聚糖。其中,菊糖和菊糖型低聚糖已经在2018年6月份被美国FDA公开批准为膳食纤维。菊糖主要以β-(2, 1)糖苷键相,而levan型果聚糖中的果糖分子多以β-2,6糖苷键相互连接。Levan型果聚糖具有重要的... 详细信息

Inulin(菊糖)和levan是两种常见的β-果聚糖。其中,菊糖和菊糖型低聚糖已经在2018年6月份被美国FDA公开批准为膳食纤维。菊糖主要以β-(2, 1)糖苷键相,而levan型果聚糖中的果糖分子多以β-2,6糖苷键相互连接。Levan型果聚糖具有重要的生理功能,包括改善肠道微环境、降低脂肪吸收、调节血糖水平等。利用微生物来源的果聚蔗糖酶(Levansucrase,EC 2.***.4.10)催化蔗糖合成levan果聚糖,是大规模制备levan果聚糖的重要手段。然而,大多微生物来源的果聚蔗糖酶在合成levan果聚糖的过程中具有较差的热稳定性。根据30组氨基酸序列比对,发现具有不同热稳定性的果聚蔗糖酶在404位残基种类呈现明显的偏好性。对来自Brenneria sp. EniD312的重组果聚蔗糖酶第404位氨基酸残基进行饱和定点突变研究。结果表明,相比于原始酶,突变体酶E404L的蛋白解折叠温度提高了2.8°C,同时35°C和45°C下的热稳定性也相应提高了12.5和1.3倍;此外,突变体E404V,E404I和E404F的热稳定性也相比于原始酶有了大幅提高。经过对蛋白三维结构的分析与比较,发现404位引入疏水残基可以大幅提高酶三维结构的稳定性,进而提高了果聚蔗糖酶的热稳定性。这一研究为理性改造果聚蔗糖酶天然不足的属性提供了一定的思路,同时也为高效制备levan提高了一定的应用价值。

关键词： Levan果聚糖果聚蔗糖酶饱和定点突变定向改造应用

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蛋白质耐热工程的研究进展

化学与生物工程 2009年第9期26卷 20-22页

作者：葛晓萍郭清吉青岛科技大学化工学院山东青岛266042

随着定向改造技术的出现,蛋白质工程有了新的推动力。蛋白质耐热工程是一个极具挑战的领域,因为它对于拓宽重组蛋白的工业应用非常关键。除定向改造外,一种在工程耐热性方面部分成功应用的合理化设计也有所发展。最近的研究结果表明,由... 详细信息

随着定向改造技术的出现,蛋白质工程有了新的推动力。蛋白质耐热工程是一个极具挑战的领域,因为它对于拓宽重组蛋白的工业应用非常关键。除定向改造外,一种在工程耐热性方面部分成功应用的合理化设计也有所发展。最近的研究结果表明,由嗜温氨基酸序列组成的蛋白质可以有效地单独用作工程耐热蛋白。比较了蛋白质耐热工程重点研究的合理化设计、定向改造和一致序列法等方法,并提出了将来的研究趋势。

关键词：蛋白质耐热性合理化设计定向改造一致序列

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鳜鱼感官发育与摄食行为模式定向调控技术

水利渔业 2005年第3期25卷 19-21页

作者：梁旭方暨南大学生命科学技术学院生物工程系广州510632

鳜鱼是我国特有的淡水鱼珍品,其人工饲料问题急待研究解决。探讨了鳜鱼摄食行为发育调控机理以及控制其趋光行为与猎物印记形成的内外因子,为定向改造鳜鱼摄食习性提供有效手段,认为这是最终解决鳜鱼人工饲料难题的技术关键。

关键词：鳜鱼调控技术行为模式感官饲料问题趋光行为调控机理行为发育摄食习性定向改造人工饲料淡水鱼最终解

蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽的近C端碱性氨基酸残基对镇痛活性的影响

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蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽的近C端碱性氨基酸残基对镇痛活性的影响

安徽农业大学在高水平期刊上发表植物基因工程综述文章

泛环渤海地区九省市生物化学与分子生物学会——2011年...

作者：崔勇郭桂丽刘岩峰张景海沈阳药科大学生命科学与生物制药学院

目的:研究蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic-antitumor peptide,AGAP)中近C端一个碱性氨基酸残基对其镇痛活性的影响。方法:利用定点突变PCR方法构建突变体R58D重组载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经过IPTG诱导目的蛋白的表达,经菌体破碎... 详细信息

目的:研究蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic-antitumor peptide,AGAP)中近C端一个碱性氨基酸残基对其镇痛活性的影响。方法:利用定点突变PCR方法构建突变体R58D重组载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经过IPTG诱导目的蛋白的表达,经菌体破碎后采用金属离子螯合亲和层析和阳离子交换层析方法对突变体蛋

