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安脑平冲方对脑出血模型大鼠脑组织中转铁蛋白及其受体表达的影响

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安脑平冲方对脑出血模型大鼠脑组织中转铁蛋白及其受体表达的影响

作者：雷伊琳湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过建立脑出血大鼠模型,探讨安脑平冲方对脑出血模型大鼠脑组织中转铁蛋白及转铁蛋白受体表达的影响,明确安脑平冲方对脑出血后神经功能保护的作用机制,为中医治疗出血性卒中的临床应用提供实验数据和科学依据。方法:选用S... 详细信息

目的:本研究通过建立脑出血大鼠模型,探讨安脑平冲方对脑出血模型大鼠脑组织中转铁蛋白及转铁蛋白受体表达的影响,明确安脑平冲方对脑出血后神经功能保护的作用机制,为中医治疗出血性卒中的临床应用提供实验数据和科学依据。方法:选用SD健康雄性大鼠240只,分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方中剂量组、安脑平冲方高剂量组、吡拉西坦组,每组设6h、72h、7d、14d四个时间点,每组20只大鼠。心脏采血50μl,采用二次注血退针法,注入大鼠右侧尾状核,建立脑出血大鼠模型。各组大鼠造模成功后3h首次灌胃给药,随后每隔24h灌胃给药1次。假手术组、模型组以蒸馏水灌胃。采用改良神经功能缺损评分法,评价各组大鼠不同时间点神经功能;通过HE染色,观察各组大鼠血肿周围脑组织及细胞的病理形态;通过铁染色法,测定各组大鼠血肿周围脑组织铁染色阳性颗粒密度值;采用WB技术,测定各组大鼠不同时间点转铁蛋白(Tf)和转铁蛋白受体(TfR)的蛋白表达水平,探讨安脑平冲方对脑出血模型大鼠脑组织中转铁蛋白、转铁蛋白受体表达的影响。结果:1.神经功能缺损评分结果表明:各组脑出血大鼠造模成功后,模型组及各药物组不同时间点的神经功能缺损评分均高于假手术组(P安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方中剂量组、安脑平冲方高剂量组7d、14d的神经功能缺损评分均显著降低,有统计学意义(P安脑平冲方低剂量组、中剂量组、高剂量组用药后7d、14d纤维组织及细胞水肿明显减轻,细胞损伤恢复,炎性细胞明显减少。3.铁染色后显微镜(×400倍)下观察装片,并采用IMAGE6.0图像分析系统对每张脑片中铁沉积的密度值进行分析,结果表明假手术组6h、72h、7d、14d有少量铁染色阳性颗粒;模型组6h可见铁染色阳性颗粒,72h时铁染色阳性颗粒密度值升高,第7d达峰值,第14d有所降低;各药物组及模型组不同时间点的铁染色阳性颗粒密度值均高于假手术组(P脑组织中TF和TfR蛋白的WB检测:结果表明模型组中各时间点Tf和TfR蛋白表达较假手术组明显升高,有显著性差异(P安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方中剂量组、安脑平冲方高剂量组以及吡拉西坦组TF和TfR蛋白表达较模型组降低,有统计学意义(P安脑平冲方能改善脑出血模型大鼠神经功能缺损评分,减少血肿周围脑组织中铁沉积,降低血肿周围脑组织中转铁蛋白及转铁蛋白受体的表达,其中以安脑平冲方中剂量组用药后第7d、14d疗效更佳。2.安脑平冲方通过降低血肿周围脑组织中转铁蛋白及其受体的表达,减少血肿周围脑组织中铁沉积,减轻脑组织及神经细胞损伤,起到神经功能保护作用。

关键词：脑出血转铁蛋白转铁蛋白受体安脑平冲方

基于PPARγ信号通路探讨安脑平冲方调节大鼠脑出血后神经炎症的作用机制

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时珍国医国药 2023年第1期34卷 26-30页

作者：张瑛郭纯周德生湖南中医药大学研究生院湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的基于PPARγ信号通路,探讨安脑平冲方调节脑出血后神经炎症的作用机制。方法将45只雄性大鼠分为假手术组、模型组、安脑平冲方组、安脑平冲方+GW9662组。采用自体血注入左侧尾状核建立脑出血大鼠模型。造模成功后,给予相应药物干预,... 详细信息

