检索结果-南通市图书馆

SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解剖学报 2008年第5期39卷 699-702页

作者：陈辉金辉杜春艳顾鹏宇王纯耀张钦宪高翔郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州大学实验动物中心郑州450052 南京大学模式动物研究所南京210061

目的构建胃壁细胞定位表达SV40T的真核表达载体并制备转基因小鼠动物模型,为研究胃癌发病机制提供动物模型。方法从构建的胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中酶切回收3.8kb的基因片段H+-K+ATPaseβpromoter/SV40T,通过显微注射... 详细信息

目的构建胃壁细胞定位表达SV40T的真核表达载体并制备转基因小鼠动物模型,为研究胃癌发病机制提供动物模型。方法从构建的胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中酶切回收3.8kb的基因片段H+-K+ATPaseβpromoter/SV40T,通过显微注射的方法制备转基因小鼠,PCR和Southern blotting检测阳性转基因小鼠并建系繁殖,RT-PCR检测基因的表达情况。结果将422枚注射过的受精卵移植给16只假孕雌鼠,共生出77只仔鼠,移植成功率为18.2%。在出生的77只仔鼠中,2#、4#、8#、16#、24#、51#、57#、61#、68#、73#经PCR检测为阳性首建鼠。除68#不育外,其他9个品系首建鼠共生出99只F1代鼠。8#品系23只F1代尚未发现阳性鼠,另8个品系F1代经PCR和Southern blotting检测发现31只阳性鼠,阳性率为40.8%(31/76)。RT-PCR检测F1代阳性鼠均仅在胃组织中有SV40T基因的表达,而在心、肝、肾、肺、食道、肠、骨骼肌等组织中均不表达。不育首建鼠处死解剖发现胃组织有肿瘤存在。结论建立了胃壁细胞定位表达SV40T基因的转基因小鼠动物模型。

关键词： SV40T抗原 Southern blotting 定位表达转基因小鼠

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

结合珠蛋白在正常人皮肤中的定位表达

中华皮肤科杂志 2003年第4期36卷 204-206页

作者：李萍张亚芹王岩王合王雅坤陈洪铎中国医科大学附属第一医院皮肤科沈阳110001

目的探讨正常人皮肤中结合珠蛋白及其mRNA的表达在皮肤中的作用及其与朗格汉斯细胞的关系。方法采用过氧化物酶法及荧光双标记法和原位杂交技术检测30例正常人皮肤中结合珠蛋白的表达。结果角质形成细胞、毛囊上皮、皮脂腺导管上皮细胞... 详细信息

目的探讨正常人皮肤中结合珠蛋白及其mRNA的表达在皮肤中的作用及其与朗格汉斯细胞的关系。方法采用过氧化物酶法及荧光双标记法和原位杂交技术检测30例正常人皮肤中结合珠蛋白的表达。结果角质形成细胞、毛囊上皮、皮脂腺导管上皮细胞、腺上皮及小汗腺细胞结合珠蛋白mRNA呈弱阳性至中度阳性表达,真皮成纤维细胞和血管内皮细胞中均未见阳性表达,而在蛋白质水平,只见到一些树突细胞呈阳性表达,免疫荧光双标记检测证实为朗格汉斯细胞。结论皮肤是结合珠蛋白肝外表达的又一器官,角质形成细胞等上皮来源的细胞是结合珠蛋白mRNA表达的主要细胞;正常皮肤中只见到表皮中下部、毛囊、皮脂腺导管部位的朗格汉斯细胞胞浆中含有结合珠蛋白;角质形成细胞中结合珠蛋白mRNA的表达可能与朗格汉斯细胞胞浆中的结合珠蛋白有关;结合珠蛋白可能参与皮肤中的一些免疫反应过程。

关键词：结合珠蛋白皮肤定位表达朗格汉斯细胞过氧化物酶法荧光双标记法原位杂交技术免疫反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人Bcl-2乳腺定位表达转基因小鼠的建立

