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人参研究 2024年第2期36卷 6-10页

作者：睢诚马颖琳付雯雯袁小平于晓风谢勇赵继新徐华丽睢大筼吉林省北域红药业有限公司通化134000 吉林大学药学院长春130021

目的观察姜西洋参与西洋参对大鼠虚寒证模型的影响。方法112只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,西洋参低、中、高剂量组及姜西洋参小、中、大剂量组,每组14只。除正常组外,各组均每日灌胃给予寒凉药4ml/只,连续35天建立大鼠虚寒证模型... 详细信息

目的观察姜西洋参与西洋参对大鼠虚寒证模型的影响。方法112只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,西洋参低、中、高剂量组及姜西洋参小、中、大剂量组,每组14只。除正常组外,各组均每日灌胃给予寒凉药4ml/只,连续35天建立大鼠虚寒证模型。给寒凉药第8天起,正常组及模型组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠,西洋参及姜西洋参小、中、大剂量组分别灌胃西洋参及姜西洋参0.5、1.0、2.0g/kg,每日1次,连续给药28天。观察大鼠行为状态,记录每周体重。于给药第28天,各组动物放入代谢笼,收集尿液,测定尿液中17羟皮质类固醇(17-OHCS)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量。第29天,各组动物麻醉后腹主动脉采血,测定血清促甲状腺激素(TSH)、环化腺苷酸(cAMP)、环化鸟苷酸(cGMP)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)含量。取胃组织,制备石蜡切片,HE染色,观察病理改变。结果与正常组比较,模型组及西洋参各剂量组大鼠1~4周体重有下降趋势,姜西洋参各剂量组大鼠1~4周体重无明显差异;与模型组比较,西洋参各剂量组大鼠1~4周体重均无明显差异,姜西洋参各剂量组可使大鼠体重明显增加(P西洋参各剂量组大鼠尿液17-OHCS、E、NE含量均明显降低(P姜西洋参0.5g/kg大鼠尿液NE含量明显降低(P西洋参2.0g/kg大鼠尿液中17-OHCS、E及NE含量均明显降低(P姜西洋参1.0、2.0g/kg大鼠尿液17-OHCS、E及NE含量均明显增加(P西洋参各剂量组大鼠血清cAMP含量及cAMP/cGMP比值均明显降低(P姜西洋参各剂量组大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值均无明显差异;与模型组比较,西洋参各剂量组大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值均无明显差异,姜西洋参1.0、2.0g/kg大鼠血清cAMP含量及cAMP/cGMP比值均明显增加(P西洋参各剂量组大鼠血清TSH含量明显降低(P姜西洋参各剂量组大鼠血清TSH、IL-2及IL-8含量均无明显差异;与模型组比较,西洋参2.0g/kg大鼠血清TSH明显降低(P姜西洋参1.0、2.0g/kg大鼠血清TSH及IL-2均明显增加(P西洋参及制西洋参各剂量组与正常组比较均无明显差异。结论虚寒证大鼠表现为大便溏泄,倦怠,皮毛疏松,体重减轻,交感-肾上腺髓质、免疫及物质代谢相关因子明显降低。西洋参连续服用28天可加重虚寒证大鼠上述寒凉症状,而姜西洋参对大鼠寒凉症状具有明显改善作用。

关键词：姜西洋参西洋参虚寒证模型交感-肾上腺髓质物质代谢大鼠

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姜西洋参和西洋参化学成分及防治顺铂所致急性肾损伤作用的比较研究

姜西洋参和西洋参化学成分及防治顺铂所致急性肾损伤作用的比较研...

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作者：王文娟吉林大学

学位级别：硕士

西洋参(Panax quinquefolium L.)是五加科人参属多年生草本植物,具有益气养阴、清热生津之功效。因其寒凉偏性使其临床应用受到一定限制。古籍中多记载不同的西洋参炮制方法,以改善西洋参寒凉偏性。《吴鞠通医案》中大量记载了西洋参的... 详细信息