目的基于PPARγ信号通路,探讨安脑平冲方调节脑出血后神经炎症的作用机制。方法将45只雄性大鼠分为假手术组、模型组、安脑平冲方组、安脑平冲方+GW9662组。采用自体血注入左侧尾状核建立脑出血大鼠模型。造模成功后,给予相应药物干预,予以HE染色观察血肿周围脑组织形态,采用改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)进行大鼠神经功能评价;采用免疫荧光(IF)、蛋白免疫印迹法(WB)、实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠血肿周围脑组织PPARγ、Arg-1和IL-4的表达含量及酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测ICH大鼠IL-1β和TNF-α的血清含量。结果与模型组比较,安脑平冲方组可明显减少血肿周围脑组织炎性细胞浸润,降低mNSS评分,提高血肿周围脑组织PPARγ、Arg-1和IL-4的表达量,同时减少IL-1β和TNF-α的血清含量(P安脑平冲方的保护效应。结论安脑平冲方可以减轻脑出血大鼠神经炎症级联反应,促进脑出血大鼠神经功能恢复,其机制可能是通过激活PPARγ信号通路,提高PPARγ、Arg-1和IL-4表达,同时降低IL-1β和TNF-α的表达。

关键词：脑出血神经炎症安脑平冲方过氧化物酶体增殖物激活受体γ 精氨酸酶-1 白介素-4

基于HMGB1/RAGE通路研究安脑平冲方减轻大鼠脑出血后神经元氧化应激损伤的作用机制

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基于HMGB1/RAGE通路研究安脑平冲方减轻大鼠脑出血后神经元氧化应...

作者：黄小丽湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过建立脑出血大鼠模型,探讨中药复方安脑平冲方通过下调HMGB1/RAGE通路来减轻脑出血后氧化应激反应,并进一步发挥神经细胞的保护作用的机制,为安脑平冲方在临床上治疗脑出血提供理论支撑。方法:将S D大鼠随机分为4组,分别是:假... 详细信息

目的:通过建立脑出血大鼠模型,探讨中药复方安脑平冲方通过下调HMGB1/RAGE通路来减轻脑出血后氧化应激反应,并进一步发挥神经细胞的保护作用的机制,为安脑平冲方在临床上治疗脑出血提供理论支撑。方法:将S D大鼠随机分为4组,分别是:假手术组、模型组、安脑平冲汤组、丙酮酸乙酯组(HMGB1抑制剂,E P组),每组有5只大鼠。通过二次注血/退针法,将100u1大鼠自体血注入左侧尾状核建立脑出血大鼠模型。造模后各组大鼠成功苏醒,并予以相应药物进行干预,假手术组、模型组用同等剂量的蒸馏水代替,中间每隔12小时给药1次。各实验组大鼠在造模后第3d进行神经功能缺损评分,用生化试剂盒检测血清丙二醛(MDA)的浓度和血清过氧化氢酶(CAT)的活性,对脑组织冰冻切片进行Tunel染色以观察血肿周围组织的细胞凋亡情况,并通过免疫荧光法检测血肿周围组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白表达。结果:1假手术组没有出现明显的神经功能损伤,与假手术组比较,造模各组在3d的神经功能缺损评分均明显升高,有显著差异(P安脑平冲方组、EP组大鼠神经功能评分均明显降低(P脑出血造模组大鼠3d血清MDA浓度均升高(P安脑平冲方组和E P组在造模成功后第3d的MDA浓度均低于模型组(P脑出血造模组大鼠在第3d血清的CAT活性均升高(P安脑平冲方组和EP组CAT活性均增高(P脑组织中的细胞凋亡结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠3d血肿周围脑组织的平均荧光密度值均增大,差异有统计学意义(P安脑平冲方组、EP组在第3d的平均光密度值均降低,差异有统计学意义(P脑组织中的HM GB1和R A GE蛋白表达结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠3d血肿周围脑组织的平均荧光强度均增多,差异具有统计学意义(P安脑平冲方组、EP组血肿周围脑组织在第3d的平均荧光强度均降低,差异具有统计学意义(P安脑平冲方可能通过减少脑出血模型大鼠脑组织血肿周围中HMGB1蛋白及其受体RAGE蛋白的表达,降低体内氧化应激产物MDA的浓度及增加抗氧化酶CAT的活性,从而减轻氧化应激反应,抑制神经细胞的凋亡,起到保护神经功能的作用。