中国兽医学报 2002年第5期22卷 430-432页

作者：赵君任文陟张守峰刘彬宇丽扈荣良殷震解放军军需大学军事兽医研究所解放军基因工程重点实验室吉林长春130062 湖南大学湖南长沙410000 暨南大学广东广州510000

以 p CAT、p WB和 p WC为原始质粒 ,构建 WAP启动子调控的 Bcl- 2乳腺组织特异性表达载体 p WBS。载体用Bgl +Sal +Pvu 酶切 ,回收 3.0 kb的基因片段 WAP- Bcl- 2 - SV40 Poly A,通过显微注射方法导入 C5 7BL / 6 J×DBA/ 2 JF1代小鼠... 详细信息

以 p CAT、p WB和 p WC为原始质粒 ,构建 WAP启动子调控的 Bcl- 2乳腺组织特异性表达载体 p WBS。载体用Bgl +Sal +Pvu 酶切 ,回收 3.0 kb的基因片段 WAP- Bcl- 2 - SV40 Poly A,通过显微注射方法导入 C5 7BL / 6 J×DBA/ 2 JF1代小鼠受精卵的雄原核内。共注射 10 0 0枚卵 ,将存活的约 6 0 0枚卵分别移植至 2 9只假孕母鼠输卵管内 ,获得仔鼠 5 5只。PCR检测 ,阳性鼠 12只。Southern blot检测 ,阳性鼠 4只 ,其中公、母鼠各 2只 ,在饲养过程中 ,2只公鼠均意外死亡。Western blot证实 ,1只母鼠 Bcl- 2表达阳性 ,其 F1代的 40只小鼠中 ,有 18只呈 PCR阳性 ,其中母鼠8只 ,在 5个月的反复怀孕过程中 ,未观察到乳房有任何肿瘤或肿块的出现 ,证实 Bcl- 2单独在转基因鼠乳腺中表达不会引起转基因鼠乳腺癌的发生。

关键词：人 Bcl-2乳腺定位表达转基因小鼠

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人c-myc乳腺定位表达转基因小鼠的建立

中国兽医学报 2002年第6期22卷 587-589页

作者：赵君张守峰刘彬任文陟宇丽乔贵林扈荣良殷震解放军军需大学军事兽医研究所解放军基因工程重点实验室吉林长春130062 湖南大学生命科学院湖南长沙410000 暨南大学生命科学院广东广州510000

以含有 1.6 kb的小鼠乳清酸蛋白 (WAP)上游调序列的 p CAT- WAP和含有人 c- myc c DNA的 p WM为原始质粒 ,构建了 WAP启动子调控下的 c- myc乳腺定位表达载体 p WCS。载体用 Bgl +Bam H 酶切 ,回收 3.5 kb的基因片段 WAP- c- myc- SV40 ... 详细信息

以含有 1.6 kb的小鼠乳清酸蛋白 (WAP)上游调序列的 p CAT- WAP和含有人 c- myc c DNA的 p WM为原始质粒 ,构建了 WAP启动子调控下的 c- myc乳腺定位表达载体 p WCS。载体用 Bgl +Bam H 酶切 ,回收 3.5 kb的基因片段 WAP- c- myc- SV40 Poly A,通过显微注射方法导入 C5 7BL/ 6 J× DBA/ 2 JF1 代小鼠受精卵的雄原核内。共注射10 0 0枚卵 ,将存活的约 6 0 0枚卵分别移植至 2 9只假孕母鼠输卵管内 ,获得仔鼠 45只。PCR检测 ,阳性鼠 9只 ,South-ern blot检测 ,阳性鼠 3只 ,其中 1只母鼠 ,2只公鼠 ,在饲养过程中 ,1只母鼠意外死亡。对 2只转基因公鼠的 F1代PCR检测表明 ,仅 1只公鼠具有遗传性 ,在所生的 2 7只 F1代小鼠中有 13只为 PCR阳性。