关键词：蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽定向改造镇痛活性

来源： cnki会议评论

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安徽农业大学学报 2021年第5期48卷 712-712页

植物基因工程是定向改造植物遗传性状、实现植物精准育种的有力手段。在气候变化和人口增长的情况下,植物基因工程技术将在改善作物的产量、品质和抗逆性方面表型出突出的优势。而如何高效地将外源基因导入到植物细胞,是植物基因工程技... 详细信息

植物基因工程是定向改造植物遗传性状、实现植物精准育种的有力手段。在气候变化和人口增长的情况下,植物基因工程技术将在改善作物的产量、品质和抗逆性方面表型出突出的优势。而如何高效地将外源基因导入到植物细胞,是植物基因工程技术的关键。传统的转基因技术体系(农杆菌转化、基因枪等)具有高度的物种依赖性,且费时费力。

关键词：植物基因工程植物细胞安徽农业大学基因枪外源基因导入转基因技术农杆菌转化定向改造

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封山育林的培育特点

安徽林业科技 2009年第6期 50-50页

作者：方俊

封山育林生态效益体现在能快速恢复森林植被,保存生物多样性,减轻森林病虫的发生,涵养水源、保持水土、改良土壤、净化水质等多因素的综合;还能提供用材、薪材、林副产品。我省南方自然条件优越,树种繁多,森林植被丰富,封山育林是培育... 详细信息

封山育林生态效益体现在能快速恢复森林植被,保存生物多样性,减轻森林病虫的发生,涵养水源、保持水土、改良土壤、净化水质等多因素的综合;还能提供用材、薪材、林副产品。我省南方自然条件优越,树种繁多,森林植被丰富,封山育林是培育森林资源、林业生态工程的重要营林方

关键词：樵采森林病虫立地条件林副产品定向改造鹅掌楸宝剑木鹅掌楸属薪材木材补植森林资源生物资源林地农业用地

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科学家培育出世界首对基因编辑猴

中华肺部疾病杂志(电子版) 2014年第2期 201-201页

近日,全球首对靶向基因编辑猴在中国出生,完成这一工作的科学家来自南京医科大学生殖医学国家重点实验室、云南省灵长类生物医药研究重点实验室和南京大学。猴子属灵长类动物,猴基因编辑的成功将有助于建立猴疾病模型,更好地模拟人类疾... 详细信息

近日,全球首对靶向基因编辑猴在中国出生,完成这一工作的科学家来自南京医科大学生殖医学国家重点实验室、云南省灵长类生物医药研究重点实验室和南京大学。猴子属灵长类动物,猴基因编辑的成功将有助于建立猴疾病模型,更好地模拟人类疾病,大大降低药物研究的风险。未来有望定向改造人类基因,治疗基因疾病。

关键词：基因编辑灵长类人类基因定向改造生殖医学疾病模型人类疾病基因疾病

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基因工程与医疗

濮阳职业技术学院学报 1995年第2期13卷 28-28页

作者：董自梅

基因工程是七十年代初兴起的一门综合性技术科学。其目的就是按照人们预先设计的生物蓝图,通过遗传物质的直接操纵、改组、重建、实现对遗传性状的定向改造,从而定向地生产出新的生物类型或制品。现在,基因工程在农业、能源、工业生产... 详细信息

基因工程是七十年代初兴起的一门综合性技术科学。其目的就是按照人们预先设计的生物蓝图,通过遗传物质的直接操纵、改组、重建、实现对遗传性状的定向改造,从而定向地生产出新的生物类型或制品。现在,基因工程在农业、能源、工业生产方面已初有成效,特别是与医疗事业的发展更是密不可分。

关键词：基因工程技术基因调控制药工业直接操纵单基因遗传病定向改造单克隆抗体半乳糖酶生物类型遗传物质

高保真CRISPR-Cas9基因组编辑方法获新进展

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种业导刊 2017年第11期 34-34页

基因组编辑是生命科学新兴的颠覆性技术,特别是基于CRISPR-Cas9系统的基因组编辑工具近几年迅猛发展.但Cas9脱靶现象是限制其发挥巨大潜力的最主要问题之一,该系统的特异性亟待提高.美国课题组分别对Cas9蛋白定向改造,获得了三种特异性... 详细信息

基因组编辑是生命科学新兴的颠覆性技术,特别是基于CRISPR-Cas9系统的基因组编辑工具近几年迅猛发展.但Cas9脱靶现象是限制其发挥巨大潜力的最主要问题之一,该系统的特异性亟待提高.美国课题组分别对Cas9蛋白定向改造,获得了三种特异性显著提高的Cas9蛋白变体：eSpCas9（1.0）、eSpCas9（1.1）和SpCas9-HF1.

关键词：编辑方法基因组高保真种特异性生命科学编辑工具定向改造颠覆性