关键词：脑出血氧化应激高迁移率族蛋白B1 晚期糖基化终产物安脑平冲方

从P2X7R/NLRP3通路探讨安脑平冲方对脑出血后炎症反应的影响

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从P2X7R/NLRP3通路探讨安脑平冲方对脑出血后炎症反应的影响

作者：左玲敏湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨安脑平冲方对脑出血后脑组织中P2X7R、NLRP3、caspase-1蛋白表达及血清IL-1β、IL-18含量的影响,明确安脑平冲方抑制脑出血后炎症反应的可能作用机制,为临床用药提供科学依据。方法:将192只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、造模... 详细信息

目的:探讨安脑平冲方对脑出血后脑组织中P2X7R、NLRP3、caspase-1蛋白表达及血清IL-1β、IL-18含量的影响,明确安脑平冲方抑制脑出血后炎症反应的可能作用机制,为临床用药提供科学依据。方法:将192只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、造模组。造模组造模成功后随机分为模型组(B组)、安脑平冲方低剂量组(C组)、安脑平冲方高剂量组(D组)、七叶皂苷钠组(E组)、BBG组(F组),每组设6h、24h、3d、7d 4个时间点,每组每个时间点8只大鼠。造模组采用二次注血/退针法,将80μL大鼠自体血注入左侧尾状核建立脑出血大鼠模型。各时间点各组大鼠造模成功苏醒后首次药物干预,以后每隔12小时给药(BBG组每隔24h给药),假手术组、模型组用蒸馏水灌胃。相应时间点各组大鼠进行改良神经功能缺损评分;HE染色观察大鼠脑组织病理形态改变;ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-18含量;IHC观察24h各组大鼠血肿周围脑组织P2X7R、NLRP3、caspase-1蛋白表达情况。结果:1.神经功能缺损评分:模型组和各药物组大鼠各时间点(6h、24h、3d、7d)神经功能缺损评分均高于假手术组(P0.05);24h安脑平冲方高剂量组、BBG组的神经功能缺损评分较模型组降低,差异有统计学意义(P脑组织形态正常,细胞排列整齐,胞浆丰富,细胞核淡染,核仁清晰;模型组可见神经纤维溃变,细胞空泡样改变,肿胀变形,组织间隙水肿,以3d最为明显,胶质细胞增生,神经元核仁皱缩,变性、坏死,数量减少;各药物组6h较模型组无明显差异,24h、3d、7d与模型组比较细胞水肿减轻,胶质细胞减少,神经元变性、坏死恢复,安脑平冲方高剂量组药效优于安脑平冲方低剂量组及七叶皂苷钠组,随着用药时间的延长,效果越好。3.各组各时间点大鼠血清中IL-18、IL-1β含量:模型组和各药物组大鼠各时间点(6h、24h、3d、7d)血清IL-1β含量均高于假手术组(P0.05);24h安脑平冲方高剂量组、七叶皂苷钠组、BBG组的血清IL-1β含量较模型组减少,差异有统计学意义(P安脑平冲方高剂量组大鼠血清IL-1β含量明显低于七叶皂苷钠组。模型组和各药物组大鼠各时间点(6h、24h、3d、7d)血清IL-18含量均高于假手术组(P0.05);24h安脑平冲方高剂量组、七叶皂苷钠组、BBG组的血清IL-18含量较模型组减少,差异有统计学意义(P安脑平冲方高剂量组大鼠血清IL-18含量明显低于七叶皂苷钠组,7d安脑平冲方高剂量组大鼠血清IL-18含量低于BBG组。4.24h大鼠血肿周围脑组织P2X7R、NLRP3、caspase-1表达情况:假手术组P2X7R、NLRP3、caspase-1蛋白均有少量表达,模型组和各药物组P2X7R、NLRP3、caspase-1的平均光密度值均增大,差异有统计学意义(P平均光密度值较模型组均降低(P安脑平冲高剂量组P2X7R、NLRP3、caspase-1的平均光密度值较模型组均显著降低(P平。结论:1.安脑平冲汤能改善脑出血大鼠神经功能缺损症状,抑制脑出血后炎症反应,保护神经功能。2.安脑平冲方可能是通过下调P2X7R的表达,从而抑制NLRP3炎性小体合成,降低血清炎症因子IL-1β、IL-18含量,抑制脑出血后炎症反应。