关键词：转基因小鼠乳腺定位表达 c-myc原癌基因乳腺癌发病机制

人胎儿内耳c-myc、c-fos蛋白的定位表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中山大学学报（医学科学版） 2003年第6期24卷 607-610页

作者：高春生陈向东深圳市南山医院耳鼻咽喉科广东深圳518052 郑州大学第二附属医院耳鼻咽喉科河南郑州450002

【目的】探讨不同胎龄的人胎儿内耳细胞癌基因c-myc、c-fos蛋白产物的表达情况。【方法】用免疫组织化学方法对9.5～29周胎龄的人胎儿内耳耳蜗、前庭及骨迷路内的不同部位c-myc、c-fos的表达进行定位研究。【结果】c-myc、c-fos蛋白产... 详细信息

【目的】探讨不同胎龄的人胎儿内耳细胞癌基因c-myc、c-fos蛋白产物的表达情况。【方法】用免疫组织化学方法对9.5～29周胎龄的人胎儿内耳耳蜗、前庭及骨迷路内的不同部位c-myc、c-fos的表达进行定位研究。【结果】c-myc、c-fos蛋白产物在人胎儿内耳的Corti's器、螺旋神经节细胞、血管纹、前庭及壶腹嵴多个部位均有阳性表达,而在胎儿的不同时期表达的强弱不同,但在骨迷路内无阳性表达。【结论】c-myc、c-fos参与人内耳发育,在此过程中可能主要起促分化作用。

关键词：胎儿内耳 c-myc c-fos 蛋白定位表达

基因1b型HCV不同截短片段核心蛋白在HepG2亚细胞器中的定位表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华检验医学杂志 2008年第8期31卷 914-918页

作者：颜学兵梅蕾汪明珊徐州医学院附属医院感染病科 221002 江苏省常熟市第二人民医院感染病科

目的为进一步探讨HCV核心蛋白（CORE）在HCV致病机制中的作用，观察基因1b型不同截短片段CORE在瞬时转染HepG2细胞中亚细胞器的分布状况。方法将含有增强型绿荧光蛋白（EGFP）的3个基因1b型不同准种HCV和同一准种5个不同截短片段的CORE... 详细信息

目的为进一步探讨HCV核心蛋白（CORE）在HCV致病机制中的作用，观察基因1b型不同截短片段CORE在瞬时转染HepG2细胞中亚细胞器的分布状况。方法将含有增强型绿荧光蛋白（EGFP）的3个基因1b型不同准种HCV和同一准种5个不同截短片段的CORE融合蛋白真核表达质粒pEGFF-CORE，瞬时转染HepG2细胞，用荧光显微镜及激光共聚焦观察它们在亚细胞的分布状况。结果基因1b型不同准种CORE的N端1-172氨基酸（aa）主要表达于胞质，含有N端越长表达于胞质内越多，而N端1-58aa主要表达于核内，而59-126aa及127-172aa胞质和核内均有表达。结论不同区段CORE在细胞内亚细胞器的表达部位不同，与其在致病机制中功能的发挥可能存在一定的关系。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白亚细胞器定位表达

survivin在儿童急性白血病细胞中的定位表达及与化疗的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国当代儿科杂志 2006年第2期8卷 101-104页

作者：侯燕胡群刘爱国张柳清刘双又华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心湖北武汉430030

目的探讨survivin在急性白血病中的表达、细胞中的定位及与临床疗效的关系,并从细胞水平说明survivin定位表达与化疗疗效的关系。方法应用免疫组织化学链霉亲和素、生物素、过氧化物酶复合物方法,检测62例急性白血病患儿和40例同期住院... 详细信息

