检索结果-南通市图书馆

作者：帅维正第三军医大学

学位级别：硕士

呼吸道病毒是一组能够通过呼吸道传播引起呼吸系统或及其他系统疾病的病原微生物。呼吸道病毒传染性强,可以引起局部暴发和世界大范围流行,严重影响人类健康。由于呼吸道致病微生物感染临床症状相似,影像学表现缺乏特异性,因此病原学证... 详细信息

呼吸道病毒是一组能够通过呼吸道传播引起呼吸系统或及其他系统疾病的病原微生物。呼吸道病毒传染性强,可以引起局部暴发和世界大范围流行,严重影响人类健康。由于呼吸道致病微生物感染临床症状相似,影像学表现缺乏特异性,因此病原学证据在临床诊断和流行病监控中十分重要,但目前的检测方法,如病毒分离、病毒抗原检测和血清学检测等方法,尚不能满足高效、快速和高通量的要求。季节性甲型流感病毒、乙型流感病毒、人鼻病毒及猪源H1N1流感病毒是致病性强和传播速度快的常见重要呼吸道病毒,亟需可以快速、准确鉴别的检测方法。目的: 建立一种可同时检测四种常见呼吸道病毒的多重RT-PCR快速检测方法。方法: 1、收集2009年9月至2009年10月在第三军医大学附属新桥医院以急性上呼吸道感染为主要表现的门诊患者咽拭子标本。提取病毒RNA,通过常规RT-PCR方法进行检测,获得上感病人常见感染呼吸道病毒病毒学证据;2、使用pBS-TⅡ质粒作为载体,构建包含INFA、INFB、HRV和SOIVs四种病毒目的基因序列的重组子标准品;3、通过对反应条件和反应体系的优化,建立可同时检测季节性甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)、人鼻病毒(HRV)和猪源H1N1流感病毒(SOIVs)的多重RT-PCR方法并评价其特异性和敏感性;4、应用常规RT-PCR与多重RT-PCR方法同时对上感患者咽拭子进行检测,比较两种方法的检测效能。结果: 1、在2009年9月至10月,共纳入病例36例,其中男21例,女15例,年龄: 24±10.08岁。在临床诊断为急性上呼吸道感染的患者咽拭子样本中检测到四种呼吸道病毒(季节性甲型流感病毒、乙型流感病毒、人鼻病毒、猪源H1N1流感病毒),总例数为12例,其中季节性甲型流感病毒检查阳性3例,乙型流感病毒阳性1例,人鼻病毒阳性3例,猪源H1N1流感病毒阳性5例。在流感病毒感染病例中,SOIVs所占比例为55.6%。 2、以pBS-TⅡ质粒作为载体,构建了包含INFA、INFB、HRV和SOIVs四种病毒目的基因序列的重组子,经过定量鉴定和稀释,制备了浓度为101-107 copies/ml的检测标准品;3、建立了可同时检测四种病毒的多重RT-PCR方法,该法可同时或分别扩增INFA 212bp、INFB 489bp、HRV 380bp和SOIVs 153bp的基因片段。检测的敏感性分别为104、104、103、104copies/ml。采用相同的反应体系和反应条件,分别对其他6种常见呼吸道病原体(包括肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌核酸)进行扩增,均未检测出扩增产物。 4、常规RT-PCR与多重RT-PCR方法对临床样本的检测阳性一致率为83.3%,经χ检验两种检测方法的检测效能无统计学差异。同时进行的吻合系数检验提示两种诊断方法吻合度较强且有统计学意义。结论: 1、在2009年秋季,重庆地区SOIVs疫情处于流行阶段,是流感病毒中的优势病毒株。 2、本课题构建的此种多重RT-PCR检测方法可用于呼吸道感染患者四种常见呼吸道病毒(INFA、INFB、HRV、SOIVs)的快速甄别。

关键词：多重RT-PCR 季节性甲型流感病毒乙型流感病毒人鼻病毒猪源H1N1流感病毒

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重庆单中心2009至2011年急性呼吸道感染住院患儿2种甲型流感病毒检出情况及临床特征分析

引用

中国循证儿科杂志 2014年第3期9卷 181-185页

作者：谢晓虹金玲彭才静王丽佳邓昱刘恩梅重庆医科大学附属儿童医院重庆400014

目的了解重庆地区急性呼吸道感染住院患儿新型甲型H1N1流感病毒(S-OIVs)与季节性甲型流感病毒(IVA)检出情况及临床特征。方法收集2009年6月至2011年5月重庆医科大学附属儿童医院呼吸科急性呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物(NPA),采用荧光定... 详细信息

目的了解重庆地区急性呼吸道感染住院患儿新型甲型H1N1流感病毒(S-OIVs)与季节性甲型流感病毒(IVA)检出情况及临床特征。方法收集2009年6月至2011年5月重庆医科大学附属儿童医院呼吸科急性呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物(NPA),采用荧光定量PCR技术检测S-OIVs和季节性IVA基因组RNA,分析流行特点和临床特征,并采用Logistic回归分析急性呼吸道感染进展为重症肺炎的危险因素。结果共收集NPA标本1 074份,经PCR检测IVA阳性105份(9.8%),其中1.4%(15/1 074)为S-OIVs,8.4%(90/1 074)为季节性IVA。2种病毒阳性病例男女比例、年龄分布和平均住院天数差异均无统计学意义(P>0.05)。①S-OIVs在2009年夏季高发(11/15,73.3%),季节性IVA在2009年夏季(26/95,27.4%)、2010年夏季(22/95,23.2%)和2011年春季(25/95,26.3%)检出率明显高于其他各季节。②2种病毒阳性患儿临床症状、外周血WBC计数、CRP水平相当,S-OIVs阳性患儿重症毛细支气管炎1例(6.7%),季节性IVA阳性患儿重症肺炎14例(15.6%)。③15份S-OIVs阳性标本中,单纯S-OIVs感染3份,合并其他病毒感染9份,痰培养阳性7份。90份季节性IVA阳性标本中,单纯季节性IVA感染21份,合并其他病毒感染42份,痰培养阳性10份。④心脏基础疾病(OR=13.60)、发生喘息(OR=6.82)和合并腺病毒感染(OR=6.21)为季节性IVA感染患儿进展为重症肺炎的危险因素。结论重庆单中心急性呼吸道感染住院患儿S-OIVs检出率低于季节性IVA。S-OIVs和季节性IVA感染患儿均以下呼吸道感染为主。心脏基础疾病、喘息症状和合并腺病毒感染有可能是季节性IVA感染患儿进展为重症肺炎的危险因素。

关键词：新型甲型H1N1流感病毒季节性甲型流感病毒儿童急性呼吸道感染

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