关键词：安脑平冲方脑出血炎症 P2X7R NLRP3

从BDNF/TrkB信号通路探讨安脑平冲方对脑出血大鼠神经保护的作用

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从BDNF/TrkB信号通路探讨安脑平冲方对脑出血大鼠神经保护的作用

作者：陈小红湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨安脑平冲方对脑出血后脑组织中BDNF、Trk B蛋白表达的影响,明确安脑平冲方对脑出血后神经保护的可能作用机制,为临床用药提供科学依据。方法:将100只SD大鼠随机分为假手术组（A组）、造模组。造模组造模成功后随机分为模型组（... 详细信息

目的:探讨安脑平冲方对脑出血后脑组织中BDNF、Trk B蛋白表达的影响,明确安脑平冲方对脑出血后神经保护的可能作用机制,为临床用药提供科学依据。方法:将100只SD大鼠随机分为假手术组（A组）、造模组。造模组造模成功后随机分为模型组（B组）、安脑平冲方组（C组）、奥拉西坦组（D组）,每组设24h、3d、7d等3个时间点,每组每个时间点6只大鼠。造模组采用二次注血/退针法,将100ul大鼠自体血注入左侧尾状核建立脑出血大鼠模型。各时间点各组大鼠造模成功苏醒后首次药物干预,以后每隔12小时给药,假手术组、模型组用蒸馏水灌胃。相应时间点各组大鼠进行改良神经功能缺损评分;尼氏染色观察大鼠脑组织病理形态改变;Tunel染色观察大鼠出血脑组织周围细胞凋亡情况;Western Blot法检测大鼠血肿周围脑组织BDNF、Trk B蛋白表达情况。结果:1.神经功能缺损评分:假手术组未见明显神经功能缺损症状,模型组和各药物组大鼠各时间点（24h、3d、7d）神经功能缺损评分明显升高（P＜0.01）,差异有统计学意义。模型组24h神经功能缺损评分最高,随后逐渐下降;3d、7d安脑平冲方组、奥拉西坦组神经功能缺损评分比模型组均降低,但仍高于假手术组,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.尼氏染色:假手术组各时间点大鼠脑组织细胞形态清晰,排列整齐,呈类椭圆形,数量多,未见神经元丢失或炎性细胞浸润;模型组可见细胞形态、组织结构受损,细胞肿胀变形,神经元丢失、胞体变小,尼氏小体减少,细胞质染色变浅或浓缩,细胞核出现固缩、破碎或溶解,以3d最为明显;各药物组24h、3d、7d与模型组比较细胞肿胀减轻,核固缩、破碎减少,神经元变性、坏死有所恢复,安脑平冲方组与奥拉西坦组药效相当,随着用药时间的延长,效果越好。***染色:假手术组无出血,装片中未见棕褐色凋亡细胞,模型组和各药物组大鼠各时间点（24h、3d、7d）平均光密度值均增大,差异有统计学意义（P＜0.01）,与模型组相比,安脑平冲方组、奥拉西坦组各个时间点（24h、3d、7d）的平均光密度值均降低,并且随着时间的推移逐渐下降,以7d下降最明显（P＜0.01）,差异有统计学意义。*** Blot蛋白分析:假手术组各时间点BDNF、Trk B的表达无明显变化,模型组各时间点BDNF、Trk B的表达逐渐升高,以7d达到高峰,安脑平冲方组及奥拉西坦组各个时间点BDNF、Trk B的表达增加,以7d增加明显（P＜0.01）,差异有统计学意义。与假手术组比较,模型组各时间点脑组织中BDNF、Trk B的含量增加,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）,与模型组比较,安脑平冲方组、奥拉西坦组各个时间点BDNF、Trk B的表达增加,以7d增加明显（P＜0.05或P＜0.01）,差异有统计学意义。结论:1.安脑平冲方能够有效地改善脑出血大鼠神经功能缺损症状,减轻脑出血后尼氏小体的破坏,减少神经细胞凋亡的发生,发挥了神经保护的功能。2.安脑平冲方可能是通过增加出血脑组织中BDNF、Trk B的蛋白表达,改变血肿周围的微环境状态,促进神经元修复,从而发挥了脑出血后的神经保护作用。