西洋参(Panax quinquefolium L.)是五加科人参属多年生草本植物,具有益气养阴、清热生津之功效。因其寒凉偏性使其临床应用受到一定限制。古籍中多记载不同的西洋参炮制方法,以改善西洋参寒凉偏性。《吴鞠通医案》中大量记载了西洋参的炮制方法,其中包括西洋参与姜汁炒、姜汁制黄色和姜炒等;姜西洋参已收录于《吉林省中药饮片炮制规范》(2020年版)第一册。虽然临床实践和药理研究均证明西洋参经生姜炮制后可增强其益气、润燥和扶正气之功效,但炮制引起西洋参化学成分的变化以及对西洋参入血成分变化的影响尚不清楚。因此,本研究利用UPLC-Q-TOF-MS技术对西洋参经生姜炮制后化学成分的变化及对西洋参体内入血成分的影响进行系统的研究。利用网络药理学、药效学和非靶向代谢组学的方法,对姜西洋参和西洋参防治顺铂所致急性肾损伤作用机制进行了深入研究。主要研究内容包括以下几个方面:(1)姜西洋参和西洋参化学成分的对比分析为明确姜制过程对西洋参化学成分变化的影响,本研究利用UPLC-Q-TOF-MS技术系统分析了姜西洋参和西洋参化学成分,共鉴定出包括三萜类皂苷和姜醇类等85种化合物。通过姜西洋参和西洋参化合物的种类对比分析发现,姜西洋参比西洋参多出6-Gingerdione、6-Gingerol、8-Gingerol和10-Gingerol等4个来源于生姜的成分,提示姜制过程对西洋参体外化学成分的种类没有影响。采用PCA和OPLS-DA多元统计分析方法,分析姜西洋参与西洋参的差异成分和相对含量变化。结果表明姜西洋参与西洋参之间含量具有显著性差异的化合物52个(P姜制后含量显著降低,Ginsenoside Re、Ginsenoside Rb2和6-Gingerdione等28个化合物姜制后含量显著升高,推测西洋参在与姜汁闷润、干燥过程中,可能干预西洋参化学成分的代谢转化过程。采用相关分析解析姜西洋参差异成分间的相关性,结果显示,生姜各成分与西洋参成分间存在相关性,进一步验证了姜汁成分在姜制过程中干预西洋参皂苷类成分代谢转换。对52个差异化合物中的12个主要化合物进行定量分析,其含量测定结果与相对含量分析结果一致。本研究明确了姜制对西洋参成分变化的影响,为姜西洋参与西洋参入血成分的差异分析奠定物质基础。(2)姜西洋参和西洋参入血成分的对比分析为探究姜制过程对西洋参入血成分的影响,本研究在明确姜西洋参体外成分的基础上,进一步探讨姜西洋参与西洋参体内入血成分的差异与变化规律。基于UPLC-Q-TOF-MS方法对姜西洋参、西洋参灌胃给予大鼠的血浆中药物成分进行分析鉴定。结果显示,姜西洋参组共鉴定入血成分37种,西洋参入血成分27种。与体外成分分析结果对比,有8种西洋参化学成分仅在血浆中被鉴定。对比姜西洋参与西洋参入血成分,发现Ginsenoside Rh、Ginsenoside Rh、Ginsenoside Rh和Ginsenoside C-K等稀有人参皂苷以及6-Gingerdione、6-Gingerol、8-Gingerol和10-Gingerol仅鉴定于姜西洋参组,推测姜西洋参成分吸收入血后在体内促进大分子人参皂苷的吸收代谢从而转化为稀有皂苷。进一步对入血成分间潜在代谢转化规律进行分析,结果显示,姜西洋参可以加速多种人参皂苷水解代谢,使PPD、PPT型人参皂苷最终代谢成的苷元。通过体外成分和体内入血成分分析可见,姜制过程中可促进西洋参皂苷类药效成分吸收入血,发挥更好的体内药效作用。本研究为接下来基于姜西洋参和西洋参入血成分的网络药理学比较研究奠定了基础。(3)基于网络药理学比较研究姜西洋参和西洋参防治顺铂所致急性肾损伤的作用机制已有文献报道,西洋参对顺铂所致急性肾损伤具有较好的防治作用,为深入探究姜西洋参与西洋参潜在的药效及作用机制的差异,本研究采用基于入血成分的靶向网络药理学方法,系统预测姜西洋参和西洋参潜在干预疾病及药理作用机制。基于Swiss Target Prediction和Dis Ge Net数据库进行疾病富集预测分析,发现姜西洋参对于肾脏损伤具有干预作用。进一步分析发现姜西洋参防治顺铂诱导的急性肾损伤潜在作用靶点为557个,显著多于西洋参(441个)。姜西洋参组潜在靶点主要富集的与顺铂所致急性肾损伤相关的关键信号通路多于西洋参组,主要包括PI3K-Akt信号通路、JAK-STAT信号通路、NF-kappa B信号通路、花生四烯酸代谢通路和坏死性凋亡信号通路,SRC、PIK3R1、HSP90AA1、PIK3CA、MAPK1、PTPN11等靶点不仅与上述差异通路密切相关,且是PPI网络分析中具有较高关联性的蛋白,这些靶

关键词：姜西洋参主成分分析入血成分急性肾损伤网络药理学代谢组学

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姜西洋参炮制及降糖活性研究

姜西洋参炮制及降糖活性研究

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作者：胡明欣吉林大学

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西洋参(Panax quinquefolium L.)为五加科人参属植物,具有补气养阴,清热生津等功效,虽然其引入中国仅300年,但已广泛应用于治疗各种疾病,例如糖尿病、阿尔默兹海默症等。但由于西洋参药性寒凉,脾胃脏器虚寒者长期服用易出现腹痛、四肢... 详细信息