目的探讨survivin在急性白血病中的表达、细胞中的定位及与临床疗效的关系,并从细胞水平说明survivin定位表达与化疗疗效的关系。方法应用免疫组织化学链霉亲和素、生物素、过氧化物酶复合物方法,检测62例急性白血病患儿和40例同期住院患儿(排除急性白血病)骨髓细胞survivin的表达,survivin在细胞中的定位。同时用SABC法检测不同浓度柔红霉素作用的Molt-4细胞中survivin定位表达的变化,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果在62例急性白血病患儿中,survivin蛋白表达阳性率为41.9%(26/62),明显高于非急性白血病骨髓5.0%(2/40)(χ2=16.66,P表达为46.2%(12/26),在胞核中的表达为53.9%(14/26),差异无统计学意义(χ2=0.3077,P>0.05),但二者第19天缓解率差异有显著性(P表达阳性者缓解率高于胞浆阳性表达者。DNR处理的Molt-4细胞survivin表达降低,呈时间和剂量依赖性,而且survivin从胞浆移位到胞核,流式细胞术显示细胞凋亡率也呈剂量和时间依赖性。结论①survivin在儿童急性白血病中表达率为41.9%,提示其在儿童急性白血病发生、发展和预后中的意义;②survivin在胞浆和胞核的不同表达与临床化疗疗效有关,可作为判断预后的指标;③DNR可以降低白血病细胞中survivin表达,并使其从胞浆移位到胞核,诱导细胞凋亡。

关键词： survivin 急性白血病定位表达柔红霉素儿童

食管癌组织中基质金属蛋白酶-2,-9的定位表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

郑州大学学报（医学版） 2005年第3期40卷 497-499页

作者：温洪涛张蕾李继昌张云汉郑州大学第一附属医院消化内科郑州450052 郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室郑州450052

目的:探讨食管癌组织中基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,9)的蛋白和mRNA定位表达。方法:用免疫组化,原位杂交,RT-PCR法分别检测41例食管癌组织标本中MMP2,9的mRNA及蛋白定位表达。结果:用RT-PCR、原位杂交2种不同方法检测食管癌组织及癌细胞MMP... 详细信息

目的:探讨食管癌组织中基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,9)的蛋白和mRNA定位表达。方法:用免疫组化,原位杂交,RT-PCR法分别检测41例食管癌组织标本中MMP2,9的mRNA及蛋白定位表达。结果:用RT-PCR、原位杂交2种不同方法检测食管癌组织及癌细胞MMP-9mRNA的阳性表达率分别为80.49%和53.66%,MMP2mRNA的阳性表达率分别为58.54%和9.76%,食管癌细胞与组织成分中MMP9阳性表达相一致,但MMP2明显不符。结论:本研究结果提示MMP-9由食管癌组织中的肿瘤细胞分泌,而MMP-2则非肿瘤细胞所分泌。

关键词：基质金属蛋白酶食管肿瘤定位表达

人胎内耳中碱性成纤维细胞生长因子的定位表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

郑州大学学报（医学版） 2002年第5期37卷 616-618,F003页

作者：陈向东董雪蕾董明敏郑州大学第二附属医院耳鼻咽喉科郑州450003 郑州大学第三附属医院耳鼻咽喉科郑州450052 郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科郑州450052

目的 :研究人胎内耳中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的定位表达情况。方法 :合法水囊引产胎儿 1 0个 ,制备火棉胶包埋颞骨切片 ,采用免疫组织化学技术观察bFGF在内耳中表达情况。结果 :耳蜗毛细胞、支持细胞、螺旋神经节细胞、神经纤... 详细信息

目的 :研究人胎内耳中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的定位表达情况。方法 :合法水囊引产胎儿 1 0个 ,制备火棉胶包埋颞骨切片 ,采用免疫组织化学技术观察bFGF在内耳中表达情况。结果 :耳蜗毛细胞、支持细胞、螺旋神经节细胞、神经纤维均有bFGF表达 ,成熟毛细胞表达很弱 ;前庭毛细胞、支持细胞、上皮下组织和神经纤维均有bFGF表达。结论 :bFGF参与人内耳发育。

关键词：人胎儿内耳碱性成纤维细胞生长因子定位表达