关键词：脑出血安脑平冲方 BDNF TrkB 神经保护

基于SIRT1/PGC-1α通路探讨安脑平冲方对大鼠脑出血后氧化应激的影响

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基于SIRT1/PGC-1α通路探讨安脑平冲方对大鼠脑出血后氧化应激的...

作者：雷洺湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:从SIRT1/PGC-1α信号通路对氧化应激的调控作用,探讨中药复方安脑平冲方在脑出血后的神经保护作用机制,为临床治疗脑出血提供依据。方法:将20只SD大鼠随机分为4组,分别是:假手术组(J组)、模型组(M组)、安脑平冲汤组(A组)、依达拉奉... 详细信息

目的:从SIRT1/PGC-1α信号通路对氧化应激的调控作用,探讨中药复方安脑平冲方在脑出血后的神经保护作用机制,为临床治疗脑出血提供依据。方法:将20只SD大鼠随机分为4组,分别是:假手术组(J组)、模型组(M组)、安脑平冲汤组(A组)、依达拉奉组(Y组),每组5只大鼠。造模组采用二次注血/退针法,将80ul大鼠自体血注入左侧尾状核建立脑出血大鼠模型,其中假手术组未注射血液或其它试剂。造模3d后,对各组大鼠进行mNSS评分以评估神经功能缺损情况;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中氧化应激产物8-OHdG含量评估大鼠氧化应激损伤程度;CAT活性试剂盒检测血清中CAT活力评估大鼠抗氧化能力;采用Tunel染色观察大鼠脑出血后脑组织神经元损伤凋亡情况;通过免疫荧光检测SIRT1和PGC-1α蛋白的表达变化。结果:1.假手术组大鼠神经功能未见异常,与假手术组比较,模型组和给药组大鼠有明显的神经功能缺损(P安脑平冲方组和依达拉奉组的神经功能评分有明显的好转(P安脑平冲方组和依达拉奉组大鼠血清8-OHdG含量显著降低(P安脑平冲方组的CAT活性显著升高(P脑出血大鼠给药3d后进行TUNEL染色发现,假手术组未见凋亡细胞,模型组和给药组大鼠出血周围脑组织可见明显的神经细胞凋亡(P安脑平冲方组和依达拉奉组大鼠血肿周围组织神经元凋亡细胞明显减少(P安脑平冲方组和依达拉奉组的SIRT1、PGC-1α的表达也显著增加(P安脑平冲方可能通过增加脑出血大鼠血肿周围脑组织中SIRT1蛋白及其受体PGC-1α蛋白的表达,降低血清中氧化应激产物8-OHdG的浓度及增加抗氧化酶CAT的活性,抑制脑出血周围组织氧化应激和细胞凋亡,起到神经功能保护作用。

关键词：脑出血氧化应激安脑平冲方 SIRT1 PGC-1α

基于BDNF-Nrf2信号通路研究安脑平冲方对脑出血后神经元的保护作用

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基于BDNF-Nrf2信号通路研究安脑平冲方对脑出血后神经元的保护作用

作者：漆宇昕湖南农业大学

学位级别：硕士

目的:脑出血是神经内科常见危重病,脑出血后神经细胞死亡是继发性脑损伤的重要原因。本研究通过建立脑出血后血红蛋白损伤神经元模型,体外模拟观察安脑平冲方对血红蛋白损伤神经元细胞内亚铁离子超载及过度氧化应激的调节作用,以及对BDN... 详细信息