西洋参(Panax quinquefolium L.)为五加科人参属植物,具有补气养阴,清热生津等功效,虽然其引入中国仅300年,但已广泛应用于治疗各种疾病,例如糖尿病、阿尔默兹海默症等。但由于西洋参药性寒凉,脾胃脏器虚寒者长期服用易出现腹痛、四肢欠温等不良反应,这一特性限制了其广泛应用。古籍中记载西洋参以不同方式炮制后入药,可以改善其性味寒凉的特质,姜西洋参就是其中一种。生姜作为一种常见的药用炮制辅料,具有解表散寒,温中止呕的特性。其在与不同中药炮制的过程中可以改变药性,达到减毒增效的作用。目前,在中医临床上也常用生姜炮制西洋参。有研究表明,姜西洋参可以增强西洋参的补气作用,并改变其寒凉偏性。但目前尚无姜西洋参的炮制规范及其质量标准,为了保证姜西洋参工艺稳定,质量可靠,需要量化姜西洋参的炮制工艺参数,构建完善全面的质量评价体系。本文主要从生姜炮制西洋参的工艺、姜西洋参的质量标准和姜西洋参初步降糖活性三个方面进行研究。1.姜西洋参炮制工艺研究在查阅大量医案及文献基础上,选择姜炙法和姜制法两种炮制方法,利用单因素和正交实验,以外观性状和总皂苷为指标,对姜炙法和姜制法两种炮制工艺参数进行考察。结果确定,(1)最佳姜炙工艺为:每100 g西洋参加入10 mL姜汁,姜汁加入前加4倍量水稀释至50 mL,闷润55 min,80℃炒制30 min,翻炒频率为120次/min。(2)最佳姜制工艺为:每100 g西洋参加入10 mL姜汁,姜汁加入前加4倍量水稀释至50 mL,室温闷润4 h,80℃干燥。相较于姜炙西洋参,姜制品总皂苷含量高,炮制过程不涉及火炒,炮制条件易控,样品性状均一,故选择姜制法作为姜西洋参的炮制工艺,制定姜西洋参炮制规范。2.姜西洋参质量标准研究首先,建立高效液相色谱测定姜西洋参中5种人参皂苷和6-姜辣素含量的方法,并进行方法学验证。结果表明,该方法分离度高、专属性强、准确度和精密度高、线性和稳定性好,可以用于姜西洋参特征图谱研究及指标成分含量测定。其次,收集制备21批姜西洋参,选择其中20批用于特征图谱研究,通过相似度计算,确定8个特征峰,分别为峰1(人参皂苷Rg)、峰2(人参皂苷Re)、峰3(人参皂苷Rb)、峰4(人参皂苷Rg)、峰5(人参皂苷Rc)、峰6(未知)、峰7(人参皂苷Rd)、峰8(6-姜辣素),建立了姜西洋参特征图谱对照图谱。最后,参考2015版《中国药典》西洋参项下方法,分别考察不同批次姜西洋参性状、鉴定项(薄层鉴别)、检查项(水分、灰分、人参薄层鉴别、农药残留、重金属及有害物质)、醇溶浸出物、指标成分含量及20批西洋参中5种皂苷含量。其中,较西洋参而言,姜西洋参含量测定的指标成分新增加了人参皂苷Rd、Rc、6-姜辣素。同时,可知西洋参中5种主要皂苷类成分含量在炮制后发生明显改变。并在上述研究基础上,制定了姜西洋参的质量标准(草案)。3.响应面法优化姜西洋参水提工艺采用响应曲面分析方法优化姜西洋参水提工艺。以姜西洋参中主要的活性成分(总皂苷、总多糖及5种人参皂苷Rg、Re、Rb、Rc及Rd)的含量为响应值,分别考察提取次数、提取时间和液料比三个参数。结果显示,以总皂苷含量为指标时,可得到用于计算和预测姜西洋参最佳水提工艺的二次回归模型,得出最佳工艺参数为提取3次,每次103 min,液料比为10:1。姜西洋参降糖活性初步研究采用腹腔注射STZ(65 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型,初步研究姜西洋参的降糖活性。结果显示,模型组大鼠出现明显的糖尿病损伤症状。DM大鼠经西洋参和姜西洋参水提液治疗后,两组大鼠胰岛组织损伤程度减轻,糖尿病症状得到改善。其中,姜西洋参组大鼠胰岛组织受损情况更轻,细胞胞浆更饱满,空腹血糖下降趋势更快。表明姜西洋参可通过四个方面发挥降糖活性,(1)修复胰岛组织损伤,促进胰岛素分泌;(2)增强DM大鼠血糖调节能力,改善机体血糖升高的病症;(3)增加肌肉和肝脏内糖原含量,从糖异生途径改善糖代谢紊乱;(4)清除血清中多余的TG、TC及LDL,减慢HDL的分解,改善脂质在非脂肪组织中过度堆积造成的组织损伤。综上所述,本文在查阅大量医案及文献、参考传统炮制方法的基础上,考察了两种炮制工艺参数,确定最佳炮制工艺,最终制定了姜西洋参的炮制规范和质量标准,并对姜西洋参的降糖活性进行了初步研究。这为姜西洋参规范生产和质量控制提供了科学依据,同时,为拓宽适用人群,提升质量稳定性,以及更广泛的临床应用奠定了基础。

关键词：姜西洋参炮制工艺质量标准降糖活性

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