目的:脑出血是神经内科常见危重病,脑出血后神经细胞死亡是继发性脑损伤的重要原因。本研究通过建立脑出血后血红蛋白损伤神经元模型,体外模拟观察安脑平冲方对血红蛋白损伤神经元细胞内亚铁离子超载及过度氧化应激的调节作用,以及对BDNF-Nrf2信号通路的影响,以阐明安脑平冲方对脑出血后神经元的保护作用机制。方法:原代培养皮质神经元,分别以10μM、15μM、20μM、25μM、30μM的血红蛋白干预24h,然后显微镜下观察神经元细胞形态,通过CCK-8检测其细胞活力,确认血红蛋白损伤神经元的最佳浓度。进一步采用5%、10%、20%安脑平冲方含药血清以及10μM、20μM、30μM甲硫磺去铁胺干预血红蛋白损伤神经元模型,24h后观察神经元细胞形态并使用CCK-8法检测其细胞活力,确认安脑平冲方含药血清和甲硫磺去铁胺的最佳浓度。将神经元铺于96孔板,设正常组、模型组、空白血清组、安脑平冲方含药血清和甲硫磺去铁胺组,用相应药物干预24h,通过特异性Fe荧光探针检测各组神经元内亚铁离子的含量变化;采用ROS荧光染色检测各组神经元内活性氧水平;提取各组细胞总蛋白,采用Western blot检测BDNF和Nrf2的表达水平。结果:(1)血红蛋白损伤神经元的细胞形态学观察以及CCK-8法检测结果表明,与正常组相比,25μM血红蛋白处理24h,活细胞数量减少,神经元突触网络变少,细胞存活率为48%(P安脑平冲方含药血清组能促使血红蛋白损伤神经元的细胞存活率达到95%(P安脑平冲方组亚铁离子荧光值降低(p安脑平冲方组ROS荧光值显著降低(p平升高(p安脑平冲方以及甲硫磺去铁胺组BDNF和Nrf2表达水平显著提高(p安脑平冲方组的BDNF和Nrf2表达高于甲硫磺去铁胺组。结论:安脑平冲方可能通过上调BDNF-Nrf2信号通路表达,调节血红蛋白损伤神经元内亚铁离子过载以及过度氧化应激,发挥对神经元的保护作用。

关键词：脑出血神经元安脑平冲方 BDNF Nrf2

探讨安脑平冲方对脑出血大鼠神经细胞自噬的影响

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探讨安脑平冲方对脑出血大鼠神经细胞自噬的影响

作者：康健颖湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究安脑平冲方对脑出血后大鼠神经细胞自噬的作用及机制。方法:参照随机数字表法将96只SD大鼠分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方高剂量组。采用鼠尾状核注入法制作脑出血模型,每组下设12h、1d、3d、7d4个亚组... 详细信息

目的:研究安脑平冲方对脑出血后大鼠神经细胞自噬的作用及机制。方法:参照随机数字表法将96只SD大鼠分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方高剂量组。采用鼠尾状核注入法制作脑出血模型,每组下设12h、1d、3d、7d4个亚组,术后各组给予相应药物灌胃,2次/d,假手术组、模型组均给予同等剂量蒸馏水灌胃。然后在相应时间点断头取脑组织,依据量表进行各组大鼠各时间点神经功能缺损评分、HE染色法观察大鼠脑组织形态学改变、Western Blot法检测脑组织中Beclin 1、LC3A、LC3B蛋白的表达。结果:1.神经功能缺损评分:与假手术组比较,模型组各时间点神经功能缺损评分均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,中药低剂量组、中药高剂量组第12h、1d、3d、7d神经功能缺损评分均显著降低（P＜0.05）。***染色:假手术组神经细胞密集,排列整齐,神经元胞浆丰富,淡染,胞核居中,核仁清楚,胞浆无红染,细胞周围间隙致密无水肿。模型组可见神经细胞坏死、水肿以及胶质细胞的增多和神经元的减少、变性,其中坏死的神经细胞主要表现为核固缩、空泡形成。低、高剂量组12h可见不同程度的细胞水肿、神经纤维溃变及炎性细胞浸润,出现变性细胞及坏死细胞,随着给药时间的延长,水肿程度及炎症反应逐渐降低,高剂量组第3天可见少量细胞轻度水肿,炎症细胞减少,高剂量组、低剂量组效果差异不明显。*** Blot检测:（1）与假手术组比较,模型组、安脑平冲方低、高剂量组Beclin 1均显著升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与假手术组比较,模型组大鼠在同一时间点Beclin 1的表达升高,并随时间延长升高越明显,直至7d;与模型组比较,安脑平冲方低剂量组、高剂量组第1d、3d、7d Belin 1的表达明显降低（P＜0.05）,安脑平冲方组低剂量组、高剂量组第3d降低最明显（P＜0.01）。（2）与模型组比较,安脑平冲方低、高剂量组LC3A、LC3B蛋白表达均下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与安脑平冲方组低剂量组相比安脑平冲方高剂量LC3A、LC3B蛋白表达差异不明显,差异不具有统计学意义（P＞0.05）。（3）与模型组比较,安脑平冲方低、高剂量组LC3B蛋白表达均下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与安脑平冲方组低剂量组相比安脑平冲方高剂量LC3B蛋白表达差异不明显,差异不具有统计学意义（P＞0.05）。结论:1.安脑平冲汤可改善脑出血大鼠神经功能缺失评分,减轻脑水肿,发挥脑神经保护的作用。2.可能机制:安脑平冲方通过抑制血肿周围神经细胞自噬改善脑出血。3.安脑平冲方在调节自噬改善脑出血方面的量效关系不显著。

关键词：脑出血自噬安脑平冲方 Beclin1 LC3

安脑平冲方对脑出血大鼠脑血肿周围组织Tf及TfR的影响

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中国中医急症 2020年第1期29卷 9-13页

作者：郭纯雷伊琳左玲敏颜思阳刘利娟冯君健刘峻呈周德生湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南省浏阳市中医医院湖南浏阳410300 湖南中医药大学湖南长沙410208 广东省深圳市宝安区福永人民医院广东深圳518103

目的观察安脑平冲方对脑出血模型大鼠神经功能缺损、脑组织铁沉积及脑血肿周围组织转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白受体(TfR)表达水平的影响。方法将240只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方中剂量组、安脑平... 详细信息

目的观察安脑平冲方对脑出血模型大鼠神经功能缺损、脑组织铁沉积及脑血肿周围组织转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白受体(TfR)表达水平的影响。方法将240只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方中剂量组、安脑平冲方高剂量组、吡拉西坦组,每组再分为6 h、3 d、7 d、14 d 4个亚组,每个亚组10只大鼠。使用大鼠自体全血于左侧尾状核立体定位注射,并采用二次注血退针法复制脑出血大鼠模型。造模成功后的大鼠,除假手术组和模型组外,均给予相应药物进行干预,并对各组各时间点的动物采用Berderson法进行神经功能缺损评分,摩列利铁染色法检测脑组织铁沉积的变化,Western blotting法检测脑血肿周围组织Tf和TfR的蛋白表达水平。结果模型组及各药物组不同时间点的神经功能缺损评分均高于假手术组(P安脑平冲方低、中、高剂量组7、14 d的神经功能缺损评分均低于模型组(P平均光密度值统计分析结果显示模型组6 h可见铁离子沉积,3 d逐渐升高,第7日达峰值,第14日有所降低;模型组和各药物组在不同时间点的铁沉积密度值均显著高于假手术组(P平均光密度值与同期模型组比较下降显著(P安脑平冲方低、中、高剂量组各时间点Tf和TfR蛋白表达较模型组降低(P安脑平冲方能改善脑出血大鼠的神经功能损伤,其机制可能为通过下调Tf和TfR来减少铁离子向神经细胞中转移,从而产生神经保护作用。

关键词：脑出血安脑平冲方转铁蛋白转铁蛋白受体铁沉积神经保护大鼠